[Note for Guidance on The Quality, Reclinical and Clinical Aspects of Gene Transfer Medicinal Products] Руководство по качеству, доклиническим и клиническим аспектам лекарственных препаратов для переноса генов

1. 7 Westferry Circus, Canary Wharf, Лондон Е14 4НВ, Соединенное Королевство
Тел. +44 (0)20 7418 8400, факс +44 (0)20 7418 8613
E-mail: mail@emea.eu.int www.ema.europa.eu
©EMA 2001. Воспроизведение и (или) дистрибуция настоящего документа допускается только в некоммерческих целях с разрешения EMA.
Европейское агентство по лекарственным средствам
Экспертиза лекарственных препаратов для медицинского
применения
Лондон, 24 апреля 2001 г.
CPMP/BWP/3088/99
КОМИТЕТ ПО ЛЕКАРСТВЕННЫМ ПРЕПАРАТАМ ДЛЯ МЕДИЦИНСКОГО
ПРИМЕНЕНИЯ (КМЛП)
РУКОВОДСТВО ПО КАЧЕСТВУ, ДОКЛИНИЧЕСКИМ И КЛИНИЧЕСКИМ
АСПЕКТАМ ЛЕКАРСТВЕННЫХ ПРЕПАРАТОВ ДЛЯ ПЕРЕНОСА ГЕНОВ
ОБСУЖДЕНИЕ В БИОТЕХНОЛОГИЧЕСКОЙ РАБОЧЕЙ
ГРУППЕ (БРГ)
июнь–декабрь 1999 г.
ОБСУЖДЕНИЕ В РАБОЧЕЙ ГРУППЕ ПО БЕЗОПАСНОСТИ
(РГБ)
июнь 1999 г.
ОБСУЖДЕНИЕ В РАБОЧЕЙ ГРУППЕ ПО ЭФФЕКТИВНОСТИ
июль–ноябрь 1999 г.
ПЕРЕДАЧА В КМЛП
декабрь 1999 г.
ИЗДАНИЕ ДЛЯ ОБСУЖДЕНИЯ
декабрь 1999 г.
КОНЕЧНЫЙ СРОК ПОДАЧИ ЗАМЕЧАНИЙ
июнь 2000 г.
ОБСУЖДЕНИЕ В РАБОЧЕЙ ГРУППЕ ПО ЭФФЕКТИВНОСТИ
(РГЭ)
сентябрь 2000 г.
ОБСУЖДЕНИЕ В БИОТЕХНОЛОГИЧЕСКОЙ РАБОЧЕЙ
ГРУППЕ (БРГ)
февраль 2001 г.
ОБСУЖДЕНИЕ В РАБОЧЕЙ ГРУППЕ ПО БЕЗОПАСНОСТИ
(РГБ)
март 2001 г.
ПИСЬМЕННАЯ ПРОЦЕДУРА С РАБОЧЕЙ ГРУППОЙ ПО
БЕЗОПАСНОСТИ (РГБ)
апрель 2001 г.
ПЕРЕДАЧА КМЛП
апрель 2001 г.
ОКОНЧАТЕЛЬНОЕ ПРИНЯТИЕ КМЛП
апрель 2001 г.
ДАТА ВСТУПЛЕНИЯ В СИЛУ
октябрь 2001 г.

2. 2
РУКОВОДСТВО ПО ВОПРОСАМ КАЧЕСТВА, ДОКЛИНИЧЕСКИХ И
КЛИНИЧЕСКИХ ИССЛЕДОВАНИЙ ЛЕКАРСТВЕННЫХ ПРЕПАРАТОВ ДЛЯ
ПЕРЕНОСА ГЕНОВ
СОДЕРЖАНИЕ
1. Введение......................................................................................................................................4
1.1. Перенос генов..............................................................................................................................4
1.2. Лекарственные препараты для переноса генов........................................................................4
1.3. Сфера применения ......................................................................................................................5
2. Общие положения ......................................................................................................................6
2.1. Генетическая разработка ............................................................................................................6
2.2. Производство...............................................................................................................................7
2.3. Очистка.........................................................................................................................................9
2.4. Описание свойств препарата......................................................................................................9
2.5. Однородность и стандартный выпускающий контроль качества готового препарата.........9
2.5.1. Однородность ......................................................................................................................9
2.5.2. Стандартный выпускающий контроль качества ..............................................................9
3. Частные вопросы отдельных стратегий переноса генов ......................................................11
3.1. Препараты плазмидной ДНК (например, ДНК-вакцины).....................................................11
3.2. Невирусные векторы для доставки трансгенов (например, липосомы, рецептор-
опосредованные лиганды).......................................................................................................13
3.3. Вирусные векторы.....................................................................................................................14
3.4. Клеточные препараты...............................................................................................................16
3.4.1. Источник клеток................................................................................................................16
3.4.2. Описание биологических свойств клеточной популяции .............................................17
3.4.3. Манипуляции над клетками in vitro.................................................................................17
3.4.4. Банк клеток ........................................................................................................................18
3.4.5. Пролиферативная способность........................................................................................18
3.4.6. Долговечность и стабильность культуры .......................................................................18
3.4.7. Вопросы качества генетически модифицированных клеток.........................................18
4. Вопросы использования генетически модифицированных организмов (ГМО) ................19
5. Доклиническая фармакологическая и токсикологическая оценка лекарственных
препаратов для переноса генов................................................................................................................19
5.1. Общие положения.....................................................................................................................19
5.2. Частные вопросы.......................................................................................................................20
5.2.1. Нежелательные и непредвиденные последствия переноса генов.................................20
5.2.2. «Голая» и заключенная в комплекс нуклеиновая кислота (невирусные векторы) .....21
5.2.3. Вирусные векторы.............................................................................................................22
5.2.4. Генетически модифицированные соматические клетки................................................22
5.3. Потенциальная эффективность................................................................................................23

3. 3
5.4. Фармакологическая и токсикологическая оценка лекарственных препаратов для переноса
генов ..........................................................................................................................................24
5.4.1. Общие принципы ..............................................................................................................24
5.4.2. Исследования токсичности при однократном введении ...............................................25
5.4.3. Исследования токсичности при многократном введении .............................................25
5.4.4. Иммуногенность и иммунотоксичность .........................................................................25
5.4.5. Репродуктивная и онтогенетическая токсичность.........................................................26
5.4.6. Исследования генотоксичности и канцерогенности......................................................26
5.4.7. Вторичная фармакодинамика...........................................................................................27
5.4.8. Фармакокинетика..............................................................................................................27
5.4.9. Местная переносимость....................................................................................................27
6. Оценка клинической эффективности и безопасности ..........................................................27
6.1. Общие положения.....................................................................................................................27
6.2. Исследования фармакологических свойств у человека.........................................................28
6.3. Исследования эффективности..................................................................................................29
6.4. Безопасность..............................................................................................................................29
6.5. Мониторинг пациентов.............................................................................................................30
7. Аббревиатуры...........................................................................................................................31
8. Глоссарий..................................................................................................................................31

4. 4
1. ВВЕДЕНИЕ
1.1. Перенос генов
Научный прогресс последнего десятилетия ознаменовался разработкой новых методов переноса
генетического материала в соматические клетки. В целях настоящего руководства под переносом
генов подразумевается преднамеренное введение генетического материала в соматические клетки
в терапевтических, профилактических или диагностических целях.
1.2. Лекарственные препараты для переноса генов
Лекарственные препараты для переноса генов направлены на лечение или предотвращение
заболеваний у человека или вводятся человеку в целях постановки медицинского диагноза или
восстановления, коррекции или модификации его физиологических функций.
В настоящее время используют два основных вида векторов для переноса генов:
1. плазмидная ДНК бактерий,
2. вирус,
оба из которых подверглись генетической модификации, как правило, в целях экспрессии
определенного белка. Плазмидную ДНК вводят либо в виде простого солевого раствора
(называемой «голой» ДНК), либо в комплексе с носителем или адъювантом. Вирусные векторы,
как правило, не способны к репликации, однако существуют вирусные векторы, способные
реплицироваться.
При использовании таких векторов достигается генетическая модификация соматических клеток
in vivo.
Соматические клетки перед введением их человеку могут быть модифицированы ex vivo
(например, аллогенные и аутологичные соматические клетки) или in vitro (например, клетки,
поддающиеся формированию банка клеток (bankable cells)).
К прочим областям лабораторной разработки относятся использование других видов векторов,
например, бактерий, и подходы, направленные на модификацию или ингибирование
функционирования эндогенных генов или генетических элементов клеток млекопитающих.
В этой связи лекарственные препараты для переноса генов представляют собой широкий круг
лекарственных препаратов биологического происхождения (см. табл. 1).
Таблица 1
Вид лекарственного препарата
для переноса генов
Примеры
(a) голые нуклеиновые кислоты Естественные или синтетические нуклеиновые кислоты, как
правило, вшитые в соответствующие плазмиды или кассеты
(см. раздел 1.3, исключая антисмысловые олигонуклеотиды)
с адъювантом или без него
(b) нуклеиновые кислоты,
заключенные в комплекс, и
невирусные векторы
(i) Как и выше, но в комплексе с поликатионами (например,
олигодендромером), белками (например, трансферрином)
или другими полимерами (например, диэтиламиноэтил-
декстраном, полилизином)
(ii) как и выше (i), но инкапсулированные или
ассоциированные (например, липосомы)
(iii)как и выше, но покрытые коллоидными частицами
(c) вирусные векторы Как правило, вирусы, неспособные к репликации, включая
аденовирусы, ретровирусы, аденоассоциированный вирус,
вирус простого герпеса; в некоторых случаях вирусы,
способные к репликации, например, вирус осповакцины.
(d) генетические Аллогенные, ксеногенные или клетки микробного

5. 5
модифицированные клетки происхождения, несущие недавно введенный сегмент
нуклеиновой кислоты
1.3. Сфера применения
Лекарственные препараты для переноса генов подпадают под Часть A Регламента Совета EC
2309/931
и подлежат регистрации по централизованной процедуре. Цель настоящего руководства
— представить рекомендации по качеству, доклиническим и клиническим аспектам
лекарственных препаратов для переноса генов и оказать содействие получению данных,
обосновывающих регистрацию в Европейском Сообществе.
В настоящем документе рассмотрены:
 включение и экспрессия гена(ов) в терапевтических целях (например, лекарственные
препараты для переноса генов и противораковые вакцины);
 инокуляция нуклеиновых кислот с целью вакцинации против чужеродных антигенов
(например, ДНК-вакцинация);
 перенос нуклеиновых кислот с целью содействия модификации функции или экспрессии
эндогенного гена.
Настоящий документ не распространяется на синтезированные химическим путем
олигонуклеотиды, например, антисмысловые олигонуклеотиды и РНК/ДНК-химеры, контроль
качества которых при производстве будет отличаться. Однако изложенные в настоящем документе
принципы допускается, если применимо, использовать при исследовании и разработке таких
лекарственных препаратов.
Подобно любой новой технологии, для контроля таких лекарственных препаратов используется
гибкий подход, поэтому в свете накопленного опыта производства, применения и дальнейшего
прогресса рекомендации могут быть изменены. Несмотря на то что представленные ниже
рекомендации носят общий характер, отдельные лекарственные препараты могут вызывать
особую озабоченность относительно контроля их качества и безопасности, например, ДНК-
вакцины, направленные на профилактическое применение у большой группы здоровых лиц.
Производство и контроль каждого лекарственного препарата будет рассматриваться в
индивидуальном или специфичном для препарата порядке с учетом его предлагаемого
клинического применения.
Первично-ксеногенные клетки, полученные от животных-доноров, не допускается применять до
более подробного изучения возможности использования такого подхода. По данному вопросу
КМЛП предполагает подготовить отдельное руководство.
Вопросы контроля качества, доклинических и клинических исследований лекарственных
препаратов для переноса генов рассматриваются в разных разделах настоящего руководства с
перекрестными ссылками между ними.
Необходимо отметить, что некоторые вопросы доклинической и клинической разработки
лекарственных препаратов для переноса генов потребует четкого понимания их свойств, чтобы
надлежащим образом спланировать доклинические и клинические исследования, направленные на
оценку токсикологических и фармакологических характеристик. В этой связи неизбежны
некоторые пересечения между разделами (например, между контролем качества и
доклиническими исследованиями) настоящего документа. В целях обеспечения правильного
включения данных в части по качеству (Часть II), доклиническим (Часть III) и клиническим (Часть
IV) исследованиям внутри частей допускаются повторы, при этом необходимо указывать
перекрестные ссылки между этими тремя частями.
Настоящее руководство неразрывно связано с соответствующим европейским законодательством
и другими руководствами КМЛП, включая технические руководства Международной
конференции по гармонизации (ICH). При обращении с ex vivo генетически модифицированными
клетками необходимо также руководствоваться Руководством КМЛП по лекарственным
препаратам на основе клеток человека.
1
Утратил силу и заменен Регламентом (EC) № 726/2004.

6. 6
Поскольку лекарственные препараты для переноса генов содержат генетические и другие
материалы биологического происхождения, многие принципы контроля качества, разработанные в
отношении лекарственных препаратов на основе технологии рекомбинантной ДНК (рДНК) и
других биологических лекарственных препаратов, производящихся с помощью современных
биотехнологических методов, справедливы и при производстве лекарственных препаратов для
переноса генов. Необходимо также учитывать требования к площадкам, производящим
биологические препараты, например, Директиву 91/356/EEC по Надлежащей производственной
практике2
.
Заявителям необходимо также учитывать влияние лекарственных препаратов для переноса генов
на окружающую среду. В связи с этим следует обращаться к Директиве Совета 90/220/EEC3
со
всем поправками к ней и 90/219/EEC4
(в редакции Директивы Совета 98/81/EC) соответственно о
преднамеренном выпуске и ограниченном использовании генетически-модифицированных
(микро)-организмов, а также к европейскому Руководству по оценке риска для окружающей среды
со стороны лекарственных препаратов для медицинского применения, содержащих или состоящих
из генетически модифицированных организмов (раздел 4).
2. ОБЩИЕ ПОЛОЖЕНИЯ
2.1. Генетическая разработка
Дизайн лекарственных препаратов для переноса генов является составной частью обоснования их
разработки. Необходимо представить сведения о пригодности векторной системы и системы
доставки. Необходимо представить данные о контроле и стабильности экспрессии генов. В связи с
этим необходимо документировать и описать каждый элемент экспрессирующей конструкции
(включая значимые участки сшивки [junction regions]), к которым относятся сведения об их
происхождении, идентификации и выделении, а также нуклеотидные последовательности и их
функции, включая регулятивную и кодирующую способности. Последовательность необходимо
идентифицировать и верифицировать надлежащими методами. Необходимо также подробно
описать включение в экспрессирующую конструкцию всех намеренных модификаций, например,
сайтспецифических мутаций, делеций, реаранжировок каких-либо компонентов по сравнению с их
естественными аналогами. Необходимо представить научные обоснования функций различных
элементов и их включения в экспрессирующую конструкцию. Для экспрессирующих
конструкций, которые включают транскрипционные элементы для контроля над экспрессией
трансгена, например, на временной или тканеспецифичной основе, необходимо представить
обобщенные сведения, подтверждающие специфичность с точки зрения показателей и контроля
качества лекарственного препарата. Необходимо представить перекрестные ссылки на подробные
отчеты, включенные в соответствующие доклинические и клинические части досье.
Необходимо тщательно проанализировать выбор маркеров, использованных в ходе скрининга и
разработки и сохраняющихся в готовом препарате, с позиций их потенциального нежелательного
влияния на стандартные методы лечения некоторых заболеваний человека, например, гены
антибиотикорезистентности. По возможности, необходимо рассмотреть возможность отказа от их
применения. В связи с этим остов конструкции (back-bone construct), который может быть
использован для включения различных экспрессионных кассет, необходимо регулярно проверять
пригодность определенного гена-маркера с учетом современных научных данных.
Необходимо представить подробное описание способа включения экспрессирующей конструкции
в вектор, включая сведения о последовательностях, позволяющих конструкции реплицироваться в
клетках прокариот или эукариот. Необходимо полностью описать клетки, использованные для
амплификации генетического материала, включая родословную (происхождение) клеточной
линии, ее идентификационные характеристики, свойства и потенциальную зараженность
2
Утратила силу, и заменена Директивой Комиссии 2003/94/EC.
3
Утратила силу, и заменена Директивой 2001/18/EC.
4
Утратила силу, и заменена Директивой 2009/41.

7. PharmAdvisor
библиотека научно-правовых актов, научных и
административных руководств ICH, EC и США
На этом сайте представлен бесплатный фрагмент документа.
Купите полную версию на www.pharmadvisor.ru
info@pharmadvisor.ru
+7 999 828 0097