Morfologi Koloni, Pembiakan Bakteri Dan Jamur

2. MIKROBIOLOGI DAN PARASITOLOGI
MODUL III
“PANDUAN PRAKTIKUM MIKROBIOLOGI”
PENULIS
Dr. Padoli, SKp,M.Kes
PENDIDIKAN JARAK JAUH PENDIDIKAN TINGGI KESEHATAN
PUSDIKLATNAKES, BADAN PPSDM KESEHATAN
KEMENTRIAN KESEHATAN REPUBLIK INDONESIA
2013
WAT 2.05/2 SKS MODUL 1-4

3. Tujuan Pembelajaran Umum
Tujuan Pembelajaran Khusus
Kegiatan Praktikum
22
IV
Setelah menyelesaikan kegiatan Praktikum 4, Anda
diharapkan mampu menjelaskan prosedur pembia-
kan bakteri dan jamur
TUJUANPembelajaran Umum
TUJUANPembelajaran Khusus
Setelah mengikuti Kegiatan Prak-
tikum - 4, Anda diharapkan mampu :
1. Mengetahui jenis-jenis koloni
bakteri dan jamur
2. Mengetahui hal-hal yang perlu
diperhatikan dalam mempela-
jari koloni bakteri dan jamur
3. Mengetahui bahwa sifat-sifat
koloni dapat digunakan untuk
membantu identifikasi bakteri
dan jamur
4. Mengenal berbagai jenis me-
dium yang digunakan membia-
kan bakteri dan jamur
A. Materi Praktikum
1. Morfologi Koloni Bakteri dan Ja-
mur
2. Pembiakan, Pertumbuhan Bak-
teri Dan Jamur
Morfologi Koloni, Pembiakan dan Pertumbuhan Bakteri dan Jamur

4. Modul Pendidikan Jarak Jauh, Pendidikan Tinggi Kesehatan Prodi Keperawatan
3
1. Morfologi Koloni Bakteri dan Jamur
a. Morfologi koloni bakteri
Sekumpulan sel bakteri pada pembenihan padat akan tampak sebagai
koloni . hal-hal yang perlu diperhatikan dalam melihat morfologi koloni
bakteri adalah :
1. Ukuran (diameter)
2. Sifat-sifat :
a. Ada/tidaknya pigmen
b. Menonjol atau rata
c. Keruh atau bening
d. Suram atau mengkilat
e. Permukaan rata(smooth) atau tidak rata (rough)
f. Pinggiran rata atau tidak rata
g. Menjalar atau tidak
h. Berlendir atau tidak
Bakteri yang dibiakan pada pembenihan agar darah dapat memperlihat-
kan ada/tidaknya zona pada medium di sekeliling koloni . zona yang terben-
tuk adalah :
1. Zona jernih tidak berwarna , disebut hemolisis tipe beta (hemolisis)
2. Zona berwarna hijau atau keruh , disebut hemolisis tipe alfa (hemodigesti)
3. Tidak ada zona , disebut hemolisis tipe gamma (non hemolisis)
b. Morfologi Koloni Jamur
Uraian Materi

5. 4
Modul Pendidikan Jarak Jauh, Pendidikan Tinggi Kesehatan Prodi Keperawatan
Seperti halnya bakteri , sekumpulan jamur akan membentuk koloni yang
dapat digunakan untuk membantu identifikasi . hal-hal yang perlu diperhati-
kan dalam mempelajari koloni jamur adalah :
Warna : permukaan dan dasar koloni
Tekstur : halus , licin , menyerupai beludru , menyerupai kapas
Topografi : flat , folded , rugose , crateiform , celebriform atau verrucose
Secara umum koloni morfologi jamur terdiri dari :
1. Koloni ragi/khamir/yeast
• koloni bulat dan cembung . bertekstur halus dan licin menyeru-
pai bakteri
• membentuk koloni basah dan berwarna putih kekuningan
Contoh : candida , cryptococcus
2. Koloni kapang / mold
• membentuk koloni kering dan padat
• .tekstur menyerupai beludru atau kapas
Contoh: aspergillus , trichophyton , epidermophyton
.
Gambar 4.1: Candida albicans, Ragi Bulat , dan Koloni Ragi Pink

6. 5
Modul Pendidikan Jarak Jauh, Pendidikan Tinggi Kesehatan Prodi Keperawatan
Candida Albicans b) Koloni ragi bulat c) Koloni ragi pink

7. Modul Pendidikan Jarak Jauh, Pendidikan Tinggi Kesehatan Prodi Keperawatan
6
c. Tugas Mahasiswa
Mengamati dan mempelajari berbagai jenis koloni bakteri dan jamur .
Peragaan:
1. Koloni S (smooth) : Escherichia coli
2. Koloni R (rough) : Bacillus subtilis
3. Koloni menjalar : Proteus sp
4. Koloni beranyaman : Bacillus mycoides
5. Koloni mukoid/berlendir : Klebsiella sp
6. Koloni berpigmen : Staphylococcus aureus , Staphylococcus
citreus , Staphylococcus aibus , Serratia marcescens , Chromobacte-
rium violaceum , Pseudomonas aeruginosa .
7. Koloni Streptococcus pada plat agar darah dengan hemolisis tipe
alfa , beta dan gamma
8. Berbagai jenis koloni jamur
d. Lembar kerja Praktikum Mikrobiologi
Kegiatan 4a : Morfologi Koloni Bakteri dan Jamur
Hari/tanggal : …………………
Nama : …………………
Kelompok : …………………
Tugas

8. 7
Modul Pendidikan Jarak Jauh, Pendidikan Tinggi Kesehatan Prodi Keperawatan
Koloni S Koloni R Koloni Menjalar Koloni Berany-
aman
Koloni Berlendir
Koloni Berpigmen
Koloni S Koloni R Koloni Menjalar Koloni Berany-
aman
Koloni Ber-
lendir

9. 8
Modul Pendidikan Jarak Jauh, Pendidikan Tinggi Kesehatan Prodi Keperawatan
Koloni khamir
Koloni Kapang
2. Pembiakan, Pertumbuhan Bakteri Dan Jamur
a. Pembiakan Dan Pertumbuhan Bakteri
Berbagai jenis media pertumbuhan bakteri lazim digunakan untuk
tujuan isolasi, transportasi, persemaian dan diferensiasi. Untuk menunjang
pertumbuhan yang optimal, bakteri membutuhkan nutrisi yang amat be-
ragam. sebagian bakteri dapat tumbuh dalam medium yang hanya men-
gandung zat anorganik, sedangkan bakteri tertentu memerlukan tam-
bahan asam amino, vitamin dan zat organik lain untu pertumbuhannya.
Media pembiakan bakteri umumnya terdiri dari ekstrak daging, akstrak
ragi, pepton dan agar .
Berdasarkan konsistensinya, media pembiakan bakteri dapat dibagi
menjadi media cair , media padat dan semi solid. Kaldu nutrisi (pepton
dan ekstrak daging ) dan agar nutrisi ( pepton, ekstrak daging dan agar )
merupakan contoh medium cair dan padat yang sering digunakan. Bak-
teri komponen dapat ditambahkan ke dalam medium untuk menghasilkan
medium dengan sifat tertentu .sebagai contoh, penambahan zat warna
dapat digunakan untuk indikator aktivitas metabolisme bakteri

10. 9
Modul Pendidikan Jarak Jauh, Pendidikan Tinggi Kesehatan Prodi Keperawatan
Untuk mnumbuhkan bakteri yang menumbuhkan nutrisi tinggi (fas-
tidious microorganism), medium dapat diperkaya dengan menambahkan
darah, serum, vitamin dan komponen-komponen lain. Medium tersebut
termasuk dalam medium diperkaya, contoh medium tersebut adalah agar
darah .
Isolasi bakteri menggunakan medium selektif yang dapat meng-
hambat pertumbuhan bakteri secara selektif. medium yang termasuk
dalam medium selektif adalah salmonelle shigella (SS).
Medium lain yang digunakan untuk membedakan beberapa jenis
bakteri disebut medium diferensial, medium yang banyak di kembangkan
pada anak saat ini memiliki sifat selektif dan diferensial, contoh medium
tersebut adalah agar eosin methylene blue (EMB).
Bila pengambilan spesimen di luar laboratorium, maka untuk
mencegah kematian bakteri, spesimen dapat ditanam pada medium trans-
por sebelum dipindahkan pada medium pertumbuhan yang diperlukan .
contoh medium transpor yang sering digunakan di laboratorium antara
lain Carry-Blair , amies dan stuart.
Gamba 4.2 : bentuk media pembiakan bakteri
b. Pembiakan Dan Pertumbuhan Jamur
Spesimen untuk pemerisaan jamur harus diinokulasikan pada medi-
um yang dapat menunjang pertumbuhan optimal. Berbagai macam media
dapat digunakan, dapat berupa medium dengan/atau tanpa antibiotika.

11. 10
Modul Pendidikan Jarak Jauh, Pendidikan Tinggi Kesehatan Prodi Keperawatan
Chylohexamide dalam medium diharapkan dapat menghambat pertum-
buhan jamur saprofit yang tumbuh cepat sehingga prtumbuhan jamur pa-
togen yang lambat tidak terhalangi. Sedangkan khloramfhenicol dan/atau
gentamisin dapat menghambat kontaminasi bakteri .
Medium kultur jamur yang dianjurkan antara lain :
1. Sabouraud Dextrose Agar (SDA)
Medium standar yang mengandung mycological pepton , gula dek-
strosa dan agar .
2. SDA+Chylohexamide+khloramfhenikol ( agar mycobiotic atau agar my-
cosel )
Medium selektif untuk jamur dermatofita dan candida albicans .
3. Inhibitory Mold Agar (IMA)
Medium ini merupakan medium diperkaya yang mengandung kloraam-
fenikol , menunjang hampir semua pertumbuhan kapang dan khamir
dan menghambat pertumbuhan bakteri .
4. Brain – Heart Infusion Agar
Medium yang berfungsi sebagai penunjang pertumbuhan jamur di-
morfik .
Temperatur optimal untuk pertumbuhan adalah 30 C . jika inkuba-
tor yang diharapkan tidak tersedia, kultur harus diinkubasi pada suhu
kamar (25 C) dengan kelembapan yang harus tetap terjaga.
Sebagian kultur jaringan diinkubasi selama 4 minggu sebelum dinyata-
kan negatif. kultur yeast dari tersangka oral trush atau vaginitas hanya
membutuhkan 5 hari, sedangkan kultur dari tersangka jamur dimorfik
(25 C dan 37 C ) harus diinkubasi 8 minggu sebelum dinyatakan negatif
.
Tabel 4.1 Kegunaan berbagai medium untuk pembiakan bakteri dan
jamur

12. 11
Modul Pendidikan Jarak Jauh, Pendidikan Tinggi Kesehatan Prodi Keperawatan
Media Agar Padat ( 1,5 – 2% Agar)
No. Media Kegunaan
Agar Nutrien Mengasingkan / mempelajari koloni bakteri
Agar Darah Membiakkan bakteri yang memerlukan nutrisi
tinggi dan melihat adanya reaksi hemolisis
Agar Coklat
Thayer Martin
Medium selektif untuk membiakkan Niesseria sp
Agar Endo Medium selektif dan differensial untuk membiak-
kan bakteri enterik
Agar Eosin Mthylen
Blue (EMB)
Medium selektif dan differensial untuk membiak-
kan bakteri enterik
Agar Salmonella
Shigella
Medium selektif dan differensial untuk membiak-
kan Salmonella dan Shigella
Agar Thiosulphate
Citrate Bile Sucrose
(TCBS)
Medium selektif dan differensial untuk membiak-
kan Vibrio cholerae dan Vibrio sp lainnya
Serum Loefler Membiakkan Corynebacterium diptheriae
Agar Darah Telurit Medium selektif untuk membiakkan Corynebacte-
rium sp.
Triple Sugar Iron
Agar
Melihat kemampuan bakteri dalam meragi gula-
gula dan membentuk H2S
Lowenstein Jensen Membiakkan Mycobacterium sp.
Agar Sabourand Membiakkan koloni jamur.
Media Agar Semisolid (0,5% Agar)
No. Media Kegunaan
1. Semisolid Melihat gerak bakteri dan dapat juga digunakan
untuk melihat reaksi indol
Media Cair
No. Media Kegunaan
Kaldu Membiakkan bakteri atau membuat suspensi
bakteri
Kaldu Darah Membiakkan bakteri dan melihat hemolisis bak-
teri
Air Pepton Membiakkan bakteri dan membuat suspensi
bakteri
Perbenihan Tarozzi Membiakkan bakteri anaerob

13. 12
Modul Pendidikan Jarak Jauh, Pendidikan Tinggi Kesehatan Prodi Keperawatan
Pembenihan Thiog-
likolat
Perbenihan transpor dan persemaian untuk bak-
teri aerob dan anaerob
Perbenihan Empedu Membiakkan bakteri enterik terutama Salmonella
sp.
Gula Air Pepton Mengetahui kemampuan bakteri dalam memfer-
mentasi gula.
Gula yang digunakan :
1. Glukosa (tutup tabung berupa kapas berwar-
na kuning)
2. Laktosa (tutup tabung berupa kapas berwar-
na ungu)
3. Manitol (tutup tabung berupa kapas hijau)
4. Maltosa (tutup tabung berupa kapas berwar-
na merah)
c. Tugas mahasiswa
Mengamati dan mempelajari jenis-jenis dan kegunaan berbagai media
pembiakan yang sering digunakan untuk pembunuhan bakteri dan jamur dari
peragaan berbagai media pembiakan cair, padat dan semisolid untuk bakteri dan
jamur yang sering digunakan di laboratorium.
d. Lembar kerja Praktikum Mikrobiologi
Kegiatan 4b : Pembiakan Bakteri dan Jamur
Hari/tanggal : …………………
Nama : …………………
Kelompok : …………………

14. 13
Modul Pendidikan Jarak Jauh, Pendidikan Tinggi Kesehatan Prodi Keperawatan
No. Tipe Media Penjelasan
Medium Sederhana
Medium diperkaya
Medium selektif
Medium Differensial
Medium Transpor

15. Modul Pendidikan Jarak Jauh, Pendidikan Tinggi Kesehatan Prodi Keperawatan
14
Untuk memperdalam pemahaman anda mengenai materi diatas, kerjakan-
lah latihan berikut, dengan memberikan penjelasan bebas dengan bahasa anda
sendiri pada lembar kertas tersendiri. Anda dapat membandingkan jawaban den-
gan kunci jawaban yang terdapat pada akhir modul ini.
Jawablah soal tugas di bawah ini dengan singkat dan jelas!
1. Sebutkan koloni morfologi jamur!
2. Sebutkan jenis medium pembiakan bakteri menurut konsistensinya dan con-
tohnya!
3. Sebutkan bahan media pembiakan bakteri!
4. Jelaskan apa kegunaan medium differensial!
5. Jelaskan apa medium selektif dan contohnya !
Tugas Mandiri

16. Modul Pendidikan Jarak Jauh, Pendidikan Tinggi Kesehatan Prodi Keperawatan
15
Jaypee, 2005, Text book of Microbiology for Nursing Student, Jaypee Brother Pub-
lishers
Gita Pawana, 2012, Petunjuk Praktikum Mikrobiologi, Jurusan Agroekoteknologi,
Fakultas Pertanian Universita Tronojoyo Madura
Petunjuk Praktikum Mikrobiologi Dasar, 2008, Laboratorium Mikrobiologi, Fakul-
tas Biologi Universitas Jenderal Soedirman Purwokerto
Penuntun Praktikum Mikrobiologi Kedokteran, 2012, Departemen Mikrobiologi
Klinik FKUI-RSCM, Badan Penerbit FKUI, Jakarta
Rahardjo Boedhy, 2010 , Pedoman Praktikum Bakteriologi, Untuk Pendidikan dan
Pelatihan Profesi Analis Medis / Analis Kesehatan, Laboratorium Bakteri-
ologi DIII Analis Medis Fak. Kedokteran, Universitas Airlangga Surabaya,
Acuan Pustaka

17. Modul Pendidikan Jarak Jauh, Pendidikan Tinggi Kesehatan Prodi Keperawatan
16
Kegiatan Belajar - 1
1. Persiapan alat untuk pengambilan spesimen yang meliputi : alat pengambilan
(spuit, lidi kapas dll), wadah spesimen, label atau barcode, registrasi, media
transport atau media pemupuk, biakan aerob dan anaerob
2. Jenis spesimen : darah, urin, feses, nanah, usapan/swab bagian tubuh tertentu.
3. Saat pengambilan spesimen perlu memperhatikan : waktu pengambilan sep-
simen harus disesuai jenis penyakit. Jumlah spesimen, sterilitas atau kebersi-
han wadah spesimen dan area tempat pengambilan spesimen.
4. Yang perlu diperhatikan dalam pengiriman spesimen : form/pengantar spesi-
men, waktu pengiriman spesimen dan keamanan spesimen.
Kegiatan Belajar -2
1. Mikroskop cahaya menggunakan cahaya sebagai media untuk mengirim-
kan gambar ke mata, dan berfungsi untuk mengamati bagian-bagian yang
kecil mikroskopik dan transparan sedangkan mikroskop elektron menggu-
nakan berkas-berkas elektron suatu lampu katoda sebagai media untuk
mengirimkan gambar ke mata, berfungsi untuk mengamati obyek yang
lebih kecil seperti virus.
2. Lapangan pandang area lingkaran yang terlihat melalui lensa okuler. Dan
Jarak kerja adalah ruang antara objektif dan slide.
3. Diafragma untuk mengatur sejumlah cahaya yang masuk, Tombol-tombol
penyesuaian Kasar (makrometer)dan halus (mikrometer) digunakan untuk
memperoleh fokus pada spesimen/obyek.
4. Gunakan tombol makrometer untuk mengangkat slide dari stage, dan
dibuang ke dalam tempat yang berisi disentektan. Bersihkan minyak yang
mengotori stage dengan Kimwipes atau tissue. Bersihkan permukaan lensa
okuler dan obyektif dengan kertas lensa dan larutan eter-etanol (7:3). Atur
kembali bagian-bagian mikroskop pada posisi semula, dengan memutar
lensa obyektif ke tempatnya serta tombol makrometer untuk memperoleh
Kunci Jawaban