Teks tersebut memberikan informasi mengenai aspirasi sumsum tulang dan interpretasinya. Teks ini menjelaskan tentang: 1. Lokasi sumsum tulang dan indikasi aspirasi sumsum tulang untuk diagnosis penyakit. 2. Langkah-langkah pelaksanaan aspirasi sumsum tulang. 3. Teknik pemeriksaan preparat aspirasi dan pelaporan hasilnya.

1. TUTOR HEMATOLOGI ASPIRASI SUMSUM TULANG DAN INTERPRETASINYA Oleh : dr. Esti Rohani Pembimbing : dr. Solichul Hadi, SpPK 1

3. Sumsum merah ditemukan terutama pada : - tulang pipih : tulang pinggul, tulang dada, tengkorak, tulang rusuk tulang punggung, tulang belikat. - tulang panjang : ujung tulang humerus dan femur 2 Pendahuluan

4. Digunakan untuk menentukan komposisi, selularitas dan maturasi sel-sel hemopoietik di sumsum tulang. Harus dilakukan dengan teknik aseptik Sampel yang baik bisa diperoleh dari aspirasi di sternum, krista iliaka posterior ataupun anterior Aspirasisumsumtulang 3

5. 1.Diagnosis : penyakit yang belumdiketahui penyebabnya * anemia, leukopenia, trombositopenia, pansitopenia * limfadenopati, spenomegali * demam yang tidakdiketahuisebabnya * penurunanberatbadanterusmenerus * reaksileukomoid * lesiosteolitik Diagnosis penyakit-penyakit yang dicurigai leukemia akut anemia megaloblastik, hipersplenisme Indikasipemeriksaanaspirasisumsumtulang 4

6. 2. Mengetahui penyebaran penyakit * penyakit infeksi : TBC, infeksi jamur sarkoidosis, mononukleus infeksiosa * keganasan : sarkoma, limfoma, neuroblastoma 3. Monitoring hasil pengobatan : anemia aplastik, leukemia akut, anemia megaloblastik 4. Persiapan pengobatan dengan sitostatika/ radiasi. 5 Indikasi……

7. A. Persiapanpenderita - penjelasantentangprosedurpelaksaan daninformed consent - obatpenenangkalauperlu B. Persiapanalatdanbahan - obat-obatan : betadin, alkohol 70%, lidokain - sarungtangansteril, duksteril - spuitdisposible - kapas, kasa, plester,bengkok - skalpel, jarumaspirasisumsumtulang - kacaobyek - EDTA Persiapanaspirasi 6

8. 1. Penentuan lokasi a. sternum: setinggi ICS II-III lokasi dekat permukaan tulang tipis, terdapat berbagai jenis sel sedikit lemak dan trabekula resiko menembus pembuluh darah besar Pelaksanaanaspirasi 7

9. b. Spina Iliaka Posterior Superior - rongga sumsum tulang luas - tulang relatif tipis - struktur anatomi vital (-) - pasien tidak melihat proses aspirasi - dapat langsung biopsi bila terjadi dry tap 8

12. Lakukan sterilisasi kulit, pasang duk

13. Infiltrasi anestesi pada kulit, jaringan subkutan, periosteum

14. Insisi kulit sesuai diameter jarum aspirasi

15. Masukkan trokar dengan stilet melalui insisi hingga mencapai periosteum,sambil diputar masukkan menembus kortek tulang.Langkah-langkah (SIPS) 10

17. Stilet dimasukkan lagi, trokar ditarik perlahan-lahan

18. Luka ditutup kasa steril+betadin  tekan beberapa saat  diplester.11

19. Aspirasisumsumtulangdispinailiaka posterior superior (SIPS) 12

21. Kering  fiksasidengan methanol  20`  dicatdenganRomanowsky (May-Grunwald-Giemsa, Wright,atauGiemsa)

22. Pemakaian EDTA harusbetul-betulsesuai  berlebihan  akanterlihatbahanamorfberwarna pink, eritroblas + retikulositmenggumpal.Pembuatanpreparat 13

24. Untukmemeriksacadanganbesi Prinsipreaksi : besi yang terionisasiakanbereaksidenganasamferrocyanideakanmenghasilkanwarnabirukehijauan. 4FeCl₃ + 3K₄Fe(CN)₆ Fe₄[Fe(CN)₆]₃ + 12KCl Reagen yang dipakai : 1.Larutan A : potassium ferrocyanide 2 g air suling 100ml 2. Larutan B : hydrochloric acid con. 2 g air suling 100 ml Campurlarutan A + larutan B (1:1) sebelumdigunakan 15 Pewarnaan Perl’s

25. 16 ReagenuntukPewarnaan Perl’s 2 g potasium ferocyanide 2 g asam hydrochloric 100 ml air suling 100 ml air suling Larutan reagen Larutan B Larutan A

26. Metodepewarnaan Perl’s : Keringkanapusandanfiksasidengan methanol selama 10 - 20` Rendamdalamlarutanreagenselama 10` padasuhu 20⁰ Bilas slide dalam air mengalirselama 20` Bilasdengan air suling Cat lagidengan eosin selama 10 - 15 detik Besiakantampaksebagaigranulberwarnabiru padamakrofag 17

27. 18 Besitampaksebagaigranulberwarnabiru

28. 19

30. Memilih bagian yang akan diperiksa

31. Mendapatkan kesan kepadatan sel dan jumlah megakariosit

32. Mendeteksi keberadaan sel-sel abnormal20

34. Melihatgumpalansel abnormal  adainfiltrasi tumor metastase

35. Mengenalimakrofag. Padapembesaranlebihbesar (obyektif 40X, 100X denganminyakemersi) memeriksaadanyahemofagositosis, pigmen malaria, infeksijamurataubakteri.UrutanpemeriksaansumsumtulangpadapengecatanRomanowsky (pembesaran 100X) 21

37. Menentukan rasio myeloid : eritroid

38. Melakukan hitung jenis sel

39. Melihat daerah nekrosis di sumsum tulang

40. Memperkirakan kandungan besi di makrofag dan granul-granul besi di sel eritroid pada pewarnaan Perl’s22

41. Table 1.5. Differential Counts of Bone Marrow Aspirates from 12 Healthy Men

43. Kepadatan sel, jumlah lemak dan banyaknya megakariosit

44. Tiap jenis sel yang dipelajari : disebutkan distribusi stadia pematangan, kelainan morfologi, dan perbandingan dengan sel sel yang lain, terutama M:E ratio24

46. Buat ikhtisar semua kelainan dan diberi tafsiran hasil dengan mempertimbangkan data-data klinik dan pendapat-pendapat dari pemeriksaan darah tepi25

47. 26

48. Terimakasih Terimakasih 27

50. Sutul mengandung sel-sel imatur yang sangat rapat, lengket dan tidak dapat diaspirasi (sebagian kasus leukemia akut)

51. Terdapat fibrosis sutul atau kanker metastatikDry tap : tidakdiperolehbahanaspiratwalaupuntekniksudahbenar 28

52. Perbandinganaspirasidanbiopsi 29

53. Sitogenetik, biakan mikrobiologi, analisis biokimia, petanda imunologik dan sitokimia, analisis imunoglobulin atau gen reseptor T, analisis DNA atau RNA untuk mencari kelainan gen, biakan sel progenitor. 30 Pemeriksaankhusus yang lain

55. Biarkandingin, lalusaring

56. Larutansiapuntukdigunakan

57. Metode:

58. Cat slide, lalukeringkan.

59. Setelah 2`, tambahkan air + cat selama 5-7`

60. Cuci dg air mengalirataubufersampaimunculwarna pink (2`)

61. Biarkansampaikering31

63. May-Grunwald Giemsa stain

64. Jenner-Giemsa stain

65. Giemsa stain

66. Buffered distilled water pH 6.8Buffer: Buat 50 ml dari 66 mmol/l sorensen’s phosphat buffer, tambah air sampai 1 liter pada pH 6.8 32 Cat Romanowsky

67. 1 g serbuk dye dimasukkan ke conical flask kapasitas 200-250 ml. Tambahkan 100 ml methanol, campur pada suhu 50⁰. Simpan pada suhu ini selama 15` sambil kadang2 diaduk Larutan siap dipakai. 33 Giemsa stain

69. Fiksasi selama 3`

70. Cat dg lar.cat yg diencerkan selama 15`

71. Bilas dg bufer pH 6.8 selama 1`

72. Bilas air  keringkan di udara.Larutan cat: sebelum digunakan, encerkan 1 vol stock solution dg 14 vol.HEPES Larutan ini stabil 8 jam Fiksatif: 1 stock sol. Azure B-eosin Y + 14 methanol 34 Romanowsky stain

73. 35 Jarumsalah, jarumklima & jarum Islam

74. 36 Change in differential counts of bone marrow with age

75. 37 Grading of iron storage in bone marrow aspirate material