1. TUTOR HEMATOLOGI ASPIRASI SUMSUM TULANG DAN INTERPRETASINYA Oleh : dr. EstiRohani Pembimbing : dr. SolichulHadi, SpPK 1

3. Sumsummerahditemukanterutamapada : - tulangpipih : tulangpinggul, tulang dada, tengkorak, tulangrusuktulangpunggung, tulangbelikat. - tulangpanjang : ujungtulanghumerusdan femur 2 Pendahuluan

4. Digunakanuntukmenentukankomposisi, selularitasdanmaturasisel-selhemopoietikdisumsumtulang. Harusdilakukandenganteknikaseptik Sampel yang baikbisadiperolehdariaspirasidi sternum, kristailiaka posterior ataupun anterior Aspirasisumsumtulang 3

5. 1.Diagnosis : penyakit yang belumdiketahui penyebabnya * anemia, leukopenia, trombositopenia, pansitopenia * limfadenopati, spenomegali * demam yang tidakdiketahuisebabnya * penurunanberatbadanterusmenerus * reaksileukomoid * lesiosteolitik Diagnosis penyakit-penyakit yang dicurigai leukemia akut anemia megaloblastik, hipersplenisme Indikasipemeriksaanaspirasisumsumtulang 4

6. 2. Mengetahuipenyebaranpenyakit * penyakitinfeksi : TBC, infeksijamur sarkoidosis, mononukleusinfeksiosa * keganasan : sarkoma, limfoma, neuroblastoma 3. Monitoring hasilpengobatan : anemia aplastik, leukemia akut, anemia megaloblastik 4. Persiapanpengobatandengansitostatika/ radiasi. 5 Indikasi……

7. A. Persiapanpenderita - penjelasantentangprosedurpelaksaan daninformed consent - obatpenenangkalauperlu B. Persiapanalatdanbahan - obat-obatan : betadin, alkohol 70%, lidokain - sarungtangansteril, duksteril - spuitdisposible - kapas, kasa, plester,bengkok - skalpel, jarumaspirasisumsumtulang - kacaobyek - EDTA Persiapanaspirasi 6

8. 1. Penentuanlokasi a. sternum: setinggi ICS II-III lokasidekatpermukaan tulangtipis, terdapatberbagai jenissel sedikitlemakdantrabekula resikomenembuspembuluh darahbesar Pelaksanaanaspirasi 7

9. b. SpinaIliaka Posterior Superior - ronggasumsumtulangluas - tulangrelatiftipis - strukturanatomi vital (-) - pasientidakmelihatprosesaspirasi - dapatlangsungbiopsibilaterjadidry tap 8

12. Lakukansterilisasikulit, pasangduk

13. Infiltrasianestesipadakulit, jaringansubkutan, periosteum

14. Insisikulitsesuai diameter jarumaspirasi

15. Masukkantrokardenganstiletmelaluiinsisihinggamencapaiperiosteum,sambildiputarmasukkanmenembuskortektulang.Langkah-langkah (SIPS) 10

17. Stiletdimasukkanlagi, trokarditarikperlahan-lahan

18. Luka ditutupkasasteril+betadin  tekanbeberapasaat  diplester.11

19. Aspirasisumsumtulangdispinailiaka posterior superior (SIPS) 12

21. Kering  fiksasidengan methanol  20`  dicatdenganRomanowsky (May-Grunwald-Giemsa, Wright,atauGiemsa)Pembuatanpreparat 13

23. Untukmemeriksacadanganbesi Prinsipreaksi : besi yang terionisasiakanbereaksidenganasamferrocyanideakanmenghasilkanwarnabiru - birukehijauan. 4FeCl₃ + 3K₄Fe(CN)₆ Fe₄[Fe(CN)₆]₃ + 12KCl Reagen yang dipakai : 1.Larutan A : potassium ferrocyanide 2 g air suling 100ml 2. Larutan B : hydrochloric acid con. 2 g air suling 100 ml Campurlarutan A + larutan B (1:1) sebelumdigunakan 15 Pewarnaan Perl’s

24. 16 ReagenuntukPewarnaan Perl’s 2 g potasiumferocyanide 2 g asam hydrochloric 100 ml air suling 100 ml air suling Larutanreagen Larutan B Larutan A

25. Metodepewarnaan Perl’s : Keringkanapusandanfiksasidengan methanol selama 10 - 20` Rendamdalamlarutanreagenselama 10` padasuhu 20⁰ Bilas slide dalam air mengalirselama 20` Bilasdengan air suling Cat lagidengan eosin selama 10 - 15 detik Besiakantampaksebagaigranulberwarnabiru padamakrofag 17

26. 18 Besitampaksebagaigranulberwarnabiru

27. 19

29. Memilihbagian yang akandiperiksa

30. Mendapatkankesankepadatanseldanjumlahmegakariosit

31. Mendeteksikeberadaansel-sel abnormal20

33. Melihatgumpalansel abnormal  adainfiltrasi tumor metastase

34. Mengenalimakrofag. Padapembesaranlebihbesar (obyektif 40X, 100X denganminyakemersi) memeriksaadanyahemofagositosis, pigmen malaria, infeksijamurataubakteri.UrutanpemeriksaansumsumtulangpadapengecatanRomanowsky (pembesaran 100X) 21

36. Menentukanrasio myeloid : eritroid

37. Melakukanhitungjenissel

38. Melihatdaerahnekrosisdisumsumtulang

39. Memperkirakankandunganbesidimakrofagdangranul-granulbesidiseleritroidpadapewarnaan Perl’s22

40. Table 1.5. Differential Counts of Bone Marrow Aspirates from 12 Healthy Men

42. Kepadatansel, jumlahlemakdanbanyaknyamegakariosit

43. Tiapjenissel yang dipelajari : disebutkandistribusi stadia pematangan, kelainanmorfologi, danperbandingandenganselsel yang lain, terutama M:E ratio24

45. Buatikhtisarsemuakelainandandiberitafsiranhasildenganmempertimbangkan data-data klinikdanpendapat-pendapatdaripemeriksaandarahtepi25

46. 26

47. Terimakasih Terimakasih 27

49. Sutulmengandungsel-selimatur yang sangatrapat, lengketdantidakdapatdiaspirasi (sebagiankasus leukemia akut)

50. Terdapat fibrosis sutulataukankermetastatikDry tap : tidakdiperolehbahanaspiratwalaupuntekniksudahbenar 28

51. Perbandinganaspirasidanbiopsi 29

52. Sitogenetik, biakanmikrobiologi, analisisbiokimia, petandaimunologikdansitokimia, analisisimunoglobulinatau gen reseptor T, analisis DNA atau RNA untukmencarikelainan gen, biakansel progenitor. 30 Pemeriksaankhusus yang lain

54. Biarkandingin, lalusaring

55. Larutansiapuntukdigunakan

56. Metode:

57. Cat slide, lalukeringkan.

58. Setelah 2`, tambahkan air + cat selama 5-7`

59. Cuci dg air mengalirataubufersampaimunculwarna pink (2`)

60. Biarkansampaikering31

62. May-GrunwaldGiemsa stain

63. Jenner-Giemsa stain

64. Giemsa stain

65. Buffered distilled water pH 6.8Buffer: Buat 50 ml dari 66 mmol/l sorensen’sphosphat buffer, tambah air sampai 1 liter pada pH 6.8 32 Cat Romanowsky

66. 1 g serbuk dye dimasukkanke conical flask kapasitas 200-250 ml. Tambahkan 100 ml methanol, campurpadasuhu 50⁰. Simpanpadasuhuiniselama 15` sambil kadang2 diaduk Larutansiapdipakai. 33 Giemsa stain

68. Fiksasiselama 3`

69. Cat dg lar.cat ygdiencerkanselama 15`

70. Bilas dg bufer pH 6.8 selama 1`

71. Bilas air  keringkandiudara.Larutan cat: sebelumdigunakan, encerkan 1 vol stock solution dg 14 vol.HEPES Larutaninistabil 8 jam Fiksatif: 1 stock sol. Azure B-eosin Y + 14 methanol 34 Romanowsky stain

72. 35 Jarumsalah, jarumklima & jarum Islam

73. 36 Change in differential counts of bone marrow with age

74. 37 Grading of iron storage in bone marrow aspirate material

75. Lebihmudahdimulaidarieritrositmaturatauneutrofilmatur Kelainanmaturasi : giant pronormoblas, nuclear cytoplasmic asynchrony  infeksi parvovirus B19, mielodisplastiksindrom, ataumegaloblastik anemia Perubahanproporsiselmieloidprimitifterhadap yang maturmenunjukkanrespontreatmenpada leukemia atau recovery dariagranulositosis Adanyaselblasbermaknadalamdeferensiasi anemia refrakterdanmenentukan prognosis leukemia 38 Interpretasimaturasiselmieloiddaneritroid

77. Plasma sel normal : < 2%padadiskrasiasel plasma  meningkat, terjadi clump 39 Deff.count

78. Selterwarnaitidakteratur, bataskabur, sitoplasmamengkerut, intipiknotik Terjadipada sickle cell disease Kadangteerjadipadalimfoma, akulimfoblastikdankroniklimfositik leukemia, mieloproliferatif disease, ca metastatik, septikemia, TBC, anorexia nervosa 40 Sutulnekrosis

79. 41 hematopoiesis