Teks tersebut membahas tentang pemeriksaan TUBEX-TF untuk mendeteksi antibodi IgM terhadap antigen LPS-09 Salmonella Typhi. TUBEX-TF mengukur kemampuan serum untuk menghambat reaksi antara partikel magnetik yang dilabeli antigen LPS-09 dan antibodi monoklonal yang dilabel warna. Hasilnya menunjukkan tingkat inhibisi yang menentukan status infeksi Salmonella Typhi pasien.

1. TUTOR INFEKSI PUTARAN I PEMERIKSAAN TUBEX-TF Lulut K, dr – Dr. JusakNugraha, dr, MS, SpPK (K)

2. Pendahuluan PenyebabdemamtifoidterseringadalahSalmonella Typhi Salmonella Typhimempunyai : Antigen O  somatik Antigen H  flagela Antigen Vi  envelope Persamaanfaktordominan Ag O digolongkanserogrup yang sama (serogrup A, B, C, D) Persamaanfaktor Ag H digolongkanserotip yang sama (serotip a, b, c, d)

3. Pendahuluan

4. Pendahuluan Gejalaklinistidakkhas, sulitdibedakandenganDBD, malaria, leptospirosis danchikungunya. Perlupemeriksaanlaboratorium

5. Pendahuluan Diagnosis demamtifoiddigolongkandalamtigakelompokyaitu: 1. Isolasikuman 2. UjiSerologi antiboditerhadap antigen spesifikSalmonella Typhidanmenentukan antigen spesifikSalmonella Typhi TUBEX 3. Pelacakan DNA Salmonella Typhidarispesimenpenderita hibridisasidenganpelacak DNA (DNA probe) dantehnikPolymerase Chain Reaction (PCR)

6. PrinsipPemeriksaan TUBEX-TF Mengukurkemampuan serum antibodiIgMmenghambatreaksiantara antigen berlabellateksmagnetik (reagenwarnacoklat) danantibodimonoklonalberlabellatekswarna (reagenwarnabiru). Dipisahkanolehsuatudayamagnetik. Konsentrasipartikelindikator yang tersisadalamcairanmenunjukkandayainhibisi.

7. PrinsipPemeriksaan TUBEX-TF

8. PersiapanPemeriksaan Reagencoklat Skalawarnadengan magnet Kontrolpositif Kontrolnegatif SumuranreaksiberbentukV Reagenbiru Stikerpenandabotol Selotifuntuksumuranreaksi

13. MetodePemeriksaan

14. PelaporanHasil

15. InterpretasiHasil

16. TERIMA KASIH

17. Hal yang MempengaruhiPemeriksaan Perbandingan yang salahantarareagendansampel Suspensipartikel yang tidakhomogen Pencampuranreagen yang kurangsempurna

18. Hal yang MempengaruhiPemeriksaan Pengocokanyang terlalulambatselamainkubasi Plasma EDTA atausitras Sampel yang hemolisisatauikterik

19. Salmonella Batang, Gram negatif, oksidasenegatif, tidak membentuk spora dan bersifat fakultatif anaerob Dibagimenjadi 2 spesies : Salmonella enterica Salmonella bongori S.typhi: K/A, gas-, H2S+, sitrat-, lisin+, indol-, motilitas+

20. ANTIBODI Antibodimonoklonal : antibodimonospesifik yang dapatmengikatsatuepitopsaja Epitop : bagian antigen yang dapatmenimbulkanterjadinyaresponimun

21. LIPOPOLISAKARIDA Sebuahmolekulbesarberupakompleksantarasenyawa lipid danpolisakaridadenganikatankovalen. Senyawa LPS banyakditemukanpadalapisanmembranselsebelahluarbakteri gram-negatifdanbersifatendotoksin, yang memicuaktivasisistemkekebalan.

22. LIPOPOLISAKARIDA LPS dari Ag O terdiri dari 3 regio : Regio I : mengandung Ag O spesifik atau Ag dinding sel polimer oligosakarida berguna untuk pengelompokan serologis, Regio II, terikat pada antigen O, terdiri dari core polysaccharide, mempunyai sifat yang konstan di antara Enterobacteriace Regio III, mengandung lipid A yang terikat pada core polysaccharide, merupakan bagian yang toksik. Lipid A menempelkan LPS pada membran permukaan sel (outer membrane)

23. False Positif Reagenbiru >> Reagencoklat << Menyebabkanreagenbiru yang takterikatdalamjumlahberlebih di supernatan.

24. False Negatif Terlalubanyakreagencoklat yang akanmengikatIgMpasiendanIgMdarireagen.

25. Skor TUBEX dan respon terbentuknya antibodi (Lim 2010)

27. LarutanKontrol KontrolPositif : antibodidalam protein yang distabilkandengan buffer KontrolNegatif : protein yang distabilkandengan buffer

28. Deteksi Antigen padaTubex TF

29. Pengelompokan organisme Salmonella menurut skema Kauffmann-White berdasarkan antigen O dan H

30. WHY LPS O9 Antigen ? Immunodominant & Robust Immunogenic in infants LPS O-9 Antigen Potent B cell mitogen Very rare in nature Only in group D Salmonella (WHO, 2003. Background document : The diagnosis, treatment and prevention of typhoid fever) tc

31. Serotipe (serovar) Spesies dicetak miring Serovar tidak dicetak miring dan mulai dengan huruf pertama kapital Contoh: Salmonella enterica serovar Typhi. Serovar dapat digunakan tanpa nama spesies, misalnya: Salmonella Typhi (S. Typhi)