Spora bakteri tahan terhadap pewarnaan karbol fuchsin karena dinding selnya yang tebal, sehingga diperlukan pemanasan agar zat warna dapat masuk. Sedangkan bakteri vegetatif akan melepaskan karbol fuchsin dan mengambil warna biru dari methylene blue. Hal ini menyebabkan spora berwarna merah dan bakteri vegetatif berwarna biru.

1. PEWARNAAN SPORA
METODE KLIEN
VEDDERKelompok 2
Annisa Kurnia Dewi
As’ad Amanullah
Muh. Khafi Cakra Rivanka
Nur Aulia Fitriani Kuntari
XI-4
SMK-SMAK Bogor

2. Prinsip Dasar
Spora bakteri mempunyai dinding sel yang tebal
sehingga diperlukan pemanasan agar pori - pori
membesar dan zat warna Carbolfuchsin dapat masuk,
dengan pencucian pori - pori kembali mengecil
menyebabkan zat warna Carbolfuchsin tidak dapat
dilepas walaupun dilunturkan dengan Asam sulfat 1%,
sedangkan pada bakteri warna
Carbolfuchsin dilepaskan dan mengambil warna biru
dari methylene blue. Sehingga bakteri berwarna biru
dan spora akan berwarna merah.

3. Alat dan Bahan
Bahan-bahan yang
diperlukan ialah:
• suspensi bakteri
• minyak immercy
• Carbolfuchsin.
• Methylen biru 1%.
• Asam sulfat 1%.
• Alkohol 70 %
• LF
• Kapas
• Kertas saring
Alat-alat yang diperlukan
ialah:
• Object Glass
• Ose
• Pinset
• lampu spirtus
• Mikroskop binokuler
• Tabung reaksi
• Rak tabung reaksi
• Pencil glass
• Pipet tetes

4. Bagan Kerja
SP 48
jam
LF
Disiapkan Alat
dan Bahan
Sanitasi
SP 48
jam
Suspensi bakteri dicampurkan dengan
karbol fuchsin dengan bagian 1: 1
Kaca alas datar
dibersihkan
dengan kapas
beralkohol
Dikeringkan
Dibagi 3 bagian
dengan pencil
glass.
SP 48
jam
LF

5. Ulaskan suspensi
bakteri pada
tiap bagian Difiksasi Dicelupkan kedalam
H2SO4 1-3 detik
Dibilas
dengan air
suling.
Ditetesi zat warna
methylene blue.
Diamkan 3 menit.
Dibilas
dengan air
suling.
Dikeringkan
dengan kertas
saring.
Tetesi dengan minyak
imersi pada satu
bagian.
Diamati pada mikroskop
dengan pembesaran
1000x (lensa objektif
100x)
Catat dan gambar hasilnya

6. Hasil Pengamatan
• Badan vegetative : warna biru
• Spora : warna merah muda
• Sel vegetative : bentuk batang

7. Spora dapat terbentuk di tengah, bagian tengah
(central), ujung (terminal) ataupun tepian sel.
Sentral
Terminal
Sub Terminal

8. PEMBAHASAN

9. Spora bakteri adalah bentuk bakteri yang
sedang dalam usaha mengamankan diri
terhadap pengaruh buruk dari luar.

10. Bagian-bagian Spora
 Core : Sitoplasma yang
terkandung semua unsur
untuk kehidupan bakteri.
 Cortex : lapisan yang paling
tebal, terdiri dari lapisan
peptidoglikan tapi dalam
bentuk istimewa.
 Dinding spora : lapisan
paling dalam, akan kembali
menjadi dinding sel bila
spora kembali ke bentuk
vegetative.

11. Bagian-bagian Spora
 Eksosporium : lipoprotein
membrane yang terdapat
dari luar.
 Coat : zat yang
menyebabkan spora tahan
terhadap pengaruh luar.

12. Penyebab Bakteri Membentuk Spora
Umur sudah tua
Kebutuhan nutrisi di sekitar lingkungan
habis
Keadaan lingkungan sekitar tidak
menguntungkan

13. Beberapa bakteri mampu membentuk spora
meskipun tidak dalam keadaan ekstrem ataupun
medium yang kurang nutrisi. Jika medium selalu
diadakan pembaruan dan kondisi lingkungan
disekitar bakteri selalu dijaga kondusif,
beberapa jenis bakteri dapat kehilangan
kemampuannya dalam membentuk spora.
(Dwijoseputro (1979))

14. Proses Pembentukan Spora
1. Terjadi kondensasi DNA pada bakteri yang akan membentuk
spora
2. Terjadi pembalikan membran sitoplasma, sehingga, lapisan luar
membran kini menjadi lapisan dalam membran (calon) spora.
3. Pembentukan korteks primordial (calon korteks)
4. Pembentukan korteks
5. Spora terlepas dan menjadi spora yang bebas, pada tahap 5
ini,jika spora mendapatkan lingkungan yang kondusif, maka ia
bisa tumbuh menjadi satu sel bakteri yang baru. (sumber: FMIPA
UPI).

15. Keterangan
1) Fungsi dipanaskan pada suhu 80o C adalah
agar memudahkan zat warna meresap ke
dalam dinding spora.
2) Saat dimasukkan ke dalam asam sulfat, zat
warna karbol fuchsin baru merembes ke
dalam spora.

16. Kesimpulan
Vegetatif bewarna biru, spora batang basil,
susunan rantai, spora merah, letak spora central