Downloaded 194 times
Uploaded byAsthrEey' Schwarzenegger
Pewarnaan bakteri (1)
Dokumen ini membahas prinsip dan metode pewarnaan bakteri, termasuk pembagian menjadi morfologi, diferensial, dan khusus. Pewarnaan dilakukan dengan berbagai zat pewarna untuk mengidentifikasi jenis bakteri, seperti Gram positif/negatif serta tahan asam. Terdapat deskripsi proses dan contoh spesifik untuk setiap metode pewarnaan yang digunakan di laboratorium mikrobiologi.
More Related Content
Similar to Pewarnaan bakteri (1)
Pewarnaan bakteri (1)
- 1. Pewarnaan bakteri Bacteria staining SHERWINARMANDA, S.Si. LABORATORIUM MIKROBIOLOGI FAKULTAS FARMASI UNIVERSITAS HASANUDDIN
- 2. Prinsip Pewarnaan/Pengecatan • Bakteribermuatan negatif (kandungan NH4-). Salah satu mekanisme pewarnaan yaitu ionisasi. Zat pewarna terbagi menjadi dua: • 1. Basa, bila zat warna yang digunakan memiliki muatan pada bagian kationnya. Contoh: kristal violet, metilen biru, karbol fuksin, fuksin basa. • 2. Asam, bila zat warna yang digunakan memiliki muatan pada bagian anionnya. Contoh: Eosin, merah kongo, Sudan III, Sudan IV
- 3. Pembagian Pengecatan 1. Morfologi -Pengecatan sederhana - Pengecatan negatif 2. Diferensial - Pengecatan Gram - Pengecatan Tahan Asam 3. Khusus - Pengecatan Kapsul - Pengecatan Flagel - Pengecatan Spora
- 4. Morfologi… 1. Pengecatan Sederhana Hanyamenggunakan 1 pewarna saja. Contoh: Kristal violet, Metilen biru, Karbol fuksin, 2. Pengecatan Negatif Proses pewarnaan bukan terhadap sel namun lingkungan disekitaran sel mikroorganisme
- 5. 1 ose suspensibiakan bakteri Ratakan diatas gelas objek Teteskan nigrosin di ujung objek gelas Fiksasi Tetesi metilen biru 1-2 tetes Biarkan 1-2 menit Masukkan inokulan dari ose Cuci dengan air mmengalir (Sisa air dikeringkan dengan tisu) Amati dibawah mikroskop dengan perbesaran 10 x 100 Objek gelas lain diletakkan disebelah luar nigrosin dengan posisi miring (300) Sederhana Geser perlahan hingga membentuk lapisan tipis Amati dibawah mikroskop dengan perbesaran 10 x 100 Negatif
- 6. Diferensial… • Pengecatan Gram. Untukmembedakan Gram positif dan negatif. Ada 4 proses pewarnaan yaitu pewarna utama, penguatan pewarna, dekolorisasi, pewarna penutup.
- 7. • Pengecatan TahanAsam Disebut dengan pewarnaan Ziehl-Neelsen. Membedakan mycobacterium dan Nocardia yang memiliki kandungan asam mikolat dalam lipidnya. Prinsipnya hampir sama dengan Gram, namun tidak ada proses penguatan pewarna.
- 8. Preparat olesan Fiksasi + GramA (kristal violet) Biarkan 20 detik, cuci 2 detik + Gram B (Larutan Iodin) + Gram C (Etil alkohol) Biarkan10 - 20 detik, cuci 2 detik + Gram D (Safranin) Keringkan dengan kertas saring/tisu Amati dibawah mikroskop dengan perbesaran 10 x 40
- 9. Preparat olesan Fiksasi + KarbolFuksin Panaskan 1-2 menit, dan bilas dengan air mengalir + Alkohol asam bilas dengan air mengalir + Metilen biru Biarkan10 - 20 detik, cuci 2 detik Amati dibawah mikroskop dengan perbesaran 10 x 100
- 10. Khusus… 1. Pengecatan Spora Sporamerupakan bentuk pertahanan bakteri dari pengaruh panas dan bahan kimia. Contoh bakteri yang memiliki spora: Bacillus, Clostridium, Sporasarcina. Dua metode pewarnaan spora yaitu SchaefferFulton dan Dorner
- 11. Schaeffer-Fulton Preparat olesan Tutup dengankertas saring + Hijau Malakit Suspensi m.o Panaskan 5 menit, dan diamkan 1 menit. Lepaskan kertas saring, Cuci air mengalir + Safranin Diamkan 1-2 menit, bilas dengan air mengalir Amati dibawah mikroskop dengan perbesaran 10 x 100 Tabung reaksi yang berisi 0,5 ml air steril + 5 tetes karbol fuksin Panaskan dengan bekker yang berisi air mendidih Oleskan Preparat Lakukan seperti pengecatan negatif Amati dibawah mikroskop dengan perbesaran 10 x 100 Dorner
- 12. 2. Pewarnaan Kapsul Kapsulmerupakan lapisan polipeptida atau polisakarida yang melekat diluar sel. Proses pewarnaan kapsul tidak semudah pewarnaan sederhana, pemanasan berlebihan menyebabkan kapsul pecah dan tidak adanya pemanasan menyebabkan kapsul akan tercuci.
- 13. Preparat olesan bakteri Ratakandiatas gelas objek Fiksasi + kristal violet Biarkan 1-2 menit Panaskan diatas penangas air selama 1 menit Bilas dengan CuSO4 Keringkan dengan kertas saring Amati dibawah mikroskop dengan perbesaran 10 x 100
- 14. REFERENSI 1. Benson. MicrobiologyApplications Laboratory Manual in General Microbiology eigth edition. McGraw-Hill Companies. 2001. 2. Prescott M Lansing, Herley, Klein. Microbiology 5th . McGraw-Hill Companies. 2002. 3. Lay, W Bibiana.Analisis Mikroba di Laboratorium. PT. Raja Grafindo Persada. Jakarta. 1994
- 15. BAT ASAN MATERI 1.Morfologi bakteri 2. Perbedaan Gram Positif dan Gram Negatif 3. Jenis-jenis zat pewarna berdasarkan sifat kimia 4. Mekanisme Pewarnaan Bakteri.
- 16.