Dokumen tersebut memberikan informasi mengenai beberapa tes laboratorium klinik, seperti tes deteksi HIV (Western Blot), tes anti-Thyroid Peroxidase (ELISA), tes hCG (immunokromatografi), tes Widal (aglutinasi), dan Direct Coomb's Test (aglutinasi). Dokumen tersebut menjelaskan prinsip, prosedur, dan interpretasi hasil dari masing-masing tes tersebut.

1. dr. Uleng Bahrun Sp.PK(K), PhD

2. Praktikum
Imunologi
Deteksi HIV
(Western Blot)
Tes anti-Thyroid
Peroxidase
(ELISA)
Tes hCG
(immunokromatografi)
Tes Widal
(aglutinasi)
Direct Coomb’s Test
(aglutinasi)

3.  Pra Analitik
1. Persiapan Pasien
catat daftar obat yang sedang dikonsumsi
pasien. Obat yang dapat mempengaruhi
tes ini adalah: penisilin, sefalosporin, obat
antihipertensi, dll
2. Persiapan Sampel
hindari sampel hemolisis, sampel darah
dengan antikoagulan natrium sitrat 3.8%.
Tes sebaiknya dilakukan paling lambat 2
jam setelah pengambilan sampel

4. 3. Alat & Bahan
Alat :
Tabung reaksi 75 x 10 mm
Pipet tetes
Sentrifus
Inkubator
Kaca objek
Bahan :
Darah sitrat (1:9)
Larutan NaCl fisiologis (0.9%)
Reagen Coomb’s,
Kontrol positif dan kontrol negatif

5.  Analitik
1. Prinsip
Penambahan serum Coomb’s (serum hewan yang
mengandung antibodi spesifik terhadap globulin
manusia) pada eritrosit yang tersensitisasi/eritrosit
yang terbungkus dengan immunoglobulin atau
komplemen akan menimbulkan suatu aglutinasi.

6. 1
43
2

7. Agglutination
5 6

8. 2. Cara Kerja
 Masukkan 0,5 ml darah yang akan diperiksa ke dalam tabung
reaksi.
 Lakukan pencucian eritrosit empat kali berturut-turut dengan
setiap kali dilakukan sentrifus kemudian plasma dibuang.
 Buatlah suspensi eritrosit yang tertinggal dalam tabung setelah
sentrifus terakhir dengan menambah sekian banyak NaCl
fisiologis sampai suspensi eritrosit mempunyai nilai hematokrit
2%.
 Ke dalam tabung 75x10 mm, masukkan 1 tetes suspensi tadi
kemudian tambahkan dengan 2 tetes reagen Coomb’s.
 Campur kemudian diinkubasikan pada suhu 370C selama 30-50
menit.
 Kocok dengan hati-hati tabung tersebut, lihat adanya aglutinasi,
konfirmasikan dengan menggunakan mikroskop pembesaran
10x atau 40x (buat sediaan dengan cara meneteskan satu tetes
suspensi di atas kaca objek).
 Jika hasilnya negatif, lakukan sentrifus ulang dengan kecepatan
1000 rpm selama 1 menit.
 Periksa kembali adanya aglutinasi seperti langkah 6 di atas.
 Bandingkan hasil tes dengan kontrol positif dan kontrol negatif.

9.  Pasca Analitik
Nilai Rujukan:
negatif (tidak terbentuk aglutinasi)
Terbentuknya aglutinasi membuktikan adanya
antibodi yang melapisi eritrosit.
Tes Coomb’s positif pada:
• Panyakit hemolitik pada bayi baru lahir
(Autoimmune Hemolytic of the Newborn)
• Anemia hemolitik autoimun (Autoimmune
Hemolytic Anemia)
• Anemia hemolitik karena obat-obatan
• Reaksi transfusi hemolitik

11. Tes
Widal
Metode
Slide
Metode
Tabung

12.  Pra Analitik
1. Persiapan Pasien
Tidak ada persiapan khusus
2. Persiapan Sampel
• Darah vena diambil sesuai prosedur baku,
dibiarkan membeku; kemudian disentrifus untuk
memperoleh serum segar.
• Bila tes akan ditunda, simpanlah serum dalam
lemari pendingin pada suhu 2-8C (48 jam). Bila
menunda > 48 jam, serum harus disimpan dalam
keadaan beku (di bawah 0C).
• Serum yang lipemik, hematik (mengandung darah)
atau tercemar tidak boleh dipakai untuk tes

13. 3. Alat & Bahan
• Kit Tydal (Tulip Diagnostic)
• Lempeng pereaksi (tile / slide)
• Tabung reaksi & Rak tabung
• Pipet 0,08 ml; 0,04 ml; 0,02 ml; 0,01
ml; 0,005 ml 1,0 ml dan 1,9 ml
• Larutan NaCl fisiologis (0.85 %)
• Sentrifus
• Inkubator

14. Analitik
1. Prinsip
Tes ini digunakan untuk mendeteksi ada
tidaknya ANTIBODI terhadap
Salmonella Typhi dan Salmonella
Paratyphi A dan B

15. 2. Cara Kerja
Metode Slide
• Siapkan serum yang akan dites, jika menggunakan serum-
simpan, biarkan serum beberapa saat untuk menyesuaikan
suhu ruangan (18-30C).
• Siapkan lempeng-reaksi, buatkan lima buah lingkaran dengan
 3 cm. Pipetkan serum sesuai pola di bawah ini:
• Kocok dengan baik isi botol suspensi antigen kemudian pipet 1
tetes pada setiap lingkaran.
• Serum dan antigen dalam setiap lingkaran dicampur baik
kemudian goyang memutar lempeng pereaksi agar campuran
reaksi merata.
• Setelah satu menit baca hasil reaksi (agglutinasi).
Lingkaran Serum
1 0,08 mL
2 0,04 mL
3 0,02 mL
4 0,01 mL
5 0,005 mL

16. Metode Tabung
• Siapkan 8 tabung reaksi kecil, beri nomor , , , , , , , dan
.
• Pipetkan NaCl 0,85% sebanyak 1.9 mL ke tabung , dan 1 ml
masing-masing ke tabung  s/d 
• Tambahkankan 0,1 ml serum ke tabung  dan campur baik isi
tabung
• Pindahkan 1,0 ml isi tabung  ke tabung  dan campur baik isi
tabung  dan seterus nya ke tabung  sampai tabung . Dari
tabung , buang 1,0 ml.. Tabung  hanya akan berisi NaCl 0,85%
dan akan dipakai sebagai control.
• Botol reagen dikocok baik kemudian pipetkan 1,0 ml ke setiap
tabung. Campur baik isi setiap tabung.
• Inkubasikan pada suhu 50C selama 4 jam atau pada 37C
semalam.
• Baca hasil reaksi dan laporkan tabung terakhir yang masih
menunjukkan agglutinasi.
Tabung
1 2 3 4 5 6 7 8
Pengenceran
1:20 1:40 1:80 1:160 1:320 1:640 1:1280 kontrol

17.  Pra Analitik
1. Persiapan Pasien
Tidak ada persiapan khusus
2. Persiapan Sampel
• Semua spesimen urin dapat digunakan untuk tes ini, tetapi untuk hasil yang
optimal dianjurkan urin pertama di pagi hari karena mengandung
konsentrasi hCG tertinggi.
• Spesimen urin dikumpulkan pada wadah yang kering, bersih dan wadah
terbuat dari plastik/kaca.
• Jika spesimen tidak dapat diperiksa segera, simpan dilemari pendingin pada
suhu 2-80C (sampai 72 jam sebelum pemeriksaan). Tidak dianjurkan
menggunakan pengawet. Pada saat akan digunakan, spesimen dibiarkan
beberapa saat untuk menyesuaikan dengan suhu ruangan (20-300C).
• Perhatikan tanggal kadaluarsa dari strip tes yang akan digunakan.
• Hindari strip tes dari sinar matahari langsung, kelembaban dan panas
• Strip tes dapat disimpan di lemari pendingin atau suhu ruangan (2-300C).

18. 3. Alat & Bahan
• Wadah penampung urin
• Urin pertama pagi hari
• Strip tes

19. Analitik
1. Prinsip
merupakan tes kualitatif m’ggunakan
two site sandwich immunoassay.
Membran dilapisi dengan rabit anti hCG
pada bagian tes dan rabit anti-mouse
pada bagian kontrol. Selama tes urin
pasien bereaksi dengan konyugat
colloidal gold monoklonal anti-hCG

20. Sampel : Antigen hCG
Bantalan Konyugat : Colloidal gold monoclonal anti hCG
Garis Tes (T) : Rabit anti hCG
Garis Kontrol (C) : Rabit anti mouse

21. T
C

22. C
T

23. • Negatif: hanya timbul satu
garis berwarna merah pada
kontrol
• Positif: timbul 2 garis merah
(satu pada kontrol dan satu
pada tes)
• Invalid: tidak ada garis
merah pada kontrol maupun
tes atau ada garis merah
pada tes tetapi tidak ada
pada kontrol  ulangi tes
dengan strip tes yang baru

24. Prinsip Tes :

25. Serum yg mengandung
antibodi anti-TPO
horseradish peroksidase
(HRP) anti IgG
Tiroid Peroksidase (TPO)
Intensitas warna kuning ini
diukur secara fotometri
pada panjang gelombang
450 nm

26. Prinsip Tes :

27. Proses Elektroforesis dan
Blotting Protein
Electrophoresis Tank

28. Interpretasi
• Positif : bila terdeteksi 2 pita dari
p24, gp41, gp120 atau gp160
• Negatif : bila tidak ada pita HIV
spesifik yang terdeteksi
• Indeterminate : bila satu pita saja yang
positif, yaitu p24, gp41, gp120 atau
gp160, p66, p51, p31 atau p17

29. WB (+) : min. dua atau tiga pita selubung bebas,
yaitu p24, gp41 dan gp120 atau gp160