1. На правах рукописи
КРУК НИНА АЛЕКСАНДРОВНА
; ВЛИЯНИЕ БИОЛОГИЧЕСКИХ И ТЕХНИЧЕСКИХ
' ФАКТОРОВ НА РЕЗУЛЬТАТИВНОСТЬ ОСЕМЕНЕНИЯ
СВИНЕЙ ЗАМОРОЖЕННОЙ СПЕРМОЙ
06.02.01. - Разведение, селекция, генетика и
воспроизводство сельскохозяйственных животных
АВТОРЕФЕРАТ
диссертации на соискание ученой степени
кандидата биологических наук
Дубровицы, Московская область
1999 г.
Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис»

2. £&G*C6><>*> - - ^^c^U^U^^M^.
Работа выполнена во Всероссийском научно-исследовательском
институте свиноводства. L .
tCCM(з£*
Научный руководитель: доктор биологических наук
АХНАРИЖНЫЙ
Официальные оппоненты: доктор биологических наук
И.Н. ШАЙДУЛЛИН
кандидат биологических наук
Н.В. ЖУКОВСКАЯ
Ведущее учреждение: Российская академия
•менеджмента в
животноводстве
Защита диссертащшсостоится " <2 " /*аябр.я1999г. в 10 часов
на заседании диссертационного Совета Д.020.16.01 при-.Всерос-
сийском научно-исследовательском институте животноводства.
Адрес: 142012, Дубровины, Подольского района,
Московской области.
С:диссертацией можно ознакомиться в библиотека Всерос­
сийского научно-исследовательского института животног.олсггва.
Автореферат разослан " i*f "сентября 1999 г.
Ученый секретарь
диссертационного Совета,
доктор с.-х. наук Ю.И,;ШМАКС?3
Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис»

3. 1. ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ;
1.Г. Актуальность работы. Искусственное осеменение является
важнейшим рычагом - интенсификации; репродукции - свиней.в
условиях промьшшенного содержания. Особенно важным с точки
зрения интенсификацш! селекционно-племеннойi работы,в евино-•
водстве является метод долгосрочного хранения - спермы.хряков в.
глубокозамороженном состоянии.- . •
Использование замороженной-
спермы%позволяет улучшить
племенную работу: в свиноводстве,, так как при. этом появляется=
возможность широкого использования выдающихся в генетическом*,
отношешга хряков, проверенных по качеству потомства... :'•:
Однако до сихпор, данный метод осемененияне нашелширокого
практического применения в связи с пониженной фертильностью
заяороженнооттаяной спермы хряков. , • ., ; •-.; :•, ...
•- Биологические причиныпониженной криоустойчивости спермы
Хряков к замораживанию окончательно не выяснены и этот вопрос
требует дальнейших всесторонних исследований.
Важное значение для успешного замораживания спермы хряков
имеет состав синтетических сред. В этой связи дальнейшее совершен­
ствование и повышение криозащитных свойств разбавителей для.
спермы хряков имеет одно из важнейших значений.
Большую роль в успешном осеменении свиней замороженной
спермой играет также время введения спермы по отношению к
овуляции. Поэтому вопросы стимуляции и синхронизации овуляции
3' свиней в связи с использованием для осеменения замороженной
спермы, также являются актуальной задачей биологической науки.
-•. Не менееважное практическое значение при разработке методов
замораживашга спермыхряков имеет вопрос снижения объема и дозы
сохраняемой спермы. При этом появляется возможность значитель­
ного сниженияэкономическихзатрат нахранение спермы в результате
сокращения потребностей в хладоагентах и биохранилшцах. . •
Большой научный и практический интерес имеюттакже вопросы-
влияния на криоустойчивость сперматозоидов хряков посредством
введения определенных биологичеЬЫ акТИц-ныХлОДЦссга в их
3 КМ : и ."• С ..;• ,ОТ£КА
Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис»

4. рацион.
Именно на решение данных проблем и были направлены иссле­
дования,изложенные в диссертации. •./::
1.2; Цель н задачи исследований. Целью данной работы явля­
ется повышение эффективности искусственного осеменения свиней
при использовании глубокозамороженной спермы. > :/>..
Для решения поставленной цели в задачу нашихисследований ••
входило изучение следующих вопросов:
1) Изучить влияние диализной обработки спермы хряков на её
криоустойчивость. -...-::
2) Выясшпъ влияние методазамораживания на содержание АТФ
в сперматозоидах хряков. •
. 3) Изучить влияние новых антиоксидантов и пищевой глюкозы
на криоустойчивость спермы хряков./ : .
< 4) Проанализировать криоустойчивость спермы хряков в связи
с содержанием витаминов Е и С в их рационе.
5) Определить влияние подкормки хряков препаратом СГОЛ на
криоустойчивость сперматозоидов.
6) Выясшпъ возможность повышения результативности осеме­
нения свиней замороженной спермой при стимуляции овуляции
сурфагоном и анипростом.
7) Исследовать оплодотворяемость свиноматок от замороженной
спермы в зависимости от концентрации сперматозоидов в дозе.
8) Проанализировать экономическую эффективность результатов
исследований.
1.3. Научная новизна исследований. Впервые изучена динамика
содержания АТФ в сперматозоидах хряков в связи со способом крио-
консервации и установлена высокая криопротектнвная эффектив­
ность нового антиокснданта ВНИИС-1. Выяснена возможность
использования пищевой глюкозы в составе синтетической среды для
спермы хряков иустановлено влияние способа оттаивания на биоло­
гическую полноценность сперматозоидов. Установлена возможность
повышения криоустойчнвости спермы хряков при их подкормке
препаратом СГОЛ и витаминами Е и С. Доказана возможность
Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис»

5. повышения результативности осеменения свиней замороженной
спермой при стимулящш овуляции сурфагоном и анипростом.
1.4. Практическая.значимость. Замораживание спермы хряков
с диализной обработкой позволяет значительно уменьшить потреб­
ность в хладоагентах и биохрашшшцах. Использование в составе
замораживающей среды антиоксиданта ВНИИС-1 повышает крио-
устойчивость и оплодотворяющую способность сперматозоидов.
Замена медицинской глюкозы.на пищевую в составе заморажи­
вающей среды снижает на 20% ее себестоимость.
Подкормка хряков препаратом СГОЛ позволяет повысить
крнеустойчивость сперматозоидов и результативность искус­
ственного осеменения свиней.
Стимуляция овуляции у свиней с помощью внутриматочного
введения сурфагона и ашшроста позволяет проводить однократное
осеменение свиней замороженной спермой в течение эструса.
Апробация работы. Основные материалы диссертации
доложены на:
• научно-практической конференции: "Проблемы обогащения и
эффективного использования генофонда в животноводстве". РАМЖ,
Быково, 1995; .
• научной конференции: Воронежского государственного
аграрного университета им. К.Д.Глинки. Воронеж, 1996;
* • рабочем совещании: "Консервация генетических ресурсов".
Пущино, 1996;
• научно-практической конференции: "Современные проблемы
воспроизводства стада с.-х. животных и задачи кадрового обес­
печения". РАМЖ, Быково, 1996;
• международном симпозиуме: "Бесплодие. Вспомогательные
репродуктивные технологии". Киев, 1997;
• научно-практической конференции: "Повышение конкурентно­
способности животноводства и задачи кадрового обеспечения".
РАМЖ, Быково, 1997;
• на 2-ой международной научно-практической конференции:
"Актуальные проблемы ветеринарно санитарного контроля с.-х.
5
Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис»

6. продукции". Москва, 1997;
• научно-практической конференции: "Эффективность развития
свиноводства в современных условиях рыночной экономики".
ВНИИС, Быково, 1998;
• Всероссийском совещании по воспроизводству с.-х. животных,
Москва, ВВЦ, 1999;
• международном симпозиуме: "Бесплодие. Вспомогательные
репродуктивные технологии 2000". Киев, 1999;
• международной научно-практической конференции: "Повы­
шение эффективности ведения свиноводства". ВНИИС, Быково, 1999;
• расширенной межотдельской конференции ВНИИС, 1999;
• научно-практической конференции: "Повышение конкуренто­
способности животноводства и задачи кадрового обеспечения".
.РАМЖ, Быково,; 1999.
По материалам диссертации опубликовано 10 статей.
1.6. Структура и объем диссертации. Диссертация состоит из
введения, обзора литературы, материала и методов исследования,
практических предложений и списка литературы. Работа изложена
на 109 страницах машинописного текста, включает26 таблиц. Список
литературы включает 193 источника, из них 97 иностранных.
2. МАТЕРИАЛ И МЕТОДИКА ИССЛЕДОВАНИЙ
Экспериментальные исследования выполнены во Всероссийском
НИИ свиноводства. Объектом исследований служила сперма хряков
различных пород. Эксперименты по искусственному осеменению
свиней проведены в различных хозяйствах России.
В случае обычного разбавления эякулята, сперму получали;
мануальным методом и разбавляли ее 1:1 глюкозо-цитратно-трис-
глицерино-желточной средой(Кононов В.П. и др. 1991). Затем сперму
охлаждали 4-5 часов до 4°С, и замораживали на фторопластовой
пластине в виде гранул объемом 0,5 мл. После чего гранулы спермы
помещали на хранение в жидкий азот.
При диализной обработке, густую фракцию спермы, полученную
мануальным путем, помещали в среднюю емкость диализной камеры.
6
Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис»

7. Боковые емкости заполняли средой следующего состава (на 1000 мл
дистиллированной воды): лактоза - 84 г; глюкоза - 6 г; трилон - Б -
4 г; аммоний цитрат — 2 г; трис - (оксиметил)-аминометан — 0,6 г;
глицерин - 40 мл. Заполненную таким образом диализную камеру
помещали в холодильник и выдерживали при + 15°С в течение 3-4-х
часов. После чего сразу переливали в стеклянный сосуд и добавляли
к ней смесь желтка куриного яйца и изотонического раствора щгграта
натрия (1:1) в количестве 10% от объема спермы. После этого сперму
охлаждали до +4°С в течение одного часа. Замораживали сперму в
гранулах объемом 0,5 мл.
Оттаивание спермы проводили с помощью специального гидро-
оттаивающего устройства (Кононов В.П. и др., 1975)
Содержание АТФ в сперматозоидах определяли биолюминис-
центным методом с помощью портативного люминометра ЕМПЛТЕ-
100 ЗА (Россия).
Анализ активности аспарапшовой и аланиновой трансаминаз в
сперме хряков проводили по модифицированному методу Умбрайта
(Покровский А.А., 1969).
При изучении влияния стимуляции овуляции у свиней на
результативность осеменения, свиноматкам за 10-12 часов до осеме­
нения внутрнматочно вводили в 100 мл физраствора 10 мкг сурфагона
или 90 мкг анипроста, либо вводили данные препараты сочетанно (5
мкг сурфагона + 45 мкг анипроста).
Результаты осеменения свиноматок анализировали по данным
опоросов.
Биометрическую обработку полученных данных проводили по
Е.К. Меркурьевой (1964).
7
Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис»

8. ОБЩАЯ СХЕМА ИССЛЕДОВАНИЙ
Разработка биотехнических факторов, влияющих на
результативность осеменения свиней замороженной спермой
Повышение криоустойчивости
сперматозоидов хряка
Повышение результативности
осеменения свиней замороженной
спермой
Диализная обработка спермы Использование различных способов
оттаивания
Использование различных
антиоксидантов
Использование стимуляции овуляции
для повышения результативности
осеменения
Применение глюкозы различной
степени очистки
Влияние числа,
сперматозоидов в дозе
Исследование различных способов
оттаивания
Подкормка хряков витаминами С и Б
для повышения криоустойчивости •
спермы
Повышение криоустойчивости
сперматозоидов путем скармливания
препарата СГОЛ
Влияние температуры оттаянной
спермы при осеменении на его
результативность
Модернизированная технология криоконсервации спермы хряков
8
Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис»

9. 3. РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЙ
3.1. Приемы повышения устойчивости спермы
хряков к замораживанию
3.1.1. Влияние диализной обработки спермы на
ее крноустончнвость .
В связи с большим объемом эякулята ухряков возникают опреде­
ленные проблемы при разбавлении и хранении в замороженном
состоянии таких объемов семени. В этой связи было предложено
использовать криоконсервацию сперматозоидов хряков с частичным
удалением семенной плазмы (Шапиев И.Ш. и др. 1976; Кононов В.П.,
Нарижный А.Г. 1981). Однако этот метод трудоемок и оказывает
неблагоприятное влияние на результативность осеменения маток
замороженной спермой.
Позднее В.П.Кононовым с сотрудниками (1987) был предложен
метод диализной обработки спермы хряков перед замораживанием.
Целью данного разделадиссертации было изучение сравнитель­
ной эффективности замораживания спермы хряков при ее обычном
разбавлении и диализной обработке.
Результаты искусственного осеменения свиноматок спермой,
замороженной различными способами представлены в таблице 1.
: ~ Таблица 1
Влияние способа обработки спермы на результативность
осеменения свиней замороженной спермой
Метод замора­
живания
Обычное
разбавление
Диализная
обработка
Число осеме­
ненных маток
44
45
Опоросилось
число
23
29 '
%
52,3
' 64,4
Многоплодие
маток
8,3±0,3
9,2±0,5 '
9
Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис»

10. Из таблицы 1 видно, что результативность осеменения свино­
маток криоконсервированной спермой при ее диализной обработке
была выше на 12%. При этом также на 0,9 поросенка было выше и
многоплодие маток в этой группе (Р<0,05).
Полученные данные свидетельствуют о преимуществах диализ­
ного способа замораживания спермы хряков и его перспективности
для дальнейшего практического применения.
3.1.2. Анализ содержания АТФ в сперматозоидах хряков
в зависимости от метода замораживания
Содержание АТФ в сперматозоидах животных коррелирует с их
подвижностью и оплодотворяющей способностью (Ерохин А.С,
ЛехмусИ.А. 1996; Foolkes J.A. е.а., 1979; KahnW. е.а., 1982; Aalbers
J.G. е.а., 1985). •
В связи с совершенствованием методов криоконсервации спермы
хряков представляет несомненный практический интерес изучение .
динамики содержания АТФ в сперматозоидах подвлиянием глубокого
замораживания и в связи с методом криоконсервации.
Целью наших экспериментов было изучение содержания АТФ в
нативных и подвергнутых замораживанию различными способами
сперматозоидах хряков. , .
Изучение влияния различных способов разбавления спермы
хряков перед замораживанием на уровень АТФ в сперматозоидах
представлено в таблице 2.
Из таблицы 2 видно, что способ разбавления спермы перед
замораживанием оказьгеает определенное влияние на содержание
АТФ в сперматозоидах после замораживания-оттаивания и на их
подвижность. Лучшие результаты получены при разбавлении диализ­
ным способом. При этом через 2 часаэквилибрации спермы, в группе
с диализной обработкой было выявлено более высокое содержание
АТФ по сравнению с обычным разбавлением: 33,2 нмоль/108
кл.
против 29,5 нмоль/10' кл. соответственно. При этом в диализной
группе содержание АТФ в сперматозоидах через 5; 60 и 120 мин.
после оттаивания снизилось на 37%, 75% и 80% против 45%, 79% и
10
Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис»

11. - • ' Таблица 2
Влияние способа разбавления спермы перед замораживанием на
содержание АТФ в сперматозоидах (п=9)
Время
исследования
АТФ
Перед замо­
раживанием
Через 5 мин.
после
оттаивания
Через 60 мин.
после
оттаивания
Через 120
мин. после
оттаивания
Обычное разбавление спермы
подвижность
спермиев, %
76±5,0
32±1,4 *
20±0,8
15±1,0"
содержание АТФ,
нмолъ/108
кл
29,5±2,1
16,3±1,8 *
6,1±0,2"
'4,9±0,3"
Диализная обработка спермы
подвижность
спермиев, %
78±7,1
35±2,1* '
' 23±1,0"
23±0,8"
содержание АТФ,
нмоль/108
кл
33,2±2,1
20.&U.4 »
8,1±0,5 «
б,8±0,6 "
Х
-Р<0,05хх
-Р<0,01
83% при обычном разбавлении спермы.
В диализной группе также отмечено менее резкое снижение
подвижности оттаянных сперматозоидов. .. . . •
Эти данные свидетельствуют о том, что диализный метод разбав­
ления спермы хряков способствует более эффективной защите
сперматозоидов в процессе их криоконсервации.
3.1.3. Влияние антиоксидантов на криоустойчивость
спермы хряков
Ранее было установлено, что процесс глубокого замораживания
может стимулировать процессы перекисного окисления липидов в
сперме животных, результатомчего является развитие деструктивных
изменений в мембранах сперматозоидов и снижение их биологи­
ческой полноценности
В этой связи целью:наших исследований было изучение влияния
некоторых новых антиоксидантов на устойчивость спермы хряков к
глубокому замораживанию.
11
Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис»

12. В частности мы изучали криозащитное влияние холин хлорида
и синтетического жирорастворимого антиоксиданта ВНИИС-1., ,.
Мы изучали криозащитную эффективность антиоксидантов при
раздельном или совместном применении. Причем, в случае раздель­
ного применения использовали 2,5% концентрацию холин хлорида
в составе среды и 600 мг/л антиоксиданта ВНИИС-1.
При совместном использовании препаратов в замораживающую .
среду вводили 1,5% холин хлорида и 400 мг/л ВНИИС-1.Результаты
этого эксперимента представлены в таблице 3.
- Таблица 3
Влияние антиоксидантов на криоустойчивость сперматозоидов .
хряка (п=8)
Изучаемые
показатели
Подвижность
оттаяных сперма­
тозоидов, %
Абсолютный
показатель
живучести
при 37°С, усл.ед.
Число спермато­
зоидов с непов­
режденной
акросомой, %
Активность
аминотрансфе-
: раз в семенной
плазме:
ACT
АЛТ
Замораживание сперматозоидов
Без антиокси­
дантов
(контроль)
38±1,2
79±6,1
54±2,0
1
38±5
г 7±1,2. .
С холин
хлоридом
44±2,8
88±4,7
69±3,7
29±2,1х
6±0,б
С
ВНИИС-1
47±3,1
93±4,3 х :
73±2,3 х
25±2,5 х
; 5±0,4Х
С ВНИИС-1
+ холин
хлорид
49±2,8Х
101±б,4х
78±6,1х
. 23±1,4Х
4±0,6Х
*-Р<0,05;
12
Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис»

13. Таблица 4
Результативность осеменения свиней спермой замороженной с
антиоксидантами
Замораживание
спермы
Контроль (без
антиоксидонтов)
Схолин
хлоридом (2,5%)
С ВНИИС-1
(бООмг/л)
Холин хлорид
(1,5%) +
ВНИИС-1
(400 мг/л)
Осемене­
ние маток
48
50
.49
55
Опоросилась
число
26
33
34
40 "
%
54
66
69 х
72 х
Много­
плодие
9,3±0,6
9,7±0,4
9,7±0,4
9,9±0,6 *
Масса поросенка
при рождении, кг
1,35±0,04
1,39±0,03
. 1,42±0,0б
1,44±0,02
Как видно из таблицы 3, использование антиоксидантов в
оптимальной концентрации способствовало повышению подвиж­
ности сперматозоидов хряка сразу после оттаивания и увеличило
продолжительность их живучести при 37°С. Кроме того, введение
антиоксидантов в состав разбавителя, способствовало повышению
сохранности мембранных структур сперматозоидов при замора­
живании, о чем свидетельствует более низкаяутечка внутриклеточных
аминотрансфераз в инкубационную среду.
В частности в группе с холин хлоридом, утечка ACT была ниже
на 24%, а утечка АЛТ - на 14% ниже по сравнению с контролем
(Р<0,05).
Призамораживании сперматозоидов с антиоксидантом ВНИИС-
*-* 1, утечка из клеток ACT была на 35% ниже, а АЛТ - на 29% ниже по
сравнению с контролем (Р<0,05).
Совместное применение антиоксидантов оказало еще более
выраженный протективный эффект при замораживании спермы
хряков. При этом подвижность и живучесть оттаянных спермато­
зоидов была соответственно выше на 29 и 27 % по сравнению с
контролем (Р<0,05).
Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис»

14. Утечка ACT in сперматозоидов в данном случае снижалась на
40%, а АЛТ - на 43% по сравнению с контролем (Р<0,05).
Затем в производственном эксперименте мы выяснили результа­
тивность искусственного осеменения свиней спермой, замороженной
с различными антиоксидантами (табл. 4).
Как видно из данных таблицы 4, замораживание спермы,с
добавлением холин хлорида, способствовало повышению оплодо­
творяемости свиней на 12%, а многоплодия - на 0,4 поросенка по
сравнению с контрольной группой.
При использовании антиоксиданта ВНИИС-1, опоросилось на
15% больше свиней по сравнению с контролем. В этом случае также
было выше многоплодие свиноматок и крупноплодность их потом­
ства.
Совместное применение в составе синтетической среды обоих
антиоксидантов привело к более заметному повышению результа­
тивности осеменения свиней замороженной спермой.
Дальнейшие исследования в данном направлении представляют
несомненный практический интерес.
3.1.4. Эффективность замораживания спермы при
использовании медицинской и пищевой глюкозы
В связи с тем, что в настоящее время в стране снизился выпуск
медицинской глюкозы, представляет интерес изучение возможности
ее замены пищевой глюкозой в составе сред для замораживания
спермы хряков. -
Имеются данные, что пищевая глюкоза может быть успешно
использована вместо медицинской в составе сред для хранения
спермы хряков в охлажденном состоянии (ОК Савин, 1999).
В этой связи, целью наших исследований являлось изучение
возможности замены медицинской глюкозы на пищевую в составе
среды для глубокого замораживания спермы хряков. Причем, нами
выясняласьэффективность применения пищевой глюкозы при обыч­
ном и диализном разбавлении спермы.
14:
Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис»

15. Введение пищевой глюкозы в состав замораживающей среды
вместо медицинской, не оказало отрицательного влияния на подвиж­
ность сперматозоидов после оттаивания и абсолютный показатель
ихживучести при обоих методах разбавления спермы. Следовательно,
пищевая глюкоза обладаеткриозащитной эффективностью на сперма­
тозоиды хряков, сравнимой с действием медицинской глюкозы.
В последующем производственном опыте была изучена эффек­
тивность осеменения маток спермой, замороженной с двумя видами
глюкозы при обычном и диализном разбавлении эякулятов.
Результаты эксперимента показали, что при замораживании
спермы с обоими видами глюкозы, вне зависимости от способа
разбавления, были получены практически одинаковые результаты по
оплодотворяемости и многоплодию маток, а также по крупно-
плоднасти их потомства. Сохранность поросят также не отличалась
в зависимости от группы животных.
Это свидетельствует о том, что пищевая глюкоза не оказывает
отрицательного влияния на результативность осеменения свиней
замороженной спермой и она может быть использована в практике
криоконсервации спермы хряков.
3.1.5. Криоустойчивость сперматозоидов в зависимости от
содержания витаминов Е и С в рационе хряков
Имеются данные, что введение повышенных доз витамина Е в
состав рационов хряков способствует повьппению устойчивости их
сперматозоидов к глубокому замораживанию (В.ГХКононов и др.,
1978; А. Г. Нарижный, 1995).
В этой связи мы решили изучить влияние подкормки хряков
витаминами Е и С на устойчивость их спермы к глубокому замора­
живанию при диализной обработке.
Повышение уровня витамина Е в рационе хряков в 6 раз по
сравнению с контролем (600 мг), способствовало повышению его
концентрации в крови на 24%, а в сперме—на 61% по сравнению с
контролем (Р<0,05). ,
Дополнительная;подкормка хряков витамином С привела к
15
Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис»

16. повышению его концентрации в крови и сперме соответственно на
10,9 и 7,8%.
Совместное введение данныхвитаминов в соответствующей дозе
в состав рациона, повысило концентрацию витамина Е в крови на
49%, а в сперме—на 39%. Уровень витамина С повысился в крови
и сперме — на 35,4 и 69% соответственно. Следовательно, путем
специального кормления хряков возможно повысить содержание
витаминов Е и С не только в крови, но и в их сперме.
Затем нами было изучено влияние подкормки хряков данными
дозировками витаминов на сперматологические показатели хряков.
Результаты этого эксперимента показали, что дополнительная
подкормкахряков витаминами Е и С, а особенно в комплексном виде,
способствовала повышению объема эякулята, увеличивала концен­
трацию и подвижность сперматозоидов, и положительно влияла на
сохранность акросом.
Опыты по искусственному осеменению маток замороженно-
отгаянной спермой приведены в таблице 5.
Данные таблицы 5 свидетельствуют, что при подкормке хряков
витаминами Е и С, повышается оплодотворяющая способность
спермы и увеличивается многоплодие свиноматок.
Полученные нами данные свидетельствуют о перспективности
дальнейших исследований в области повьппения криоустойчивости
спермы хряков путем целенаправленной подкормки витаминами,
обладающими антиоксидантной активностью.
3.1.6. Повышение криоустойчивости сперматозоидов при
подкормке хряков препаратом СГОЛ
В последние годыдля регуляции воспроизводительной функции
у свиней применяют различные. гормональные: и биологически
активные препараты.
В частности, в настоящее время разработана-технология
получения- из молочной* сыворотки биологически: активного .
соединения — препарата СГОЛ;
16
Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис»

17. Таблица 5
Эффективность осеменения свиней криоконсервированной
спермой лри подкормке хряков витаминами
Содержание витами­
нов в суточном
рациона хряков
Контроль
Витамин Е (600 мг)
Витамин С (1500 мг)
Витамин Е (600 мг)+
Витамин С (1500 мг)
Осеме­
нено
маток
50
60
60
61
Опороси­
лось, %
52
66,6
65
68,8 *
Родилось жиз­
неспособных
поросят
232
386
373
414
Многоплодие,
гол.
8,9±0,3
. 9,6±0,2
9,5±0,4
9,8±0,3 *
Х
-Р<0,05 -
В этом препарате содержатся полисахариды, белки, пептиды,
аминокислоты, витамины и другие активные вещества.
Учитывая состав препарата, мы решили изучить влияние
подкормки хряков данным веществом на качественные показатели
эякулятов и на устойчивость сперматозоидов к глубокому замора­
живанию.
Результаты 3-х месячной подкормки хряков различными дози­
ровками СГОЛ показали, что сперма хряков, получавших препарат,
обладает более высокими биологическими показателями по срав­
нению со спермой контрольных животных.
Так у животных, получавших по 2 г препарата на 1 кг массы
тела, объем эякулята и концентрация сперматозоидов были выше
соответственно на 18 и 21 % по сравнению с контролем. При этом
живучесть сперматозоидов при 37°С также повысилась на 28%
(р<о,о5). ;
Лучшие результаты были отмечены в группе, где использовали
дозу препарата в 3 г на 1 кг живой массы хряков. Объем эякулята в
этой группе превышал контрольные показатели на 18,4%, концен­
трация: сперматозоидов была выше на 23%, а живучесть сперма­
тозоидов - на 30% (Р<0,05).
17
Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис»

18. Анализ результатов искусственного осеменения свиней спермой,
замороженной от хряков, получавших различные дозировки СГОЛ
приведен в таблице б.
Таблица 6
Влияние подкормки хряков препаратом СГОЛ на
результативность осеменения свиней замороженной спермой
Доза
препарата,
г на 1 кг
лсассы тела
Контроль
1,0
2,0
3,0
Заморо­
жено
эякулянтов
14
15
15
16
Из них с
подвижнос­
тью 30% и
более
9
11
13
14
Осеме­
нено
свиней
25
26
26
28
Опоросилось
число
14
16
17
. 19
%
56
61,5
65,3
67,8
Многопло­
дие свиней,
; голов
8,9±0,4
9,1±0,6
9,4±0,6
9,4±0,3
Наилучшие результаты по подвижности оттаянных спермато­
зоидов были получены в группах, получавших 2 и 3 г СГОЛ на 1 кг
массы хряков. По сравнению с контролем, процент оттаянных эяку-
лятов, пригодных для осеменения в этих группах, повысился на 22,3
и 23,2% соответственно.
Оплодотворяемость свиноматок 3 и 4-й группы повысилась по
сравнению с контролем на 9,3% и на 11,8% (Р>0,05). В этих группах
также имелась тенденция к повышению многоплодия свиноматок.
Таким образом, полученные в этих опытах данные показывают,
что препарат СГОЛ является перспективным соединением, улучша­
ющим показатели спермопродукции хряков и повышающим устой­
чивость сперматозоидов хряков к глубокому замораживанию; Необ­
ходимо проведение дальнейших исследований в данном направлении
с целью выяснения более точного механизма действия препарата и
его оптимальных дозировок.
18
Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис»

19. 3.3. Влияние биологических факторов на результативность
осеменения свиней криоконсервированнон спермой
3.3.1. Влияние способа осеменения свиней замороженной .
спермой на оплодотворяемость
Как известно, при осеменении свиней применяют два метода
введения спермы: не фракционный метод (Милованов В.К., 1962) и
фракционный метод (Квасницкий А.В. и др., 1961).
В случае фракционного метода в качестве заполнителя исполь­
зуют изотонические растворы Сахаров или солей.
В этой связи мы решили изучить влияние искусственного
осеменения свиней замороженно-оттаянной спермой с применением
этих двух методов введения спермы. Причем, в обоих случаях
использовали одинаковую концентрацию сперматозоидов в оттаян­
ной дозе - 3 млрд. живых клеток. Результаты опыта приведены в
таблице 7.
Таблица 7
Влияние способа осеменения свиней криоконсервированной
спермой на их оплодотворяемость
Метод
осеменения
Не-
фракционный
Фракционный
Заполнитель
1,7% р-р
сернокислого
натрия
Осеменено
свиней
38
37
Опоросилась
число
20
19
%
52
51
Много­
плодие
8,9±0,3
8,8±0,6
Результаты опоросов показали, что оба метода осеменения
свиней спермой, замороженной с диализной обработкой, дают
практически одинаковые результаты пооплодотворяемости и
многоплодию маток в случае использования дозы, содержащей 3
млрд.-подвижных сперматозоидов.
19
Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис»

20. 3.3.2. Оплодотворяемость свиней в зависимости от
концентрации сперматозоидов в дозе
С целью уточнения оптимальной концентрации сперматозоидов
в дозе оттаянной спермы хряков, нами были проведены специальные
опыты.
В первом опыте изучали влияние числа подвижных спермато­
зоидов в оттаянной сперме, замороженной с диализной обработкой,
на результативность не фракционного осеменения свиней. ,
Оттаянную сперму перед осеменением разбавляли изотони­
ческим раствором цитрата натрия для получения определенной
концентрации клеток в 100 мл раствора. Затем производили
осеменение маток.
Было установлено, что при обычном осеменении свиней
замороженно-оттаянной спермой в объеме 100 мл, практически
одинаковые результаты по оплодотворяемости и многоплодию
получены при содержании 2,5; 3,5 и 4,5 млрд. клеток.
Уменьшение числа сперматозоидов в оттаянной дозе до 1,5 млрд.
привело к достоверному снижению оплодотворяемости и много­
плодия маток.
Во втором опыте изучали влияние числа сперматозоидов в дозе
при фракционном способе осеменения свиней по Квасницкому А.В.
(1961). В качестве заполнителя спермы при этом использовали 1,7%
раствор сернокислого натрия. ...
В результатеэтого опыта было установлено, что при уменьшении
вводимой фракционным методом дозы спермы до 50 мл с содержа­
нием 2,2 млрд. сперматозоидов, были полученытакие же результаты,
как и при большем объеме и числе сперматозоидов в дозе. Снижение
объема спермы до 25 мл с содержанием 1,1 млрд. сперматозоидов,
привело к значительному снижению результативности осеменения
маток криоконсервированной спермой.
Следовательно, при использовании криоконсервированной
спермы, замороженной с диализной обработкой, для. успешного
осеменения в дозе должно быть не менее.2,2-2,5 млрд. подвижных
сперматозоидов.
20
Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис»

21. 3.3.3. Влияние температуры оттаянной спермы на
результативность осеменения
На результативность осеменения свиней криоконсервированной
спермой влияют не только условия ее замораживания и оттаивания,
но также и ряд других факторов. В частности, одним из таких факто­
ров может быть температура оттаянной спермы, при которой произво­
дится искусственное осеменение, а также продолжительность ее
инкубации после оттаивания при различныхтемпературных условиях.
В этой связи, мы решили изучить влияние различных темпера­
турных режимов, до которых оттаянная сперма подогревается перед
осеменением, на оплодотворяемость свиноматок.
Результаты этих опытов показали, что температура, до которой
подогревается сперма, оказывает некоторое влияние на результа­
тивность осеменения. В частности, при более низкой температуре
вводимой спермы (18°С), имелась тенденция к повышению оплодо-
творяемости и многоплодия свиноматок, по сравнению с более
высокими температурами.
В последующем опыте, мы решили изучить влияние продол­
жительности инкубации оттаянной спермыхряков при определенной
температуре на результативность осеменения маток.
В этом эксперименте было показано, что инкубация оттаянной
спермы втечение 10-60 мин. после оттаивания при 18°С, не приводит
к снижению оплодотворяемости и многоплодия маток.
В случае инкубации оттаянной спермы в течение 30-60 мин. при
28 и 38°С, отмечалась тенденция к снижению результативности
осеменения маток и их многоплодия. Следовательно, оптимальной
температурой оттаянной спермы, при которой производят.
осеменение свиней, следует считать 18°С. При этом оттаянную
сперму желательно использовать для осеменения втечение часа после
ее оттаивания. В случае использования более высоких температур
подогрева спермы, желательно проводить осеменение в течение 10-
20 минут после оттаивания.
21
Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис»

22. 3.3.4. Результативность осеменения свиней замороженной
спермой при стимуляции овуляции
При искусственном осеменении свиней замороженной спермой
большое значение для улучшения оплодотворяемости имеет время
введения сперматозоидов по отношению к овуляции.
Поэтому в наших исследованиях мы решили изучить влияние
синхронизации овуляции у свиноматок с помощью рилизинг-гормона
и простагландина на результативность их осеменения спермой,
замороженной с использованием диализной обработки.
Причем, в отличии от ранее проведенных экспериментов, стиму­
лирующие овуляцию вещества мы вводили внутриматочно после
выявления признаков эструса у свиней.
В первом опыте мы выясняли влияние дозировки (сурфагона и
пергонала) на число овулировавших фоликулов у свиноматок.
Анализ полученных результатов свидетельствует, что внутри-
маточное введение сурфагона и пергонала в изученных дозировках
свиноматкам в начале эструса, способствует увеличению числа
овулировавших фолликулов и повышает потенциальное многоплодие
животных. При этом, лучшее действие оказал сурфагон в дозах 10-
15 мкг на животное. '
В следующем опыте мы выясняли эффективность однократного
осеменения свинейзамороженной спермой при стимуляции овуляции
раздельным или совместным применением сурфагона и анипроста в
оптимальных дозировках (табл. 8).
Результаты таблицы 8 показывают, что стимуляция овуляции у
свиней совместным применением анипроста и сурфагона, способ­
ствовала некоторому повышению оплодотворяемости маток по
сравнению с их раздельным применением. При этом, результа-
„ тивность однократного осеменения была: практически схожей с
двухкратным осеменением свиней.
22:
Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис»

23. Таблица 8
Влияние раздельного или совместного применения
сурфагона и анипроста на результативность осеменения свиней
замороженной спермой
Группа
животных
Осеме­
нено
свиней
Опоросилась
число | %
Среднее
много­
плодие
Масса поросенка
при рождении, кг
Двухкратное осеменение
Контроль(без
препаратов) .42 26 61 9,0±0,6 1,32±0,08
Однократное осеменение
Сурфагон (10 мкг)
Анипрост (90 мкг)
Сурфагон (5 мкг) +
Анипрост (45 мкг)
44
39
•'• 4 2
25
22
25
57,7
56,8
60,4
9,1±0,3
9,1±0,5
9,2±0,6
1,35±0,О8
1,30±0,04
i,32±0,06
Таким образом, полученныеданные свидетельствуют о перспек­
тивности стимуляции овуляции у свиней при использовании криокон-
сервированной спермы с целью повышения оплодотворяемости и
снижения кратности осеменения. Дальнейшие исследования в данном
направлении имеют несомненную практическую важность. ^
3.4. Экономическая эффективность результатов исследований.
Экономическая эффективность использования криоконсер-
вированной спермы для искусственного осеменения свиней связана
с его результативностью и трудовыми затратами на осеменение
животных и криоконсервацию спермы.
Нами была проведена экономическая оценка затрат на искус­
ственное осеменение свиней спермой, замороженной с антиокси-
дантами. За счет повышения оплодотворяемости маток при исполь-
зовашш холин хлорида, антиоксиданта ВНИИС-1 или их комплекс­
ного применения, себестоимость 1-го поросенка при рождении
соответственно составляла 56,1 руб.; 53,4 руб. и 50 рублей против
23
Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис»

24. 71,4 рубля в контроле. Таким образом, при дополнительном получе­
нии 100 поросят от опытных свиноматок прибыль будет составлять
соответственно по группам 1530 руб.; 1800 руб. и 2140 рублей.
За счет оптимизации процессов оттаивания спермы с исполь­
зованием ультратермостатов с повышенной скоростью вращения
двигателя (1900; 12000 и 16000 об/мин.) и повышения резуль­
тативности осеменения при использовании 2-го и 3-го аппаратов,
дополнительная прибыль на 1-го поросенка в этих группах соответс­
твенно составила 3,5 и 7,2 рубля или в расчете на 100 поросят—350
и 720 рублей.
Использование в составе замораживающей среды для спермы
хряков пищевой глюкозы вместо медицинской, снижает себесто­
имость среды на 20%.
Биотехнические приемы стимуляции овуляции у свиней позво­
ляют без ущерба для осеменения заменить двухкратное осеменение
на однократное. Экономический эффект при этом складывается не
только из 2-х кратной экономии спермопродукщш, но также и в
результате снижения трудовых затрат на проведение искусственного
осеменения маток.
Общий экономический эффект от использования криоконсер-
вированной спермы может быть также обусловлен ускорением гене­
тического прогресса в разводимых стадах свиней в связи с исполь­
зованием выдающихся в племенном отношении производителей.
4. ВЫВОДЫ
1. Диализная обработка спермы хряков перед замораживанием
способствует повышению криоустойчивости сперматозоидов и улуч­
шению их оплодотворяющей способности.
2. Замораживание спермы хряков с диализной обработкой
способствует лучшей стабилизации мембранных структур спермато­
зоидов и более медленному гидролизу АТФ в оттаянных образцах:
3. Установлено, что введение в состав замораживающей среды
для спермы хряков антноксидантов ВНИИС-1 и холин: хлорида,
Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис»

25. повышает криоустоичивость сперматозоидов и результативность
осеменения свиноматок соответственно на 15 и 12%. Комплексное
применение данных препаратов повысило оплодотворяемость свиней..
. по сравнению с контролем на 18% (Р<0,05).
4. Использование пищевой глюкозы вместо медицинской в "
составе среды для замораживания спермыхряков, не оказало отрица­
тельного влияния на оплодотворяемость и многоплодие свиноматок.
5. Показана возможность повышения устойчивости спермато-
• зондов хряков к глубокому замораживанию посредством их допол­
нительной подкормки витаминами Е н С.
. 6. Подкормка хряков биологически активным препаратом СГОЛ
оказывает положительное влияние на криоустоичивость спермато­
зоидов и результативность искусственного осеменения свиней. ,,
7.-Выяснено, что при фракционном осеменении свиней заморо- ;
женно-оттаянной спермой, в дозе должно содержаться не менее 2,2
млрд. подвижных сперматозоидов.
8. Оптимальная температура подогрева оттаянной спермы.
хряков, составляет 18°С.
9. Стимуляция овуляции у свиней с помощью сурфагона и ани-
проста позволяет проводшъ однократное осеменеш!е св1шей крио-,
консервированной спермой без снижения его результативности по
сравнению с двухкратным. >
5. ПРАКТИЧЕСКИЕ ПРЕДЛОЖЕНИЯ
1. С целью повышения крнеустойчивости сперматозоидов хряков
рекомендуем использовать диализную обработку спермы и вводить
в состав синтетической среды 400 мг/л антиоксиданта ВНИИС-1 и
15 г/л холин хлорида.
2. Рекомендуем для повышения криоустойчивости спермы хряков
ежедневную их подкормку препаратом СГОЛ в дозе 2-3 г на 1 кг
массы тела.
3. Для повышения результативности искусственного осеменения
свиней замороженно-оттаянной спермой предлагаем проводить
25
Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис»

26. синхронизацию.овуляции с помощью внутриматочного введения^.
свиньям' 5 мкг сурфагона и 45: мкг анипроста?за 10-12 часов до>
осеменения; v
•;..<• ....-•.-••.•-..
• • Список опубликованных работ, по теме диссертации
* 1. КрукН:А; Использование биологически активных.веществJ
при замораживании*спермы!хряковл// Зоотехния.- 199б>№7. с.28-т
•2.' Нарижный^ А;Г„, Крук: Н:А, Минеева - Е.А. и: др.
Совершенствование технологиизамораживания^хранения и исполь­
зования спермы хряков-улучшателей7/ Научные аспекты,профи-.
лактики и терапии болезней с.-х.' животных. Воронеж. — 1996., /
3. Нарижный A.F., Крук- Н.А', Савин О.1
и-др: Влияние разба­
вителей, содержащих гидратную и медицинскую глюкозу, на оплодо-
творяемость маток.//Свиноводство.— 1997 -№4. — с. 18-25:
4. Epoxini А.С, Нарижный АГ., Крук НА.'Результативность
диализного способа разбавления спермы хряков перед замора­
живанием. //Зоотехния.•-1997 -№8.-с. 26.-28 .
-'5. Нарижный А.Г;, Крук Н.А., Комова З.П. . и др.
Усовершенствование метода криоконсервации гамет хряка с исполь­
зованием диализа. // Бесплодие. Вспомогательные репродуктивные
технологии. Мат. — симп. Киев. 15-16 мая 1997г. -с.Л83-185.
6. Нарижный А.Г., Крук Н.А., Бурлака Г.М. и др. Влияние
повышенных доз витаминов Е и С в рационехряков на устойчивость
сперматозоидов к замораживанию. // Селекция, кормление, содер­
жание с.-х. животных и технология производства продуктов живот­
новодства Сб. тр. ВНИИплем. - 1997.- вып. 1. - с. 125-129.
7. Нарижный А.Г., Крук Н.А., Минеева Е.А. и др. Применение
препарата СГОЛ для повышения воспроизводительной функции
свиней. // Селекция, кормление, содержание сельскохозяйственных
животных и технология производства продуктов животноводства
Сб.тр. ВНИИплем. -1997-вып. 2 - е . 135-140.
26
Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис»

27. 8. Зыкунов Н.П:, Нарижный А.Г., Крук НА. и др Рекомендации
по применению сурфагона в свиноводстве. М. - 1998. 11. С.
9. Крук Н.А. Повышение криозащитных свойств среды с
применением новых антиоксидантов //Повышение эффективности:
ведения свиноводства. Сб.: докл; конф. Быково, ВНИИС. - 1999. - с.
208-209.
10. Крук Н.А, Герасимов А.В., Сидоров А; И. и др., Действие
биологически активных препаратов на воспроизводительную функ­
цию свиноматок. // Бесплодие. Вспомогательные репродуктивные
технологии 2000. Сб. науч. тр. Симпозиума. Киев. - 1999. - с. 244.
( ^
Отпечатано в ООО фирме "ФЕЛИКС
п Подольск^Шокзальная пл., 10
Тел.: (27)63-27-91
Тираж 100 экз.
г .27
Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис»

28. Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис»