2. Pendahuluan
• Katalisator atau senyawa yang
Enzim mempercepat proses reaksi
tanpa habis bereaksi.
• Molekul yang menurunkan
Inhibitor aktivitas enzim
• Senyawa yang meningkatkan
Aktivator aktivitas enzim.
3. Pembahasan
Amilase
Tipe reaksi memutuskan ikatan kimia Dihasilkan oleh kelenjar ludah di
dengan penambahan air mulut dan kelenjar pankreas
Sumber Amilase
Amilase yang dihasilkan di pankreas biasa Untuk menghidrolisis serat, glikogen dan karbohidrat
disebut amilase pankreas kecuali selulosa
Dibedakan menjadi tiga
alfa-amilase, beta-amilase dan glukoamilase
4. • Salah satu enzim yang berperan dalam
α- amilase proses degradasi pati, sejenis makromolekul
karbohidrat
• Enzim golongan hidrolase kelas 14 yang
β-amilase digunakan dalam proses sakarifikasi pati
(sejenis karbohidrat).
• Salah satu enzim kelas 15 yang
Glukoamilase berperan dalam proses sakarifikasi pati
(sejenis karbohidrat).
Amilase
5. Tempat Kerja dan Cara Kerja
Amilase
α-amilase β-amilase Glukoamilosa
• Memotong ikatan • Memotong ikatan
• Aktif bekerja pada
glikosidik pada alfa-1,4 pada
kisaran suhu 25 C
gugus molekul pati.
– 95 C.
amilosa, amilopektin, • Hasil utama
• Penambahan ion
dan glikogen. pemecahan adalah
Ca dan Cl aktivitas
glukosa
kerja dan menjaga
kestabilan enzim
ini.
6. Masalah Klinis
Peningkatan Penurunan
Pankreatitis akut, obstruksi
duktus Kerusakan hati
pankreas, penggunaan atau pankreatitis
alkohol, gondok, penyakit serta fibrosis kistik.
ginjal dan tukak lambung
7. γ -glutamyltransferase
• Enzim yang mengkatalisis pemindahan gugus γ -glutamil dari
suatu peptida yang mengandung gugus tersebut, misalnya
Definisi glutation, ke peptida lain atau ke asam amino.
• Di hati dan ginjal, sementara dalam jumlah yang rendah
ditemukan dalam limpa, kelenjar prostat dan otot jantung.
Tempat
8. γ-glutamyltransferase
Peninggian aktivitas GGT dalam serum akan
mempunyai nilai diagnostik yang lebih besar
bila dihubungkan dengan aktivitas enzim-
enzim lainnya. Misalnya pada karsinoma
pankreas aktivitas GGT meningkat tanpa
peninggian enzim-enzim transaminase (GOT
dan GPT). Bila transaminase juga
meninggi, yang harus dipikirkan adalah
adanya penyakit hati yang akut
9. Pemeriksaan laboratorium
Pemeriksaan Amilase
Salah satu pemeriksaan untuk menunjang
diagnosis penyakit yang berhubungan
dengan kerusakan endokrin, pankreas
Metode
Kinetik
(Para-Nitro Phenyl Glucose 7/PNPG7)
10. Pemeriksaan Laboratorium
Amilase
• Prinsip :
Dalam suasana netral, alfa amilase mengkatalisis reaksi hidrolisis
PNPG7 menjadi PNPGn dan glukosa primer. PNPGn yang
terbentuk dihidrolisis dengan bantuan enzim glukoamilase
menghasilkan PNPG1 dan glukosa polimer. PNPG1 yang terbentuk
dikatalisis oleh glukosidase menghasilkan p-nitrofenol dan glukosa.
Aktivitas katalitik amilase sebanding dengan terbentuknya p-
nitrofenol yang dapat ditentukan secara kinetik pada panjang
gelombang 405 nm, pada fotometer clinicon 4010 atau microlab
300.
12. Alat & bahan
Alat : Bahan :
Sampel (serum)
Fotometer 4010, Microlab 300. Pereaksi, terdiri dari :
Clinipette 20 μL dan 1000 μL PNPG7 1,2 mmol/L
Glucosidase 25.000 IU/L
Cuvette Glucoamilase 10.000 IU/L
Tabung Khan NaCl 50 mmol/L
CaCl2 1 mmol/L
Tip (kuning dan biru) Hepes Buffer 50 mmol/L
Tissue pH 7,2
13. Cara Kerja
1.Pipet ke dalam tabung sebanyak 20 μL serum
2.Tambahkan 1000 μL larutan pereaksi
3.Campur sampai homogeny
4.Inkubasi selama satu menit
5.Baca pada fotometer clinicon 4010 atau microlab
300, dengan program kinetik (K20 atau K60) pada
panjang gelombang 405 nm.
15. Metode Pemeriksaan GGT
Penunjang diagnosis penyakit hati alkoholik atau
penyakit hati toksis karena zat kimia dan obat
• Kinetik
Metode
• Gamma glutamil p-nitroanilida/GPNA
• Dalam suasana basa GGT mengkatalis
reaksi L-Gamma Glutamil p-Niroanilida
Prinsip dengan glisilglisin menjadi L-Gamma
glutamil glisilglisin dan p-nitroanilida.
16. Alat dan bahan
• Fotometer 4010, • Sampel (serum)
Spektrofotometer • Pereaksi GGT, terdiri dari :
• Clinipette 50 μL dan 1000 μL
• Reagen 1 (buffer)
• Cuvette
Glisilglisin 62 mmol/L
• Tabung Khan
TRIS buffer pH 8,1 95 mmol/L
• Tip (kuning dan biru)
• Reagen 2 (substrat)
• Tissue
L-G-Glutamil p-Nitroanilida2,0
mmol/L
18. Kesimpulan
Peningkatan kadar amilase dalam serum dapat
mengindikasikan gangguan yang terjadi pada
pankreas, endokrin, dan jaringan spesifik
lainnya.
Pemeriksaan kadar amilase dapat di lakukan
dengan metode kinetik (PNPG7) dengan
menggunakan fotometer pada panjang
gelombang 405 nm.
Pemeriksaan GGT dapat
dilakukan dengan metode
kinetik (GPNA) dengan
menggunakan fotometer
atau spektrofotometer pada
panjang gelombang 405 nm.
