Đề tài: Hoạt tính kháng khuẩn từ dịch chiết của củ cải trắng, HAY

TRƯỜNG ĐẠI HỌC BÀ RỊA - VŨNG TÀU
VIỆN KỸ THUẬT - KINH TẾ BIỂN
BARIA VU N G TA U
UNIVERSITY
CAP Sa in t ia c q u es
ĐỒ ÁN TỐT NGHIỆP
KHẢO SÁT HOẠT TÍNH KHÁNG KHUẨN
TỪ DỊCH CHIẾT CỦ CẢI TRẮNG
(Raphanus sativus L.)
Giáo viên hướng dẫn
Sinh viên thực hiện
Lớp
Ngành
: Th.s Phạm Thị Kim Ngọc
: Bùi Thị Hồng Loan
: DH13TP
: Công Nghệ Thực Phẩm
Vũng Tàu, 06/2017

Trình Độ Đào Tạo : Đại Học
Hệ Đào Tạo: Đại học chính quy
1. Tên đề tài: Khảo sát hoạt tính kháng khuẩn từ dịch chiết của củ cải trắng
(Raphanus sativus L.)
2. Ngày giao nhiệm vụ: 06/02/2016
3. Ngày hoàn thành nhiệm vụ: 10/06/2017
4. Họ và tên người hướng dẫn: Th.S Phạm Thị Kim Ngọc
VIỆN KỸ THUẬT - KINH TẾ BIỂN Độc lập - Tự do - Hạnh phúc
PHIẾU GIAO ĐỀ TÀI ĐỒ ÁN TỐT NGHIỆP
Họ và Tên: Bùi Thị Hồng Loan
Ngành: Công nghệ Thực phẩm
MSSV: 13030375
Lớp: DH13TP
GIẢNG VIÊN HƯỚNG DẪN
(Ký và ghi rõ họ tên)
Bà Rịa-Vũng Tàu, ngày 26 tháng 6 năm 2017
SINH VIÊN THỰC HIỆN
TRƯỞNG BỘ MÔN
TRƯỞNG KHOA

Tôi cam đoan rằng tất cả những kết quả nghiên cứu được nêu trong đồ án này là
do tôi thực hiện, các ý tưởng tham khảo và những kết quả trích dẫn từ các công trình
khác đều được nêu rõ trong đồ án.
Vũng Tàu, năm 2017
Sinh viên thực hiện

Trong suốt thời gian từ khi bắt đầu học tập ở giảng đường đại học cho đến nay,
em đã nhận được rất nhiều sự quan tâm, giúp đỡ của quý thầy cô Trường Đại học Bà
Rịa Vũng Tàu, gia đình và bạn bè.
Em xin gửi lời cảm ơn đến quý thầy cô Trường Đại học Bà Rịa Vũng Tàu, quý
thầy cô trong ngành Công nghệ Thực phẩm - những người đã trực tiếp giảng dạy,
truyền đạt những kiến thức bổ ích cho em, đó chính là những nền tảng cơ bản, là
những hành trang vô cùng quý giá để em có thể bước vào sự nghiệp trong tương lai.
Đặc biệt, em xin gửi lời cảm ơn chân thành đến cô Phạm Thị Kim Ngọc. Cảm ơn cô đã
tận tình quan tâm, giúp đỡ em trong suốt thời gian thực hiện đồ án, đã giải đáp những
thắc mắc trong quá trình nghiên cứu.
Trong quá trình thực hiện đồ án này vì kiến thức thực tế em còn hạn chế và thời
gian thực hiện không nhiều nên sẽ không tránh khỏi sai sót. Kính mong nhận được sự
đóng góp ý kiến và nhận xét của quý thầy cô, các bạn để em có thể rút kinh nghiệm và
hoàn thiện hơn.
Em xin chân thành cảm ơn!

LỜI CAM ĐOAN.............................................................................................................
LỜI CẢM ƠN...................................................................................................................
MỤC LỤC.......................................................................................................................I
DANH MỤC TỪ VIẾT TẮT........................................................................................iii
DANH MỤC BẢNG..................................................................................................... iv
DANH MỤC HÌNH....................................................................................................... v
BẢNG PHỤ LỤC..........................................................................................................vi
ĐẶT VẤN ĐỀ.................................................................................................................1
CHƯƠNG 1: TỔNG QUAN TÀI LIỆU........................................................................ 2
1.1. Tổng quan về củ cải trắng...................................................................................... 2
1.1.1. Đặc điểm của cây và củ cải trắng.....................................................................2
1.1.2. Thành phần hóa học của củ cải trắng...............................................................3
1.1.2.1. Thành phần hóa học cơ bản.......................................................................3
1.1.2.2. Các hợp chất thứ cấp trong củ cải trắng....................................................5
1.2.2.3. Tác dụng sinh học của củ cải trắng...........................................................6
1.2. Giới thiệu chung về khuẩn....................................................................................... 8
1.2.1. Bacillus cereus.................................................................................................. 8
1.2.2. Pseudomonas aeruginosa................................................................................10
1.2.3. Salmonella typhi..............................................................................................11
1.2.4. Staphylococcus aureus....................................................................................13
1.3. Giới thiệu chung về nấm mốc................................................................................14
1.3.1. Nấm mốc Aspergillusflavus............................................................................14
1.3.1.1. Phân loại [47]...........................................................................................14
1.3. L2. Đặc điểm của nấm Aspergillusflavus [43]..................................... 15
1.3.1.3. Hình thức sinh sản [43]...........................................................................16
1.3.1.4. Một số bệnh lý do nấm mốc Aspergillusflavus gây ra [43]....................16
1.3.2. Nấm mốc Fusarium solani [8]........................................................................17
1.3.2.1. Phân loại...................................................................................................17
1.3.2.2. Đặc điểm của nấm Fusarium solani [41]................................................17
1.3.2.3. Hình thức sinh sản....................................................................................18

Đồ án tốt nghiệp Đại học khóa 2013-2017________________________________ ĐHBRVT
1.3.2.4. Một số bệnh lý do nấm mốc F. solani...................................................19
CHƯƠNG 2: VẬT LIỆU VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU...............................20
2.1 Phương tiện nghiên cứu..........................................................................................20
2.1.1. Thời gian và địa điểm.....................................................................................20
2.1.2. Đối tượng nghiên cứu.....................................................................................20
2.1.3. Phạm vi nghiên cứu........................................................................................20
2.1.4. Hóa chất sử dụng............................................................................................20
2.1.5. Thiết bị - Dụng cụ........................................................................................... 20
2.2.Nội dung và phương pháp nghiên cứu...................................................................21
2.2.1. Nội dung nghiên cứu...................................................................................... 21
2.2.2. Phương pháp nghiên cứu................................................................................ 21
2.2.2.1. Phương pháp định tính các thành phần trong cao chiết...........................21
2.2.2.2. Chuẩn bị giống........................................................................................ 23
2.2.2.3. Chuẩn bị pha cao củ cải ở các nồng độ khác nhau..................................24
2.2.2.4. Phương pháp xác định hoạt tính kháng...................................................24
2.2.2.5. Xử lý số liệu............................................................................................ 26
CHƯƠNG 3: KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN............................................................... 27
3.1. Kết quả định tính các nhóm chất có trong cao củ cải trắng..................................27
3.2. Kết quả kháng khuẩn và nấm mốc của cao củ cải trắng........................................30
3.3.1. Kết quả kháng khuẩn...................................................................................... 30
3.3.2. Kết quả kháng nấm mốc................................................................................. 33
3.4. Bàn luận................................................................................................................35
KẾT LUẬN.................................................................................................................. 39
TÀI LIỆU THAM KHẢO............................................................................................ 40
PHỤ LỤC..................................................................................................................... 45

DANH MỤC TỪ VIẾT TẮT
DMSO: Dimethyl sulfoxide - Hợp chất hữu cơ lưu huỳnh với công thức
(CH3)2SO
Rs-AFP1, Rs-AFP2 (Raphanus sativus antifungal peptide 1): peptide giàu
cysteine có khả năng ức chế sự phát triển của nấm.
MR: Methyl Red - Thử nghiệm Methyl Red
VP: Voges Proskauer - Thử nghiệm Voges Proskauer
MHA: Mueller Hinton Agar - Môi trường thạch Mueller Hinton
MIC: Minimal Inhibitory Concentration - Nồng độ ức chế tối thiểu
TSB: Tryptone Soy Broth - Môi trường dinh dưỡng TSB
SDA: Sabouraud Dextrose Agar Môi trường dinh dương SDA
PDA: Potato Dextrose Agar Môi trường dinh dưỡng PDA
DNA: Acid deoxyribonucleic - Phân tử mang thông tin di truyền mã hóa cho
hoạt động sinh trưởng, phát triển, chuyên hóa chức năng và sinh sản của các sinh vật
và nhiều loài virus
RNA: Acid ribonucleic
rpm: tốc độ vòng/ phút
Am: thuốc kháng sinh Amipicillin
Ge: thuốc kháng sinh Gentamycin
Te: thuốc kháng sinh Tetracycline
Ter: thuốc kháng sinh Terbinafine

Bảng 1.1 Thành phần hóa học trong 100g củ cải trắng tươi..........................................4
Bảng 3.1. Kết quả định tính các hợp chất có trong mẫu cao củ cải trắng....................27
Bảng 3.2. Đường kính vòng kháng khuẩn của cao củ cải trắng (mm).........................30
Bảng 3.3. Đường kính vòng kháng nấm của cao củ cải trắng (mm)............................34

Hình 1.1. Cây và củ cải trắng.........................................................................................2
Hình 1.2. Hoa, lá và quả của cây cải củ......................................................................... 3
Hình 1.3. Vi khuẩn B. cereus sau khi nhuộm Gram và khuẩn lạc trên môi trường thạch
TSB................................................................................................................................. 9
Hình 1.4. Vi khuẩn P. aeruginosa khi chụp bằng kính hiển vi điện tử và khuẩn lạc trên
môi trường thạch TSB...................................................................................................11
Hình 1.5. Vi khuẩn S. typhi khi chụp bằng kính hiển vi điện tử và khuẩn lạc trên môi
trường thạch TSB..........................................................................................................12
Hình 1.6. Vi khuẩn S. aureus khi chụp bằng kính hiển vi điện tử và khuẩn lạc trên môi
trường thạch TSB..........................................................................................................14
Hình 1.7. Aspergillusflavus..........................................................................................15
Hình 1.8. Fusarium solani.............................................................................................17
Hình 1.9. Loài F. solani:A-B: đại bào tử; C-D: tiểu bào tử; E-G: bào tử đính trên môi
trường (Dương Minh,2010)...........................................................................................18
Hình 2.1. Sơ đồ nghiên cứu.......................................................................................... 21
Hình 2.2. Mô tả cách đo vòng tròn kháng khuẩn (Hudzicki, 2009)............................. 25
Hình 3.1. Khả năng kháng B. cereus của cao củ cải trắng........................................... 32
Hình 3.2. Khả năng kháng P. aeruginosa của cao củ cải trắng.................................... 33
Hình 3.3. Khả năng kháng S. aureus của cao củ cải trắng........................................... 33
Hình 3.4. Khả năng kháng S. typhi của cao củ cải trắng.............................................. 33
Hình 3.5. Khả năng kháng A. flavus của cao củ cải trắng............................................ 34
Hình 3.6. Khả năng kháng F. solani của cao củ cải trắng............................................ 34
Hình 3.7. Biểu đồ thể hiện khả năng kháng khuẩn của cao củ cải trắng từ 4 chủng vi
khuẩn và nấm mốc khác nhau...................................................................................... 35

BẢNG PHỤ LỤC
Phụ lục A. Môi trường và kháng sinh......................................................................45
Phụ lục B. Kết quả nhuộm Gram của 4 chủng vi khuẩn khảosát.............................46
Phụ lục C. Đếm bào tử nấm mốc trên kính hiển v i..................................................46
Phụ lục D. Cao thành phẩm......................................................................................47
Phụ lục E. Kết quả ANOVA, LSD về sự khác biệt ở từng nồngđộ cao củ cải và số
liệu thô đường kính vòng kháng khuẩn trên Bacillus cereus....................................... 47
Phụ lục F. Phụ lục F. Kết quả ANOVA, LSD về sự khác biệt ở từng nồng độ cao củ
cải và số liệu thô đường kính vòng kháng khuẩn trên Pseudomonas aeruginosa........49
Phụ lục G. Kết quả ANOVA, LSD về sự khác biệt ở từng nồng độ cao củ cải và số
liệu thô đường kính vòng kháng khuẩn trên Staphylcoccus aureus............................. 51
Phụ lục H. Kết quả ANOVA, LSD về sự khác biệt ở từng nồng độ cao củ cải và số
liệu thô đường kính vòng kháng khuẩn trên Salmonella Typhi....................................53
Phụ lục I. Kết quả ANOVA, LSD về sự khác biệt ở từng nồng độ cao củ cải và số liệu
thô đường kính vòng kháng nấm mốc trên A. flavus....................................................55

ĐẶT VẤN ĐỀ
Củ cải trắng có tên khoa học là Raphanus sativus L., thuộc họ cải Brassicaceae,
là cây trồng hàng năm, dùng như một loại rau ăn củ ở Việt Nam và nhiều nước trên thế
giới.
Theo các tài liệu y học cổ truyền, củ cải trắng có vị ngọt hơi cay, đắng, tính bình,
không độc, có tác dụng long đờm, trừ viêm... được dùng trong chữa trị khá nhiều bệnh
đường hô hấp, ung thư, bệnh đường tiêu hóa. Ở nước ta, củ cải trắng là một loại rau củ
phổ biến, rẻ tiền, được trồng và sử dụng nhiều.
Một số nghiên cứu khoa học công bố gần đây ở nước ngoài cho thấy dịch chiết từ
củ cải trắng trồng ở 1 số nước khác nhau có khả năng khử các gốc tự do, làm giảm các
quá trình oxi hóa, vốn là nguyên nhân sâu xa gây ra nhiều loại bệnh tật ở người. Hoạt
tính kháng khuẩn của củ cải trắng cũng được đánh giá cao. Nước ép và dịch trích ly từ
củ cải trắng bằng các dung môi khác nhau (nước, methanol, etahnol, ethyl acetate, este
dầu hỏa) đã được xác định là có khả năng ức chế sự phát triển của nhiều loại vi khuẩn
và nấm mốc khác nhau. Tuy nhiên, hoạt tính của dịch chiết phụ thuộc vào giống và
đặc điểm nguồn gốc, điều kiện địa lý của vùng trồng.
Đó là lý do chúng tôi tiến hành nghiên cứu đề tài: Khảo sát hoạt tính kháng
khuẩn từ dịch chiết của củ cải trắng (Raphanus sativus L.). Trong nghiên cứu này
của chúng tôi đã tiến hành khảo sát hoạt tính kháng khuẩn từ dịch chiết thô của củ cải
trắng (Raphanus sativus L.) thu hái tại huyện Đức Trọng, tỉnh Lâm Đồng, Việt Nam.

CHƯƠNG 1: TỔNG QUAN TÀI LIỆU
1.1. Tổng quan về củ cải trắng
1.1.1. Đặc điểm của cây và củ cải trắng
Củ cải trắng (white radish) là củ của cây cải củ, có tên khoa học là Raphanus
sativus L. thuộc giới thực vật, ngành Magnoliophyta, lớp Magnoliopsida, bộ
Brassicales, họ Brassicaceae, chi Raphanus, loài sativus [22].
Củ cải trắng là tên gọi phổ biến ở Việt Nam. Ngoài ra , Raphanus sativus L.còn
có các tên gọi khác như Rettich (Đức), Daikon (Nhật), Hua piahs (Thái Lan), Lai fu
(Trung Quốc), Lobak beurem (Indonesia), Mu (Hàn Quốc), Muli (Ấn Độ) [22].
Củ cải được thuần hóa ở Châu Âu trong thời kì tiền La Mã. Những cư dân cổ đại
của Hy Lạp cho rằng các loại củ cải có giá trị nhất trong tất cả các loại cây trồng lấy
củ. Loại củ này được xem là một thực phẩm thông dụng ở Ai Cập trước khi các kim tự
tháp được xây dựng và củ cải cũng rất phổ biến ở thời Ý cổ đại. Chính Columbus và
những người đầu tiên khai hoang Châu Âu đã đem củ cải vào trồng trọt [16].
Củ cải được sử dụng như một loại thực phẩm trong bữa ăn của người Ai Cập cổ
vào khoảng 2700 - 2200 trước công nguyên, sau đó được trồng ở châu Âu vào thế kỉ
16 - 17 và châu Mỹ vào thế kỉ 20. Ở khu vực Đông Á, nhiều loại củ cải khác nhau đã
được phát hiện trồng ở Trung Quốc khoảng 2450 năm trước và ở Nhật Bản khoảng
1300 năm trước [20].
Cây củ cải là một loại cây cho củ hàng năm hoặc hai năm một lần. Loại cây này
được trồng chủ yếu để lấy củ do rễ củ chứa nhiều chất dinh dưỡng. Cây củ cải cao
khoảng 30 - 120 cm, có loại bề mặt láng nhẵn nhưng cũng có loại bề mặt sần sùi hoặc
có loại có lông cứng, mọc thẳng đứng vàcuống lá phân thành nhánh. Củ cải có nhiều
thịt, phình ra, có nhiều màu sắc như trắng, hồng, đỏ hoặc đen. Ngoài ra, hình dạng củ
cải có thể thuôn dài hoặc có dạng hình cầu [21].
Hình 1.1. Cây và củ cải trắng

Đồ án tốt nghiệp Đại học khóa 2013-2017
Lá to có dạng hình đàn lia xẻ lá, có cuống, có lớp lông tơ mỏng láng bề mặt, rìa
lá có răng cưa. Lá non thường không phân nhánh và có răng cưa [21].
Hoa của cây củ cải có màu hơi đỏ tía hay màu hồng tới gần trắng với gân hoa
màu tím dài từ 1,5- 2 cm, đường gân nhỏ dần về phía cuống lá. Bên trong hoa còn có
chỉ nhị mảnh, bao phấn hình mũi tên nằm trong vòi nhụy và đầu nhụy. Quả cải thuộc
loại quả không nẻ, có dạng hình thoi phình to ở giữa và nhọn dần về hai đầu, khi bóp
nhẹ quả cải sẽ thấy một đường nứt xuất hiện và bên trong đó là các hạt cải. Một quả
cải cho được từ 2 đến 4 hạt cải. Hạt cải có dạng hình cầu hoặc hình trứng, kích thước
hạt khoảng 2,5 - 4 mm [21].
Củ cải có thể trồng quanh năm nhưng để thu được củ cải chất lượng tốt thì
thường trồng vào mùa xuân và đầu mùa thu. Thời gian nuôi trồng của củ cải từ khoảng
50 đến 90 ngày, phụ thuộc vào từng loại khác nhau và chất lượng sản phẩm khi thu
hoạch. Để thu hoạch một loại củ cải nặng 500 g thì thời gian thu hoạch khoảng 50 đến
60 ngày vào mùa hè và khoảng 70 đến 80 ngày vào mùa đông. Củ cải phát triển tốt ở
điều kiện nhiệt độ khoảng 20 - 250C, pH đất trồng tối ưu từ 6,0 - 6,5 cũng như cần
ánh sáng và nước với liều lượng thích hợp để tăng trưởng [22].
Hình 1.2. Hoa, lá và quả của cây cải củ
1.1.2. Thành phần hóa học của củ cải trắng
1.1.2.1. Thànhphần hóa học cơ bản
Các thành phần hóa học cơ bản của 100 g củ cải trắng được nêu ở bảng 1.1.
Trong củ cải trắng, ngoài thành phần nước chiếm tỉ lệ cao thì protein chiếm tới 1,5%
khối lượng. Củ cải có chứa nhiều acid amin thiết yếu như lysine, methionine,
tryptophan, phenylalanine, threonine, valine,leucine, isoleucine, histidine,... cũng như
các acid béo như acid palmitic, acid oleic, acid linoleic, acid linolenic [40].
Củ cải trắng có hàm lượng lipid thấp. Lipid trong củ cải giúp tạo vị ngon cho củ.
Trong củ cải, glucid chiếm hàm lượng cao. Sucrose là một loại carbohydrate dự trữ

quan trọng trong thực vật, đặc biệt trong các cơ quan lưu trữ như củ, rễ và hạt. Kích
thước củ cải càng lớn thì hàm lượng sucrose và glucose càng cao. Glucid trong củ cải
trắng bao gồm đường, tinh bột, pectin và xơ. Đường trong củ cải trắng chủ yếu là
glucose, một lượng nhỏ fructose, sucrose và pentosan. Tinh bột thay đổi tùy theo
giống, chiếm từ 0,2 - 0,5%. Xơ chiếm một lượng khoảng 1,5 % gồm chủ yếu là
cellulose và hemicellulose có trong phần vỏ, mô nâng đỡ và thành tế bào của củ cải
trắng, đóng vai trò tạo cấu trúc, chống lại các va chạm cơ học. Pectin chiếm khoảng
0,3%, chủ yếu tham gia vào cấu tạo của thành tế bào, tồn tại chủ yếu dưới dạng
calcium pectate. Ngoài ra, củ cải trắng còn nổi bật với hàm lượng lipid thấp, hàm
lượng vitamin và khoáng cao. Một số khoáng vi lượng cũng được tìm thấy trong củ cải
trắng như nhôm, bari, liti, mangan, silic, titan, flo và iod với hàm lượng tổng lên đến
18 pg/100 g [28, 30, 17].
Bảng 1.1 Thành phần hóa học trong 100g củ cải trắng tươi
STT Thành phần Đơn vị Hàm lượng
1 Nước G 92,1
2 Năng lượng Kcal 21
3 Protein G 1,5
4 Lipid G 0,1
5 Glucid G 3,6
6 Chất xơ G 1,5
7 Tro g 1,2
8 Đường tổng g 2,5
9 Canxi mg 40
10 Sắt mg 1,1
11 Magie mg 15
12 Phospho mg 41
13 Kali mg 242

14 Natri mg 10
15 Đồng pg 150
16 Vitamin C mg 30
17 Vitamin B1 mg 0,06
19 Vitamin PP mg 0,5
(Nguồn: National Nutrient Databasefor Standard).
1.1.2.2. Các hợp chất thứ cấp trong củ cải trắng
Trong củ cải trắng có nhiều enzyme được tìm thấy như enzyme amylase,
invertase, ß-galactosidase, protease, cellulase, peroxidase. Enzyme invertase đóng vai
trò quan trọng trong việc thủy phân đường sucrose thành glucose và fructose ở thực
vật bậc cao, đặc biệt là ở các mô dự trữ. Sucrose là một sản phẩm ban đầu của phản
ứng quang hợp, chúng cũng được xem là cacbohydrate vận chuyển tự do trong các cơ
quan ở thực vật. Protease còn là enzyme quan trọng trong việc điều chỉnh lại sự lão
hóa ở cây [28].
Ngoài ra còn có các acid hữu cơ có lợi cho sức khỏe như acid malic, acid oxalic,
acid erythorbic có trong củ cải và acid erucic, acid linoleic, acid oleic có trong hạt củ
cải. Bên cạnh đó, trong củ cải còn có acid palmitic, acid stearic trong dịch trích ly
ether dầu hỏa từ hạt củ cải, acid glutamic trong củ cải muối chua [12].
Ở củ cải có nhiều acid phenolic như acid caffeic, acid p-coumaric, acid ferulic,
acid hydroxycinnamic, acid p-hydroxybenzoic, acid vanillic, acid salicylic, acid
gentisic, anthocyanin, pelargonidin, cyanidin. Trong củ cải trắng có các hợp chất
flavonoid như quercetin, kaempferol, myricetin, apigenin và luteolin. Ngoài ra, trong
củ cải còn có polysaccharides, proteoglycans, sắc tố, hợp chất có chứa lưu huỳnh,các
chất kháng khuẩn (saphanin và sulphoraphene), ß-carotene. Hàm lượng raphanusol A
và B trong củ cải trắng tăng khi có ánh sáng và giảm khi thiếu ánh sáng. Raphanusol A
và raphanusol B là chất ức chế sự tăng tưởng của cây trồng để cây củ cải không bị úa
vàng và hạt củ cải bị hư [12].
Ngành Công nghệ Thựcphẩm

Mùi hăng của củ cải được tìm thấy bởi hợp chất glucosinolate. Ở củ cải tồn tại 4
loại glucosinolate là glucoraphenin, dehydroerucin, glucobrassicin và glucoerucin.
Glucosinolate trong củ cải giúp tăng lượng enzyme tham gia vào việc giải độc các chất
gây ung thư. Chất này có tiềm năng được sử dụng như một chất ngăn chặn sự lão hóa
[21].
I.2.2.3. Tác dụng sinh học của củ cải trắng
Rosa M.P. Gutierrez và Rosalinda L.Perez (2004) đã nghiên cứu về thành phần
các hợp chất có mặt trong củ cải trắng gồm: alkaloid và các hợp chất có nitơ,
coumarin, enzyme, glucosinolate, các acid hữu cơ, các hợp chất phenol... Nghiên cứu
cũng đã khẳng định nước ép từ củ cải trắng có tác dụng ức chế sự sinh trưởng của vi
khuẩn G+, G" và nhiều loại nấm (E. Coli, Pseudomonas pyocyaneus, Salmonella typhi,
Bacillus subtilis, Candida albicans, Saccharomyces cerevisiae và Fusarium
culmorum...) do sự tồn tại của các peptide giàu cystein Rs-AFP1 và Rs-AFP2, các
protein RAP-1 (6,1 kDa) và RAP-2 (6,2 kDa), acid cafeic, acid ferulic, p-
hydroxybenzoic acid. Ngoài ra, cũng theo công bố này, củ cải còn có hoạt tính miễn
dịch, chống oxi hóa, chống ung thư, kháng virus,... [12].
Hirotaka Katsuzaki và cộng sự (2004) đã có nghiên cứu so sánh hoạt tính chống
oxi hóa của dịch chiết củ cải trắng bằng nước nóng và nước ở nhiệt độ bình thường.
Kết quả thực nghiệm cho thấy rằng hoạt tính chống oxi hóa của dịch chiết củ cải trắng
bằng nước nóng cao hơn dịch chiết bằng nước ở nhiệt độ bình thường. Hợp chất chống
oxi hóa được phân lập và xác định là L-tryptophan. Khi tiến hành nghiên cứu trên gan
chuột thì L-tryptophan chuyển hóa thành 5-hydroxyl tryptophan [14].
Narisa Kamkaen và cộng sự (2010) đã nghiên cứu về khả năng ức chế enzyme
tyrosinase của 16 loại rau khác nhau ở Thái Lan, bao gồm củ cải trắng. Mẫu rau được
rửa sạch, cắt nhỏ, xay nhuyễn. Quá trình trích ly được thực hiện với các dung môi
hexan, ethyl acetate, methanol và propylen glycol 50% với tỉ lệ nguyên liệu: dung môi
là 1: 4, trích ly bằng phương pháp ngâm dầm ở nhiệt độ phòng trong 12 giờ. Dịch sau
trích ly được lọc loại bỏ bã. Pha loãng 5 lần dịch sau lọc để có dung dịch mẫu phân
tích. Khả năng ức chế Tyrosinase từ nấm được xác định bằng cách cho vào ống
nghiệm 20 pl tyrosinase 1000 U/ml, 20 pl dung dịch đệm phosphate 0,1 M (pH 6,8),
100 pl dịch mẫu và 20 pl dung dịch L-DOPA 0,85 mM. Ủ ở 250C trong 10 phút rồi đo
độ hấp thu ở 475 nm. Kết quả nghiên cứu cho thấy dịch chiết hexan, ethyl acetate,

methanol và propylen glycol 50% của củ cải trắng ức chế tyrosinase từ nấm ở các mức
lần lượt là 38,43; 68,73; 53,51 và 88,50 % [23].
R. Jakmatakul và cộng sự (2009) đã so sánh khả năng ức chế tyrosinase và hoạt
tính chống oxi hóa của dịch chiết methanol và nước ép từ củ cải trắng Thái Lan lạnh
đông chậm nhằm xác định tiềm năng làm trắng da và chống lão hóa trong các ứng
dụng mỹ phẩm. Kết quả nghiên cứu công bố cho thấy nước ép từ củ cải lạnh đông
chậm có hàm lượng các hợp chất phenolic, flavonoid và acis ascorbic cao hơn trong
dịch chiết methanol, khả năng khử các gốc tự do (DPPH, superoxide, oxi đơn) và ức
chế tyrosinase của nước ép cũng cao hơn so với dịch chiết methanol. Nghiên cứu cũng
đã xác định được giá trị IC50 cho khả năng ức chế tyrosinase của dịch chiết methanol
là 9,62 mg/ml và và của nước ép là 3,09 mg/ml. Do đó, tác giả cũng đề nghị về việc
xem xét hướng nghiên cứu sử dụng R.sativus vào công nghệ mỹ phẩm dưỡng da [25].
Syed Sultan Beevi và cộng sự (2010) khảo sát thành phần các hợp chất
polyphenol, khả năng chống oxi hóa và khử gốc tự do của lá và củ cải trắng Raphanus
sativus L. Lá và củ được tách riêng, rửa sạch, sấy khô và xay thành bột mịn, bảo quản
ở -200C đến khi phân tích. Bột sau đó được trích ly với các dung môi tinh khiết
(methanol, chloroform, acetone, ethyl acetate và hexan) 3 lần, mỗi lần 24 giờ ở nhiệt
độ phòng, tỉ lệ nguyên liệu và dung môi là 1: 40 (g/ml). Dịch trích ly sau đó được gom
lại, cô giảm áp ở 400C thu cắn, cắn hòa tan lại vào methanol để dùng làm mẫu phân
tích xác định thành phần polyphenol và hoạt tính chống oxi hóa. Kết quả cho thấy
trong lá và củ cải có các chất chống oxy hóa và có khả năng khử gốc tự do. Dịch chiết
methanol và acetone của lá củ cải trắng có tổng hàm lượng polyphenol lần lượt là
86,16 và 78,77 mg/g chất khô, có thể so sánh với trà xanh và trà đen. Phân tích HPLC-
DAD cho thấy sự hiện diện của catechin, acid syringic, acid vanillic, axit ferulic, acid
sinapic, o-coumaric acid, myricetin, và quercetin trong dịch chiết tất cả các dung môi
trên cả lá và củ, hàm lượng các chất trong lá cao hơn trong củ. Dịch chiết methanol từ
lá và củ cho thấy khả năng ức chế đáng kể acid linoleic peroxy và biểu thị hoạt động
khử ion kim loại. Cụ thể, IC50khi khử gốc tự do DPPH lần lượt là 31 và 42 mg/ml, khi
khử superoxide là 23 và 52 mg/ml cho, khi khử hydrogen peroxide là 67 và 197
mg/ml, khi khử gốc NO'. 56 và 62 pg/ml, tương ứng [34].
S. Shukla và cộng sự (2011) đã khảo sát khả năng kháng khuẩn của nước ép từ củ
cải trắng Ân Độ. Củ cải tươi, rửa sạch, ép lấy nước, lọc loại bã và cô giảm áp ở 35 ±

50C để thu cao. Cao này sau đó hòa tan lại vào nước ở các nồng độ xác định dùng khảo
sát hoạt tính kháng khuẩn. Các chủng vi sinh được khảo sát gồm S. aureus, E. coli, P.
aeruginosa, Klebsiella pneumoniae, Enterococcus faecalis. Mẫu đối chứng là kháng
sinh ampicillin. Kết quả cho thấy nước ép từ củ cải trắng Ân Độ có khả năng ức chế sự
phát triển của cả 5 chủng vi sinh khảo sát, giá trị MIC xác định được dao động trong
khoảng 0,078 - 0,625 mg/ml, trong đó hiệu quả tác động lên 2 chủng E. coli và
Enterococcus faecalis là tương đương với ampicillin, và cao hơn ampicillin khi tác
động lên Klebsiella pneumoniae (MIC là 0,078 mg/ml so với 0,312 mg/ml của
ampicillin) [31].
K. Agarwal, R. Varma (2014) đã nghiên cứu về thành phần sinh hóa và khả năng
khử gốc tự do DPPH của củ cải trắng. Kết quả công bố cho thấy dịch chiết trong nước
nóng của củ cải trắng có khả năng khử gốc tự do DPPH ở mức 58,38% với nồng độ
200 ^g/ml, giá trị IC50là 166,79 ^g/ml. Kết quả phân tích cho thấy trong dịch chiết có
sự tồn tại của alkaloid, flavonoid, glycoside, tannin, triterpenoid và steroid [19].
H. Caglar Kaymak và cộng sự (2015) đã so sánh hoạt tính kháng khuẩn in vitro
của củ cải trắng và củ cải đen ở Thổ Nhĩ Kì. Hai loại củ cải trắng và đen được trồng và
chăm sóc như nhau, thu hoạch sau 80 ngày gieo hạt được rửa sạch, cắt nhỏ, sấy khô,
xay thành bột. Bột củ cải sau đó trích ly bằng phương pháp Soxhlet bằng dung môi
methanol trong 72 giờ, nhiệt độ không vượt quá nhiệt độ sôi của dung môi. Dịch chiết
sau đó đem lọc qua giấy Whatman No.1 rồi cô giảm áp thu cao. Cao này dùng khảo sát
hoạt tính kháng khuẩn. Hơn 100 giống vi sinh vật thuộc 52 loài khác nhau đã được
dùng nghiên cứu. Kết quả cho thấy dịch chiết methanol của củ cải trắng và củ cải đen
có khả năng hạn chế sự phát triển của Arthrobacter atrocyaneus, Corynebacterium
ammoniagenes, Enterobacter hormaechei, Kocuria rosea, Neisseria subflava, Pantoea
agglomerans, Proteus vulgaris, Psychrobacter immobilis và Shigella dysenteriae.
Ngoài ra, dịch chiết methanol của củ cải trắng còn tác động lên Bacillus sphaericus và
Corynebacteriumflavescen. Nhìn chung, củ cải trắng có phạm vi kháng khuẩn rộng và
mạnh hơn củ cải đen [13].
1.2. Giới thiệu chung về khuẩn
1.2.1. Bacillus cereus
Bacillus cereus (B. cereus) thuộc:
- Giới: Bacteria,

- Ngành: Firmicutes,
- Lớp: Bacilli,
- Bộ: Bacillales,
- Họ: Bacillaceae,
- Chi: Bacillus,
- Loài: cereus,
- Tên khoa học là Bacillus cereus.
B. cereus là trực khuẩn Gram dương, sinh bào tử, kỵ khí tùy ý, tăng trưởng được
trong khoảng nhiệt độ từ 5 - 500C, tối ưu ở 35 - 400C, pH dao động từ 4,5 - 9,3, dễ tạo
bào tử và bào tử nảy mầm rất dễ dàng. Vi khuẩn này hiện diện trong đất, bụi, các loại
thực phẩm (sữa, thịt, rau quả, hỗn hợp gia vị, sản phẩm khô, .. ,)[44].
Nồng độ muối tối đa cho sự sinh trưởng của B. cereus là 7,5% (Rajkowski và
Bennett, 2003). Khi có oxy, B. cereus phát triển tối ưu nhưng chúng cũng có thể sống
ở điều kiện kỵ khí. Các tế bào B. cereus được nuôi cấy trong điều kiện hiếu khí ít chịu
được nhiệt và acid hơn các tế bào B. cereus nuôi cấy trong điều kiện kỵ khí hoặc nửa
kỵ khí (Mols và cộng sự, 2009). Bào tử của B. cereus có khả năng chịu nhiệt khô hơn
nhiệt ẩm và thường chịu nhiệt lâu hơn trong các thực phẩm có chứa hoạt độ nước thấp
(Jenson và Moir, 2003).
B. cereus cho phản ứng dương tính với oxidase, catalase, lecithinase. Chúng lên
men glucose sinh acid trong điều kiện kỵ khí, khử nitrate tạo thành nitrite, dương tính
với thử nghiệm VP (Voges Proskauer), thủy phân được L-tyrosine, tăng trưởng được
trong 0,001% lysozyme. B. cereus không lên men được mannitol cũng như arabinose
[44].
Hình 1.3. Vi khuẩn B. cereus sau khi nhuộm Gram và khuẩn lạc trên môi trường thạch
TSB.

Vi khuẩn có thể tiết ra hai loại độc tố chính là diarrhoeal toxin gây tiêu chảy và
emetic toxin gây nôn mửa. Ngộ độc thực phẩm gây ra bởi B. cereus khi thực phẩm
được chuẩn bị mà không được giữ trong điều kiện lạnh trong vài giờ trước khi sử
dụng. Thực phẩm chứa vi khuẩn ở mật độ trên 106CFU/g đủ gây ngộ độc. Triệu chứng
ngộ độc phổ biến gây ra bởi B. cereus là đau bụng, tiêu chảy, không sốt, bắt đầu 4 - 16
giờ sau khi ăn thực phẩm bị nhiễm và kéo dài trong 12 - 24 giờ. Một dạng triệu chứng
ngộ độc khác là buồn nôn và nôn sau 1- 5 giờ ăn phải thực phẩm nhiễm khuẩn, không
bị tiêu chảy, kéo dài khoảng 24 giờ [44].
1.2.2. Pseudomonas aeruginosa
Pseudomonas aeruginosa (P. aeruginosa) thuộc:
- Giới: Bacteria,
- Ngành: Proteobacteria,
- Lớp: GammaProteobacteria,
- Bộ: Pseudomonadales,
- Họ: Pseudomonadaceae,
- Chi: Pseudomonas,
- Loài: aeruginosa,
- Tên khoa học là Pseudomonas aeruginosa.
P. aeruginosa là trực khuẩn hiếu khí Gram âm, tồn tại ở dạng đơn, bắt cặp hoặc
tạo chuỗi ngắn, có khả năng di động với một tiêm mao đơn cực. P. aeruginosa là vi
khuẩn hiếu khí bắt buộc nhưng chúng có thể phát triển trong môi trường kỵ khí nếu có
NO3- làm chất nhận điện tử, phát triển tối ưu ở 370C [44].
P. aeruginosa cho phản ứng dương tính với catalase, citrate, oxidase, urease
nhưng lại cho kết quả âm tính với các thử nghiệm MR (Methyl Red), VP (Voges
Proskauer) và indole. Ngoài ra, P. aeruginosa có khả năng khử nitrate thành nitrite,
hóa lỏng dung dịch có chứa gelatin. Chúng có khả năng thủy phân casein và tạo
enzyme lipase nhưng lại không thủy phân được tinh bột. P. aeruginosa cũng không có
khả năng lên men glucose và lactose để tạo acid [24].

Hình 1.4. Vi khuẩn P. aeruginosa khi chụp bằng kính hiển vi điện tử và khuẩn lạc trên
môi trường thạch TSB
Loài này hiện diện phổ biến trong đất, nước, bề mặt cơ thể động thực vật, là loài
vi khuẩn gây bệnh cơ hội trên người. Sự nhiễm bệnh bắt đầu từ khi có những biến đổi
làm suy yếu hệ bảo vệ của tế bào chủ. P. aeruginosa có thể gây nhiều bệnh khác nhau
ở người: gây viêm màng trong tim ở những người có van tim giả; gây viêm đường hô
hấp ở những người có đường hô hấp hoặc hệ thống tự bảo vệ bị suy yếu; gây viêm
phổi ở những bệnh nhân có bệnh mãn tính về phổi và bị chứng sung huyết tim; gây
nhiễm trùng đường máu, đường tiết niệu ở những bệnh nhân suy giảm hệ thống miễn
dịch như AIDS, giảm bạch cầu trung tính, tiểu đường, bỏng nặng; gây viêm màng não
mủ và áp xe não; gây viêm tai; gây bệnh hóa sừng ở mắt ở những người có hệ thống
bảo vệ suy yếu; gây viêm tủy xương; gây nhiễm trùng da, mô mềm; ... P. aeruginosa
là vi khuẩn kháng thuốc phổ biến, do đó là một loài gây bệnh nguy hiểm, chỉ có một số
ít các kháng sinh có tác dụng đối với giống Pseudomonas là fluoroquinolone,
gentamycin và imipenem [44].
1.2.3. Salmonella typhi
Salmonella typhi (S. typhi) thuộc:
- Giới: Bacteria,
- Ngành: Proteobacteria,
- Lớp: Gammaproteobacteria,
- Bộ: Enterobacteriales,
- Họ Enterobacteriaceae,
- Chi: Salmonella,

- Loài: enterica,
-Tên khoa học là Salmonella enterica serovar typhi.
S. typhi là loài vi khuẩn Gram âm, hình que ngắn, di động nhờ tiên mao, hiếu khí
hoặc kỵ khí tùy ý, không tạo bào tử. Vi khuẩn này sinh trưởng tốt nhất tại nhiệt độ
370C, là nhiệt độ cơ thể người, là nguyên nhân gây bệnh sốt thương hàn. S. typhi phát
triển tối ưu trong môi trường có pH trung tính nhưng khoảng pH phát triển của chúng
lại rất rộng (pH = 4 - 9). Khi pH thấp, oxy có tác dụng rất tốt đến sự phát triển của
chúng. S. typhi không có khả năng phát triển ở nồng độ muối cao [39, 41, 44].
S. typhi có khả năng lên men glucose và mannitol sinh acid nhưng không lên men
saccharose và lactose, không sinh indole, không phân giải ure, không có khả năng tách
nhóm amine từ tryptophan, hầu hết các chủng đều sinh H2S [44].
Hình 1.5. Vi khuẩn S. typhi khi chụp bằng kính hiển vi điện tử và khuẩn lạc trên môi
trường thạch TSB
S. typhi gây ra sốt thương hàn. Vi khuẩn này theo thực phẩm vào đường tiêu hóa,
vào niêm mạc ruột đến hạch lympho và sinh sản, phát triển tại đây. Thời gian này là
thời gian ủ bệnh [41].
Sau khi phát triển với số lượng lớn, một số tự phân giải. Kết quả là các độc tố
được giải phóng và gây độc. Một số khác sẽ theo hệ lympho vào máu và gây nhiễm
khuẩn máu. Từ máu Salmonella đi đến khắp cơ thể gây ra những áp xe khu trú, thường
thấy nhất ở bọng đái, ống tiêu hóa [41].
Sau 10 - 14 ngày ủ bệnh, nhiệt độ cơ thể tăng và người cảm thấy lạnh. Nhiệt độ
tăng dần và giữ khoảng 39 - 400C trong hai tuần đầu. Cơ thể bệnh nhân suy nhược
nhanh chóng, ăn không ngon, mệt mỏi, gan và lá lách to dần, xuất huyết ngoài da,

lượng bạch cầu giảm. Sau ba tuần, bệnh giảm dần. Sau hai tuần giảm bệnh, có 5 - 10%
trường hợp có thể tái phát [41].
1.2.4. Staphylococcus aureus
Staphylococcus aureus (S. aureus) thuộc:
- Giới: Eubacteria,
- Ngành: Firmicutes,
- Lớp: Bacilli,
- Bộ: Bacillales,
- Họ: Staphylococcaceae,
- Chi: Staphylococcus,
- Loài: aureus,
- Tên khoa học là Staphylococcus aureus.
S. aureus là loài vi khuẩn Gram dương, dạng hình cầu, là loại yếm khí tùy tiện.
Khi quan sát dưới kính hiển vi S. aureus trông giống như chùm nho. S.aureus có khả
năng phân hủy máu trên môi trường thạch. S. aureus không hình thành chuỗi dài,
không di động, không sinh bào tử [39].
Trên môi trường thông thường, S. aureus có thể sinh trưởng trong dải nhiệt độ 10
- 420C, pH 7,4 - 7,6. Vi khuẩn này hoạt động tốt nhất trong môi trường giàu oxy. S.
aureus có thể sinh trưởng trên nhiều môi trường thông thường, giàu dinh dưỡng, sữa,
gelatin hay thạch. Khi S. aureus sinh trưởng trên môi trường nuôi cấy có thạch tạo
thành các khuẩn lạc có đường kính 2 - 4 mm sau 24 giờ. Khuẩn lạc thường có hình
tròn, lồi, nhẵn trơn, mờ đục, bề mặt sáng. S. aureus khi sinh trưởng trên môi trường
thạch đặc trưng tạo thành các khuẩn lạc màu vàng nên được gọi là tụ cầu vàng [39].
S. aureus có phản ứng dương tính với enzyme catalase, có khả năng chuyển H2O2
thành nước và oxy. Đặc điểm này làm cho catalase trở thành phép thử hữu hiệu giúp
phân biệt các chủng Staphylococcus với Enterococcus. Một số lượng nhỏ các chủng S.
aureus có thể phân biệt với phần lớn Staphylococcus khác bằng cách thử phản ứng
phát hiện coagulase. S.aureus thường phản ứng dương tính (do tạo ra coagulase), gây
đông tụ, trong khi một số chủng lại có phản ứng âm tính [44].

Hình 1.6. Vi khuẩn S. aureus khi chụp bằng kính hiển vi điện tử và khuẩn lạc trên môi
trường thạch TSB
S. aureus có phản ứng với ADNase (tạo vùng sáng trong trên môi trường dinh
dưỡng thạch), lipid (màu vàng và mùi ôi), phosphatease dương tính (có màu hồng), có
khả năng lên men và sinh acid từ mannitol, trehalose, sucrose. Tất cả các dòng S.
aureus đều mẫn cảm với novobiocine, có khả năng tăng trưởng trong môi trường chứa
đến 15% NaCl [39, 44].
Trong tự nhiên S. aureus thường được tìm thấy trên da, mũi, tóc hay lông của các
loài động vật máu nóng. S. aureus sản sinh một số loại độc tố đường ruột enterotoxin
bền nhiệt, không bị phân hủy ở 1000C trong 30 phút. Khi ăn phải thực phẩm có chứa
các độc tố này, sau 4 - 6 giờ người bị ngộ độc có các triệu chứng tiêu chảy, nôn mửa
kéo dài từ 6 - 8 giờ. Các loại thực phẩm có chứa nhiều muối như jambon, kem tổng
hợp, nước súp (ít khi được xử lý ở nhiệt độ cao hơn 400C) và các loại thủy sản, thực
phẩm đóng hộp thường hay nhiễm loài vi sinh vật này. Con đường lây nhiễm chủ yếu
thông qua tiếp xúc từ nhà bếp, quá trình chế biến. Khoảng 20% dân số thường xuyên
mang theo S. aureus [39, 44].
.3. Giới thiệu chung vê nam mốc
1.3.1. Nấm mốc Aspergillusflavus
1.3.1.1. Phân loại [47]
Aspergillusflavus là một loại nấm thường có mặt trong môi trường và có thể gây
bệnh trên các loại ngũ cốc tích trữ trong thời gian dài. Chúng cũng có thể là tác nhân
gây bệnh cho người, liên quan đến bệnh aspergillosis của phổi và đôi khi gây bệnh trên
kết mạc, nấm tai, nhiễm trùng mũi hầu. Nhiều dòng nấm sinh ra một lượng lớn độc
tố aflatoxin, một trong những chất gây ung thư và gây độc cấp tính.

Hình 1.7. Aspergillusflavus
Giới: Fungi
Ngành: Ascomycota
Lớp: Eurotiomycetes
Bộ: Eurotiales
Họ: Trichocomaceae
Chi: Aspergillus
Loài: A. flavus
1.3.1.2. Đặc điểm của nấm Aspergillusflavus [43]
Sợi nấm thường là một ống hình trụ dài, có kích thước lớn nhỏ khác nhau tùy
loài. Đường kính của sợi nấm thường từ 3-5 pm, có khi đến 10 pm, thậm chí đến 1
mm. Chiều dài sợi nấm có thể tới vài chục cm. Các sợi nấm phát triển chiều dài theo
kiểu tăng trưởng ở ngọn. Các sợi nấm có thể phân nhánh và các nhánh có thể lại phân
nhánh liên tiếp tạo thành hệ sợi nấm xù xì như bông. Trên môi trường đặc biệt và trên
một số hợp chất trong tự nhiên, bào tử nấm, tế bào nấm hoặc một đoạn sợi nấm có thể
phát triển thành một hệ sợi nấm có hình dạng nhất định gọi là khuẩn lạc nấm.
Giống như các loài Aspergillus, A. flavus có một trên toàn thế giới. Điều này có
lẽ kết quả từ việc sản xuất của nhiều bào tử trong không khí, dễ dàng phân tán bởi các
chuyển động không khí và có thể do côn trùng. Thành phần không khí có ảnh hưởng
đến sự phát triển của nấm mốc. A. flavus phát triển tốt với hoạt độ nước từ 0,86 và
0,96.
Nhiệt độ thích hợp là 30-380C, tối đa là 44-470C, độ ẩm tương ứng để bảo từ nảy
mầm là 80%, độ ẩm thích hợp sinh sản vô tính là 86%.

1.3.1.3. Hình thức sinh sản [43]
Nấm mốc sinh sản dưới hình thức: vô tính
Trong sinh sản vô tính: nấm hình thành bào tử mà không qua việc giảm phân, trái
lại trong sinh sản hữu tính nấm hình thành 2 loại giao tử đực và cái. Nấm sinh sản vô
tính thể hiện qua 2 dạng là sinh sản dinh dưỡng bằng đoạn sợi nấm phát triển dài ra
hoặc phân nhánh và sinh sản bằng các loại bào tử. Bào tử đính (conidium) là các bào
tử không có túi bao bọc ở giống nấm Aspergillus, Pénicillium, ... Hình dạng, kích
thước, màu sắc và cách sắp xếp của bào tử đính thay đổi từ giống này sang giống khác
và được dùng làm tiêu chuẩn để phân loại nấm; cuống bào tử đính dạng bình có thể
không phân nhánh như ởAspergillus hay dạng thẻ phân nhánh như ở Pénicillium. Bào
tử đính hình thành từ những cụm trên những cuống bào tử đính ở Trichoderma;
1.3.1.4. Một số bệnh lý do nấm mốc Aspergillusflavus gây ra [43]
Aspergillus flavus cũng có thể là tác nhân gây bệnh cho thực vật và động vật,
trong đó có con người và vật nuôi. Nấm có thể nhiễm trên bắp, đậu phụng, cotton và
cây đậu. Nấm thường thấy dưới dạng các mảng nấm và có thể nhìn thấy được. Các
bệnh nhân nhiễm nấm A. flavus thường là suy giảm miễn dịch.
A. flavus là tác nhân đứng hàng thứ hai hay gặp nhiều nhất của nhóm nấm gây
bệnh aspergillosis, tác nhân đầu tiên là nấm Aspergillus Fumigatus. A. flavus có thể
xâm nhập vào các động mạch phổ hoặc não và gây tình trạng nhồi máu. Ngoài ra nó
còn sinh ra độc tố (aflatoxin) là một trong những tác nhân gây ung thư
(HCC_hepatocellular carcinoma). Sự phá hủy của nấm A. flavus đặc biệt thường hay
sinh aflatoxin, có thể gây viêm gan cấp, ung thư gan và gây suy giảm miễn dịch. Đồng
thời qua một số nghiên cứu tại các quốc gia cho thấy tỷ lệ ung thư gan có viêm gan
siêu vi đi kèm thì thường tỷ lệ nhiễm nấm cùng lúc cũng rất cao. Trong tự nhiên, A.
flavus có khả năng phát triển trên nhiều nguồn dinh dưỡng khác nhau. Đặc biệt chúng
sống trên các thực vật hoại sinh như mô thực vật và động vật bị chết trong đất. Vì lý
do này nên nó có thể tái sinh dinh dưỡng liên tục.
Trong một loạt ca bệnh được báo cáo về nấm A. flavus ở người, nhiều ca đưa đến
nhièu biến chứng nặng, thậm chí tử vong: viêm màng ngoài tim dẫn đến tử vong do A.
flavus trên bệnh nhân bị bạch cầu cấp, hoặc dị ứng viêm mũi xoang ở bệnh nhân ở
Qatar do A.flavus, hoặc bệnh nhân ghép gan bị viêm cơ do nấm A. flavus (Clinical
transplantation, 22: 2008, 508-510).

1.3.2. Nấm mốc Fusarium solani [8]
Bệnh héo vàng do nấm F. solani gây hại là một trong những bệnh nguy hiểm gây
thiệt hại lớn cho rau, củ, quả ở nhiều nước trên thế giới như Trung Quốc, Mỹ, Anh, Ý,
Nam Phi, Ân Độ, Australia... Bệnh này có phạm vi kí chủ rộng, xuất hiện và gây hại
nhiều nơi nhất là vùng nhiệt đới và cận nhiệt đới.
1.3.2.1. Phân loại
Hình 1.8. Fusarium solani
Giới :Fungi
Ngành: Ascomycota
Lớp: Sordariomycetes
Bộ: Hypocreales
Họ: Nectriceae
Chi: Fusarium
Loài: F. solani
1.3.2.2. Đặc điểm của nấm Fusarium solani [41]
Giai đoạn hữu tính F.solani là Haematonectria heamatococca. Tuy nhiên, tên gọi này
thường ít thông dụng. Giai đoạn hữu tính hầu như không gây bệnh cho cây, dù từ môi
trường nuôi cấy.

^ ___Ẩ___1- . __
31 Cà
c "
o
V o
E ~-/
p
A
A í
-—t-------»— 1---------— 9 ị
Ị
'" T ■■ T—*------r—-
B F OCX
Hình 1.9. Loài F. solani:A-B: đại bào tử; C-D: tiểu bào tử; E-G: bào tử đính trên môi
trường (Dương Minh,2010)
Giai đoạn vô tính là F. solani thường ký sinh gây hại cây. Tiểu bào tử của F.
solani trong suốt, hình trụ, hay nêm (9-16 x 2-4pm), có thể có 1vách ngăn. Đại bào tử
có thể có hoặc không có một vài chủng, hình trụ hoặc liềm (40-100 x 5-7,5pm),
thường có 3-5 hay 7 vách ngăn.
Nhiệt độ tối thiểu để sợi nấm phát triển và hình thành bào tử trong nuôi cấy là
280C. Bào tử áo là những bào tử có vách dày (10-11 x 8-9pm). Li et al, (1998) cho biết
ở loài F.solani f.sp. glycines nhiệt độ 300C giúp kích thích hình thành bào tử áo.
Thường bào tử áo có dạng đơn, đôi khi có dạng đôi chúng được hình thành từ phần
cuối, bên hông hay ở giữa của đại bào thì Fusarium có thể tồn tại trong đất dưới dạng
bào tử áo qua thời gian dài, bào tử áo có thể lưu tồn trong đất từ 15 đến 20 ngày. Bệnh
lây lan qua than rễ, đất bị nhiệm bệnh và truyền qua giống, ngoài sựu lây lan thứ cấp
của bệnh có thể được thực hiện qua nguồn nước và cơ giới Fusarium thường tấn công
cây trồng dễ dàng khi bị thiếu ánh sáng. Phơi nắng ở nhiệt độ cao sẽ làm giảm hiệu
quả của việc tiêm chủng F.solani.
Trên cây trồng, loài F. solanif.so.pisi (gây chết cây) phát triển tốt khi đất được
cung cấp thêm P, K, Mg hòa tan, C và N tổng số. Das (1991), cho biết khuẩn lạc của
F.solani sẽ phát triển kém khi hàm lượng K+ giảm dưới 3mM. Nếu thiếu Bo và Fe,
F.solanif.sp.phaseoli sẽ gia tăng mức gây hại lên trục hạ diệp của cây.
Ngược lại, Keawruang et al, (1989), bón thạch cao (CaSO4) và hàm lượng nước
tốt có thể làm giảm bệnh thối rễ do F.solani gây ra.
I.3.2.3. Hình thức sinh sản
Nấm F. solani sản sinh ra 3 loại bào tử vô tính đó là tiểu bào tử, đại bào tử và bào
tử hậu.

Các bào tử hậu thường có dạng hình tròn, có thành bào tử dày do các sợi nấm tạo
thành loại bào tử này thường có 3 đến 5 ngăn, chúng được sinh ra trong các đại bào tử
hoặc xen giữa các sợi nấm già [8, 47].
Tiểu bào tử là các bào tử có 3 hay 5 ngăn, có hình trứng, hình bầu dục, đây là
dạng bào tử có nhiều nhất và được sản sinh trong tất cả các điều kiện, thường được
sinh ra trong tất cả các điều kiện, thường được sinh ra trong các mạch dẫn của cây bị
bệnh.
Đại bào tử là các bào tử có từ 3 đến 5 ngăn. Đại bào tử có hình bán nguyệt, hình
lưỡi liềm. Đại bào tử có thể tồn lưu trong đất lâu đến 30 năm và nó chính là nguồn lan
truyền bệnh cho các năm sau và các cây khác.
I.3.2.4. Một số bệnh lý do nấm mốc F. solani
Nấm F. solani là loài nấm tồn tại chủ yếu trong đất, xâm nhiễm gây bệnh vào bên
trong bó mạch, chủ yếu thông qua bộ rễ do rễ làm nhiệm vụ hút nước và chất dinh
dưỡng nên nấm cũng theo con đường đó mà xâm nhập vào cây, sau khi xâm nhập gây
bệnh nấm làm cho bó mạch bị chuyển sang màu nâu xấm hoặc nâu đen, lá cây bị héo
do độc tố nấm tiết ra làm tắc bó mạch, dẫn đến mất chức năng quang hợp và cây bị
chết [8].

CHƯƠNG 2: VẬT LIỆU VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU
2.1 Phương tiện nghiên cứu
2.1.1. Thời gian và địa điểm
Thời gian: 06/02/2017 đến 06/06/2017
Địa điểm: phòng thí nghiệm Vi sinh - Hóa sinh trường Đại học Bà Rịa - Vũng
Tàu. Một phần nghiên cứu được thực hiện ở phòng F45 Viện Công nghệ Sinh học và
Thực phẩm, Trường Đại học Công Nghiệp TP.HCM.
2.1.2. Đối tượng nghiên cứu
Củ cải trắng được thu hái vào tháng 2 năm 2016 tại trang trại thuộc huyện Đức
Trọng, tỉnh Lâm Đồng, Việt Nam. Củ cải tươi sau khi thu hoạch được rửa sạch, cắt lát
dày 1-1,2 cm, sấy ở 500C đến khi còn 6 - 7% ẩm. Củ cải khô sau đó được xay nhỏ, lọt
qua sàng 40 mesh và trích ly bằng các dung môi khác nhau (nước, ethanol, methanol,
ethyl acetate, este dầu hỏa) thu được cao củ cải.
2.1.3. Phạm vi nghiên cứu
Khảo sát hoạt tính kháng khuẩn của dịch chiết từ củ cải trắng bằng hệ dung môi
ethanol - nước trên các đối tượng:
•Aspergillusflavus (VTCC-F-824)
• Fusarium solani (VTCC-F-827)
• Bacillus cereus (VTCC 1005)
• Pseudomonas aeruginosa (ATCC 9027)
• Salmonella typhi (ATCC 6538)
• Staphylococcus aureus (ATCC 14028)
2.1.4. Hóa chất sử dụng
Hóa chất sử dụng: môi trường SDA (Ân Độ) và môi trường PDA (Ân Độ), MHA
(Himedia, Ân Độ), TSB (Pháp).
2.1.5. Thiết bi - Dụng cụ
Máy ly tâm, máy đo pH, buồng đếm hồng cầu;
Micropipet;
Vortex; cân phân tích,
Nồi hấp tiệt trùng, tủ cấy, tủ hút, tủ lạnh, tủ sấy, kính hiển vi;
Và các dụng cụ thông thường trong phòng thí nghiệm.

2.2.Nội dung và phương pháp nghiên cứu
2.2.1. Nội dung nghiên cứu
2.2.2. Phươngpháp nghiên cứu
2.2.2.I. Phươngpháp định tính các thànhphần trong cao chiết
> Định tính alkaloids
Cân 2 g mẫu cao cho vào 20 ml dung dịch acid sulfuric 5% trong ethanol 50%.
Thêm 2 giọt dung dịch ammoniac đậm đặc và thêm một ít dung môi chloroform
vào rồi lắc nhẹ để trộn đều và hỗn hợp được đưa vào phễu chiết. Chờ một lúc để hỗn
hợp tách lớp rồi đem đi chiết thu được 2 lớp dịch riêng biệt rồi đem kiểm tra với thuốc
thử Dragendorf. Lần lượt cho 1 ml thuốc thử Dragendorf vào trong 2 lớp dịch được

tách riêng biệt. Hỗn hợp nào hình thành kết tủa màu nâu đỏ chứng tỏ có sự hiện diện
của alkaloids [36].
> Định tính tannin
Lấy 2 g cao hòa tan trong 10 ml dung dịch cồn 50% rồi chia làm 3 phần bằng
nhau:
- Thử nghiệm FeCl3: Nhỏ 3 giọt dung dịch FeCl3 vào phần thứ nhất, màu sắc
của mẫu chuyển sang màu xanh lam hoặc màu xanh đen đậm chứng tỏ mẫu có tồn tại
tannin [41].
- Thử nghiệm gelatin: Hòa tan một lượng nhỏ gelatin dạng hạt vào trong phần
thứ hai rồi lắc đều cho gelatin hòa tan hoàn toàn. Sau đó để yên hỗn hợp, nếu xuất hiện
kết tủa trắng lơ lửng bên trong chứng tỏ mẫu cao có sự hiện diện của tannin [36].
- Thử nghiệm chì acetate: Nhỏ 3 giọt dung dịch chì acetate vào phần thứ ba, lắc
đều cho đến khi thấy xuất hiện kết tủa màu vàng nhạt thì chứng tỏ có sự tồn tại của
tannin trong mẫu cao [36].
> Định tính anthraquinones
Cân 0,5 g mẫu cao hòa vào 5 ml dung môi chloroform và lắc đều trong vòng 5
phút. Tiến hành lọc hỗn hợp trên để thu được dịch trong rồi bổ sung thêm dung dịch
amoniac 10% với thể tích bằng với thể tích của dịch trong vừa lọc. Nếu ta thấy có xuất
hiện lớp nước màu đỏ hay hồng hoặc tím sau khi lắc đều chứng tỏ có sự hiện diện của
anthraquinones tự do có trong mẫu cao [36].
> Định tính saponin
- Thử nghiệm 1: Lấy 1g mẫu cao cho vào 2 ml dung dịch NaCl rồi lắc đều sau
đó hút 2 ml hỗn hợp cho vào ống nghiệm rồi thêm 3 giọt máu động vật bằng ống tiêm
rồi nhẹ nhàng đảo ngược ống (không tạo rung) và để yên trong 15 phút. Sự lắng xuống
của các tế bào hồng cầu chứng tỏ có sự hiện diện của saponin trong mẫu cao [36].
- Thử nghiệm 2: Cân 1 g mẫu cao rồi hòa tan trong 10 ml nước cất sau đó lắc
mạnh trong 30 giây và để yên hỗn hợp trong vòng 30 phút. Nếu có sự hình thành của
bọt khí không tan chứng tỏ có sự hiện diện của saponin trong mẫu cao [36].
> Định tínhflavonoids
Cân 2 g mẫu cao hòa tan trong 10 ml nước cất rồi hút 3 ml hỗn hợp vào trong 2
ống nghiệm. Phương pháp này gồm thử nghiệm với dung dịch NaOH 10% và thử
nghiệm với dung dịch FeCl3[36].

- Thử nghiệm NaOH 10%: Thêm 2 ml dung dịch NaOH 10% vào 3 ml hỗn hợp
rồi lắc đều. Nếu thấy xuất hiện dung dịch màu vàng rồi chuyển sang không màu nếu
cho acid hydrochloric vào chứng tỏ có sự hiện diện của ílavonoids trong mẫu cao [36].
- Thử nghiệm FeCl3: Nhỏ 3 giọt dung dịch FeCl3vào 3 ml hỗn hợp rồi lắc đều.
Sự chuyển màu của dung dịch sang màu xanh đen chứng tỏ có tồn tại ílavonoids trong
mẫu cao [36].
2.2.2.2. Chuẩn bị giống
> Nấm mốc
Tiến hành giữ các giống nấm mốc trên môi trường thạch SDA trên đĩa Petri bằng
phương pháp cấy chấm góc. Đầu tiên pha môi trường thạch SDA (65 gam/lít), hấp khử
trùng ở 1210C trong 20 phút, để nguội xuống 40-500C rồi đem đi đổ đĩa Petri. Các đĩa
này được để ở nhiệt độ phòng trong vòng 24 giờ để kiểm tra môi trường không bị
nhiễm. Đĩa Petri sau 24 giờ sẽ được dùng để cấy chuyền các giống nấm mốc nhằm
mục đích giữ giống. Sau khi cấy các đĩa Petri được đem ủ trong vòng 24 giờ ở nhiệt độ
thường và bảo quản trong 2 - 3 tuần ở nhiệt độ mát.
Để chuẩn bị thử nghiệm cấy nấm mốc qua môi trường thạch nghiêng, nuôi nấm
mốc trong 72 giờ ở nhiệt độ phòng. Thực hiện lấy bào tử nấm mốc: bơm 10 ml nước
muối sinh lý vào ống thạch nghiêng đã cấy nấm mốc, lắc ống nghiệm trên vortex với
tốc độ quay 3200 rpm thời gian 5 phút. Đổ lấy dịch huyền phù vào ống ly tâm và ly
tâm với tốc độ vòng 5000 rpm thời gian 10-15 phút. Đổ phần dịch bên trên thu lấy
phần cặn phía dưới. cặn này sẽ hòa tan vào dung dịch nước muối sinh lý để được mật
độ 5 x106bào tử/ ml. Đây chính là dịch nấm mốc để nghiên cứu.
> Vi khuẩn
Bảo quản giống: vi khuẩn sau khi lấy về sẽ được cấy ria trên môi trường thạch
dinh dưỡng TSB, đem ủ ở 370C trong vòng 16 đến 24 giờ để chọn ra các khuẩn lạc đặc
trưng. Khi chọn được khuẩn lạc đặc trưng trên đĩa thạch không bị nhiễm thì đem tăng
sinh chúng trong môi trường lỏng TSB rồi ủ ở 370C, lắc với tốc độ 100 rpm trong 10 -
12 giờ. Môi trường trở nên đục do có sự tăng sinh của vi sinh vật. Chuẩn bị sẵn
glycerol và effendorf đã được hấp tiệt trùng. Tiến hành bơm 400 pl dịch vi khuẩn nuôi
cấy vào effendorf rồi cho tiếp 600 pl glycerol rồi đem cho vào tủ lạnh đông sâu ở -
490C để giữ giống cho quá trình làm thí nghiệm.

Tăng sinh: vi khuẩn lấy ra từ tủ đông sâu cần được rã đông khoảng 2 tiếng bằng
cách hạ nhiệt độ từ từ xuống để tránh vi khuẩn sốc nhiệt gây chết. Để hoạt hóa vi
khuẩn tiến hành tăng sinh với 3 ml môi trường TSB cho 40 gl dịch vi khuẩn rồi 10 ml
môi trường với 0,5 ml dịch và 100 ml môi trường với 1 ml dịch, ở mỗi giai đoạn này
đều ủ ở 370C trong 100 rpm từ 10 - 12 giờ.
Thực hiện lấy tế bào vi khuẩn: huyền phù vi khuẩn sau đó được ly tâm trong 15
phút ở 5000 rpm để tách sinh khối ra khỏi môi trường rồi rửa sinh khối vi sinh vật
bằng 3 lần nước cất vô trùng và pha loãng bằng nước cất vô trùng đến độ đục tương
đương 0,5 MC Farland. Huyền phù vi khuẩn này được dùng trong các khảo sát hoạt
tính kháng khuẩn.
2.2.2.3. Chuẩn bịpha cao củ cải ở các nồng độ khác nhau
Cao củ cải trắng được pha trong dung dịch DMSO 5% vô trùng với các nồng độ
1600, 800, 400, 200 và 100 mg/ml. Cao với các nồng độ khác nhau sau đó được cho
lên khoanh giấy (đường kính 6 mm) vô trùng. Các kháng sinh được sử dụng để đối
chứng là ampicillin (10 gg/đĩa), gentamycin (10 gg/đĩa), tetracycline (30 gg/đĩa) dùng
cho khuẩn và terbinaílne (1 mg/ml pha trong DMSO 5%) dùng cho mốc, chứng âm là
dung dịch DMSO 5% vô trùng.
2.2.2.4. Phươngpháp xác định hoạt tính kháng
Khả năng kháng vi sinh vật kiểm định của dịch chiết được xác định bằng phương
pháp khuếch tán trên đĩa thạch của Hadacek và cộng sự (2000). Theo đó, hoạt tính
kháng vi sinh vật kiểm định được đánh giá bằng cách đo bán kính vòng ức chế vi sinh
vật (BK) theo công thức BK (mm) = D - d với D là đường kính vòng vô khuẩn và d là
đường kính khoanh giấy kháng.
Kháng sinh ở trong khoanh giấy sẽ khuếch tán vào thạch có chứa các chủng vi
khuẩn thử nghiệm và mức độ nhạy cảm của vi khuẩn với kháng sinh được biểu hiện
bằng đường kính các vòng vô khuẩn xung quanh khoanh giấy kháng sinh.
Cách tiến hành:
♦♦♦ Đối với nấm mốc
Pha môi trường PDA (39 g/l), hấp tiệt trùng ở 1210C trong 20 phút, để nguội đến
40 - 500C, thực hiện đổ đĩa Petri, ủ trong vòng 24 giờ ở nhiệt độ thường để kiểm tra
môi trường không bị nhiễm.

Cho vào đĩa petri 100 pl dung dịch đã chuẩn bị ở mục 2.2.2.2, trang đều dịch
nấm mốc trên đĩa thạch, để yên 30 phút ở nhiệt độ phòng.
+ Sử dụng kẹp đầu nhọn vô trùng để đặt từng khoanh giấy kháng sinh lên đĩa
thạch hoặc dùng dụng cụ để đặt khoanh giấy kháng sinh nhẹ nhàng lên đĩa thạch.
Mỗi đĩa petri được đặt 7 khoanh giấy
Không di chuyển khoanh giấy khi đã tiếp xúc với mặt thạch để tránh các vòng ức
chế chồng chéo lên nhau và có thể gây sai số khi đo vòng ức chế.
- 5 đĩa giấy chứa 10 pl cao củ cải trắng với các nồng độ khác nhau.
- 1 đĩa chứng âm chứa 10 pl dung dịch DMSO 5% vô trùng.
- 1 đĩa giấy chứng dương là kháng sinh có nồng độ được trình bày ở mục 2.2.2.3.
Để các đĩa thạch ở nhiệt độ phòng trong 30 phút cho kháng sinh từ các khoanh
giấy khuếch tán trên mặt thạch.
Lật ngược các đĩa thạch và ủ ấm ở nhiệt độ phòng trong vòng 24 - 48 giờ.
♦♦♦ Đối với vi khuẩn
Thử nghiệm hoạt tính kháng khuẩn của cao chiết bằng phương pháp khuếch tán
trên đĩa thạch. Cho vào mỗi đĩa Petri 25 ml môi trường MHA vô trùng (khoảng 40 -
500C) và 1ml dịch vi khuẩn mật độ 1,5 x 106CFU/ml, lắc đều, để yên khoảng 45 phút
cho môi trường đông đặc. Mỗi đĩa Petri được đặt 7 đĩa giấy, trong đó gồm:
- 5 đĩa giấy chứa 10 pl cao củ cải trắng với các nồng độ khác nhau đã trình bày ở
mục 2.2.2.4.
- 1 đĩa chứng âm chứa 10 pl dung dịch DMSO 5% vô trùng.
- 1 đĩa giấy chứng dương là kháng sinh có nồng độ như đã trình bày trong phần
2.2.2.3.
Mỗi nồng độ được tiến hành lặp lại 3 lần. Các đĩa được ủ ở 37oC trong vòng 16 -
20 giờ. Đường kính vùng ức chế được đo bằng thước đo đơn vị mm [42].
Đ ĩa giấy đ ặt lên m ôi
trư ờ ng chư a có vòng
k háng khuẩn xung
q uanh đĩa giấy
Đ o đư ờ n g kính vòng
k háng khuẩn từ 2
điểm đối xứ ng nhau
trên đư ờng tròn đi
qua tâm của đĩa giấy
d = 0 m m
Đ ĩa Petri có sẵn m ôi trường
và vi khuấn
Hình 2.2. Mô tả cách đo vòng tròn kháng khuẩn (Hudzicki, 2009)

2.2.2.5. Xử lý số liệu
Kết quả vòng kháng khuẩn đo được sẽ được tính từ trung bình của các lần lặp
lại, thể hiện theo dạng trung trình ± SD.
Kiểm tra sự khác biệt giữa các nghiệm thức bằng phân tích ANOVA và LSD
trên phần mềm Statgraphics.

CHƯƠNG 3: KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN
3.1. Kết quả định tính các nhóm chất có trong cao củ cải trắng
Theo Kukum Agarwal và Rajana Varma (2014) trong củ cải có các nhóm chất
alkaloid, glycoside, triterpenoid và steroid nhưng không tìm thấy sự hiện diện của các
hợp chất carbohydrate, đường khử, flavonoid, tannin, hợp chất phenolic, saponin,
protein và acid amin. Tuy nhiên, G. Aruna, Venu G. Yerragunt, Akondi B. Raju
(2012) cũng đã nghiên cứu các hợp phần có tính chất dược lý trong củ cải trắng và đã
xác định được đó là các flavonoid, glycoside, alkaloid, saponin, tannin, polyphenol,
anthocyanin, glucosinolate và isothiocyante. Nghiên cứu của Safia Janiua, Maliha
Shahid, Fakhir-i-Abbas (2013) cũng cho thấy trong củ cải trắng tồn tại các hợp chất có
tác dụng chữa bệnh như tannin, saponin, flavonoid, phlobatannin, anthraquinone,
carbohydrate, đường khử, steroid, phytosterol, alkaloid, acid amin, terpenoid, cardiac
glycoside và chalcone [2, 18].
Để xác định sơ bộ thành phần các chất có trong mẫu củ cải khảo sát, chúng tôi
tiến hành định tính một số hợp chất có trong mẫu như đã trình bày ở phần 2.2.2.1. Kết
quả ghi nhận được thể hiện ở bảng 3.1.
Bảng 3.1. Kết quả định tính các hợp chất có trong mẫu cao củ cải trắng
Thí nghiệm
1. Định tính alkaloid
Kết quả Kết luận
+
2. Định tính tannin

Thử nghiệm FeCl3
Thử nghiệm chì acetate
Thử nghiệm gelatin
3. Định tính anthraquinones
+
+
+
4. Định tính saponin

Thử nghiệm 1
Thử nghiệm 2
5. Định tính ílavonoids
Thử nghiệm NaOH
Thử nghiệm FeCỈ3
+
+
Từ 5 thử nghiệm khảo sát định tính như trình bày, kết quả có 3 thử nghiệm đạt
dương tính:

- Alkaloids
- Tannin
- Flavonoids
Kết quả này tương tự với các nghiên cứu đã trình bày ở trên. Có 2 thử nghiệm
thu được kết quả âm tính là saponin và anthraquinones. Theo chúng tôi có thể là do sự
khác nhau về nguồn nguyên liệu, bởi thành phần của nguyên liệu chịu ảnh hưởng rất
nhiều của giống, đất đai, thổ nhưỡng, điều kiện chăm sóc, ...
Từ kết quả định tính xác định được trong củ cải trắng có hợp chất alkaloid,
tannin và flavonoid. Các hợp chất sinh học có khả năng kháng khuẩn nên theo chúng
tôi có lẽ sự kháng khuẩn của cao củ cải trắng là do các hợp chất này tạo ra.
3.2. Kết quả kháng khuẩn và nấm mốc của cao củ cải trắng
3.3.1. Kết quả kháng khuẩn
Hoạt tính kháng khuẩn của cao củ cải trắng đã được nghiên cứu ở các nồng độ
khác nhau (100; 200; 400; 800; 1600 mg/ml) chống lại 4 chủng vi khuẩn gây bệnh bao
gồm hai chủng Gram âm (Salmonella typhi - ATCC 14028, Pseudomonas aeruginosa
- ATCC 9027); và hai chủng Gram dương (Staphylococus aureus - ATCC 6538,
Bacillus cereus - VTCC 1005).
Khả năng kháng khuẩn được xác định dựa trên khả năng ức chế sự phát triển
của vi khuẩn được thể hiên qua đường kính kháng khuẩn được tạo ra trên đĩa Petri
được trình bày ở bảng 3.2.
Bảng 3.2. Đường kính vòng kháng khuẩn của cao củ cải trắng (mm)
STT
Nồng độ
(mg/ml)
B. cereus S. typhi P. aeruginosa S. aureus
1 1600 15,56c± 0,88 13,67c± 0,71 17,89b± 0,60 16,78c± 0,67
2 800 15,00c± 0,50 13,33c± 0,87 15,00c± 0,71 15,89d± 0,60
3 400 13,89d± 1,05 11,89d± 1,27 12,22d± 0,44 14,11e± 0,33
4 200 12,67e± 0,50 11,89d± 1,27 10,67e± 0,50 13,33f± 0,50
5 100 11,56f± 0,88 9,89e± 1,67 8,78f± 0,67 11,56g± 0,73
6 Ampicilin 8,67g± 0,58 19,00a± 0,00 0 9,67h± 0,58
7 Gentamycin 16,67b± 1,15 14,67b± 0,58 21,00a± 0,00 18,67b± 1,15
8 Tetracycline 24,67a± 1,15 19,00a± 1,00 0 22,33a± 0,58

Trong cùng một cột, các số có chữ số mũ khác nhau thì khác nhau ở mức ý nghĩa a
= 0,05.
Theo bảng 3.2 khi đánh giá sơ bộ về khả năng kháng khuẩn của cao củ cải trắng
trên từng chủng vi khuẩn chúng tôi rút ra một số nhận xét như sau:
- Trên chủng vi khuẩn B. cereus khi khảo sát ở các nồng độ chúng tôi nhận thấy
ở hai nồng độ 1600 mg/ml và 800 mg/ml không có chênh lệch đáng kể và không khác
nhau ở mức ý nghĩa a = 0,05, kết quả lần lượt là 15,56 ± 0,88 mm và 15,00 ± 0,50
mm. Các nồng độ còn lại là 400 mg/ml, 200 mg/ml và 100 mg/ml kết quả thu được ở 3
nồng độ trên lần lượt là: 13,89 ± 1,05, 12,67± 0,50 và 11,56 ± 0,88 mm. Kết quả cho
thấy hoạt tính kháng khuẩn của cao củ cải trắng đối với chủng B. cereus tương đối cao,
nhận thấy dịch chiết củ cải có khả năng kháng chủng này tốt kể cả ở nồng độ thấp.
- Trên chủng S. typhi khi khảo sát các nồng độ trên, chúng tôi nhận thấy rằng
hai nồng độ đầu là 1600 mg/ml và 800 mg/ml có kết quả ghi nhận lần lượt là 13,67 ±
0,71 mm và 13,33 ± 0,87 mm không khác nhau ở mức ý nghĩa a = 0,05. Mặt khác, ở
hai nồng độ tiếp theo là 400 mg/ml và 200 mg/ml hoàn toàn không khác nhau, kết quả
thu được ở cả hai nồng độ là 11,89 ± 1,27 mm. Và nồng độ cuối cùng là thấp nhất so
với các nồng độ trước với kết quả là 9,89 ± 1,67 mm. Qua kết quả trên, chúng tôi nhận
thấy đối với chủng S. typhi ở các nồng độ gần nhau thì khả năng kháng của cao củ cải
hầu hết cho ra kết quả tương đương nhau, ở nồng độ cuối kết quả thu được thấp hơn
nhiều. Hầu như với chủng này cao củ cải kháng yếu hơn so với chủng B. cereus.
- Trên chủng P. aeruginosa khi chúng tôi tiến hành khảo sát với 5 nồng độ trên,
nhận thấy ở tất cả các nồng độ đều có sự khác biệt nhau ở mức ý nghĩa a = 0,05. Cụ
thể ở nồng độ cao nhất và nồng độ thấp nhất thu được kết quả lần lượt là 17,89 ± 0,60
mm và 8,78 ± 0,67 mm, kết quả cho thấy hoạt tính cao củ cải giảm dần từ nồng độ cao
nhất đến nồng độ thấp nhất. Dựa theo kết quả ghi nhận được, chúng tôi nhận thấy với
chủng P. aeruginosa, cao củ cải ở nồng độ cao (1600 mg/ml) có khả năng kháng tốt và
càng dần về nồng độ thấp thì hoạt tính giảm dần và có xu hướng giảm đi một nửa so
với nồng độ cao nhất.
- Cuối cùng là chủng S. aureus, tương tự như chủng P. aeruginosa, chúng tôi
nhận thấy các nồng độ khảo sát có sự khác biệt nhau ở mức ý nghĩa a = 0,05. Mặc dù
chủng S. aureus có kết quả giảm dần từ nồng độ cao nhất đến nồng độ thấp nhất tương
tự như P. aeruginosa nhưng theo kết quả ghi nhận được ở nồng độ cao củ cải là 100

mg/ml thì cao củ cải vẫn giữ được hoạt tính kháng tốt (11,56 ± 0,73 mm). So với hoạt
tính ở B. cereus đối với nồng độ 100 mg/ml thì cao củ cải có khả năng kháng tương
đương đối với hai chủng này.
Dựa trên kết quả thí nghiệm với DMSO 5%, các mẫu chứng âm không xuất hiện
vòng kháng khuẩn, điều này được khẳng định khi đa số các thí nghiệm về kháng khuẩn
đều dùng DMSO làm chứng âm [33]. DMSO không kháng khuẩn ở tất cả các dịch
chiết với các dung môi khác nhau. Vì vậy có thể kết luận rằng DMSO hòa tan đa số
các hợp chất và sử dụng làm chứng âm với khuẩn mà không ảnh hưởng đến kết quả
kháng khuẩn [29].
Cao củ cải trắng có khả năng ức chế sự phát triển của cả 4 chủng vi khuẩn thử
nghiệm. Mức độ kháng phụ thuộc nồng độ của cao sử dụng. Hiệu quả kháng của cao
củ cải tốt nhất trên P. aeruginosa và thấp nhất với S. typhi. Đối với S. aureus và B.
cereus, mức độ kháng không cao như P. aeruginosa, chỉ thấy được sự khác biệt rõ nét
ở nồng độ cao nhất (1600 mg/ml) và nồng độ thấp nhất (100 mg/ml), hầu như hoạt tính
kháng không giảm đáng kể khi so sánh với những nồng độ gần kề nhau. Tuy nhiên, khi
giảm nồng độ xuống còn 100 mg/ml thì vòng kháng khuẩn có đường kính ghi nhận
được ở hai chủng vi khuẩn S. aureus và B. cereus là khá cao và cao hơn cả P.
aeruginosa khi ở cùng nồng độ khảo sát thấp, kết quả thu được lần lượt của S. aureus,
B. cereus là 11,56 ± 0,73 mm; 11,56 ± 0,88 mm.
Ở nồng độ 1600 mg/ml, hiệu quả kháng của cao củ cải thấp hơn của tetracycline
mức 30 pg, tương đương với 10 pg gentamycin và cao hơn 10 pg ampicilin (trừ S.
typhi với vòng kháng đạt 19,00 ± 0,00 mm). Đặc biệt, với P. aeruginosa, hai kháng
sinh là ampicilin và tetracycline không có khả năng kháng với chủng này, nhưng cao
củ cải trắng lại có khả năng kháng tốt, nồng độ 100 mg/ml vẫn cho thấy vòng kháng
đạt 8,78 ± 0,67 mm.
Hình 3.1. Khả năng kháng B. cereus của cao củ cải trắng

Hình 3.2. Khả năng kháng P. aeruginosa của cao củ cải trắng
Hình 3.3. Khả năng kháng S. aureus của cao củ cải trắng
Hình 3.4. Khả năng kháng S. typhi của cao củ cải trắng
(1): chứng âm DMSO 5%, (2): 1600mg/ml, (3): 800 mg/ml, (4): 400 mg/ml,
(5): 200 mg/ml, (6): 100 mg/ml, (7): chứng dương gồm 3 loại (a) Ampicillin ,
(b) Gentamycin, (c) Tetracycline
3.3.2. Kết quả kháng nấm mốc
Hoạt tính kháng nấm của cao củ cải trắng đã được nghiên cứu ở các nồng độ
khác nhau (100; 200; 400; 800; 1600 mg/ml) chống lại chủng nấm mốc gây bệnh như
A. flavus và F. solani. Khả năng kháng nấm được xác định dựa trên khả năng ức chế
sự phát triển của nấm mốc được thể hiện qua đường kính kháng nấm được tạo ra trên
đĩa petri được trình bày ở bảng 3.3.

Hình 3.6. Khả năng kháng A. flavus của cao củ cải trắng
Hình 3.5. Khả năng kháng F. solani của cao củ cải trắng
(0): chứng âm DMSO 5%, (1): 1600mg/ml, (2): 800 mg/ml, (3): 400 mg/ml,
(4): 200 mg/ml, (5): 100 mg/ml, (tâm): chứng dương gồm loại (Ter) Terbinaíine
Bảng 3.3. Đường kính vòng kháng nấm của cao củ cải trắng (mm)
STT Nồng độ (mg/ml)
Hiệu số vòng kháng đối với các VSV kiểm định
D-d (mm)
A.flavus F. solani
1 1600 11,5b± 0,84 0,0
2 800 8,5c± 0,84 0,0
3 400 6,83d± 0,41 0,0
4 200 5,83f± 0,41 0,0
5 100 0,0 0,0
6 Terbinafine 39,33a± 0,58 21,0 ± 1,73
---------- --------------------------------7------ ---------7 --------------------------------
Trong cùng một cột, các số có chữ số mũ khác nhau thì khác nhau ở mức ý nghĩa a
= 0,05.

* Nhận xét
DMSO 5% là mẫu chứng âm không thể kháng mốc giống với khuẩn được trình bày
ở 3.3.1.
Loại thuốc kháng Terbinafine có thể kháng sinh hai loại nấm mốc A. flavus và F.
solani. Thuốc kháng sinh có hoạt tính kháng cao hơn và tốt hơn so với dịch chiết cao
của củ cải trắng.
Dịch cao chiết từ củ cải có hoạt tính kháng đối với chủng A. flavus nhưng không có
hoạt tính kháng đối với chủng F. solani.
• Với nồng đồ cao 1600 mg/ml và 800 mg/ml tôi nhận thấy rằng vòng kháng
sinh to,rõ ràng và có sự chênh lệch khá nhiều với kết quả lần lượt là 11,5 ± 0,84; 8,5 ±
0,84 mm và khác nhau ở mức độ ý nghĩa a = 0,05. Các nồng độ còn lại 400 mg/ml,
200 mg/ml và 100mg/ml có sự chênh lệch nhiều hơn và nhận thấy được sự khác biệt rõ
nét kết quả lần lượt là 6,83 ± 0,41; 5,83 ± 0,41; 0 mm. Nồng độ cao có thể kháng được
nấm mốc ở 200 mg/ml. Ở nồng độ 100 mg/ml thì cao của củ cải trắng không có hoạt
tính kháng. Vì khi nồng độ cao càng thấp thì hoạt tính kháng càng giảm. Ở nồng độ
200 mg/ml vẫn còn hoạt tính kháng.
uA.flavus káis.aureus up. aeruginosa
Nồngđộdịch chiếtcủcải trắng(mg/ml)
Hình 3.7. Biểu đồ thể hiện khả năng kháng khuẩn của cao củ cải trắng từ 4 chủng vi
khuẩn và nấm mốc khác nhau
3.4. Bàn luận
Các kháng sinh chúng tôi sử dụng trong nghiên cứu này bao gồm gentamycin,
ampicillin và tetracycline, terbinafine.

Trong đó, gentamycin là một kháng sinh thuộc nhóm aminoglycoside, có khả
năng kháng hiệu quả nhiều loại bệnh nhiễm khuẩn nặng do vi khuẩn Gram âm và
Gram dương gây ra. Cơ chế tác dụng của gentamycin là ức chế tổng hợp protein và
phá vỡ toàn bộ màng tế bào vi khuẩn. Gentamycin khuếch tán vào trong tế bào và
được vận chuyển qua màng tế bào chất nhờ năng lượng từ hệ thống vận chuyển
electron của một quá trình phụ thuộc vào O2. Pha vận chuyển này có thể bị ức chế bởi
các cation Ca2+, Mg2+, làm giảm pH và tăng áp lực thẩm thấu. Sau khi qua màng sẽ
được vận chuyển nhanh đến gắn với các tiểu đơn vị của ribosome làm giảm độ chính
xác của các RNA thông tin, dẫn đến kết hợp sai các acid amin trong chuỗi polypeptide
của vi khuẩn [7, 37].
Ampicillin là kháng sinh phổ rộng đầu tiên hoạt động chống lại vi khuẩn Gram
dương bao gồm Streptococcus pneumoniae, Streptococcus pyogenes, S. aureus và một
số loài Enterococcus. Hoạt tính chống lại vi khuẩn Gram âm bao gồm Neisseria
meningitidis, Haemophilus influenzae và một số loài Enterobacteriaceae. Ampicillin
nằm trong nhóm penicillin kháng sinh P-lactam và là một phần của họ aminopenicillin
[3, 27]. Ampicillin hoạt động như một chất ức chế không thuận nghịch của enzyme
transpeptidase, là một enzyme cần thiết của vi khuẩn để tạo nên thành tế bào [1, 9].
Ampicillin ức chế giai đoạn cuối cùng của sự tổng hợp thành tế bào vi khuẩn trong sự
phân đôi tế bào, dẫn đến việc phân tách tế bào. Do đó, cơ chế của ampicillin là tác
động vào quá trình nhân lên của vi khuẩn, ức chế sự tổng hợp mucopeptide của màng
tế bào vi khuẩn [27, 1].
Tetracycline ức chế rất nhiều phản ứng enzyme thiết yếu cho các quá trình quan
trọng của tế bào vi khuẩn. Các phản ứng sinh hóa nhạy cảm nhất được ức chế là sự
tổng hợp các protein [7]. Tetracycline hoạt động bằng cách liên kết đặc hiệu với
ribosome 30S của vi khuẩn, ngăn sự gắn kết của aminoacyl tRNA với phức hợp RNA-
ribosome. Đồng thời tetracycline ức chế các bước khác của quá trình tổng hợp protein.
Tetracycline cũng có thể làm thay đổi màng tế bào chất và điều này là nguyên nhân
làm đảo lộn trật tự các nucleotide và các hợp chất khác ra khỏi tế bào. Do vậy mà
tetracycline không trực tiếp giết chết vi khuẩn mà thay vào đó ức chế màng tế bào của
vi khuẩn [26, 4].
Terbinafine có tác dụng là ảnh hưởng đến khả năng tạo chất hóa học là các sterol
của nấm. Các sterol là thành phần quan trọng của màng tế bào nấm và liên kết chúng

với nhau. Sự ảnh hưởng này làm suy yếu màng tế bào. Terbinafine can thiệp chọn lọc
vào giai đoạn đầu của quá trình sinh tổng hợp ergosterol, dẫn đến sự thiếu hụt
ergosterol và làm tăng sự tích tụ nồng độ squalene trong nội tế bào và làm chết tế bào
nấm. Terbinafine phát huy tác dụng bằng cách ức chế squalene epoxidase trong màng
tế bào nấm [10].
Nói về khả năng kháng khuẩn và nấm của các hợp chất có nguồn gốc thực vật, đã
có nhiều nghiên cứu báo cáo về hoạt tính của các loại cây có khả năng kháng khuẩn và
nấm cao. Và khi so sánh với dịch chiết cao thô của củ cải trắng mà tôi nghiên cứu, tôi
nhận thấy rằng so với các loại cây khác, dịch chiết cao thô của củ cải có hoạt tính
tương đối cao. Mặc dù dịch chiết cao thô của củ cải không phải là loại cây có hoạt tính
kháng khuẩn và nấm cao nhất nhưng nó cũng được xem là một trong những loại cây
lấy củ có khả năng kháng và diệt khuẩn tốt. Cụ thể như sau:
- Zdenka Cvetni (2004), nghiên cứu về chiết xuất từ hạt bưởi có khả năng
kháng các vi khuẩn thử nghiệm. Chiết xuất ethanol cho thấy hoạt tính thấp (vùng ức
chế 10 - 12 mm) đối với các chủng vi khuẩn khảo nghiệm B. cereus, S. aureus. Kết
quả thu được cụ thể như sau: B. cereus 12 mm, S. aureus 10 - 12 mm. Riêng đối với
P. aeruginosa thì kết quả cho thấy chiết xuất từ hạt bưởi không có tác dụng đối với vi
khuẩn này. Nhìn chung, nghiên cứu này cho thấy hoạt tính kháng khuẩn của chiết xuất
tương đối thấp, so với nghiên cứu về cao củ cải trắng thì thấp hơn nhiều và cao củ cải
trắng còn có khả năng kháng được P.aeruginosa với kết quả kháng cao [9].
- Theo khảo sát của Võ Thị Mai Hương (2009) về hoạt tính kháng khuẩn của lá
muồng trâu được thử nghiệm với các chủng vi sinh vật cho thấy lá có khả năng kháng
khuẩn tương đối tốt. Đem dịch chiết này tiến hành thử nghiệm với các chủng vi khuẩn
được tuyển chọn (trong đó có S. aureus), kết quả cho thấy khả năng kháng của dịch
chiết này đối với S. aureus là 18,30 ± 0,75 mm. So với cao củ cải trắng ở nồng độ
1600 mg/ml là 16,78 ± 0,67 mm, cho thấy khả năng kháng của cao củ cải trắng so với
dịch chiết nguyên chất của lá muồng trâu không chênh lệch nhiều và tương đối cao
[45].
- Theo kết quả nghiên cứu của Faiyaz A và cộng sự (2012) từ hạt củ cải đối với
các chủng vi khuẩn gây bệnh như S. aureus, P. aeruginosa, S. typhi. Theo nghiên cứu
này thì hạt củ cải chiết xuất từ ethanol có hoạt tính kháng khuẩn cao nhất và đường
kính nằm trong khoảng từ 12 - 21 mm. Đối với kết quả từ cao củ cải của chúng tôi đối

với các chủng vi khuẩn thử nghiệm gồm S. aureus, P. aeruginosa, S. typhi thì đường
kính vòng kháng khuẩn ở nồng độ 1600 mg/ml lần lượt là 16,78 mm, 17,89 mm và
13,67 mm. Dựa vào kết quả trên, hoạt tính kháng khuẩn từ cao củ cải là tương đương
với chiết xuất từ hạt củ cải [11].
- Theo báo cáo của Jinxu Sun (2012) về quả mâm xôi nhằm xác định hoạt tính
kháng khuẩn của quả này với các chủngvi khuẩn. Kết quả thu được từ thử nghiệm trên
nhiều loại vi khuẩn như E.coli, S. aureus, B. subtiỉis,...Riêng với S. aureus thì đường
kính vòng kháng khuẩn theo báo cáo này đạt 13,50 mm. So với nồng độ cao 1600
mg/ml thì cao củ cải có hoạt tính cao hơn và đường kính vòng kháng khuẩn đạt đến
16,78 mm [32].
- Nghiên cứu của Hoàng Văn Tuấn (2013) cũng đã khẳng định dịch chiết giàu
ílavonoid từ cây diếp cá khi trích ly bằng ethanol với hàm ẩm 19,21% có tác dụng
kháng khuẩn trên 4 đối tượng nghiên cứu gồm B. subtilis 18 mm, E. coli 17 mm, P.
aeruginosa 14 mm, S. aureus 20 mm. So sánh với cao củ cải trắng của chúng tôi đối
với 2 chủng P. aeruginosa và S. aureus, chúng tôi nhận thấy cao củ cải trắng có hoạt
tính cao hơn ở P. aeruginosa và thấp hơn ở S. aureus so với dịch chiết từ cây diếp cá.
Và kết quả cao củ cải chúng tôi ghi nhận đường kính kháng khuẩn đối với P.
aeruginosa và S. aureus lần lượt là 17,89 mm và 16,78 mm [38].
Antara Sen (2004), nghiên cứu về chiết xuất từ lá Melia azedarach L có khả năng
kháng các vi khuẩn và nấm thử nghiệm. Chiết xuất ethanol, methanol, este dầu hỏa,
nước cho thấy hoạt tính cao (vùng ức chế 20 - 22 mm) đối với các chủng vi khuẩn
khảo nghiệm A. flavus. Kết quả thu được cụ thể lần lượt như sau: A. flavus 21,5 ± 0,32;
18,3 ± 0,54; 17,5 ± 0,56; 11,3 ± 0,41 mm. Nhìn chung, nghiên cứu này cho thấy hoạt
tính kháng khuẩn của chiết xuất tương đối cao, so với nghiên cứu về dịch chiết cao thô
của củ cải trắng thì tương đối cao hơn [5].
Qua nghiên cứu trên, nhận thấy rằng các thành phần trong cao củ cải trắng có
hoạt tính kháng khuẩn và nấm hiệu quả, là cơ sở cho việc nghiên cứu về các loại virus
và phân lập cũng như phân tích các hợp chất, thành phần có trong đó để ứng dụng vào
thực tiễn và các nghiên cứu y học, dịch tễ.

KẾT LUẬN
Qua thời gian thực hiện đề tài “Khảo sát hoạt tính kháng khuẩn từ dịch chiết của
củ cải trắng (Raphanus sativus L.) ”chúng tôi thu được các kết quả như sau:
- Kết quả định tính cho thấy các hợp chất có trong cao củ cải trắng thu được bao
gồm: flavonoid, alkaloid và tannin.
- Kết quả khảo sát về hoạt tính của cao củ cải đối với các chủng vi khuẩn được
thử nghiệm cho thấy ở nồng độ cao 1600 mg/ml đạt đường kính vòng kháng khuẩn cao
nhất ở 4 loại chủng khuẩn và loại chủng mốc và ở nồng độ cao 100 mg/ml thì cao củ
cải trắng vẫn còn hoạt tính kháng. Ngoài ra, ở nồng độ 1600 mg/ml nhận thấy cao củ
cải có khả năng kháng tốt hơn kháng sinh ampicillin, tetracycline và tương đương với
hai loại kháng sinh còn lại là gentamycin, terbinafine.
Các kết quả trên sẽ là nghiên cứu tiền đề khi triển khai ứng dụng dịch chiết của
củ cải vào sản xuất, chế biến một số thực phẩm có hoạt tính kháng khuẩn hay bảo quản
thực phẩm theo hướng dùng các hợp chất sinh học tự nhiên, an toàn.

TÀI LIỆU THAM KHẢO
> Tài liệu bằng tiếng anh:
[1] . Adnan, S., Paterson, DL., Lipman, J., Roberts, JA., 2013,
‘Ampicillin/sulbactam: its potential use in treating infections in critically ill
patients’, International Journal of Antimicrobial Agents, Vol 42, No. 5, pp. 384-389.
[2] . Agarwal, Kumkum, Varma, Ranjana, 2014, ‘Radical Scavenging Ability and
Biochemical Screening of a Common Asian Vegetable - Raphanus sativus
L.’,Intemational Journal of Pharmaceutical. Sciences Review and Research, Vol. 27,
No. 1, pp. 127 - 134.
[3] . Akova, M., 2008, ‘Sulbactam-containing beta-lactamase inhibitor
combinations’, European Society of Clinical Microbiology and Infectious
Diseases,Vol.14, Suppl 1, pp. 185- 188.
[4] . Akul Mehta, 2011, Mechanism of Action of Tetracyclines, 27 May
2011,<http://pharmaxchange.info/press/2011/05/mechanism-of-action-of-tracyclines/>
[5] . Antara Sen và Amla Batra, 2012, ‘ Evaluation OfAntimicrobial Activity Of
Different Solvent Extracts Of Medicinal Plant: Melia Azedarach L.’, International
Journal Of Current Pharmaceutial Research, Vol. 4, pp. 975 - 7066.
[6] . Aruna, G., et al., 2012, 'Photochemistry and pharmacology of Raphanus
sativus’. International Journal of drug formulation and research, Vol. 3, Issue 1, pp. 43
- 52.
[7] . Begg, F.J., et al., 1995,‘Aminoglycosides - 50 years on’, British Journal of
Clinical Pharmacology, Vol. 39, No. 6, pp. 597 - 603.
[8] . CAB International, 2006. Crop Protection Compendium, 2006 Edition
Wallingford, UK: CaB International. www.cabicompendium.org/cpc,S'e/ec/e<7 texts for
Fusarium.
[9] . Cvetni, Zdenka, 2004, ‘Antimicrobial activity of grapefruit seed and pulp
ethanolic extract’, Acta Pharmaceutica, Vol. 54, No. 3, pp. 243 - 250.
[10] . C. J. Jessup et al., 2000, ‘An Evaluation Of The In Vitro Activity Of
Terbinafine’, Medied Mycology, Vol. 38, pp. 155 - 159.

[11] . Faiyaz, A., Izharul, H., Danish, K. Chishti, Haqeeq, A., 2012,
‘Antibacterial activity of Raphanus sativus Linn. Seed extract’, Global journal of
medical research, Vol. 12, Issue 11, Version 1.0, pp. 24 - 33.
[12] . Gutierrez, Rosa M.P., Perez, Rosalinda L., 2004, 'Raphanus sativus
(Radish): their chemistry and biology’, The Scientific Word journal, Vol. 4, pp. 811 -
837.
[13] . H. Caglar Kaymak và Faika Yarali và Mesude Figen DONMEZ 2015, ‘The
Effects ofBio-priming with PGPR on Germination of Radish (Raphanus sativus L.)
Seeds under Saline Conditions’, Turkish Journal of Agriculture and Forestry, Vol. 33,
pp. 23 - 28.
[14] . Hirotaka Katsuzaki và Masnobu Ota, 2004, 'Chemistry and antioxidative
activity of hot water extract of Japanese radish (daikon) Article in BioFactors,
Vol. 21, pp. 211-400.
[15] . Hauser, Alan R.. 2013. Antibiotic Basics for Clinicians. Lippincott
Williams and Wikins, pp. 25-28.
[16] . Jones, L. J. L., Thorpe, J. P., Wallis, G. P., 1982, 'Genetic divergence in
four species of the genus Raphanus: Implications for the ancestry of the domestic
radish R. sativus’. J. Linnean Society, Vol. 18, No. 1, pp. 35 - 48.
[17] . Jahan, M.G.S., et al., 2014, ' Correlation between P-amylase activity and
starch content in different cultivars of radish (Raphanus sativus L.) ’, Biotechnology,
Vol. 9, No. 7, pp. 298 - 302.
[18] . Janiua, Safia., Shahid, Maliha., Fakhir-i-Abbas, 2013, ‘Phytochemical
nanlysis and in vitro antibacterial activity of root peel extract of Raphanus sativus
L.var niger’, Advancement in Medical plant research, Vol. 1, No. 1, pp. 1- 7.
[19] . K. Agarwal, R. Varma , 2014, ‘ Wound Healing Biomaterials’, Functional
Biomaterials, Vol. 2.
[20] . Kole, C., 2007, ' Genome mapping and molecular breeding in plants’,
New York: Springer Berlin Heidelberg, Vol. 5: Vegetable.
[21] . Lim, T.K., 2015. Edible medicinal and non-medicinal plant. Springer
Dordrecht Heidelberg New York London, Vol. 9: Modified Stems, Roots, Bulbs, pp.
829 - 869.

[22] . Morgan, W., Midmore, D., 2003. Daikon in Australia. Rural industries
research and development corporation, pp. 2 - 4.
[23] . Narisa Kamkaen, Chantana Mekseepralard và Jenny Wilkinson, 2010,
‘Antimicrobial and Antioxidant Activities of Traditional Thai Herbal Remediesfor
Aphthous Ulcers ‘, Phytotherapy Research, Vol. 24, pp. 31 - 51.
[24] . Ningthoujam, Debananda Singh, Ningthoujam, Shovarani, 2008, ‘Isolation
and Characterization of a Pseudomonas aeruginosa Strain DN1 Degrading p-
Nitrophenol’, Research Journal of Microbiology, Vol. 3, No. 5, pp. 345 - 351.
[25] . R. Jakmatakul, Rutt Suttisri và Parkpoom Tengamnuay, (2009),
‘Evaluation of antityrosinase and antioxidant activities of Raphanus sativus root:
Comparison between freeze-dried juice and methanolic extract’, Thai Journal of
Pharmaceutical Sciences, Vol. 33, pp. 22 - 33.
[26] . Rafal Klajn, 2002, Chemistry and chemical biology of tetracyclines,
12/12/2002, <http://www.chm.bris.ac.uk/motm/tetracycline/antimicr.htm .>
[27] . Rafailidis, PI., Ioannidou, EN., Falagas, ME., 2007, ‘Ampicillin/Sulbactam
Current Status in Severe Bacterial Infections’, Drugs, Vol 67, No. 13, pp. 1829-1849.
[28] . Sarowar Jahan, M. G., et al., 2011, 'Screening of some enzyme and
nutrients in radish (Raphanus sativus L.) roof, Philippine Journal of Veterinary and
Animal Sciences, Vol. 37, pp. 89 - 100.
[29] . Senthilkumar, A., Venkatesalu, V.,2013, ‘Chemical constituents, in vitro
antioxidant and antimicrobial activities of essential oilfrom thefruit pulp of wood
apple’, Industrial Crops and Products, Vol. 46, pp. 66 - 72.
[30] . Singh, Preeti, Singh, Jaspal, 2013, 'Medical and therapeutic utilities of
Raphanus sativus’, International Journal of plant, animal and environmental Sciences,
Vol. 3, Issue 2, pp. 103 - 105.
[31] . Surekha Shukla et al., 2011,‘Antimicrobial Efficacy OfRaphanus Sativus
Root Juice’, International Joural Of Pharmacy and Pharmaceutical Sciences, Vol 3,
No 5, pp 89 - 92.
[32] . Sun, J., Zhu HX., Guo J., Xiao DG., 2012, ‘Antimicrobial action of
purified raspberryflavonoid’, African Journal of Biotechnology, Vol. 11, No. 11, pp.
2704 - 2710.

Đề tài: Hoạt tính kháng khuẩn từ dịch chiết của củ cải trắng, HAY

Đề tài: Hoạt tính kháng khuẩn từ dịch chiết của củ cải trắng, HAY

Recommended

Recommended

More Related Content

What's hot

What's hot (20)

Similar to Đề tài: Hoạt tính kháng khuẩn từ dịch chiết của củ cải trắng, HAY

Similar to Đề tài: Hoạt tính kháng khuẩn từ dịch chiết của củ cải trắng, HAY (20)

More from Dịch vụ viết bài trọn gói ZALO: 0909232620

More from Dịch vụ viết bài trọn gói ZALO: 0909232620 (20)

Recently uploaded

Recently uploaded (20)

Đề tài: Hoạt tính kháng khuẩn từ dịch chiết của củ cải trắng, HAY