2. PENDAHULUAN
Pada dasarnya, sel mengandung dua asam nukleat yaitu DNA dan RNA. DNA
terletak pada kromosom, dijumpai di nukleus, mitokondria dan kloroplas. Sedangkan RNA
dijumpai di nukleus, sitoplasma, dan ribosom. DNA ada dalam setiap selmakhluk hidup.
Zat ini disebut cetak biru kehidupan karena memiliki peranan yang sangat penting, yaitu
sebagai pembawa informasi hereditas yang penentu struktur protein dan proses
metabolisme lain. DNA bisa mengalami denaturasi dan renaturasi. Banyak hal yang
mempengaruhi prosestersebut, antara lain suhu tinggi lainnya, pH ekstrim, kandungan
elektrolit Na+ atau K+ dan komposisi basa C-G.
Untuk mendapatkan DNA murni dari suatu sel dalam jaringan tubuh makhluk
hidup dapat dilakukan suatu teknik isolasi DNA. Zubaidah (2004: 38) menyatakan bahwa
isolasi DNA dapat dilakukan dengan berbagai cara, akan tetapi pada setiap jenis maupun
bagian tanaman dapat menimbulkan masalah yang berbeda antara lain karena adanya
senyawa polifenol dan polisakarida dalam konsentrasi tinggi yang dapat menghambat
pemurnian DNA dan juga mempengaruhi enzim-enzim seperti polimerase, ligase, restriksi
endonuklease, atau enzim untuk kegiatan molekuler lain yang dapat menyebabkan DNA
tidak dapat digunakan untuk aplikasi penelitian.
APA ITU DNA ?
2
3. ALAT DAN
BAHAN
ALAT
• BEAKER GELAS
• PISAU
• PENGADUK
• PENYARING
• BLENDER
• SPATULA
• TABUNG REKASI DAN RAK TABUNG
REKASI
• GELAS KIMIA
• PIPET TETES
• GELAS UKUR
• CORONG SARING
BAHAN
• BUAH(TOMAT, PAPAYA, PISANG,
STROBERI, SAWI, KANGKUNG)
• DETERJEN
• GARAM DAPUR (NaCl)
• ETANOL 96 %
• ES BATU
3
4. CARAKERJA
A. DETERJEN DILARUTKAN KE DALAM 60 ML AQUADES, DIADUK PERLAHAN SELAMA
15 MENIT DAN JANGAN SAMPAI BERBUSA.
B. AMBIL 100 GR DAGING BUAH DITAMBAH 100 ML AQUADES, DIMAUKAN KE DALAM
MESIN BLENDER, KEMUDIAN DIBLENDER SELAMA 40 DETIK
C. LALU CAMPURKAN MASING-MASING 4 ML LARUTAN SABUN DENGAN 4 ML JUS
BUAH.
D. TAMBAHKAN 1 SPATULA GARAM DAPUR KEMUDIAN DIADUK SELAMA 10 MENIT
SAMPAI DIPEROLEH CAMPURAN YANG HOMOGEN
E. LALU, SARING CAMPURAN YANG DIHASILKAN PADA POIN SEBELUMNYA SEBANYAK
2 KALI
F. 6 ML HASIL PENYARINGAN PADA TITIK DIATAS DIMASUKAN KE DALAM TABUNG
REAKSI DAN TAMBAHKAN 5 ML ETANOL 96% DINGIN
G. AMATI PROSES TIMBULNYA DNA, MELIPUTI WAKTU YANG DIPERLUKAN,BENTUK,
WARNA, SRTA BANYAK SEDIKITNYA DNA YANG TERBENTUK
5. PEMBAHASAN
Isolasi DNA merupakan tahap terpenting dalam analisis biologi molekuler. Teknik-
teknik isolasi DNA yang telah dikembangkan sangat mahal dan menambahkan waktu
yang lama. (Listanto,1996). DNA dapat diisolasi dari berbagai sel atau jaringan baik
hewan, tumbuhan maupun manusia. Isolasi DNA merupakan teknik awal dalam
pemanfaatan DNA untuk berbagai tujuan. Sebenarnya telah ada metode standar dalam
Iso DNA. Isolasi DNA dari sel maupun jaringan eukariotik, misalnya dari jaringan
tumbuhan maupun hewan dilakukan melalui tahap penghancuran sel (lisis), penghilangan
RNA dan protein serta pemurnian DNA. DNA isolasi ini membutuhkan alat-alat canggih
dan bahan-bahan yang cukup mahal, misalnya EDTA ( Etilendiamin tetra asetat ) yang
berfungsi sebagai merusak sel dengan cara mengikat ion Magnesium yang berfungsi
mempertahankan integritas sel, SDS ( Sodium dodesil sulfat ) yang dapat melarutkan
membrane sel, mendenaturasi protein, enzim proteinase K yang mendegradasi protein,
RNAse mendegradasi RNA serta NaCl dan kloroform untuk memurnikan DNA.
DNA
5
8. DAFTAR PUSTAKA
Listanto, E., S.J. Pardal, and K. Wang. 1996. A simple
method of DNA isolation from transgenic maize
plant for polymerase chain reaction. Indones.
J. Agric. Biotechnol. (1)1:33-38.