Download to read offline
More Related Content
28798ip
- 1. РЕСПУБЛИКА КАЗАХСТАН (19) KZ(13) A4 (11) 28798 (51) A61K 36/286 (2006.01) КОМИТЕТ ПО ПРАВАМ ИНТЕЛЛЕКТУАЛЬНОЙ СОБСТВЕННОСТИ МИНИСТЕРСТВА ЮСТИЦИИ РЕСПУБЛИКИ КАЗАХСТАН ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ К ИННОВАЦИОННОМУ ПАТЕНТУ (21) 2013/1418.1 (22) 23.10.2013 (45) 15.08.2014, бюл. №8 (72) Тургумбаева Акнур Аманбековна; Бурашева Гаухар Шахмановна; Устенова Гульбарам Омаргазиевна; Конырбеков Мырзабек; Рахимов Кайролла Дюсенбаевич (73) Республиканское государственное предприятие на праве хозяйственного ведения "Казахский национальный медицинский университет им. С.Д. Асфендиярова" Министерства здравоохранения Республики Казахстан (56) Патент RU №2236863, 27.09.2004 (54) СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ БИОЛОГИЧЕСКИ АКТИВНОГО ВЕЩЕСТВА (57) Изобретение относится к области фармации и касается способа получения биологически активного вещества (комплекс флавоноидов), обладающего антидиабетической цитотоксической активностью. Способ получения биологически активного вещества включает обработку растительного сырья экстрагентом, представляющим собой 70%-ный водный раствор этилового спирта, концентрирование экстракта, отделение из экстракта смолистых веществ, получение целевого продукта, при этом в качестве растительного сырья используют измельченную до мучного состояния надземную массу цветка сафлоры казахстанского вида «Акмай», экстрагирование проводят при комнатной температуре в течение 3 суток, затем экстрагирование повторяют, концентрирование экстракта осуществляют под вакуумом при температуре 40-55°С в течении 15 минут, отделение смолистых веществ из экстракта осуществляют путем последовательной экстракции петролейным эфиром, гексаном, хлороформом, этилацетатом, при этом полученный бутанольный экстракт концентрируют в течении 15 минут под вакуумом при температуре 40-55°С, для получения целевого продукта бутанольный экстракт промывают на колонке с силикогелем смесью 70% этанол- хлороформ и 100% этанол. Разработанный способ легко осуществим, экологически безопасен и обеспечивает высокое качество конечного продукта. Может быть рекомендован для широкого внедрения в практику. (19)KZ(13)A4(11)28798
- 2. 28798 2 Изобретение относится кобласти фармации и касается способа получения биологически активного вещества (комплекс флавоноидов), обладающего антидиабетической цитотоксической активностью. Известен способ получения биологически активного вещества водного экстракта чаги, включающий экстрагирование измельченной чаги горячей водой при соотношении чага: вода 1: (9-11) при температуре 60-70°С ступенчато в экстракторе, на первой ступени экстрагирование ведут в СВЧ- печи с получением водного экстракта первой ступени экстрагирования, затем экстрактор вынимают из СВЧ-печи и на второй ступени экстрагирования продолжают экстрагировать экстракт первой ступени в течение 1-4 часов с получением готового водного экстракта (Патент RU №2343930, МПК7 А61K 36/06, B01D 11/02, опубл. 20.12.2007). Недостатком известного способа является низкое содержание экстрактивных веществ, низкая антиоксидантная активность экстракта, длительность и многостадийность процесса, высокая температура экстрагирования, короткий срок годности экстракта чаги. Известен способ получения биологически активного вещества сухого экстракта бессмертника (Фармакопейная статья "Extractum Helichrysi siccum. Экстракт бессмертника сухой". ФС 42-246-87 от 21.07.87). Основной группой действующих веществ этого растения являются флавоноидные соединения. При получении экстракта цветки бессмертника измельчают и экстрагируют 10% этиловым спиртом. Далее спирт отгоняют и высушивают полученный экстракт. К недостаткам известного способа относится то, что он не обеспечивает полноту экстракции суммы флавоноидов из растительного сырья, а лишь флавоноиды высокой степени гликозилирования. Известен способ получения биологически активного вещества комплекса флавоноидов - препарата флавитекс (Патент RU №2236863, МПК А61K 35/78, опубл. №27 от 27.09.2004). Способ получения комплекса биофлавоноидов, включающий обработку растительного сырья (опилки древесины лиственницы) экстрагентом, представляющим собой 60-70%-ный водный раствор этилового спирта при нагревании, упаривание экстракта, отделение смолистых веществ, нагревание экстракта перед кристаллизацией, проведение кристаллизации, очистку и выделение целевого продукта осуществляют из водного раствора изопропанола или этанола в присутствии активированного угля при нагревании смеси до кипения, при этом целевой продукт выделяют при охлаждении. Недостатки способа заключаются в сложной технологической цепочке, требующей соответствующего оборудования, а также вероятность выпадения осадка экстрактивных веществ при хранении, отсутствие компактности и невозможность дальнейшего использования в производстве других технологически более совершенных лекарственных форм, таких как капсулы, таблетки. Задачей настоящего изобретения является разработка способа получения биологически активного вещества на основе надземной массы цветка сафлоры казахстанского вида «Акмай», лишенного недостатков известных из уровня техники. Способ получения биологически активного вещества включает обработку растительного сырья экстрагентом, представляющим собой 70%-ный водный раствор этилового спирта, концентрирование экстракта, отделение из экстракта смолистых веществ, получение целевого продукта, при этом в качестве растительного сырья используют измельченную до мучного состояния надземную массу цветка сафлоры казахстанского вида «Акмай», экстрагирование проводят при комнатной температуре в течение 3 суток, затем экстрагирование повторяют, концентрирование экстракта осуществляют под вакуумом при температуре 40-55°С в течении 15 минут, отделение смолистых веществ из экстракта осуществляют путем последовательной экстракции петролейным эфиром, гексаном, хлороформом, этилацетатом, при этом полученный бутанольный экстракт концентрируют в течении 15 минут под вакуумом при температуре 40-55°С, для получения целевого продукта бутанольный экстракт промывают на колонке с силикогелем смесью 70% этанол- хлороформ и 100% этанол. Способ осуществляют следующим образом. В качестве растительного сырья используют надземную массу цветка сафлоры казахстанского вида «Акмай». Сухое растительное сырье (цветок сафлоры) собирают летом, сушат, затем измельчают до мучного состояния. Экстрагирование осуществляют методом настаивания 70%-ным водным раствором этилового спирта при комнатной температуре в течении 3 суток, при соотношении сырье: экстрагент 1:5. Экстракцию повторяют дважды. Концентрирование экстракта проводят под вакуумом при температуре 40-55°С в течении 15 минут. Объединенный экстракт концентрируют. Отделение смолистых веществ из экстракта осуществляют путем последовательной экстракции петролейным эфиром, гексаном, хлороформом, этилацетатом, а также бутанолом. При этом полученный бутанольный экстракт концентрируют в течении 15 минут под вакуумом при температуре 40-55°С в течении 15 минут, целевой продукт получают путем промывания полученного бутанольного экстракта на колонке с силикогелем смесью 70% этанол-хлороформ и 100% этанол. Концентрирование всех экстрактов проводят под вакуумом при температуре 40-55°С, потому что при повышении температуры происходит процесс окисления действующих веществ. Полученное биологически активное вещество представляет собой порошок темно-коричного цвета, хорошо растворимый в воде и 15% этиловом спирте.
- 3. 28798 3 Пример выполнения способа.В качестве растительного сырья использовали надземную часть цветка сафлоры казахстанского вида «Акмай» (300 г измельченного до 4-6 мм). Сырье экстрагировали 70%-ным раствором этилового спирта при соотношении сырье: экстрагент 1:5. Экстрагирование проводили при комнатной температуре в течение 3 суток, затем экстрагирование повторяли. Концентрирование экстракта осуществляли под вакуумом при температуре 40-55°С в течении 15 минут, Отделение смолистых веществ из экстракта проводили путем последовательной экстракции петролейным эфиром, гексаном, хлороформом, этилацетатом, при этом полученный бутаноловый экстракт концентрировали в течении 15 минут под вакуумом при температуре 40-55°С, целевой продукт получали путем промывания полученного бутанолового экстракта на колонке с силикогелем смесью 70% этанол-хлороформ и 100% этанол. Бутанольный экстракт поставили на колонку с силикагелем и промывали 1%, 2.5%, 5%, 10%, 15%, 20%, 25%, 30%, 35%, 40%, 50%, 60%, 70% этанол- хлороформ и 100%) этанолом. Собрано 25 фракций. Из фракции бутанольного экстракта были обнаружены на ТСХ (проявитель 10% H2SO4) агликоны флаваноидов, и их моногликозиды, кверцетин. Наилучший результат для получения целевого продукта был получен путем промывания полученного бутанольного экстракта на колонке с силикогелем смесью 70% этанол-хлороформ и 100% этанол. Полученное биологически активное вещество представляет собой порошок темно-коричного цвета, хорошо растворимый в воде и 15% этиловом спирте. При использовании данных условий экстрагируются до 50% биологически активных веществ. Бутанольный экстракт. 3-О-β-D-глюкопиранозид -кверцетина R= R1= R2=OH 3-0-β-D-галактопиранозид кверцетина R= R1= R2=OH Целевой продукт - полученное биологически активное вещество проявляет цитотоксическую и антидиабетическую активность. Полученное средство проявляет антидиабетическую активность - 49,8% (LD50 - 79,5996ug/ml). Шифр вещества Концентрация компонента (мкг/мл) Изучаемое вещество Контроль NaVO3 IС50 Carthamus tinctorius 100 49,8% 100% 33,9079ug/ml Предлагаемый способ позволяет получить средство, содержащее флавоноиды, проявляющее антидиабетическую, активность. Антидиабетическая активность биологически активного вещества, полученного из надземной массы цветка сафлоры казахстанского вида «Акмай» выявлена впервые, была изучена в Синьзянском техническом институте химии и физики г. Урумчи (КНР), в качестве контроля использован NaVO3. Выявлена также цитотоксическая активность биологически активного средства, полученного из надземной массы цветка сафлоры казахстанского вида «Акмай». Таким образом, разработанный способ получения биологически активного вещества, содержащего флавоноиды, из надземной части цветка сафлоры казахстанского вида «Акмай» позволяет упростить технологию и получить целевой продукт. Разработанный способ легко осуществим, экологически безопасен и обеспечивает высокое качество конечного продукта. Может быть рекомендован для широкого внедрения в практику. ФОРМУЛА ИЗОБРЕТЕНИЯ Способ получения биологически активного вещества, включающий обработку растительного сырья экстрагентом, представляющим собой 60- 70%-ный водный раствор этилового спирта, концентрирование экстракта, отделение смолистых веществ, получение целевого продукта, отличающийся тем, что в качестве растительного сырья используют измельченную до мучного состояния надземную массу цветков сафлоры казахстанского вида «Акмай», экстрагирование проводят при комнатной температуре в течение 3 суток, затем экстрагирование повторяют, концентрирование экстракта осуществляют под вакуумом при температуре 40-55°С в течении 15 минут, отделение смолистых веществ из экстракта осуществляют путем последовательной экстракции петролейным эфиром, гексаном, хлороформом,
- 4. 28798 4 этилацетатом, при этомполученный бутаноловый экстракт концентрируют в течении 15 минут под вакуумом при температуре 40-55°С, целевой продукт получают путем промывания полученного бутанолового экстракта на колонке с силикогелем смесью 70% этанол-хлороформ и 100% этанол. Верстка Ж. Жомартбек Корректор Е. Барч