CDE bulanan Klinik Pergigian Peringgit (oleh Dr Norazreen Abdul Jalil)

1. UJIAN KEBERKESANAN AUTOKLAF

2. KANDUNGAN
• PENSTERILAN
• AUTOKLAF
• UJIAN KEBERKESANAN AUTOKLAF

3. PENSTERILAN
• Proses memusnahkan mikroorganisma scr menyeluruh termasuk
fungal, virus, protozoa & bakteria (+spora) yg boleh menyebabkan
jangkitan kpd sistem kesihatan tubuh badan

4. Kaedah-kaedah pensterilan
1.Agen fizikal
‘Moist heat’ @ stim (eg : autoklaf)
‘Dry heat’
Radiasi (eg : gamma, ultra-violet, etc)
2.Agen kimia
Gas (eg : ethylene oxide, ozone, etc)
‘Liquid & vapor’ (eg : hydrogen peroxide, glutaraldehyde, etc)

5. ‘Steam sterilization’
• Kaedah pensterilan menggunakan stim (saturated steam) @ wap tepu yg bersuhu
tinggi & bertekanan tinggi
• Berbanding kaedah pensterilan menggunakan ‘dry heat’, pensterilan menggunakan
stim (moist heat sterilization) merupakan kaedah yg sangat efektif krn stim
(saturated steam) @ wap tepu yg terhasil itu mengandungi sejumlah ‘tenaga haba’
yg tinggi ; yg boleh membunuh mikroorganisma dgn lebih cepat & berkesan
• Apabila ‘distilled water’ dipanaskan di bawah tekanan (pressure) tertentu, ia akan
menghasilkan stim (mengandungi tenaga haba yg tinggi) yg boleh membunuh
mikroorganisma
• Prinsip dlm kaedah ‘steam sterilization’ adalah utk mendedahkan item yg nak disteril
kpd stim yg telah terhasil pd suhu, tekanan & masa tertentu bagi membolehkan
proses pensterilan berlaku (item mesti ada ‘direct contact’ dgn stim tanpa ada
sebarang halangan & stim mesti berupaya mencapai ke semua permukaan item yg
nak disteril)

6. • Sebab-sebab yg boleh mengurangkan keberkesanan @ menggagalkan proses
pensterilan :
Instrumen kotor
Autoklaf ‘chamber’ yg terlalu padat dgn peralatan
Pendedahan kpd stim @ ‘moist heat’ yg tidak mencukupi
• Kunci kpd keberkesanan kaedah pensterilan ini adalah :
Udara mesti disingkirkan sepenuhnya dari ‘chamber’ autoklaf & liang / ruang
yg terdapat pada ‘load’ @ item yg nak disteril
Ruang yg telah dikosongkan oleh udara tadi, mesti dipenuhkan dgn stim
(saturated steam) yg terhasil dlm autoklaf – stim yg terhasil tsb akan
mensterilkan item yg terdapat dlm autoklaf

7. • Kebaikan kaedah ‘steam sterilization’ :
‘sporicidal’ (membunuh & memusnahkan mikroorganisma + spora)
‘non-toxic’ (sbb guna stim ; tak menggunakan bahan kimia)
‘inexpensive’ (tak perlu kos yg tinggi)
berupaya menembusi item spt fabrik (tanpa merosakkan struktur fabrik tsb)
membunuh mikroorganisma dlm masa yg singkat (stim yg diguna
mengandungi ‘tenaga haba’ yg tinggi)
• Terdapat 4 parameter yg dititikberatkan dlm kaedah ‘steam sterilization’ :
1.Stim
2.Tekanan (pressure)
3.Suhu (temperature)
4.Masa (time)

8. 1.Stim
• ‘Load’ (item yg nak disteril) mesti ada ‘direct contact’ dgn stim (saturated
steam) bagi membolehkan stim memindahkan ‘tenaga haba’nya (thermal
energy) kpd item yg nak disteril
• Jumlah ‘tenaga haba’ yg tersimpan di dlm stim (moist heat) adalah lebih
tinggi berbanding ‘dry heat’ atau air yg berada pd suhu yg sama
• Sbg cth, sebanyak 419 kJ/kg tenaga diperlukan utk memanaskan air dari suhu
0⁰C hingga 100 ⁰C. Manakala, sebanyak 2257kJ/kg tambahan tenaga pula yg
diperlukan utk menghasilkan stim pada tekanan atmosfera ; yg mana tenaga
tambahan yg terdapat pada stim inilah yg akan ditukarkan kpd ‘tenaga haba’
utk membunuh mikroorganisma yg terdapat pada peralatan yg nak disteril
• Bagi membolehkan stim memindahkan tenaga ‘haba’nya yg tersimpan ke atas
item yg nak disteril, stim mestilah di’tumpu’ & di’padat’kan ke atas item tsb

9. 2.Tekanan
• Tekanan diperlukan utk meningkatkan suhu dlm autoklaf -> Apa kaitan antara tekanan vs
suhu…?
• Secara asasnya, bila air @ sesuatu cecair dipanaskan, molekul air @ cecair akan menyerap
‘tenaga haba’ dari proses pemanasan tsb. Ini akan menyebabkan, molekul-molekul air tadi
akan bergerak dgn lebih cepat & bila ia mencecah kpd takat didih (boiling point), molekul
air tsb berjaya mengatasi tekanan luar (external pressure) dari atmosfera & akhirnya
terbebas ke atmosfera @ udara lalu bertukar menjadi gas (stim)
• Konsep dlm kaedah ‘steam sterilization’ adalah ; bila tekanan luar ditambahkan ke atas
permukaan air @ cecair, lagi susah molekul-molekul air tadi nak terbebas ke udara utk
membentuk stim (ini menyebabkan takat didih air akan jadi semakin meningkat)
• Bila takat didih air semakin meningkat, maka lebih banyak ‘tenaga haba’ yg diperlukan
oleh molekul air utk terbebas ke udara @ atmosfera utk membentuk gas (stim)
• Jadi, suhu perlu ditingkatkan agar molekul-molekul air tadi mendapat lebihan ‘tenaga
haba’ dari proses pemanasan tadi, bagi mengatasi tekanan dari luar & membolehkan
molekul air terbebas ke udara utk bertukar menjadi gas (stim)

10. 3.Suhu
• Kawalan ke atas suhu stim (saturated steam) di dalam ‘chamber’ autoklaf
adalah penting
• Ini krn peningkatan suhu adalah diperlukan bagi mengurangkan masa proses
pensterilan & membunuh mikroorganisma yg terdapat pada item yg nak
disteril
• Bagi kaedah ‘steam sterilization’, suhu yg disarankan adalah 121-134⁰C
suhu, masa yg diperlukan utk membunuh mikroorganisma

11. 4.Masa
• Masa pensterilan juga penting krn tidak semua mikroorganisma mati pada
kadar masa yg sama
• Utk membunuh keseluruhan mikroorganisma, ia memerlukan sejumlah
masa yg tertentu, pada kadar suhu yg tertentu
• Bagi kaedah ‘steam sterilization’, masa yg disarankan adalah sekitar 10-60
minit (bergantung kpd suhu yg digunakan)
suhu, masa yg diperlukan utk membunuh mikroorganisma
*lebih singkat masa pensterilan
• Lebih rendah suhu yg digunakan, lebih lama ‘exposure time’ yg diperlukan
utk mensterilkan ‘load’ @ item yg nak disteril

12. • Terdapat 3 ‘cycles’ @ fasa dlm kaedah ‘steam sterilization’ :
Fasa ‘conditioning’
Fasa ‘exposure’
Fasa ‘drying’

13. Fasa ‘conditioning’
• Udara akan disingkirkan dari ‘chamber’ autoklaf & ‘load’ (item yg nak disteril)
• Ia penting krn jika terdapat sebarang kehadiran udara dlm ‘chamber’ autoklaf
& ‘load’, ia boleh menghalang proses pemadatan & penembusan stim ke atas
item yg nak disteril & sekaligus menggagalkan proses pensterilan

14. Fasa ‘exposure’
• ‘Load’ akan didedahkan kpd stim (wap tepu yg bersuhu & bertekanan tinggi) ;
dan kemudiannya ‘load’ akan dikekalkan pada suatu suhu, tekanan & jangka
masa tertentu bagi membolehkan proses pensterilan berlaku dgn lebih
berkesan

15. Fasa ‘drying’
• Selepas fasa ‘exposure’, stim akan disingkirkan keluar dari ‘chamber’ autoklaf
& ‘load’ akan dikeringkan bagi mencegah rekontaminasi item yg telah disteril
oleh mikroorganisma melalui titisan-titisan air @ kelembapan yg terdapat
pada bungkusan item

16. AUTOKLAF
• Alat yg berfungsi utk menjalankan proses pensterilan (jenis ‘steam sterilization’) dgn
menggunakan stim @ wap tepu yg bersuhu tinggi & bertekanan tinggi
• Tekanan tinggi dlm ‘chamber’ autoklaf bukanlah bertujuan utk membunuh
mikroorganisma ; akan tetapi ia berfungsi utk meningkatkan suhu dalam autoklaf ;
yg mana suhu yg tinggi inilah yg akan menghasilkan stim yg mengandungi
kandungan ‘tenaga haba’ yg tinggi bagi membunuh mikroorganisma tsb ; dgn cara
merosakkan struktur protein & enzim pada mikroorganisma secara tidak berbalik
(irreversible damage)
• Utk memastikan proses pensterilan adalah berkesan, autoklaf mestilah berupaya
mencapai & mengekalkan suhu 121⁰C dlm ‘chamber’, selama sekurang-kurangnya 30
minit, dgn menggunakan wap tepu (saturated steam) pada tekanan minimum
sebanyak 15 psi
*psi = ‘pound per square inch’ (unit yg digunakan utk mengukur tekanan)

17. Jenis-jenis autoklaf
1.Autoklaf ‘vaccum’
2.Autoklaf ‘non-vacuum’

18. 1.Autoklaf ‘vacuum’
• Menggunakan sistem pam vakum utk menyingkirkan udara sepenuhnya
dari ‘chamber’ autoklaf & ‘load’ (item yg nak disteril)
• Ini bagi membolehkan proses penembusan stim berlaku ke atas ‘load’ &
menjadikan proses pensterilan lebih berkesan (serta mengelakkan
pembentukan ‘air pocket’ yg boleh menggagalkan proses pensterilan)

19. 2.Autoklaf ‘non-vacuum’
• Menggunakan sistem ‘non-vacuum’
• Eg : ‘Gravity displacement autoclave’
• Prinsipnya : stim lebih ringan dari udara, jadi stim yg di’pam’ masuk ke dalam
autoklaf akan menolak udara keluar dari ‘chamber’ autoklaf & stim tadi akan
mensterilkan ‘load’ @ item yg berada dlm autoklaf
• Autoklaf jenis ni, tak sedut udara keluar terlebih dahulu
• ‘Penetration time’ ke atas ‘load’ mengambil masa yg lama krn masih terdapat
sisa baki udara (air pocket) yg tertinggal akibat proses penyingkiran udara yg
tidak lengkap

21. Jenis-jenis ‘load’ dlm autoklaf
• ‘Porous load’
• ‘Non-porous load’
• ‘Hollow load @ instrument’

22. ‘Porous load’
• Item yg ada permukaan yg poros @ liang-liang halus (-jika air @ apa-apa
cecair tumpah, air @ cecair tu boleh tembus @ meresap masuk melalui
permukaannya)
• Eg : fabrik spt linen, gown, hood cover, towel, etc

24. ‘Non-porous load’
• Item yg tiada rongga, ruang @ liang-liang halus (susunan zarah-zarah padat)
sehinggakan tiada benda yg boleh tembus @ meresap masuk melalui
permukaannya (-jika air @ cecair tumpah pun, air @ cecair tu tak boleh
tembus @ meresap masuk melalui permukaannya)
• Eg : metal items (-stainless steel instruments, etc)
plastic items (-impression tray, etc)

26. ‘Hollow load @ instrument’
• Peralatan yg ada ‘corong’ @ saluran
• Di dalam kawasan ‘corong’ @ saluran tsb, biasanya terdapat kandungan udara
• Udara tsb perlu disingkirkan terlebih dahulu bagi membolehkan proses
pensterilan berlaku dgn lebih berkesan & menyeluruh
• Semakin panjang & sempit ‘corong’ tsb, semakin merumitkan proses
pensterilan
• Eg : pipette tip, high volume suction tip, Yankauer suction, triple air syringe tip,
dental handpiece, etc

28. UJIAN KEBERKESANAN AUTOKLAF
Ada 2 ‘indicator’ pensterilan utk autoklaf :
1.Ujian biologikal
biological indicator
*utk menilai keberkesanan proses pensterilan (sama ada mikroorganisma berjaya dibunuh @ tidak..?)
2.Ujian kimia
tape indicator
*utk buktikan bhw item yg disteril telah didedahkan kpd suhu yg betul (121⁰C) ketika proses pensterilan dijalankan
*tapi, tak boleh nak buktikan sama ada item tsb telah berjaya disteril @ tidak
strip indicator
*utk menilai keberkesanan proses penembusan stim (steam penetration) ke atas item yg disteril ketika proses pensterilan berlaku

29. 1.Ujian biologikal
• Tujuan utk menilai kemampuan proses pensterilan dalam membunuh mikroorganisma yg
‘highly resistance’
• Setiap ‘vials’ mengandungi :
spora ‘Geobacillus stearothermophilus’ yg ‘highly resistance’ terhadap proses pensterilan
(steam sterilization & vaporized hydrogen peroxide sterilization)
medium pertumbuhan (growth indicator media) yg bertindak sbg ‘indicator’ utk
menunjukkan sama ada pembiakan mikroorganisma berlaku @ tidak
*’growth indicator media’ berwarna UNGU & akan bertukar menjadi warna KUNING jika
pembiakan mikroorganisma berlaku
• Apabila ‘vials’ diletakkan di dalam autoklaf, spora ‘Geobacillus stearothermophilus’ akan
ternyah’aktif’ apabila didedahkan kpd wap tepu (saturated steam) yg terhasil akibat
tekanan tinggi & suhu tinggi (121⁰C) ; sekurang-kurangnya selama 20 minit
• Jika ‘indicator’ @ ‘vials’ tidak bertukar warna (= hasil keputusan adalah LULUS), ertinya
proses pensterilan adalah berkesan & mampu juga membunuh mikroorganisma lain yg juga
‘highly resistance’ @ patogen yg lebih lemah drp itu

30. • Tatacara ujian biologikal :
Sediakan jadual utk kakitangan yg ditugaskan membuat ujian tsb
Pastikan :
semua ‘indicator’ tidak melepasi tarikh luput
‘indicator’ yg digunakan sebagai `control’ adalah dari jenama yg sama
tiub ‘indicator’ tidak berubah warna @ retak
Edarkan kapsul ‘indicator’ kpd kakitangan yg ditugaskan utk menjalankan
ujian tsb
Nombor di kapsul ‘indicator’ dicatat mengikut nombor siri pada autoklaf

31. • Masukkan ‘indicator’ ke dalam ‘chamber’ autoklaf
• Jalankan proses pensterilan
• Selepas pensterilan, keluarkan ‘indicator’ dari autoklaf & sejukkan ‘indicator’ selama
10 minit pada suhu bilik
• Jalankan proses inkubasi dgn cara memasukkan ‘indicator’ ke dlm mesin ‘incubator’
(CONTROL & TEST)
*rujuk panduan pengeluar utk setiap jenama yg digunakan
• Utk CONTROL, gunakan ‘biological indicator’ yg tidak disteril
• Lihat perubahan warna pada medium pertumbuhan :
CONTROL : sepatutnya warna ‘kuning’ (ada pembiakan mikroorganisma berlaku)
*keputusan diterima
TEST : sepatutnya warna ‘ungu’ (tiada pembiakan mikroorganisma berlaku)
*keputusan diterima
• Rekodkan keputusan ujian dalam BK 18

32. • 1 box = 100 ampoules @ vials
• Harga (1 box) = RM 580.00
• Autoklaf ‘vacum’ & ‘non-vacuum’
(setiap minggu)

52. • Perubahan ke warna KUNING -> ada pembiakan mikroorganisma
• Tiada perubahan warna (warna kekal UNGU) -> tiada pembiakan mikroorganisma
*utk CONTROL -> KUNING (ada pembiakan mikroorganisma)
*utk TEST -> UNGU (tiada pembiakan mikroorganisma)

54. ‘Geobacillus stearothermophilus’
• Bakteria ‘gram-positif’, aerobik
*gram-positif = bakteria yg memberikan hasil positif dgn ujian ‘gram staining’. Ujian ‘gram staining’ adalah bertujuan utk
membezakan ciri-ciri kimia & fizikal yg terdapat pada dinding sel bakteria. Dinding sel bakteria ‘gram-positif’ biasanya ada lapisan
‘peptidoglycan’ yg tebal, yg membolehkan bakteria tsb mengekalkan warna stain oleh ‘crystal violet’ dlm ujian ‘gram staining’
*aerobik = boleh hidup dlm persekitaran yg mengandungi oksigen (kalau tiada oksigen, tak boleh hidup)
• Berbentuk ‘rod’
• Bersifat ‘thermophilic’ = boleh membiak pada suhu tinggi 30-75⁰C dgn cara
menghasilkan endospora yg rintang terhadap haba
• ‘Non-pathogenic’ (tak menyebabkan penyakit kpd perumah), cuma ia sering
dikaitkan dgn makanan yg basi, rosak terutamanya susu @ produk tenusu krn
keupayaannya utk ‘survive’ dlm proses pempasteuran (sbb ‘spora’nya yg rintang
terhadap haba)
• Sering digunakan sbg ‘indicator’ dlm menilai keberkesanan sesuatu proses
pensterilan krn ‘spora’nya yg bersifat ‘heat-resistant’ terhadap proses pensterilan yg
menggunakan stim & ‘vaporized hydrogen peroxide’

56. 2.Ujian kimia
• ‘Tape indicator’
• ‘Strip indicator’
ujian ‘Helix’ (Helix test)
ujian ‘Bowie-Dick’ (Bowie-Dick test)

57. ‘Tape indicator’
• Sensitif kpd haba (heat-sensitive)
• ‘Tape’ diletak pada bahagian luar item (lekatkan pada ‘pouch’ @ kertas hijau)
& akan bertukar warna apabila didedahkan kpd suhu 121⁰C dlm autoklaf
• Kaedah ni tak boleh nak buktikan sama ada item tsb telah berjaya disteril @
tidak
*cuma nak buktikan yg item tsb telah didedahkan kpd suhu yg betul (121⁰C) ketika proses
pensterilan dijalankan
• Jika ‘tape’ tidak bertukar warna, ertinya ada masalah pada proses pensterilan ;
jika ‘tape’ bertukar warna pun tetap tak boleh nak buktikan bhw item tsb telah
benar-benar disteril

59. Biru Hitam
(sblm pensterilan) (slps pensterilan)

60. Ujian ‘Helix’
• Bertujuan utk menguji keberkesanan penembusan stim (steam penetration) ke atas
‘hollow’ instrumen
• Tujuannya utk pastikan autoklaf mampu menghasilkan ‘vacuum’ yg diperlukan bagi
menyingkirkan udara dari ‘chamber’ autoklaf & ‘corong’ (saluran) yg terdapat pada
peralatan hollow ; krn kehadiran udara dlm ruang tsb (sms proses pensterilan
berlaku) boleh menghalang stim dari menembusi peralatan yg sedang disteril
• Ujian ‘Helix’ terdiri dari satu tiub bersaiz 1.5m (panjang) & 2mm (diameter)
• Pada satu hujung tiub tsb terdapat satu ‘slot’ kecil utk memasukkan strip ujian
• Ketika ujian dijalankan, ‘vacuum’ yg terhasil mesti berupaya menyingkirkan udara
keluar dari tiub terlebih dahulu. Kemudian, stim yg terhasil mestilah berupaya
menembusi ruang di sepanjang tiub ; sekaligus menembusi strip ujian yg berada di
dalam tiub serta menukarkan warna strip tsb

61. • Jika perubahan warna adalah sekata & menyeluruh, maka keputusan ujian
dikira sbg ‘LULUS’
*ertinya autoklaf berjaya menyingkirkan semua udara dari tiub tsb & stim yg terhasil telah
berjaya menembusi keseluruhan bahagian strip ujian yg berada di dalam tiub tsb
• Jika perubahan warna adalah tidak sekata & tidak menyeluruh, maka
keputusan ujian dikira sbg ‘GAGAL’
*ertinya autoklaf TIDAK berjaya menyingkirkan semua udara dari tiub tsb, sehingga
menyebabkan stim yg terhasil tidak mampu menembusi keseluruhan bahagian strip ujian yg
berada di dalam tiub tsb

63. • 1 box = 250/500 strips
• Harga (1 box) = RM 220.00
• Autoklaf ‘vacuum’ (minggu 1 & 3)

64. • Tatacara ujian ‘Helix’ :
Masukkan ‘strip indicator’ ke dalam tiub
Letakkan tiub ke dalam ‘chamber’ autoklaf
Jalankan autoklaf satu ‘cycle’ lengkap @ guna ‘preset button’ yg spesifik utk
jalankan ujian Helix
Setelah lengkap satu ‘cycle’, keluarkan tiub & ‘strip indicator’ utk dapatkan
keputusan ujian
*Hasil ujian:
LULUS jika terdapat perubahan warna yg menyeluruh @ sekata pada ‘strip
indicator’
GAGAL jika perubahan warna tidak sekata @ tidak menyeluruh pada ‘strip
indicator’
• Rekodkan keputusan ujian dalam BK 18

71. LULUS GAGAL

73. Ujian ‘Bowie-Dick’
• Bertujuan utk menguji keberkesanan penembusan stim (steam penetration)
pada ‘porous load’
• Perlu ada ‘porosity’ yg mencukupi pada ‘load’ (item yg disteril) bagi
membolehkan proses penembusan stim berlaku
• ‘Bowie Dick’ pack terdiri dari helaian-helaian kertas yg poros diletakkan scr
berlapis-lapis ; yg mana terdapat ‘sensor sheet’ di lapisan tengah pada
helaian-helaian kertas tsb
• Autoklaf mestilah berupaya menyingkirkan keseluruhan udara dari ‘chamber’
autoklaf & ‘porous sheets’ ; dan membenarkan proses penembusan stim
berlaku ; agar stim dapat ‘directly contact’ dgn ‘sensor sheet’ yg berada di
lapisan tengah helaian ; serta menukarkan warna ‘sensor sheet’ tsb

74. • Tatacara ujian ‘Bowie-Dick’ :
Letak ‘Bowie-Dick’ pack dlm autoklaf
Pastikan tiada item lain yg disteril ketika ujian dijalankan
Tutup pintu autoklaf & jalankan ujian
Selesai ujian, keluarkan ‘Bowie-Dick’ pack dari autoklaf
Buka ‘Bowie-Dick’ pack, keluarkan ‘sensor sheet’ & lihat hasil ujian :
*jika perubahan warna pada ‘sensor sheet’ adalah sekata @ menyeluruh (KUNING -> BIRU),
dikira LULUS
*jika perubahan warna pada ‘sensor sheet’ adalah TIDAK sekata @ TIDAK menyeluruh, dikira
GAGAL
(bermakna masih terdapat sisa baki udara tertinggal di dalam ‘Bowie-Dick’ pack ketika proses
penembusan stim berlaku ; & udara tsb menghalang stim dari ‘direct contact’ dgn ‘sensor sheet’
tsb)
Rekodkan keputusan ujian dalam BK 18

79. jika perubahan warna pada
‘sensor sheet’ adalah TIDAK
sekata @ TIDAK menyeluruh :
-> dikira GAGAL
jika perubahan warna pada
‘sensor sheet’ adalah sekata @
menyeluruh (KUNING -> BIRU),
-> dikira LULUS

80. sblm ujian slps ujian

81. • Jika autoklaf hanya ada ‘porous instrument’ ; guna ujian ‘Bowie-Dick’
• Jika autoklaf hanya ada ‘hollow instrument’ ; guna ujian ‘Helix’
• Jika autoklaf ada ‘porous’ & ‘hollow instrument’ ; guna ujian ‘Helix’ sahaja

82. TERIMA KASIH
Disediakan oleh :
Dr Norazreen Abdul Jalil
Pegawai Pergigian
Klinik Pergigian Peringgit