menjelaskan tentang elektroforesis

1. ELEKTROFORESIS

2. PENGERTIAN
Elektroforesis adalah teknik
pemisahan suatu partikel / spesies
/ ion atau partikel koloid
berdasarkan kemampuan
berpindah melalui medium
konduktif, biasanya berupa larutan
bufer, sebagai respon adanya suatu
medan listrik
Secara teknis, merupakan
istilah yang diberikan
untuk migrasi partikel
yang bermuatan akibat
diberikan arus listrik
searah atau DC (Direct
Current)

3. JENIS-JENIS
Elektroforesis kertas Elektroforesis gel
Elektroforesis kapiler

4. Elektroforesis kertas
 adalah jenis elektroforesis yang terdiri dari kertas sebagai fase
diam dan partikel bermuatan yang terlarut sebagai fase gerak,
terutama ialah ion-ion kompleks.
 Pemisahan terjadi akibat adanya gradasi konsentrasi sepanjang
sistem pemisahan.
 Pergerakan partikel dalam kertas tergantung pada :
 muatan atau valensi zat terlarut
 luas penampang
 tegangan yang digunakan
 konsentrasi elektrolit
 kekuatan ion
 Ph
 Viskositas
 adsorpsivitas zat terlarut

5. Elektroforesis kertas
KELEBIHAN KELEMAHAN
 proses migrasi lebih
cepat
 pemisahan spot
menjadi lebih kecil
 mudah memisahkan
sampel dengan
spektrofotometri
 mudah dilarutkan
dalam pelarut dalam
jumlah sedikit
adanya gangguan yang
disebabkan oleh adanya
gugus OH- yang terdapat
pada selulosa yang dapat
berinteraksi dengan
molekul polar sehingga
daya migrasi molekul
tersebut terganggu dan
menjadi lebih rendah

6. Elektroforesis gel
ialah elektroforesis yang menggunakan gel
sebagai fase diam untuk memisahkan
molekul-molekul.
Awalnya dilakukan dengan medium gel kanji
(sebagai fase diam) untuk memisahkan
biomolekul yang lebih besar seperti protein-
protein.
Selanjutnya elektroforesis gel berkembang
dengan menjadikan agarosa dan
poliakrilamida sebagai gel media

7. Elektroforesis gel
KELEBIHAN KELEMAHAN
 Mudah mengamati
reaksi kimia selama
proses berlangsung
 Sampel dapat
ditangani dengan
baik dan cepat
Rawan terjadi
kesalahan pada proses
pemindahan campuran
sampai kedalam slot
gel, karena slot gel
berukuran kecil

8. Elektroforesis kapiler
 adalah metode elektroforesis yang digunakan
untuk memisahkan asam amino, protein, lipid,
karbohidrat, dan nukleotida dengan resolusi
tinggi yang dilakukan pada pipa kapiler berisi
buffer.
 Elektroforesis kapiler menggunakan listrik
bertegangan tinggi yang menyebabkan semua
komponen ion atau molekul netral bergerak ke
katoda.
 Teknik pemisahan dipengaruhi oleh tegangan
listrik, koefisien difusi, panjang, dan diameter
pipa kapiler, serta konsentrasi sampel.

9. Elektroforesis kapiler
KELEBIHAN KELEMAHAN
 Dapat digunakan
untuk memisahkan
spesies ion
 Memiliki efisiensi
dan selektivitas
yang baik
Boros listrik karena
menggunakan
tegangan tinggi
Harga alat mahal

10. APLIKASI ELEKTROFORESIS
1. Membandingkan gen homolog dari spesies yang berbeda,
mengetahui susunan sekuens berbagai genom.
2. DNA fingerprinting.
3. Mendeteksi kelainan genetik.
4. Mendeteksi lokasi dan jumlah mRNA dalam sel atau jaringan
tertentu.
5. Mengetahui aktivitas gen selama perkembangan berbagai tipe sel
organisme atau percobaan perlakuan gen.
6. Mempelajari evolusi tingkat molecular.
7. Mengetahui variasi genetik yang ada di alam.
8. Menentukan atau mengidentifikasi berat molekul DNA, RNA, dan
protein tertentu.
9. Mengidentifikasi persamaan dan perbedaan genetik antar individu.
10. Mengetahui jumlah fragmen DNA yang diklon dalam rekombinan
DNA plasmid.
11. Menganalisa fragmen DNA yang diamplifikasi lewat PCR

11. PRINSIP KERJA ELEKTROFORESIS
Adanya pergerakan komponen bermuatan positif (+) pada kutub
negatif (-) serta komponen bermuatan negatif (-) pada kutub
positif (+).
Pegerakan yang terjadi disebut "elektrokinetik“
Hasil yang didapatkan dari elektroforesis adalah elektroforegram
yang memberikan informasi mengenai seberapa cepat
perpindahan komponen (tm) atau biasa disebut kecepatan migrasi.
Besaran yang digunakan sama dengan pada proses kromatografi.

12. SKEMA ELEKTROFORESIS

13. FAKTOR-RAKTOR YANG MEMPENGARUHI
ELEKTROFORESIS
SAMPEL
LARUTAN
BUFFER
MEDAN
LISTRIK

14. MEDIUM PENDUKUNG ELEKTROFORESIS
Cellulose
asetat
Larutan buffer
Medan
elektrik

15. KOMPONEN UTAMA ALAT ELEKTROFORESIS
Larutan
elektrolit
Zat
pendukung
Elektroda

16. RANGKAIAN ALAT ELEKTROFORESIS

17. CONTOH JURNAL
Judul :
PEMISAHAN DAN KARAKTERISASI SPESI SENYAWA
KOMPLEKS YTRIUM-90 DAN STRONSIUM-90 DENGAN
ELEKTROFORESIS KERTAS
Susunan Alat Penelitian
1. Cuplikan
2. Elektrode
3. Baffle(penghalang
4. Cuplikan
5. Elektrode
6. Baffle(penghalang

18. CONTOH JURNAL
Kesimpulan Penelitian
 Ytirium-90 membentuk senyawa kompleks dalam HCl.
 Larutan penyangga yang digunakan untuk dapat membentuk spesi
senyawa kompleks90Y adalah larutan penyangga tartrat dan larutan
penyangga sitrat
 Ligan pengompleksnya adalah Cl yang berasal dari HCl yang
digunakan sebagai pelarut.
 penggunaan penyangga tartrat, diperoleh kondisi optimum HCl 2
M dengan parameter operasional elektroforesis 200 Volt, 2,5 jam.
 Dengan penyangga sitrat, diperoleh kondisi optimum HCl 8 M,
dengan parameter operasional elektroforesis 200 Volt, 2jam.
 Migrasi kertas memungkinkan diganti dengan pelat silikagel.