1. РЕСПУБЛИКА КАЗАХСТАН
(19) KZ (13) A4 (11) 28796
(51) A61K 36/00 (2006.01)
A61P 39/06 (2006.01)
КОМИТЕТ ПО ПРАВАМ
ИНТЕЛЛЕКТУАЛЬНОЙ СОБСТВЕННОСТИ
МИНИСТЕРСТВА ЮСТИЦИИ РЕСПУБЛИКИ КАЗАХСТАН
ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ
К ИННОВАЦИОННОМУ ПАТЕНТУ
(21) 2013/1395.1
(22) 18.10.2013
(45) 15.08.2014, бюл. №8
(72) Бурашева Гаухар Шахмановна; Ескалиева
Балакыз Кымызгалиевна; Кипчакбаева Алия
Куанышовна; Хажы Акбер Айса
(73) Республиканское государственное предприятие
на праве хозяйственного ведения "Казахский
национальный университет им. аль-Фараби"
Министерства образования и науки Республики
Казахстан
(56) Патент РФ №2423991, 20.07.2011
(54) СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ СРЕДСТВА С
АНТИОКСИДАНТНЫМ ДЕЙСТВИЕМ
(57) Изобретение относится к медицине, а именно к
фармакологии, к получению средств с
антиоксидантным действием.
Задачей изобретения является разработка
способа получения средства, обладающего
антиоксидантной активностью, из растительного
сырья надземной массы Климакоптеры толстоватой
(Climacoptera subcrassa).
Технический результат достигается путем
измельчения растительного сырья,
экстрагированием органическим растворителем,
концентрированием, но в отличие от известного
способа, в качестве растительного сырья
используют надземную массу Климакоптеры
толстоватой (Climacoptera subcrassa), извлечение
биологически активных веществ проводят способом
сверхкритической флюидной СO2-экстракции при
100 ваr, затем сырье обрабатывают 70%-ным
этиловым спиртом при соотношении сырье :
экстрагент - 1 : 8 - 1 : 9 в течении 6 часов при
температуре 35-40°С, потому что этот растворитель
и время экстракции являются оптимальными, так
как забирает до 50% биологически активных
веществ, вытяжку концентрируют в мягких
условиях под вакуумом при температуре 50-55°С,
концентрат обрабатывают этилацетатом, экстракт
концентрируют досуха на роторном испарителе при
температуре 50-55°С. Концентрирование экстракта
при повышенной температуре сопровождается
процессом окисления действующих веществ.
Полученное средство представляет собой
порошок темно-коричного цвета, хорошо
растворимый в воде и 30% этиловом спирте.
Действующими веществами данного средства
являются фенолокислоты, флавоноиды и их
гликозиды.
(19)KZ(13)A4(11)28796

2. 28796
2
Изобретение относится к медицине, а именно к
фармакологии, к получению средств с
антиоксидантным действием.
Известен способ получения средства,
обладающего антиоксидантным действием (Патент
РФ №2325179, МПК6
А61K 36/73, А61Р 39/06,
опубл. 27.05.2008, бюлл. №15). Высушеное
воздушным способом измельченное сырье
надземной части лабазника обыкновенного
(Filipendula vulgaris Moech) заливают 95%-ным
этиловым спиртом в соотношении сырье :
экстрагент - 1 : 10 и нагревают при температуре 80-
85°С на водяной бане с обратным холодильником в
течение 40 мин. Полученное извлечение фильтруют,
сырье отжимают. Экстракт упаривают под
вакуумом при температуре не выше 60°С досуха.
Выход сухого экстракта 8,30 г, что составляет
16,60% от массы исходного сырья (экстракт на 95%
этаноле). Содержание флавоноидов в сухом
экстракте составило 2,20%, кумаринов - 0,54%.
Недостатком указанного способа является
получение водного экстракта при повышенной
температуре, которая способствует изменению
структуры основных веществ, экстракт будет
лабильным.
Известен способ применения 5%-ного водного
экстракта из побегов багульника болотного (Ledum
palustre L.) в качестве антиоксидантного средства
(Патент РФ №2302252, МПК6
А61K 36/45, А61Р
39/06, опубл. 10.07.2007, бюлл. №19). Способ
получения водного настоя побегов багульника
болотного описан в книге «Фитотерапия с основами
клинической фармакологии. Справочник» // под ред.
В.Г. Кукеса. - М.: Медицина, 1999, с.36. 10 г.
растительного сырья (побеги) багульника болотного
помещают в эмалированную посуду, заливают 0,2 л
(1 стакан) воды комнатной температуры, закрывают
крышкой и настаивают на кипящей водяной бане в
течение 15 мин, после чего охлаждают в течение 45
минут при комнатной температуре, процеживают и
отжимают оставшееся сырье. Полученный настой
доливают кипяченой водой до первоначального
объема 0,2 л. Приготовленный настой хранят в
прохладном месте не более 2 суток.
Недостатком этого способа получения является
невозможность длительного хранения настоя.
Наиболее близким аналогом является способ
получения гепатопротекторного средства,
обладающего антиоксидантным действием (Патент
РФ №2423991, МПК6 А61K 36/28, А61Р 39/06,
А61Р 1/16, опубл. 20.07.2011, бюлл. №20). Способ
осуществляют следующим образом: высушенные
воздушным способом измельченные листья, цветки
и стебли василька шероховатого
(CentaureascabiosaL.), собранного в фазу цветения,
заливают 70% этанолом и экстрагируют при
температуре 75-80°С в течении 1-1,5 часов при
соотношении сырье: экстрагент - 1:15-1:20, затем
охлаждают до комнатной температуры и отделяют
полученный экстракт от сырья путем процеживания.
Отделенный экстракт очищают от механических
включений путем фильтрования. Шрот василька
шероховатого после первой экстракции заливают
70% этанолом и экстрагируют при температуре 75-
80°С в течении 1-1,5 часов при соотношении сырье :
экстрагент - 1:15-1: 20, затем охлаждают до
комнатной температуры, отделяют полученный
экстракт от сырья путем процеживания.
Отделенный экстракт очищают от механических
включений путем фильтрования. Далее шрот после
второй экстракции заливают 70% этанолом и
экстрагируют при температуре 75-80°С в течении 1-
1,5 часов при соотношении сырье : экстрагент - 1 :
15 - 1 : 20, затем охлаждают до комнатной
температуры, отделяют полученный экстракт от
сырья путем процеживания. Отделенный экстракт
очищают от механических включений путем
фильтрования. Полученные экстракты объединяют,
растворитель удаляют под вакуумом и остаток
высушивают.
Недостатком известного способа получения
является то, что экстракцию 70%-ным этанолом
проводят при повышенной температуре и процесс
является сложным и длительным.
Задача изобретения - разработка способа
получения средства, обладающего антиоксидантной
активностью, из растительного сырья надземной
массы Климакоптеры толстоватой (Climacoptera
subcrassa).
Техническим результатом предлагаемого
способа является упрощение способа, расширение
арсенала отечественных лекарственных средств и
получение биологически активного вещества,
обладающего антиоксидантной активностью.
Технический результат достигается путем
измельчения растительного сырья,
экстрагированием органическим растворителем,
концентрированием, но в отличие от известного
способа, в качестве растительного сырья
используют надземную массу Климакоптеры
толстоватой (Climacopterasubcrassa), извлечение
биологически активных веществ проводят способом
сверхкритической флюидной СО2-экстракции при
100 ваr, затем сырье обрабатывают 70%-ным
этиловым спиртом при соотношении сырье :
экстрагент - 1 : 8 - 1 : 9 в течении 6 часов при
температуре 35-40°С, потому что этот растворитель
и время экстракции являются оптимальными, так
как забирает до 50% биологически активных
веществ, вытяжку концентрируют в мягких
условиях под вакуумом при температуре 50-55°С,
концентрат обрабатывают этилацетатом, экстракт
концентрируют досуха на роторном испарителе при
температуре 50-55°С. Концентрирование экстракта
при повышенной температуре сопровождается
процессом окисления действующих веществ.
Сверхкритическая флюидная СО2-экстракция
используется для удаления липофильных веществ и
для улучшения экстрагирования полифенолов.
Обработка сырья после сверхкритической
флюидной СO2-экстракции 70%-ным этиловым
спиртом позволяет проэкстрагировать
фенолокислоты, агликоны и гликозиды
флавоноидов.

3. 28796
3
Полученное средство представляет собой
порошок темно-коричного цвета, хорошо
растворимый в спирте и этилацетате.
Полученный комплекс проявляет
антиоксидантную активность.
Пример 1. 1 кг травы надземной массы
Климакоптеры толстоватой (Climacoptera subcrassa),
измельченной до размера частиц 1мм, извлечение
биологически активных веществ проводят способом
сверхкритической флюидной СО2-экстракции при
100 ваr, затем экстрагируют при соотношении 1 : 8
(8л) 70%-ным этиловым спиртом при соотношении
сырье : экстрагент - 1 : 8 - 1 : 9 в течении 6 часов,
при температуре 35-40°С, вытяжку концентрируют
в мягких условиях под вакуумом при температуре
50-55°С, затем обрабатывают этилацетатом,
экстракт концентрируют досуха на роторном
испарителе при температуре 50-55°С. Выход
продукта 30 г. В таблицах 1-3 представлены данные
влияния мольного соотношения сырье : экстрагент,
температуры и времени экстракции на конечный
продукт.
Таблица 1
Влияние мольного соотношения сырье : экстрагент на конечный продукт.
№
п/п
Соотношение сырье
: экстрагент
Температура
нагревания, °С
Время
экстракции, ч
Выводы
1 1:8-1:9 35-40 6 Результат достигается полностью
2 1:6-1:7 35-40 6 Недостаточное количество растворителя,
сырье впитывает много растворителя
3 1 : 10- 1 : 11 35-40 6 Расход большого количество
растворителя
Таблица 2
Влияние температуры на экстракцию конечного продукта
№
п/п
Соотношение сырье
: экстрагент
Температура
нагревания, °С
Время экстракции,
ч
Выводы
1 1 : 8 35-40 6 Результат достигается полностью
2 1 : 8 20-25 6 Происходит неполная экстракция
основного продукта
3 1 : 8 45-55 6 Увеличивается количество
сопутствующих веществ, снижается
активность продукта
Таблица 3
Влияние времени на экстракцию конечного продукта
№
п/п
Соотношение сырье
: экстрагент
Температура
нагревания, °С
Время экстракции,
ч
Выводы
1 1 : 8 35-40 6 Результат достигается полностью
2 1 : 8 35-40 4 Происходит неполная экстракция
основного продукта
3 1 : 8 35-40 8 Увеличивается количество
сопутствующих веществ, снижается
активность продукта
Полученный полифенольный комплекс из
надземной массы Климакоптеры толстоватой
(Climacoptera subcrassa) проявляет
антиоксидантную активность. Действующим
началом в биологически активном комплексе
являются фенолокислоты, флавоноловые агликоны
и их моно- и ди-гликозиды.

4. 28796
4
5,7,4'
-тригидрокси-3'
-метоксифлавон R1 = R2=CH3O R = R3 = OH
3 -O-α-L-рамнопиранозид
5,7,4'
-тригидрокси
3'
метоксифлавона R=
R1= OH;
R2 =OCH3
R3=OH
3-О-β-D-глюкопиранозид
5,4'
-дигидрокси-
7, 3'
диметоксифлавона R=
R1 = R2 = OCH3
R3 = OH
3-O - β - D - глюкопиранозил
(6-1)-α-L - рамнопиранозид
5,7,3'
,4'
-тетрагидрокси-флавона R=
R1 = OH;
R2 = OCH3
Антиоксидантная активность биологического
активного комплекса, полученного из надземной
массы Климакоптеры толстоватой (Climacoptera
subcrassa), изучена в Синьзянском техническом
институте химии и физики г. Урумчи (КНР), в
качестве контроля использован NaVО3.
Антиоксидантная активность средства,
полученного из надземной массы растительного
сырья Климакоптеры толстоватой (Climacoptera
subcrassa), определили методом DPPH 292,29±5,97.
Для сравнения использован стандартный
антиоксидант-витамин С.
Антиоксидантная активность средства из
Климакоптеры толстоватой (Climacoptera subcrassa)
выявлена впервые.
ФОРМУЛА ИЗОБРЕТЕНИЯ
Способ получения антиоксидантного средства,
включающий измельчение растительного сырья,
экстрагирование органическим растворителем,
концентрирование, отличающийся тем, что в
качестве растительного сырья используют
надземную массу Климакоптеры толстоватой
(Climacoptera subcrassa), экстрагирование проводят
способом сверхкритической флюидной CO2 -
экстракции при 100 ваr, затем сырье экстрагируют
70%-ным водным раствором этилового спирта при
соотношении сырье : экстрагент - 1:8 - 1:9 в течение
6 часов при температуре 35-40°С, вытяжку
концентрируют в мягких условиях под вакуумом
при температуре 50-55°С, затем последовательно
обрабатывают этилацетатом, экстракт
концентрируют досуха на роторном испарителе при
температуре 50-55°С.
Верстка Ж. Жомартбек
Корректор Е. Барч