Ureter Rejeneration:The Proper Scaffold Has to Be Defined Evidence based on journal club by Yasin Yitgin

1. Dr. Yasin YİTGİN

2. GİRİŞ
 Üreter rekonstruksiyonu, radikal sistektomi ve
iatrojenik yaralanmalar sonrası kullanılmakta
 Doku mühendisliği teknikleri, laparoskopik
yaklaşım ile birleştiğinde ameliyat süresini
kısaltarak surviye katkı sağlayabilir.
 Üreter rekonstruksiyonu için ideal materyal;
-Hücre büyümesi ve göçünde uygun şartları
taşımalı, non-immunojenik, nonpermeable

3. Çalışmanın Amacı
 Üreter rekonstruksiyonu için kullanılan çatı
materyallerini karşılaştırmak
-rat aortik ark(AAM)
-sentetik poly(L-lactide-co-caprolactone) (PLCL)

4. GİRİŞ
 İlk aşamada çatı iskeleti ile proksimal üreter
konstruksiyonu yapıldı ve pasajın devamlılığı
gözlemlendi.
 İkinci aşamada defektif üreter rekonstruksiyonu
ile proksimal ve distal segmentlerde anastomoz
değerlendirildi.

5. Materyal ve Metod
 Çatı iskelet yapısı
 PCLC degradasyon testi
 Sitotoksik inceleme
 Hücre büyüme analizi
 Cerrahi prosedür

6.  Üriner konduit konstruksiyonu
 Üreter segment rekonstruksiyonu
 Böbrek boyutundaki değişiklikler
 Histolojik ve immunohistokimyasal analiz
 İstatistiksel analiz

7.  Gruplar
1-Distal üreter A)AAM
B)PCLC
2-Midüreter A)AAM
B)PCLC
7

8. SONUÇLAR
(çatı iskeleti)
 Deselülarizasyon sonrası kesitlerdeki aortik
dalların hücre debris kalıntıları görülmedi.
 Elektron mikroskop taraması: deselülarize olan
aortik dalın yüksek gözenekli yapısı gözlendi
- Fiber kalınlığı: 0.9 – 2.45 μm
- Duvar kalınlığı: 60 – 100 μm
 Nanofibröz iskelet yapısı da yüksek gözeneklilik
gösterdi(%78): aortik dala göre daha küçük
porlar ve yüksek fiber dansitesi; aortik daldan
farklı olarak demet yapılarının olmaması

9. 9

10. SONUÇLAR
(PLCL degradasyon testi)
 Fare peritonu içerisine PLCL implantasyonu – 6
hafta sonra – iskelet gelişmiş vasküler yapıya
sahip alıcı dokusuyla kaplandı.
 Makrofaj ve lenfosit hücresi görülmedi –
enflamatuar reaksiyon yok

11. SONUÇLAR
(PLCL degradasyon testi)
11

12. SONUÇLAR
(PLCL degradasyon testi)
 A – D: vasküler yapı
 E: kollajen fibril demetlerinin yıkılmış dokunun
yerini alması
 F: nanomateryal kalıntısı
 G: prolifere olan elemanlar arası sınır bağ
dokusu
 H: uygun kan damarları oluşumu

13. SONUÇLAR
(sitotoksik tahlil)
 İnkübasyonu takiben 24 ve 48 saat sonrası
aselüler aortik ark ve PLCL nanomateryalde
sitotoksik reaksiyon görülmedi
 72 saat sonra PLCL nanomateryal inkübasyonu
sonrası hafif sitotoksik reaksiyon izlendi
 Mikroskopik analizde hücre morfolojisinde
kontrol grupla tedavi gören grup arası farklılık
gözlenmedi

14. 14

15. SONUÇLAR
(hücre büyümesi analizi)
 AAM – tek tabaka halinde büyüme
 PLCL – tek hücreden iskeleti kaplayacak şekilde
birkaç tabaka oluştu.

16. SONUÇLAR
(cerrahi prosedürler)
üriner konduit yapısı
 Cerrahi nedeniyle eksitus yok
 İdrar sızdırma tüm vakalarda gözlendi(deri
düzeyinde)
 Grup 1A’da 2 , grup 1B’de 5 fare takip süresini
tamamladı
 Takipte hiçbir vakada adezyon görülmedi

17. 17

18. SONUÇLAR
(cerrahi prosedürler)
üriner konduit yapısı
 Gros incelemede AAM’nin nativ üretere daha iyi
entegre olduğu görüldü.
 Doğal üreter kullanımı operasyon sonrası 1
hafta içinde stenoz, obstrüksiyon ve idrar akım
inhibisyonuna neden oldu.
 Nanofibröz iskelet yapısı doğal üretere göre daha
kötü integrasyon gösterdi.
 1 vakada üreter operasyon sonrası 28. günde
normal üreter yapısı gösterdi.

19. SONUÇLAR
(cerrahi prosedürler)
üriner konduit yapısı
 Grup 1B’de 3 vakada üreterin açık olduğu
gözlendi, yalnız 1 vakada idrar akışı net olarak
görüldü. Bu vakada IVP üreter-PLCL-konduit
bileşkesinin orta derece hidronefroz ve üreter
gerilmesi ile sonuçlandığını gözlendi

20. SONUÇLAR
(cerrahi prosedürler)
üreter segment rekonstrüksiyonu
 Eksitus görülmedi
 Grup 2A’da 4 , grup 2B’de 6 fare takip sürecini
tamamladı.
 Grup 2A’da 1, grup 2B’de 4 vakada patent
üreter-iskelet anostomozu görüldü.
 IVP’de üreter traktı görülmeyen vakalarda
makroskopik incelemede HN ve üreter gerilimi
gözlendi.

21. SONUÇLAR
(cerrahi prosedürler)
üreter segment rekonstrüksiyonu
 AAM – mükemmel üreter integrasyonu
 PLCL – nativ üreterle integrasyon yok
 Tüm test edilen iskelet yapılarının boyunun
yaklaşık %30 kısaldığı görüldü.

22. SONUÇLAR
(histolojik inceleme)
 Grup 1: operasyondan 28 gün sonra pürülan
enflamatuar infiltrasyon ve RTA. Sadece 1
vakada bu reaksiyon düşük oranda ve tüm
vakaların %50inden daha azında renal tübüler
dilatasyon görüldü.
 Grup 2: enflamasyon + HN. Renal tübüller
iskelet türüne ve operasyona bağımlı olmadan
genişlemiş olarak gözlendi.

23. SONUÇLAR
(histolojik inceleme)
 Grup 1:
- AAM: enflamatuar infiltrasyon + düz kas
tabakası ve epitelyal tabaka rejenere olmadı
- PCLC: fokal düz kas yapıları ve epitel mevcut
 Grup 2: her iki grupta(AAM ve PCLC) düz kas
yapısı ve epitel tabakası görüldü. Buna rağmen
fibrozisin eşlik ettiği enflamatuar infiltasyon da
mevcut

24. SONUÇLAR
(histolojik inceleme)
 Grup 1:
- 1A: rejenerasyon yok
- 1B: düz kas tabakası rejenere oldu
 Grup 2: her 2 grupta rejenerasyon görüldü.
Hücre migrasyonu, büyümesi, kaotik kas hücre
grupları ve kas demetleri oluşumu izlendi.

25. 25

26. SONUÇLAR
(istatistiksel inceleme)
 İskelet tipi ve rekonstrüksiyon arasında
bağımlılık yok(AAM:p=0.09 PLNL:p=0.12)
 Grup 1 de 2 fraksiyon analizi arasında fark
anlamlıyken(p=0.045), grup 2 de anlamlı fark
bulunamadı(p=0.06).
 PLNL iskelet tipi gruplara ayırım yapılmadan
AAM’ye göre rekonstrüksiyon açısından anlamlı
üstün bulundu(p=0.01).

27. TARTIŞMA
 Bu çalışmada üriner konduit konstrüksiyonu ve
üreter segment rekonstrüksiyonu
karşılaştırılmıştır.
 Doğal rat aselüler aortik ark vs eriyebilir sentetik
polyester PLCL (poly L-lactide-co-caprolactone)
den yapılmış tübüler nanofibröz iskelet
 Bunları birbirinden ayıran iki ana faktör var:
 Porozite(geçirgenlik) ve nemlilik

28. TARTIŞMA
 Biyolojik materyaller bize daha iyi bir hücre
kolonizasyonu sağlarken idrara daha geçirgen
oldukları için çevre dokuda irritasyona neden
olmaktadır.
 Nanofibröz materyaller için ise tam tersi geçerli.

29. 29

30. TARTIŞMA
 Biyomateryeller bize çevre dokuyla hızlı bir
integrasyon sunarken nanofibröz sentetik
maddeler yabancı cisim enfeksiyonu açısından
bir risk faktörü olarak göze çarpmaktadır.
 Maximum performans için porozite,nemlilik ve
kalınlık optimal noktada buluşmak zorunda

31. TARTIŞMA
 PLCL implantasyondan 6 hafta sonra
omentumun vasküler yapılarıyla sarılmaktadır.
 Bu çalışmada nanofibröz iskelet hücre ekimi
yapılmadan kullanılmış ve asellüler aortik arka
göre daha iyi bir üriner kondüit sağlamış, ancak
nativ dokuya uyumu daha kötü
 Konstrüksiyon için kullandığımız iskelet çapı
kondüitin patensi açısından çok önemli.

32. TARTIŞMA
 Geutjes ve arkadaşlarının 10 dişi domuz ile
yaptıkları(4 ünde hücre ekimi var 6 sında yok)
çalışmada bir farklılılık saptanamamış.
 30 tavşan üzerinde yapılan başka bir çalışmada
hücre ekimi yapılan 26 tavşanın takibinde ciddi
bir komplikasyon oluşmadı. Kontrol grubundaki
6 tavşandan 4 ü öldü.

33. TARTIŞMA
 Üreter rejenerasyonu için ilk deneme köpekler
üzerinde yapıldı. İnsan veya maymundan elde
edilen umblikal kordon siklofosfamid ile
muamele edildikten sonra köpeklere yerleştirildi.
 Sadece 1 vakada iyi prognozla beraber 3 yıllık
sağ kalım gözlendi.

34. 34

35. 35

36. VARILAN SONUÇ
 Uygun çatı iskelet kullanımı remodellingi
uyarabilir.
 Bu çalışmada urotelyum rejenerasyonu her iki
materyelde de görülmüştür.
 Urotelyumun kendini yenileme kapasitesi çok
yüksek olduğundan kullanılan materyalde
nonpermeable özellik önem taşımaktadır.