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L'INGEGNERIA GENETICA
 
COME SI MANIPOLA IL DNA?
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COME SI “LEGGE” IL DNA? I  dideossinucleotidi  sono legati ad un  fluorocromo , una molecola che eccitata da un laser è in grado di emettere una luce colorata
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LIVELLI DI INTERVENTO SUL DNA SOSTITUZIONE O INATTIVAZIONE DI UN  GENE ENDOGENO   MUTATO RIPRISTINO DI UNA FUNZIONE ORIGINARIA   INTRODUZIONE DI UNA O PIU’ COPIE DI UN  GENE ENDOGENO   FUNZIONANTE POTENZIAMENTO DI UNA FUNZIONE ORIGINARIA   INTRODUZIONE DI UN  GENE ESOGENO ATTIVAZIONE DI UNA NUOVA FUNZIONE
COME INSERIRE DNA IN UNA CELLULA VIENE ISOLATA LA  SEQUENZA  DI DNA CHE SI INTENDE INSERIRE NELLA CELLULA OSPITE VIENE INDIVIDUATO UN   VETTORE   IDONEO, CIOÈ UNA SEQUENZA DI DNA IN GRADO DI PERMETTERE L’INSERIMENTO DEL DNA TRASPORTATO NEL GENOMA DELLA CELLULA OSPITE VIENE COSTRUITA UNA MOLECOLA DI   DNA RICOMBINANTE ,   CIOÈ FORMATA DAL DNA VETTORE E DAL DNA DEL GENE DA INSERIRE
L’INSERIMENTO DEL DNA NELLA CELLULA: FASI E PROBLEMATICHE DIFFICOLTÀ NELL’ISOLAMENTO DEL GENE INDIVIDUATO ALL’INTERNO DI UN GENOMA COMPLESSO ISOLAMENTO GENI IDONEI CARATTERIZZAZIONE DI VETTORI SELETTIVI PER GLI SPECIFICI TIPI CELLULARI DA COLPIRE UTILIZZAZIONE VETTORI  IDONEI LA PERCENTUALE DI CELLULE CHE INCORPORANO IL DNA NEL GENOMA È BASSO INCORPORAZIONE DNA NEL GENOMA OSPITE METTERE IL GENE INSERITO IN CONDIZIONI DI ESPRIMERSI SOLTANTO NELLE CELLULE DOVE LA SUA FUNZIONE È RICHIESTA ESPRESSIONE MIRATA DEL GENE INSERITO
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James Dewey Watson, premio Nobel per la Medicina 1962 Nell'ottobre 2007 The Independent pubblicava una sua dichiarazione secondo la quale « I neri sono meno intelligenti dei bianchi » e che l'idea che «l'eguaglianza della ragione condivisa da tutti i gruppi razziali si è rivelata una delusione», tanto che «chi ha a che fare con dipendenti di colore pensa che questo non sia vero».  Neanche due giorni dopo, nella tempesta delle innumerevoli prese di distanza e dopo diverse collaborazioni scientifiche e divulgative andate in fumo, Watson ritratta, affermando che le sue dichiarazioni non poggiavano su alcuna base scientifica e non riusciva nemmeno a rendersi conto di come avesse potuto affermare tali sciocchezze. Trascorsi poco meno di due mesi dalla dichiarazione, il genoma di James Watson è stato reso pubblico, dietro sua esplicita richiesta, ed è risultato avere 16 volte più geni di origine "nera" nel proprio Dna rispetto al bianco medio occidentale. Ciò significa, con tutta probabilità, che un suo bisnonno o trisavolo era di origine africana.

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  • 9. LA “POLIMERASE CHAIN REACTION” (PCR)
  • 10. LA “POLYMERASE CHAIN REACTION” (PCR) UN “CICLO” DI PCR E COMPOSTO DA TRE “STEP” -DENANTURAZIONE -ANNEALING -ESTENSIONE
  • 11.
  • 12. COME SI “LEGGE” IL DNA? I dideossinucleotidi sono legati ad un fluorocromo , una molecola che eccitata da un laser è in grado di emettere una luce colorata
  • 13. COME SI “LEGGE” IL DNA? L’interruzione casuale della polimerizzazione genera frammenti di diversa lunghezza ognuno dei quali è “marcato” da un fluorocromo diverso.
  • 16. LIVELLI DI INTERVENTO SUL DNA SOSTITUZIONE O INATTIVAZIONE DI UN GENE ENDOGENO MUTATO RIPRISTINO DI UNA FUNZIONE ORIGINARIA INTRODUZIONE DI UNA O PIU’ COPIE DI UN GENE ENDOGENO FUNZIONANTE POTENZIAMENTO DI UNA FUNZIONE ORIGINARIA INTRODUZIONE DI UN GENE ESOGENO ATTIVAZIONE DI UNA NUOVA FUNZIONE
  • 17. COME INSERIRE DNA IN UNA CELLULA VIENE ISOLATA LA SEQUENZA DI DNA CHE SI INTENDE INSERIRE NELLA CELLULA OSPITE VIENE INDIVIDUATO UN VETTORE IDONEO, CIOÈ UNA SEQUENZA DI DNA IN GRADO DI PERMETTERE L’INSERIMENTO DEL DNA TRASPORTATO NEL GENOMA DELLA CELLULA OSPITE VIENE COSTRUITA UNA MOLECOLA DI DNA RICOMBINANTE , CIOÈ FORMATA DAL DNA VETTORE E DAL DNA DEL GENE DA INSERIRE
  • 18. L’INSERIMENTO DEL DNA NELLA CELLULA: FASI E PROBLEMATICHE DIFFICOLTÀ NELL’ISOLAMENTO DEL GENE INDIVIDUATO ALL’INTERNO DI UN GENOMA COMPLESSO ISOLAMENTO GENI IDONEI CARATTERIZZAZIONE DI VETTORI SELETTIVI PER GLI SPECIFICI TIPI CELLULARI DA COLPIRE UTILIZZAZIONE VETTORI IDONEI LA PERCENTUALE DI CELLULE CHE INCORPORANO IL DNA NEL GENOMA È BASSO INCORPORAZIONE DNA NEL GENOMA OSPITE METTERE IL GENE INSERITO IN CONDIZIONI DI ESPRIMERSI SOLTANTO NELLE CELLULE DOVE LA SUA FUNZIONE È RICHIESTA ESPRESSIONE MIRATA DEL GENE INSERITO
  • 19. GENE SELETTORE PROCARIOTI - VETTORI DI CLONAGGIO
  • 22.
  • 23. James Dewey Watson, premio Nobel per la Medicina 1962 Nell'ottobre 2007 The Independent pubblicava una sua dichiarazione secondo la quale « I neri sono meno intelligenti dei bianchi » e che l'idea che «l'eguaglianza della ragione condivisa da tutti i gruppi razziali si è rivelata una delusione», tanto che «chi ha a che fare con dipendenti di colore pensa che questo non sia vero». Neanche due giorni dopo, nella tempesta delle innumerevoli prese di distanza e dopo diverse collaborazioni scientifiche e divulgative andate in fumo, Watson ritratta, affermando che le sue dichiarazioni non poggiavano su alcuna base scientifica e non riusciva nemmeno a rendersi conto di come avesse potuto affermare tali sciocchezze. Trascorsi poco meno di due mesi dalla dichiarazione, il genoma di James Watson è stato reso pubblico, dietro sua esplicita richiesta, ed è risultato avere 16 volte più geni di origine "nera" nel proprio Dna rispetto al bianco medio occidentale. Ciò significa, con tutta probabilità, che un suo bisnonno o trisavolo era di origine africana.