Laporan Praktkum Kultur Jaringan Tumbuhan: Pembuatan Media MS (Murashige & Sk...UNESA
1. Ada 145 botol media steril yang dihasilkan dari praktikum pembutan media MS (Murashige & Skoog), yaitu media A sejumlah 47 botol, media B sejumlah 50 botol, dan media C sejumlah 48 botol, dan tidak ada yang mengalami kontaminasi.
2. Pada eksplan embrio Kacang Tanah (Arachis hypogaea) yang ditanam pada botol media MS (Murashige & Skoog) ada 3 eksplan dan semuanya mengalami kontaminasi bakteri yang dapat dilihat dari warna akar dan tunas kacang tanah yang berwarna jingga.
3. Faktor-faktor penyebab kontaminasi dalam kultur jaringan pada praktikum ini adalah:
- Organisme kecil yang masuk ke dalam media berupa bakteri
- Botol kultur atau alat-alat tanam yang kurang steril
- Lingkungan kerja dan ruang kultur yang kotor
- Kecerobohan dalam pelaksanaan
Laporan Praktkum Kultur Jaringan Tumbuhan: Pembuatan Media MS (Murashige & Sk...UNESA
1. Ada 145 botol media steril yang dihasilkan dari praktikum pembutan media MS (Murashige & Skoog), yaitu media A sejumlah 47 botol, media B sejumlah 50 botol, dan media C sejumlah 48 botol, dan tidak ada yang mengalami kontaminasi.
2. Pada eksplan embrio Kacang Tanah (Arachis hypogaea) yang ditanam pada botol media MS (Murashige & Skoog) ada 3 eksplan dan semuanya mengalami kontaminasi bakteri yang dapat dilihat dari warna akar dan tunas kacang tanah yang berwarna jingga.
3. Faktor-faktor penyebab kontaminasi dalam kultur jaringan pada praktikum ini adalah:
- Organisme kecil yang masuk ke dalam media berupa bakteri
- Botol kultur atau alat-alat tanam yang kurang steril
- Lingkungan kerja dan ruang kultur yang kotor
- Kecerobohan dalam pelaksanaan
1. 1. Tes Tulis Perhitungan dan pembuatan media Kultur
Jaringan, Sterilisasi eksplan
2. Tes Lesan Pengoperasian Alat dan Fungsi pendukung
kegiatan Kultur jaringan
3. Tes Tulis tentang pokok bahasan kegiatan praktikum
yang telah dilaksanakan
2.
3. 1. Buatlah Stok BAP dengan konsentrasi 1000 ppm
sebanyak 50 ml.
2. Buatlah Stok C (CaCl2.2H2O) dengan kepekatan 20 x
sebanyak 250 ml. (Konsentrasi CaCl2.2H2O untuk media
MS adalah 440 mg/liter media).
a.Berapa bahan yang harus ditimbang?
b.Bagaimana cara melarutkannya?
c.-Berapa Volume pipet (ml) untuk 1 Liter media? (Jika Stok Nutrisi)
-Berapa Volume pipet (ml) untuk setiap ppm? (Jika Stok ZPT)
4. 1. Buatlah Stok BAP dengan konsentrasi 1000 ppm sebanyak 50 ml
a. Berapa bahan yang harus ditimbang?
𝑲𝒐𝒏𝒔𝒆𝒏𝒕𝒓𝒂𝒔𝒊 𝒍𝒂𝒓𝒖𝒕𝒂𝒏 =
𝒃𝒂𝒉𝒂𝒏 𝒚𝒂𝒏𝒈 𝒅𝒊𝒕𝒊𝒎𝒃𝒂𝒏𝒈 "𝑿"
𝒗𝒐𝒍𝒖𝒎𝒆 𝒍𝒂𝒓𝒖𝒕𝒂𝒏
𝟏𝟎𝟎𝟎𝒎𝒈
𝟏𝟎𝟎𝟎 𝒎𝒍
=
𝒙
𝟓𝟎 𝒎𝒍
1000 mg * 50 ml = 1000 ml *X
50000 mg=1000*X
X=50000 mg/1000
X= 50 mg
Perkalian Silang
5. c. Berapa Volume Pemipetan untuk setiap ppm zpt yang akan dibuat
b. Bagaimana cara melarutkannya?
1. Siapkan alat dan bahan
2. Timbang BAP sebanyak 50 mg
3. Ambil tempat pelarutannya (erlenmeyer kecil)
4. Masukkan beberapa tetes bahan pelarut (Akuadest steril) pada erlenmeyer tersebut
5. Masukan BAP pada erlenmeyer
6. Jika pelarutnya kurang tambahkan sedikit demi sedikit
7. Aduk sampai larutan benar-benar homogen
8. Tambahkan aquadest steril sampai volume 50 ml
9. Beri Label
10. Simpan pada lemari penyimpanan (kulkas)
6. 1000 ml * 1mg/1000ml = V2 * 1000mg/1000ml
1 = V2* 1 ml
V2 = 1/1ml
V2 = 1 ml
7. Buatlah Stok C (CaCl2.2H2O) dengan kepekatan 20 x sebanyak 250
ml. (Konsentrasi CaCl2.2H2O untuk media MS adalah 440 mg/liter
media).
a. Berapa bahan yang harus ditimbang?
berat bahan dasar * kepekatan
440 mg * 20 = 8800 mg
b. Bagaimana cara melarutkannya?
8800 mg dilarutkan dalam 250 ml Akuadest steril
Jadi didapatkan Larutan Stok C (CaCl2.2H2O) kepekatan
8800 mg/250 ml (20X)
C. Berapa Volume pipet (ml) untuk 1 Liter media
8. Contoh :
Dalam kegiatan praktikum, mahasiswa akan membuat media MS
sebanyak 1 liter. Label yang tertera di STOK C (CaCl2.2H2O) adalah
“kepekatan 8800 mg/200 ml”. Konsentrasi CaCl2.2H2O untuk Media
MS adalah 440 mg/L. Berapa ml, volume larutan stok yang harus di
ambil (di pipet)?
Diketahui :
V1=?
M1=?
V2=?
M2=?
9. Contoh Lagi :
Buatlah alkohol 70% (70/100) dalam 100 ml, alkohol yang tersedia
adalah 96% (96/100).
V1=
M1=
V2=
M2=
V2= berapa ml yang diambil dari larutan awal M2 (alkohol 96%) agar
menjadi larutan akhir sebanyak V1 (100 ml) yang konsentrasinya M1
(70%)
10. Rumus konversi :
• Dari ppm ke µM :
ppm = BM (Berat Molekul) *µM: 1000
Contoh:
2,85µM IAA =????? Ppm
Berat Molekul IAA = 175,19 gr/Mr
Ppm= 175,19 * 2,85 :1000
=0,499 ppm
11. Rumus konversi :
• Dari µM ke ppm :
µM = 1000 * ppm: BM
Contoh:
0,499 ppm IAA =????? µM
Berat Molekul IAA = 175,19 gr/Mr
µM = 1000 * 0,499 : 175,19
= 2,848 µM
12. 1. Konsentri alginat untuk pembuatan benih sintetik adalah 2,5%. Berapa gram alginat yang
harus ditimbang untuk membuat 2 Liter media ?
2. Berapa mg BAP yang harus dilarutkan untuk membuat stok dengan konsentrasi
200 ppm, sebanyak 20 ml?
Dan hitung berapa ml yang harus di pipet untuk membuat 1 liter media
MS+2ppm BAP?
3. Dalam laboratorium terdapat stokBAP dengan konsentrasi 1000 ppm, berapa ml
yang harus di pipet untuk membuat 1 liter media MS+2ppm BAP?
4. Buatlah larutan STOK A (NH4NO3) dengan pemekatan 20 X sebanyak 200 ml.
Formulasi NH4NO3 pada media MS adalah 1650 mg/L.
Hitunglah berapa bahan yang harus ditimbang? Dan berapa ml, volume
pemipetan untuk membuat 1 liter media MS?
5. Dihadapan kalian terdapat larutan stok B (KNO3) dengan kepekatan 38000
mg/200 ml. Konsentrasi dasar KNO3 untuk media MS adalah 1900 mg/1000ml).
Berapa ml pengambilan stok tersebut untuk membuat 1 liter media MS?