2. ČESKOSLOVENSKÁ socIALISTICKÁ
REPUBLIKA
Trida 42 l, /01
i Vydáno 15.září 1961 vyloženo15. března 1961
PATENTNÍspis č.
100899
10
Právo k využití vynálezu přísluší státu podle 3 odst. 6 zák. . 34/1957
Sb.
Inž. dr. OTAKAR HRDÝ, PRAHA
Způsob dělení solí cholinu od solí betainu z jejich směsi
Přihlášeno 26. ledna 1960 (Pv 534-60) . Platnost patentu od 26. ledna
1960
Vynález se týká způsobu dělení solí cholinu od solí betainu na sloupcích měničů
iontů, což umožňuje kvantitativní stanovení obou látek ve směsích; podobné směsi se
vyskytují zejména ve farmaceutických přípravcích. ·
Cholin patří do skupiny oxyaminů, jeho vzorec je:
(CH3)CH2. CH2OH.
. |
Ve farmaceutických přípravcích přichází nejčastěji jako chlorid
nebo jako kyselý vínan. - .
Betain je vnitřní amonná o vzorci
(CH3)CH2. CO |

3. « O a ve farmaceutických přípravcích přichází zpravidla jako chlorid.
Vzhledem k tomu, že po chemické stránce se obě látky, až na rozdíl v dissociační
konstantě, podstatně neliší, jsou i analytické metody, používané na stanovení
jednotlivých látek, málo odlišné. V literatuře
byly nalezeny pro stanovení směsi obou látek pouze dvě metody. G. H. Walker Jr. a R.
Erlandsen (Anal. Chem., 23, 1309, 1951).srážejí betain.

5. 30
případech stejně velké.
2 · 100899
reineckovou solí, sraženinu promyjí éterem, přidáním dusičnanu stříbrného uvolní
dusičnan betainu a titrují ho odměrným roztokem hydroxydu. V práci uvádějí, že lze
takto stanovit betain i vedle cholinu, jehož dusičnan má méně kyselou reakci. Metodu
jsme zkoušeli, nepodařilo se nám však získat reprodukovatelné výsledky pro málo ostrý
přechod na konci titrace. Autoři, kteří prováděli popsaným způsobem stanovení betainu
v cukerné šťávě, měli pravděpodobně daleko příznivější poměr obou složek, než
přichází obvykle v úvahu. Při přesnějším stanovení by bylo nutno brát v úvahu ztráty
vznikající značnou rozpustností reinec- kátu betainu, jež popisuje např. A. Simenauer
(Bull. soc. chim. France 1958], 294).
F. J. Bandelin a R. E. Pankratz (J. Am. Pharm. Assoc, Sci. Ed. 42, 442, 1953)
stanoví cholin vedle betainu tak, že v alkalickém prostředí srážejí selektivně cholin
reineckovou solí, ve filtrátu po okyselení srazí touže solí betain. Vlastní stanovení
sražených reineckátů pak provádějí, fotometricky. Metoda byla vypracována pro poměr
cholinu k betainu jako 1:1 při obsahu8 mg. Při našich zkouškách se ukázalo, že část
betainu je strhována do sraženiny reineckátu cholinu a že při promývání sraženiny
reineckátu betainu jsou výsledky nízké pro značnou rozpustnost této sraženiny; našė
výsledky jsou tedy v souladu s nálezy Simenauerovými (citace, uvedena výše. Metoda
je použitelná pouze pro
přesně daný případ, kdy je možno připravit standard stejného složení;
počítá se potom s tím, že odchylky od správné hodnoty budou v obou
Odstranění uvedených nevýhod je cílem způsobu dělení solí cholinu od solí betainu
z jejich směsi, jak přicházejí zejména ve farmaceutických přípravcích. Po rozdělení je
možno jednotlivé látky stanovit některou ze známých metod vážkových, titračních mębo
fotometrických.
Jeho podstata spočívá v tom, že roztok směsi solí cholinu a betainu se nechá protéci
sloupcem anexu (na příklad styrendivinylbenzenového typu, obsahujícího kvartérní dusík –
obvyklá obchodní značka Amberlite IRA 400); sloupec je přitom v hydroxylovém cyklu. Ze
sloupce vytéká roztok basí cholinu a betainu, který se potom nechá protéci sloupcem katexu s
karboxylovými skupinami (např. obchodní značka Amberlite IRC 50). Na tomto sloupci se
zachytí cholin a ve vytékající tekutině je obsažen betain. Cholin se poté uvolní z vazby s
katexem kyselinou chlorovodíkovou (promytím sloupce zředěnou kyselinou chlorovodíkovou). -
Směs solí cholinu a betainu (obsahující nejvýše ,4 g obou látekse rozpustí asi v 10 ml
vody. Roztok se převede kvantitativně na sloupec anexu Amberlite IRA400 v hydroxylovém
cyklu, který byl připraven podle návodu uvedeného v Čs. lékopisu, 2. vydání (str. LXXXI.
Sloupec se promyje 4X10 ml vody, přičemž se vytékající tekutina jímá do odměrné baňky na 50

6. ml. Po protečení se obsah baňky doplní po znač
ku a z roztoku se odměří 40 ml (nebo objem menší, obsahující takové.
množství basí, aby bylo možno spolehlivě provést vlastní stanovení. Odměřený
objem se nalije na sloupec katexu Amberlite IRC-50 ve vodíkovém
cyklu, který byl připraven opět podle návodu uvedeného v Čs. lékopisu,
2. vydání, s tím rozdílem, že se sloupec místo převëdení do basické formy převede do
kyselé formy promytím 50 ml ,1 N kyseliny chlorovodíkové a poté vodou do neutrální
reakce (asi 250 ml). Sloupec se promývá vodou a vytékající tekutina se jímá do
odměrné baňky na 100 ml, až je baňka plná, po značku. (Roztok obsahuje betain.] Poté
se
sloupec promyje 50 ml 1, kyseliny. chlorovodíkové a poté malým . .
množstvím vody. Vytékající tekutina se jímá do odměrné baňky na 50
po značku. (Roztok obsahuje cholin.)

8. 100
3 100899
Stanovení betainu se provede tak, že množství potřebné k titraci (tj. nejméně ,03 g
betainu) se odpaří na vodní lázni do sucha a odparek se vysuší 1 hod. při 100° C. Poté
se za tepla rozpustí v 50 ml bezvodé kyseliny octové, přidají se 2 kapky roztoku
methylvioleti a titrujo se ,05 N roztokem kyseliny chloristé v bezvodé kyselině octové
do modrozeleného zbarvení. 1 ml ,05 N roztoku kyseliny chloristé od
povídá ,007678 g chloridu betainu.
Stanovení cholinu se provede tak, že množství potřebné ke stanovení (asi ,03 g cholinų) se
odměří do kádinky, přidá se 15 ml nasyceného vodného roztoku reineckátu amonného a
opatrně se promísí. Po 2 hod. stání v chladu se vyloučená sraženina odfiltruje zváženým
filtračním kelímkem (frita G ), promyje se 3 X 15 ml promývací vody (1 ml masyceného roztoku
reineckátu amonného v 500 ml vody) a vy
, suší se při 100° C do konstantní váhy. Váha sraženiny, násobená faktorem ,3304, dá
váhu chloriduo cholinu, násobena faktorem ,5993, dá váhu vínanu cholinu.
. Pro ověření vhodnosti postupu pro různé směsi obou látek byly provedeny zkoušky,
jejichž výsledky jsou shrnuty v tabulce. .
Naváženo (g) Nalezeno ()
I. směs:vínan Cholinu ,0609 96,2
chlorid betainu ,2863.96,8 II. Směs:vínan Cholinu ,0539 99,5 Chlorid betainu ,1013 95,3
III. směs: vínan cholinu. ,1056 97,7 chlorid betainu . ,1049 95,5
IV. směs: vínan cholinu ,1041 98,1 Chlorid betainu ,0524 95,1 V. směs: vínan cholinu • ,1034
98,1 Chlorid betainu ,0113 96,1
Z výsledků je patrno, že stanovení je spolehlivé i v případech, kde jedna součást ve směsi
je ve velmi nepříznivém poměru k součásti
druhé.
Předmět patentu
Způsob dělení solí cholinu od solí betainu z jejich směsi, zejména ve farmaceutických
přípravcích, pro jejich kvantitativní stanovení, zejména vážkově a titračně, vyznačující se tím, že
roztok směsi solí cholinu a betainu se nechá protéci sloupcem anexu, čímž se získá roztok basí
cholinu a betainu, který se pak nechá protéci sloupcem katexu s karboxylovými skupinami, na
němž se zachytí cholin, a ve vytékající tekutině je obsažen betain, načež se cholin v následující
operaci uvolní z vazby s katexem kyselinou chlorovodíkovou.
Severografia, n. p, závod 03