Informasi detail tentang media mikrobiologi Chromogenic HiChrome ECC Selective Agar Base untuk analisa Escherichia coli dan Coliform pada air dan makanan

3. Media Cromogenic yang merupakan
media mikrobiologi Differential yang
direkomendasikan untuk mendeteksi
adanya Escherichia Coli dan Coliform
pada sampel air dan makanan.

4. HiCrome ECC selective Agar adalah media selektif yang
direkomendasikan untuk mendeteksi secara
berkesinambungan adanya bakteri Escherichia Coli dan
Total Coliform dalam sampel air dan makanan.
Media chromogenic mengandung dua chromogenic
substrat . Enzym Beta-D-galactosidase yang dihasilkan
coliform akan memecah salah satu chromogen untuk
membentuk koloni berwarna salmon sampai merah.
Sedangkan enzym Beta D - Glucuronidase yang
diproduksi oleh Escherichia Coli , memecah
X-Glucuronide , chromogen kedua.

5. Escherichia Coli akan memberikan warna biru gelap sampai
violet pada koloni yang tumbuh berkaitan dengan pemecahan
kedua chromogen.
Penambahan L-Tryptophan akan mempercepat reaksi indol,
yang meningkatkan reabilitas dari deteksi.
Spesial pepton, Casein Enzymic Hydrolysate , Sodium Pyruvate,
dan Sorbitol akan membentuk zat nitrogenous, karbohydrate
yang dapat difermentasi, dan nutrisi lainnya yang penting bagi
pertumbuhan organisme. Phosphate akan menjadi buffer bagi
media.

6. Formulasi media akan membantu , bahkan pada Coliform
yang lemah dan hampir mati untuk recovery dan tumbuh
secara cepat.
Tergitol akan menghambat bakteri Gram positif dan Gram
negatif lainnya selain coliform. Penambahan HiCrome ECC
Selective Supplement (FD 190) membantu menghambat
kontaminan dari heterogenous microflora yang ada.
Media dapat dinokulasi dengan metoda tuang atau metoda
sebar. Metoda analisa menggunakan membrane filter juga
dapat digunakan.

7. Bakteri gram negatif lainnya akan membentuk koloni yang tidak
berwarna, kecuali beberapa organisme dengan Beta
Glucuronidase positif.
kfqKeberadaan Beta Glocuronidase postif akan memberikan
warna koloni biru terang sampai pirus.
Glucuronidase terdapat di 94 - 96 % dari strain Escherichia Coli
dan juga pada beberapa strain Salmonella, Shigella dan Yersinia.
Untuk uji konfirmasi Escherichia Coli, Tambahkan setetes
Reagen Kovaks pada koloni biru gelap sampai violet. Positif
akan ditandai dengan Pembentukan warna merah cherry.

8. Komposisi ( Gram / Liter )
•
Peptone, Spesial
: 5.00
•
Casein enzymatic hydrolysate : 3.30
•
Sodium DiHydrogen Phosphate : 0.60
•
DiSodium Hydrogen Phosphate : 1.00
•
Sodium Chloride
: 2.00
•
Sodium Pyruvate
: 1.00
•
L-Tryptophan
: 1.00
•
Sorbitol
: 1.00
•
Tergitol-7
: 0.15
•
Chromogenic Mixture
: 0.43
•
Agar
: 10.00
pH akhir pada 25º C : 6.8 ±0.2

9. Timbang 26.48 grams dalam 1000 ml air destilasi.
Panaskan sampai mendidih dengan Hot plate Stirer sampai
medium larut dengan sempurna ( sekitar 35 menit ).
TIDAK BOLEH DI AUTOCLAVE !!
TIDAK BOLEH DIPANASKAN TERLALU TINGGI DAN LAMA !!!
Jika dibutuhkan, media selective bisa dibuat dengan
menambahkan 1 vial HiCrome ECC selective Supplement (FD
190) ke media sterile yang sudah dingin.
Campur dengan baik dan tuang ke Petridish. Media mungkin
memperlihatkan kekeruhan, tapi tidak akan mempengaruhi
kinerja media.

10. Bentuk powder :
Kuning terang sampai merah muda , Homogen, free
flowing powder.
Warna dan Kejernihan
Media siap pakai : membentu gel berwarna jernih
sampai sedikit keruh dalam petri palte.
Respon Kultur :
Karakteristik kultur dapat dilihat setelah inkubasi
pada inkubator 35 - 37 ºC selama 18-24 jam