Dokumen tersebut membahas tentang prosedur pemeriksaan golongan darah ABO dan Rh, meliputi pengambilan sampel darah, penyiapan sampel, metode pemeriksaan dengan tube method dan slide method, serta interpretasi hasilnya untuk menentukan golongan darah pasien.

1. PEMERIKSAAN GOLONGAN DARAH
ABO DAN RH
Novi Ersanto Amd. AK, S.Si
Pemeriksaan Golongan Darah Abo Dan Rh fikesumaha.ac.id

2. › Pengambilan darah sesuai prosedur
› Mereview riwayat transfusi pasien
› Pemeriksaan goldar ABO, Rh,
› Skrining antibodi
› Crossmatch (uji cocok serasi)
› Pemberian transfusi
Pemeriksaan Golongan Darah Abo Dan Rh fikesumaha.ac.id

3. Pemeriksaan Golongan Darah Abo Dan Rh fikesumaha.ac.id
1
2
3
4
• Dapat mendeteksi hampir semua atau beberapa
antibodi tak diharapkan yg signifikan secara klinik

4. Pemeriksaan Golongan Darah Abo Dan Rh fikesumaha.ac.id

5. Prinsip Penggolongan Darah
Pemeriksaan Golongan Darah Abo Dan Rh fikesumaha.ac.id
 Nama golongan darah ditentukan oleh
ekspresi antigen di permukaan eritrosit
 Antibodi (antisera) akan berikatan dg
antigen yang sesuai  anti A akan
berikatan antigen A
› Tampak aglutinasi positif
› Tidak aglutinasi  negatif

6. Pembentukan Antibodi
Pemeriksaan Golongan Darah Abo Dan Rh fikesumaha.ac.id
Sistim ABO
 Naturally occuring
 terjadi secara
alamiah
 Seorang individu
secara alamiah
mempunyai antibodi
terhadap antigen
yang tidak dimiliki
Rhesus
 Terbentuknya
antibodi karena
paparan terhadap
antigen D pada
individu Rh neg

7. Pemeriksaan Golongan Darah Abo Dan Rh fikesumaha.ac.id

8. Pemeriksaan Golongan Darah Abo Dan Rh fikesumaha.ac.id

9. Pemeriksaan Golongan Darah Abo Dan Rh fikesumaha.ac.id
Mereaksikan sel
yang belum
diketahui (Ag nya)
dengan antibodi
yang diketahui
(anti A, anti B, Anti
A,B)
Cell
grouping
Mereaksikan
serum/plasma
yang belum
diketahui (Ab nya)
dengan eritrosit
yang sudah
diketahui (gol A
atau B)
Serum
grouping
Hasil reaksi dibandingkan
 gol darah ditentukan

10. Pemeriksaan Golongan Darah Abo Dan Rh fikesumaha.ac.id
Penggolongan Darah
(Blood Grouping)
 Cell grouping
oantisera terbuat dari human sera
oantisera yg digunakan:
oAntisera A – Biru – sumber: Group B donor
oAntisera B – Kuning – sumber: Group A donor
oAntisera A,B – Jernih – sumber: Group O donor
o bukan campuran anti-A dan anti-B, namun Ab yang
bereaksi baik dengan Ag A maupun B

11. Pemeriksaan Golongan Darah Abo Dan Rh fikesumaha.ac.id
• Cell grouping
o Anti A,B digunakan pada forward grouping :
o Mengonfirmasi hasil dari anti-A dan anti-B
o Akan memperlihatkan hasil reaksi (+) dengan A dan B
weak subgroups yang tidak bereaksi dengan anti-A dan
anti-B
Gambaran Reaksi untuk Grup ABO
Blood group Agglutination with
Antisera A
Agglutination with
Antisera B
A + -
B - +
AB + +
O - -

12. Pemeriksaan Golongan Darah Abo Dan Rh fikesumaha.ac.id
• Serum grouping = Reverse Typing / back Typing
Gam aran Reaksi untuk Grup ABOBlood Group Agglutination with
A
cells
Agglutination
with B
cells
A - +
B + -
AB - -
O + +
o Antigen diketahui (sel) direaksikan dengan
antibodi yang belum diketahui (serum pasien)
o Perbandingan 2:1
o Menggunakan reagen komersial yang
mengandung sel A dan B terlarut dalam salin
Gambaran Reaksi untuk Grup ABO

13. Pemeriksaan Golongan Darah Abo Dan Rh fikesumaha.ac.id
PERSIAPAN SAMPEL DARAH

14. Sampel Darah
Pemeriksaan Golongan Darah Abo Dan Rh fikesumaha.ac.id
1. Fresh sample (bila tdk memungkinkan simpan pd suhu 4oC &
diperiksa dalam 48 jam)
2. Tidak ada tanda hemolisis
3. Sentrifus sampel pd 3000-3400 rpm selama 2 menit dan
pisahkan serum ke tabung yang sudah diberi tanda
4. Masukkan 2-3 tetes sel pasien ke dalam tabung untuk
menyiapkan suspensi eritrosit 5-10%.
5. Suspensi sel digunakan pada cell grouping forward typing.
6. Serum pasien untuk konfirmasi (serum grouping atau back
typing)

15. Pemeriksaan Golongan Darah Abo Dan Rh fikesumaha.ac.id
Pencucian Sel Darah Pekat
1. Tandai tabung ukuran 12 x 75 mm
2. Masukkan 8 tts darah sampel ke tabung
3. Semprotkan salin ke dalam tabung sampai lk ¾
4. Sentrifus 90 – 120 detik kecepatan tinggi (3400 rpm)
5. Buang supernatant dan goyang supaya terjadi
resuspensi
6. Apabila terjadi hemolisis, ulangi steps 3 sd 5
sampai supernatan terlihat jernih

16. Pemeriksaan Golongan Darah Abo Dan Rh fikesumaha.ac.id
Metode Pemeriksaan

17. Pemeriksaan Golongan Darah Abo Dan Rh fikesumaha.ac.id
1. SLIDE METHOD

18. Pemeriksaan Golongan Darah Abo Dan Rh fikesumaha.ac.id
Slide Method
 Prinsip:
 Eritrosit dicampur dengan reagen antisera, aglutinasi
akan terjadi pada slide yang mengandung sel-sel yang
memiliki Ag yang sesuai dengan antisera yg ditambahkan.
 Aglutinasi tidak terjadi apabila eritrosit tidak mengandung
antigen yang sesuai

19. Teteskanantisera
masing-masing 1 tetes
Anti-A Anti-B Anti-AB
Tambahkan darah utuh sebaiknya
suspensi eritr 10%
masing-masing 1 tetes.
Aduk (diameter 15 mm), goyang 2 menit
kmd amati tdp aglutinasi ada atau
tidak
Ø 20-40 mmTechnical Manual, 10th.ed, AABB, 1990
1
2
3
Sel pasien
METODE SLIDE
Beri label sebelumnya!!

20. Menilai Aglutinasi
Pemeriksaan Golongan Darah Abo Dan Rh fikesumaha.ac.id
 Positif :
Ada aglutinasi (jenis
golongan darah sesuai
dengan jenis
antiseranya); tjd reaksi
Ag-Ab
 Negatif :
tidak ada aglutinasi (jenis
golongan darah tdk sesuai
dengan jenis antiseranya);
tdk tjd reaksi Ag-Ab

21. Pemeriksaan Golongan Darah Abo Dan Rh fikesumaha.ac.id
TIDAK DIREKOMENDASI untuk pemeriksaan rutin !
 Tidak dapat digunakan untuk tujuan transfusi,
karena dpt terjadi postifi dan negatif palsu
 Larutan reaksi kering dpt dikelirukan dgn positif
 Kurang sensitif, tidak reliabel untuk reaksi antigen
dan antibodi lemah
 Hanya dapat digunakan pada kasus darurat
penggolongan darah ABO atau utk seleksi donor
plateletpheresis

22. Pemeriksaan Golongan Darah Abo Dan Rh fikesumaha.ac.id
2. TUBE METHOD

23. Tube Method
Metode rekomendasi
• Memungkinkan inkubasi
antigen dan antibody lebih
lama tanpa kuatir tjd drying
•Tabung dapat disentrifus utk
memperkuat reaks
•Dapat mendeteksi antigen /
antibody yg lemah
Dua tahapan
Cell grouping (Forward
grouping)
• Tests the patients red cells
with known Anti-A & Anti-B
to determine the antigen
expressed
Serum grouping (Reverse
grouping)
• Test the patients serum with
known A & B cells to
determine the presence of
antibody
Pemeriksaan Golongan Darah Abo Dan Rh fikesumaha.ac.id

24.  Tabung 1, 2 dan 3 masing-masing dilabel dgn tulisan anti-A, anti B dan
anti AB
 Buat suspensi eritrosit 5% (3000 rpm – 3 menit) – darah pasien
 Teteskan 1 tetes antisera:
› Anti- A ke tabung1
› Anti-B ke tabung 2
› Anti AB ke tabung 3 (jika diperlukan)
 Teteskan suspensi eritrosit 5% (pasien) masing-masing ke tabung 1, 2
dan 3.
 Campur & sentrifuge ke 3 tabung dengan kecepatan 3000 rpm selama
60 detik
 Resuspensi secara hati-hati
 Catat hasilnya
Pemeriksaan Golongan Darah Abo Dan Rh fikesumaha.ac.id

25. Forwardgrouping
Cell grouping
Rh grouping
Reverse grouping
Sera grouping
Tabung-tabung untuk penggolongan
ABO & Rh
Pemeriksaan Golongan Darah Abo Dan Rh fikesumaha.ac.id

26. Prosedur tes tabung – cell grouping
Anti-A Anti-B Anti-AB
1 tetes suspensi eritrosit 5%
Anti-A Anti-B Anti-AB
• Campur &
• Sentrifuge:
15-20 detik,
900-1000 x g (3000 rpm)
• Button
(endapan)
eritrosit
diresuspen
si hati-hati
• Amati ada aglutinasi
atau tidak
1
2
3
Autocontrol selalu diikutkan dlm pem.
Ideal  antisera : sel = 2 : 1

27. 1 vol suspensi
eritrosit 2-5%
2 vol anti-A
/anti-B/ Anti-AB
Forward
Grouping
Inkubasi pada suhu
kamar (20-24oC) selama
5 menit
Sentrifus pada 1000
rpm selama 1 menit
Cek aglutinasi

28. Anti A Anti B Anti A Anti B
Anti A Anti B Anti A Anti B
A B
OAB
Forward Grouping/cell grouping
Pemeriksaan Golongan Darah Abo Dan Rh fikesumaha.ac.id

29. Gol dar Cell grouping Serumg grouping
Anti A Anti B Anti AB Sel A Sel B Sel AB
A 4+ neg 3+
B neg 4+ 3+
AB 4+ 4+ 3+
O neg neg neg
Pemeriksaan Golongan Darah Abo Dan Rh fikesumaha.ac.id

30. Sel A1 Sel B Sel AB
Masukkan 2 tetes serum pasien
1
2
• Campur &
• Sentrifuge:
15-20 detik,
900-1000 x g (3000 rpm)
• Amati hemolisis
• Button (endapan)
eritrosit diresuspensi
hati-hati
• Amati ada aglutinasi
atau tidak
• inkubasi RT 5-10 menit
utk meningkatkan reaksi
serum lemah
3
Pemeriksaan Golongan Darah Abo Dan Rh fikesumaha.ac.id

31. 1 vol susp eri 5%
Reverse
(serum)
grouping Sentrifus 1000 rpm
selama 1 menit
amati
Campur & diamkan di
suhu kamar (20-24oC) -
5 menit
2 vol
serum/plasma

32. Commercially available A and B cells are added to
two tubes of plasma
AB B A O
A B A BA BA B
Reverse grouping/ serum grouping
Pemeriksaan Golongan Darah Abo Dan Rh fikesumaha.ac.id

33. Gol dar Cell grouping Serumg grouping
Anti A Anti B Anti AB Sel A Sel B Sel AB Sel O
A neg 4+ 3+ neg
B 4+ neg 3+ neg
AB neg neg neg neg
O 4+ 4+ 3+ neg
Pemeriksaan Golongan Darah Abo Dan Rh fikesumaha.ac.id

34. Gol dar Cell grouping Serumg grouping
Anti A Anti B Anti AB Sel A Sel B Sel AB Sel O
A 4+ neg 3+ neg 4+ 3+ neg
B neg 4+ 3+ 4+ neg 3+ neg
AB 4+ 4+ 3+ neg neg neg neg
O neg neg neg 4+ 4+ 3+ neg

35. Pemeriksaan Golongan Darah Abo Dan Rh fikesumaha.ac.id
Sidoarjo, 29 September 2018
TERIMAKASIH