Diskusi tentang ekstrak dari daun dan kulit T. Arjuna

1. Antimicrobial activity of
Terminalia arjuna
Wight & Arn.: An
ethnomedicinal plant against
pathogens causing ear infection

2. Kelompok 1
Nama Kelompok:
1. Annisa Listyaindra k100130091
2. Nidia Paramitha k10014003
3. Mathinrahma k1001400
4. Sita Mulyawati k1001400

3. Abstrak
• Ear infection is one of the common diseases
occurring throughout the world. Different etiological
agents are responsible for ear infections
• Aim: To assess the antimicrobial potential of
Terminalia arjuna leaves and bark extracts
against Staphylococcus aureus ,Acinetobacter
sp., Proteus mirabilis, Escherchia coli,
Pseudomonas aeruginosa and Candida albicans,
pathogens causing ear infections and their
comparison with locally available ear drops.

4. • Bahan dan Metode: Methanol, etanol, aseton, air (panas dan
dingin) ekstrak dari daun dan kulit T. Arjuna. Diuji aktivitas
antimikroba dari daun dan kulit T. Arjuna.
• Hasil: evaluasi dari ketiga pelarut organik, ekstrak daun acetonic
menunjukan penghambatan yang baik terhadap S. aureus. Ekstrak
kulit organik menunjukkan penghambatan hampir sama dari semua
bakteri Gram negatif yang diuji kecuali P. aeruginosa. Namun,
ekstrak encer dari kulit T. arjuna menunjukkan aktivitas yang baik
terhadap S. aureus. Semua ekstrak tidak menunjukkan aktivitas
antijamur.
• Kesimpulan: Ekstrak Organik yang diperoleh dari kulit kayu dan
daun T. arjuna dapat digunakan untuk mengobati patogen telinga
terutama bakteri S. aureus, yang telah menunjukkan zona
penghambatan lebih besar dari tetes herbal, namun, kami masih
membutuhkan penelitian yang lebih rinci pengujian in vivo dan
farmakokinetik properti untuk utilitas terapi T. arjuna dalam
mengobati infeksi telinga.

5. INTRODUCTION
• Ear infection is more common in children than
adults, approximately 75% of children
experience at least three or more ear infections
during the first three years of life 1.
• Ear infection is mainly caused by bacterial
(Pseudomonas aeruginosa, Staphylococcus
aureus, S. epidermidis, Streptococcus
pneumoniae, Escherichia coli, Proteus mirabilis)
and fungal pathogens (Aspergillus niger, A.
fumigatus, A. flavus, Candida albicans)

6. Terminalia arjuna Wight & Arn., Umumnya
disebut arjuna (keluarga Combretaceae), adalah
daun dan pohon cemara
Kulit dan daun : untuk menyembuhkan penyakit
yang berbeda
kulit pada tanaman : untuk pengobatan angina
(hritshool), ekspektoran, antidisentri, purgative,
laxative, leucoderma, anemia, hiperhidrosis,
asma, tumor dan gangguan kardiovaskular
lainnya dan daun sebagai obat untuk pengobatan
sakit telinga.
Kulit pada tanaman juga memiliki antikanker
yang baik, antivirus dan aktivitas antimikroba.

7. Daun dan kulit T. arjuna mengandung :
a. Glikosida yang mempunyai efek:
pelindung cardio, flavanoid yang memiliki
antioksidan, anti-inflamasi, antimikroba
(luteolin), anti kanker dan efek menurunkan
lipid
b. Tanin bertanggung jawab untuk :
astringent, penyembuhan luka, antioksidan, anti
kanker, anti virus dan aktivitas antimikroba.
Selain phytocompounds kulit ini juga mengandung
triterpenoid yang terutama bertanggung jawab
untuk pelindung cardio dan efek antibakteri
(asam arjunic, arjungenin dan, arjunetin).

8. MATERIAL AND METHODS
• Plant collection:
Terminalia arjuna were collected from the trees
alongside the roads of University of Kurukshetra,
Haryana. The taxonomic identity of this plant was
confirmed by Dr. B.D. Vashishta of Botany Department,
Kurukshetra University, Kurukshetra

9. Ekstraksi bahan tanaman
Sampel dicuci dengan hati-hati di bawah aliran air keran diikuti dengan air
suling steril dan dikeringkan pada suhu kamar (40° C) selama 4-5 hari dan
kemudian di homogenkan sampai menjadi bubuk halus menggunakan mixer
grinder yang telah disterilkan dan disimpan dalam botol kedap udara. Empat
pelarut yang berbeda yaitu etanol, metanol, aseton dan air (panas dan dingin)
yang digunakan untuk mengekstraksi. Sejumlah 10 g kulit dan daun yang
homogen secara terpisah direndam dalam termos setiap 100 ml aseton, etanol,
methanol (95%) dan air suling steril. Dalam jumlah yang sama (yaitu 10 g)
dari kulit kayu dan daun yang homogen secara terpisah dalam 100 ml air
suling steril yang panas di termos dan didiamkan selama 30 menit pada
waterbath dengan sesekali diaduk diikuti dengan menjaga semua termos pada
rotary shaker 200 rpm selama 24 jam. Setiap persiapan disaring yang
didiamkan selama 30 menit pada waterbath kertas filter dan akhirnya
terkonsentrasi sampai kering di bawah vakum pada 40°C menggunakan
rotaevaporator. Sehingga diperoleh ekstrak kering yang disterilkan oleh
penyinaran UV semalaman dan diperiksa kesterilan dalam nutrisi pada
lempeng agar dan disimpan pada 4°C di botol berlabel steril sampai
digunakan lagi nantinya.

10. • Uji mikroorganisme
Lima bakteri yaitu Staphylococcus aureus (Gram positif),
Acinetobacter sp., Proteus mirabilis, Escherchia coli,
Pseudomonas aeruginosa (Gram-negatif) dan satu ragi, Candida
albicans digunakan dalam penelitian ini, diisolasi dari pasien
yang memiliki infeksi telinga dari klinik THT lokal Kurukshetra.
Bakteri strain diidentifikasi atas dasar pewarnaan, biokimia dan
karakteristik molekuler (16S rRNA sequencing) dan ragi atas
dasar pewarnaan, morfologi dan budaya karakteristik. suatu
bakteri mengisolasi disubkultur pada nutrient agar dan ragi pada
ragi malt agar dan diinkubasi aerobik pada 37°C, yang diperoleh
dari Laboratorium Hi Media Pvt. Ltd, Bombay, India.
• Obat tetes telinga
Tiga obat tetes telinga yang sering diresepkan oleh
otolaryngologist, two allopathic Ciplox (antibakteri), Candid
(antijamur), dan tetes telinga herbal Bilwa Tel (antimikroba),
digunakan dalam penelitian ini, yang diperoleh dari pasar lokal
Kurukshetra

11. Skrining untuk aktivitas antimikroba
Aseton, metanol, etanol, cairan panas dan dingin daun dan ekstrak
kulit kayu T. arjuna digunakan untuk evaluasi aktivitas
antimikroba oleh agar dengan metode difusi.
Steril DMSO (20%) berperan sebagai kontrol negatif dan ciplox
(untuk bakteri), candid (untuk jamur) dan Bilwa tel (antimikroba)
tetes telinga berperan sebagai kontrol positif. Aktivitas
antimikroba, ditunjukkan oleh zona hambat yang terlihat disekitar
mengandung ekstrak, tercatat jika zona penghambatan lebih besar
dari 8mm.
Penentuan konsentrasi hambat minimum (MIC)
MIC, diambil sebagai konsentrasi terendah dari ekstrak uji yang
benar-benar menghambat pertumbuhan mikroba, ditunjukan oleh
zona hambat yang jelas (> 8mm), tercatat untuk setiap organisme
uji.
Analisis statistik
Semua data yang disajikan sebagai mean ± SD (Standard
deviation). Hasil statistik dievaluasi menggunakan Dennett T-test.
Nilai P kurang dari 0,01 dianggap signifikan.

12. RESULTS
Aktivitas antibakteri ekstrak kulit dan daun T.
arjuna pada lempeng agar bervariasi dalam pelarut
yang berbeda. Dari sepuluh ekstrak disaring untuk
aktivitas antijamur, tidak ada ekstrak yang
menunjukkan zona hambat terhadap Candida
albicans sehingga kurangnya aktivitas antijamur.
Kontrol positif zona hambat yang dihasilkan
berukuran signifikan melawan bakteri yang diuji
dan ragi, bagaimanapun, kontrol negatif tidak
menghasilkan efek penghambatan terhadap
organisme uji (Tabel 1).

13. Dari data pada Tabel 1 menunjukkan bahwa semua
ekstrak dari enam pelarut organik dari daun dan kulit
kayu yang memiliki aktivitas antibakteri adalah empat
bakteri patogen, dari lima patogen yang diuji.
Ekstrak daun acetonic ditemukan untuk menjadi yang
paling efektif terhadap Staphylococcus aureus (28mm)
(Gambar 1) diikuti oleh Proteus mirabilis (27.6mm),
Acinetobacter sp (16.6mm) dan Pseudomonas
aeruginosa (16mm)

14. Zona hambat yang dihasilkan oleh ekstrak metanol dan
etanol terhadap S. aureus dan P.mirabilis berkisar
antara 24.6mm dan 26,3 mm. Ditemukan S. aureus dan
P.mirabilis adalah patogen yang paling sensitif yang
bertahan sampai 1,56 mg/ml dan 3,12 mg/ml (Tabel 2)
Di antara ekstrak kulit yang diuji, semua lima ekstrak
pelarut (organik dan air) menunjukkan aktivitas
dengan antibakteri terhadap S. aureus zona hambat
tertinggi di ekstrak air panas (27.6mm) diikuti oleh
ekstrak air dingin (26.3mm) (Gambar 2), ekstrak etanol
(26mm), methanol dan ekstrak aseton (23mm)

15. DISCUSSION
Ekstrak organik dari daun T. arjuna mempunyai aktivitas yang baik
terhadap empat bakteri patogen telinga yaitu : Staphylococcus
aureus, Pseudomonas aeruginosa, Proteus mirabilis, Acitenobacter
sp. Dan tidak menunjukkan aktivitas terhadap E. coli.
Ekstrak kulit kayu juga menunjukkan bioaktivitas yang baik terhadap
empat bakteri patogen telinga, namun, P. aeruginosa tidak sensitif
terhadap ekstrak kulit kayu.
Aktivitas antijamur terhadap C. albicans tidak ditemukan di kedua
pelarut organik dan air dari ekstrak daun dan kulit kayu T. arjuna.
Cairan ekstrak daun dan kulit kayu T. arjuna mempunyai aktivitas
antijamur yang relatif kurang terhadap C. albicans dan aktivitas
antibakteri terhadap bakteri yang diuji kecuali bakteri Gram positif,
S. aureus ditemukan sensitif terhadap cairan ekstrak kulit yang
panas dan dingin
Aktivitas antibakteri ditunjukan oleh ekstrak daun dan kulit T.
arjuna terhadap bakteri patogen telinga yang mungkin disebabkan
karena adanya metabolit sekunder seperti asam arjunic, arjungenin,
arjunetin dan luteolin yang mana telah dilaporkan sebagai
antimikroba di alam.

16. Penelitian ini mengungkapkan bahwa kedua daun
dan kulit ekstrak organik dari T. arjuna memiliki
anti spektrum yang luas aktivitas bakteri terhadap
patogen telinga, divisualisasikan dengan
pembentukan zona penghambatan baik Gram positif
dan bakteri Gram negatif
semua ekstrak organik tanaman ini menunjukkan
aktivitas jauh lebih kuat terhadap bakteri telinga
yang diuji dibandingkan dengan herbal standar obat
tetes telinga (Bilwa tel) sehingga memiliki potensi
besar untuk dikembangkan sebagai obat telinga
herbal untuk mengontrol bakteri infeksi telinga.

17. CONCLUSIONS
Bahwa, semua ekstrak T.arjuna diuji (dalam
salah satu diuji persiapan-aseton, etanol atau
metanol) telah menunjukkan aktivitas yang baik
terhadap Gram positif dan Gram negatif patogen
telinga, penghambatan yang lebih tinggi terjadi
pada bakteri Gram positif daripada bakteri
Gram negatif. Kemungkinan ini menjelaskan
penggunaan tanaman oleh masyarakat adat
terhadap jumlah infeksi setelah generasi.