1. На правах рукописи
АРУШАНОВА Елена Сергеевна
ВИРУСНЫЕ БОЛЕЗНИ НАРЦИССА
(NARCISSUS L.)
И МЕРЫ БОРЬБЫ С НИМИ
Специальность 06.01.11—защита растений
Автореферат
диссертации на соискание ученой степени
кандидата биологических наук
МОСКВА 1999
Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис»
2. СП''
Диссертация выполнена на кафедре защиты растений
Р<свинского Университета дружбы народов
Наушые руководители доктор сельскохозяйственных
i'j л, профессор Ю. И. Помазков, кандидат биологических
HJVK, старший научный сотрудник Л1. А. Келдыш
Официальные оппоненты доктор биологических navK
В. В. Мазин; кандидат биологических наук О. О. Белошап-
кииа.
Ведущее предприятие — Всероссийский институт защиты
растепли, г Санкт Петербург, Пушкин
Защита диссертации состоится «-Л» umct 1999 г
з <II*> час на заседании диссертационного совета Д 120 35 09
в Московской сельскохозяйственной академии им К А Тими-
Адрес 127550, Москва, л Тимирязевская, 49 Ученый
ЧСХА
С диссертацией можно ознакомиться в ЦНБ МСХА
Автореферат разослан « {<L-s> илоЛ . . 1999 г
Ученый секретарь
диссертационного совета—
Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис»
3. .. ОК1ЦАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАКОТЫ
Актуальность исследований. В настоящее время OIMCIUWTC* тенденции
возрастания внимания к качеству цветоводческой продукции, а также мерам
но обеспечению ее фигосаншарной безопасное!и. особенно при женорге
растительного материала. И мире доход от продажи декоративных растений
составляет около 50 миллиардов долларов, ич них 12 приходится на Западную
Европу и 6 - па США и Японию. В 1'кроне лидерами являются Нидерланды
(50 % мировой продукции цветоводства), а также Данин. Кельтия, Германия,
Италия, Израиль (l.avvson, 1946).Луковичные культуры приобретают все
большую популярность благодаря не юлько их замечакмьным декоративным
свойствам и незаменимостью при создании ланлшафюв в ранневесенний
период, но и тем, что они относятся к категории важнейших ныгоночных
культур, позволяющих получать высококачественную продукцию ишмм'ч;
время (Вылов, Зайцева. 1990).
Среди декоративных луковичных растений нарциссы занимают одно и»
ведущих мест, уступая лишь тюльпанам по разнообразию окраски цветка.
Увлечение згой культурой началось в • XIX
веке, когда в Англии, были получены многочисленные гибриды между
трубчатыми п крупнокорончагымн нарциссами. Современные сорта сложные
гибриды, многие из них полиплоиды. Коллекция ГНС РАН им. II. I). Цицина
насчитывает 265 крушюкороичатых сортов; Кб - трубчатых; 47 -.
мелкокорончатых; 34 - разрешокорончагых; 2ft - махровых и 26 - из всех
прочих групп. "•',-• •
Промышленная основа цветоводства имеет свою специфику, которая
подразумевает. широкую интродукцию посадочного материала, его
вегетативное размножение и монокультуру, что способствует интенсивному
развитию болезней и расширению их ареала (Бойко, 1990).
. Сдерживающим фактором промышленного цветоводства являются
инфекционные болезни, среди которых вирусные занимаю! наибольший
удельный вес (Макутенайте. 1992). Они вызывают потерю декоративных
качеств, ухудшение физиологического состояния растений и, в конечном
счете, причиняют значительный экономический" ущерб. Интенсификация
процессов производства усиливает вредоносность вирусных болезней и
особенно смешанных вирусных инфекций. Особенностью вирусных болезней
растений является гетерогенность вирусных Популяций, представленных
различными вирусами и их штаммами с разнообразными биологическими
свойствами. Отрицательное влияние вирусов на репродуктивнуюспособность
растений приводит к фенотяпическому изменению признаков сорта.
, ЦЕНТРАЛЬНАЯ
НАУЧНАЯ ЕГ-SJtttOTEKA
Моск.
им. К.
ИНВ. №
Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис»
4. снижению vpo/ная (скор iiiiKiuin ниыочноп про IKHIIM на 40-70 "a II
нырож luniio i«iui[iiiiiM4iiiiii к nupvt. ii соршн (V1inpo<|) пиша l
)42)
1'с<срнаЦ|1Я lllipv.llll 1ШС1ОЧН11Ч К 1Ыр » KLl jpitllkOHMX II U) ЮНЫХ II
ICCHIIX ipciieciiMx paciciuiux ciioeoiicniVei HI iskiiHaiuiio и Шфк 1Я1ИШ
вшГл in к. ни lie lOLiaioiuocu cue iciiiiii о eoeianc и paeitpocr ранении
mipvcon e южноеII. n inailiifciiiKii oieMeliuie' мер оорьоы с ними e ie ia.ui
ак1.Ы1.пмм шчченпе мои I pшп i naioieiioii
Цен. и i цачи nee ie ижапин II,LIIH iiiiepaipin i iaiuii>i и
lipe IBapiile ii.iu.ie nee ie%
юн шия проно шмие n I 1>С РЛ11 eiui leie n.eiBVior о
широком распространении Blipeoii p и m'llli.ix |акеоиомичеекн rpvilll в
KOI ieKi[iioiiiiij II.IC.I* leiiiDix leKopanmiiiIN ЦНСШЧНМЧ К n.np
И екнш е ним i i 1кже lie [oeiaiouiioii щччеппоеп.ю I.IFMKIKI вопроса
кошнкаег iieoiixo IIIMOCII (ю ice ici LIMIOIO щччепня ннрсон ltd pat нгшыч
npc iLi.mnie wx N truwis I Ценно наших псе ie KiRaiuiii являюсь
oiKieiioii шпе мер oopi t>i.i с внренымп taoo и-нлипямп на ынной к ibivpc H
спя in с >шм емки 1пс1>е ie' (мощие* ia.ui'iii
1 !1<чпп. ciciieiii. раепросiранения и харакир енмпюмов Hiipvciihix
iat">o leiiaiiiiii в ко i icMinoiniMx насаж юнпях Narcis>us I
2 Olipe ic llllk ми юной соеiаи нирчеов и Псрспосчпко» и BMte'iiiH.
lOMiiiiiipvioiuiic i шп • инфекции на нарциссах а киокс на рапнчных
npc lciaBiiic |ях поря ika I iliales про ician ICHIIUX u ко i ICKIIUHX
фон loiHiii оранжереи I laniioio (хианнческою caia
^ Paipaooraib ш м и н ы спсюмы oi юров юння Narcissus I для
v iv чтения качееша юкорашвпой цве-ючпои нрол>кшш и
сохранения ви юною и сортовою рапкюбрашя колпекиий
Научная почини paooibi Па нлрциесах днап юстированы
нсемононенпме моп к |ычре внрсы Bean >ello mosaic virus ( B Y M V )
Potato virus Y (PVY) Carnation latent virus (Cml V) Carnation mottle virus
(CrnMV) Iobacco necrosis vims (TobNV) Arabis mosaic virus ( A M V ) Tomato
ringspol virus (lomRSV) ЛИ alia mosaic virus (Л1 MV) Raspberrv nngsput virus
(RRSV) Tulip breaking virus (TBV) Iobacco rattle virus, (FobrfV) Всего
выявлено 16 вош'днre icft прннатежатих к 10 таксономическим группам
(Potv- Potex- Л1 MV-group Tobamo- Nepo- Cucumo- Carmo-, Carla-. Canno-
Fobra- Tobacco nee-osisgroup)
И»>ченне характера распространения вирусов на различных сортах
Narcissus L и представите 1я фонической и субтропической флоры порядка
Liliales выявило наличие смешанных инфекций доминирующими
компонентами которых являются Tobacco mosaic virus (TMV) и Cucumis
mosaic virus (CMV) Число компонентов комплексной инфекции достигает6
Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис»
5. (сорт Pastelina). ПокаWHO, чточастога встречаемое™ AMV; RRSV; TobNV;
lomRSV: BYMV; TobRV составляет 18: 7; I I : 5 - 6; 12 и 5.3 %
соответственно для каждоговируса
В результате проведенных исследовании, показана возможность
передачи на нарциссы CMV двумя нсспсцифичсскнми нидамп глей:
.Macrosiphum rosae (I..) и My/us cerasi (I'.): BYMV - Aphis labae Scop., a I'VY -
A. labae Scop, и My/us omatus l.aing.
Проведена оценка устойчивости-.растений Narcissus I.. (12 сортов) к 5
видам глей, регулярно выявляемых и посадках нарцисса. Лпалт
устойчивое!и различных сортов не выявил образной, обладающих
абсолютной устойчивостью.
Определены размеры жепданта. обеспечивающие )ффсктнв»юс1ь
оздоровления от комплекса вирусов при максимальном выходе растении:
составы питательных сред для получения алкснтинных побегов и индукции
ризогенеза. ' •
Впервые в растениях Narcissus 1..и некоторых представителях порядка
l.ilialcs диагностирован вирус, серологически родственный Х-вирусу шалота
(ХВ111: ShXV) п прннадлежттш. как мы предполагаем, к ipyinie XB1II-
подобных вирусов (Вишничснко,Лрушанова. Келдыш идр., I9W).
Практическая значимость работы, В результате комплексных
вирусологических исследований на культуре Narcissus I,. получены данные по
видовому составу вирусов, характеру их сочетаний в составе комплексной
инфекции, особенностям распространения. Они являются обоснованием для
ра<работки и усовершенствования комплекса профилактических мероприятий
в создании системы противовирусной защиты коллекционных насаждений
Narcissus L. *
На основании экспериментальных. данных с учетом имеющихся
сведений разработана методика оздоровления нарциссов от комплекса
• вирусов, Определен оптимальный размер , жеплапга для получения
освобожденных от вирусоврастений.
Идентифицирован новый ХВШ-подобный вирус на p. Narcissus L. и
некоторых представителях порядка l.ilialcs. .
• Апробация работы. Материалы доложены на XYII Международном
симпозиуме (23 - 27 June, 1997. Beihesda. USA): на HI Международной
.конференции «Цветоводство -сегодня изавтра» (Москва,1998).
Публикации. Основные результаты исследований опубликованы в 8
печатных работах. •
Объем и содержание работы. Диссертация изложена на 147страницах
машинописного текста и состоит извведения, 15глав, выводов изаключения.
Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис»
6. 1 со кр/Мп 2U I.IO inn, и i иоыриропаиа 9 <|)o101рафиями и рисунками
Список iinipaivpi.i нкIH)4JCI 2l
W панмишнанпн in коюрмх 220 па
иноыр nun i чшкач
( О (Н'ЖЧШИ 1Ч1.О1Ы
I «>ЬU)l>,1И 11 1>ЛIУ1'Ы ПО IfMl
I) uowpc нмсраирм прнкс KIII.I мчГыиклции not ie uw юг. лающие
чарам (.рнсшкл ocnouiu.iM инрчсным taoo юнанпям поражающий рол
Narussib I особспноыям urn» IOI им к 1Ыры lloipoono рассмотрены и
обсуж кии распространение и »pi. юноенос1Ь ннрспы |або ювапин,
поражающих шрцииы ИМИ p.icnpocip ШСПНЯ нирмон мсн>1Ы и
иссле тиамин и оиюшшс приеми HIIICI рмронашкш ирогнвокирспон
1.НЦН1Ы ОсоГнк. 11IMIM.1IIIH. 1СICIIO I1LIIO IM0H.1IIIIH) кЛ 1ЬГ>рЫ allllkdLlbllblX
мериекм как uii<oio m нажнепших мего юв освобождения растении от
ЙИрСМОН ИнфскЦПН
2 УСЛОВИЯ МЛНРИАЛЫ ИMl [ОДЫИСС'И ДОВЛНИИ
')кик.риме1па.1М1ан работа пронолп мсь на кафелре taiuinы растений
Российскою Унинсрсшоа ф^жбы народов и в оглею laiuiriы растений
Г явного 6oiaiin>K(.koio ca.ia им II 13 Циаина в течение 1995-1999 i г
Основными оГ)1л;мамп пескмований яв1Я1Ись прелаавитепи порядка
Lihalcs семспс|ва Amarxllidaceae рол Narcissus L, также проводили
скринпиш на «араженность вирусами среди различных представителей
тропической и с бтроинческон флоры
Л I» выявления и идентификации вирусов испотьзовали общепринятые
схемы со сгащаргным набором шиикаторных расгеиий ( Fulton.1960, 1967,
Murant I')70a 11ома(кон. 1978 Починков Келдыш 1979, Келдыш, Помазков,
1980 Index оГ , 1983)
Оценка устойчивости форм, сортов и видов к возбудителям,
переносчикам и векторный перенос проводили по стандартным методикам
(Помазков, Келды.и, 1979,Втасов идр , 1990)
Испытание чкепериментальных растений посредством переносчиков
проводили в боксах при оптимальной температуре 1 8 - 2 3 °С (Bnggs, 1959,
Келдыш, 1967) Применяли naipyiKy от 1 до 100 особей Обособленные
популяции глей-переносчиков в отношении которых проводится оценкана
Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис»
7. устойчивость, поддерживали на основном кормовом растении под
изолятором. Наблюдения за характером поведения переносчика проводили
в течение 24 часов. Учитывали число особен, оставшихся после подсадки.
Если череч сутки на исследуемых <1юрмах не остается пи одной особи, то их
относят к иммунным. Растения, на которых остается исходное количество
.тлей или более, считаются восприимчивыми и. могут рассматриваться в
качестве кормовых растений. Растения, на которых сохранилось меньше
исходного числа особсй,относят к заселяемым (Келдыш. Помачков, 1980).
Все /женеримешгальные работы по инфицированию и тестированию
растений проводились и контролируемых условиях, исключающих
возможность вторичного и перекрестного заражения.
Биологическое тестирование выполнялось по типоным для изучаемых
групп вирусов методикам. В набор травянистых растсний-индикаюров ;щя
механической передачи входили виды: Nicotiaita tabacum; N.ruslica; N.
glutinosa: Petunia hybrida; Datura stramonium: Cucumis sativus; Chenopodium
amaranticolor; Ch.quinoa: Phaseolus vulgaris. ; . ;
' .
Для приготовления инокулюма использовали 0,02 М фосфатный буфер
рН 7,5-8,0 с добавлением различных стабилизирующих соединений: кофеина,
ДИЭКА, 2 М1-, никотннсудьфата, активированного угля, аскорбиновой
кислоты и iip.(Cadman, 1956; Fulton, I960; 1967; Picrpoint, Harrison, 1963;
Lister, 1964; Метьют.' 1973; Гиббс. Харрисон, 1978). В качестве абразива
использовали целит или карборунд: непосредственно после инокуляции
листья промывали водой, что способствовало увеличению числа
образующихся местных поражении, а затем растения помешали в затененные
условия на несколько часов для повышения восприимчивости^ Holmes, 1929;
Bawrden, Roberts, 1948). В качестве инфекционного матсрихта использовали
листья Narcissus l.., травянистых индикаторов с признаками заболеваний.
Очистку ; и концентрирование препаратов выполняли с помощью
•дифференциального центрифугирования но схемам, которые
рассматриваются » соответствующих разделах данной работы.
' Инфскционность препаратов контролировали методом биологического
, тестирования на травянистых индикаторах, применяемых'для диагностики и
идентификации определенных вирусов .
* - • Видовой состав тлей в биоценозе декоративных луковичных растений
'.определяли методом желтых чашек Мерике (Moericke. 1951).
При диагностике и идентификации вирусов, поражающих Narcissus L.,
использовались: визуальная . оценка зараженности, серологический тест
(двойная иммунодиффузия в агаровом геле по Ouchterlony (1953)),
Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис»
8. иммупофсрмшгнми JIMJIHI f I ISA (Clark Adams 1977 Ьобкова. Чирков,
1ЧХ1 Гпутова. I48S AT.HK.KOB I4SS I angveld !«W6 Beck, Husted 19%) с
IICIIOJK.«поищем геы-сисгсч прошводства Ml У ПИИКХ, НПО «Ьиочар»
Л 1я постановки сероло! ическич реакции испо1ыова.ш 1акже сыворотки и
антшены, но юченные ш чреждепми Ьодгарнн I о ишнлпн I ермапин США
Кроме гою, примени шсь отечес шейные сыворогкн и лишены m Института
бшюр|-аничсскои химии им Шемякина,1СХА НИИКХ
Регистрацию регультагов нммупоферментного анализа проводили на
адсорбциометре фирмы «f)>nattch» модечь HR-700 «Microplate Rcadcn>
Ссролш ическому aiiaiiiuy метошм иммуноблоттиша подвергали
распгге 1ьные жстракты после низкоскоростпого центрифугирования (10 000
g 30 мин ) и очищенные прспарагы Экстракты по 1>чали in свежих ичи
замороженных щетьев исследуемых сортов Листья гомо1сшг1нровали на
холоде в ступке в присутствии эксграгирчютего 0 2 М ка.нш-фосфагно1о
буфера. рИ 8 5
Иммупоблоттинг проводили в соответствии с протоколом,
исполыуемым в качестве стандартною (Пшнннчсико и др 1996,
Vishnichcnko et al, 1994) В работе исполыовались ангисыворотки против
рекомбипактно! о капсилною бе 1ка ЧВШ (As 37) и рротив
высокоочншенною препарата интактных вирусных.частиц ХВШ (As I 4)
'Электронно-микроскопические исслечования проводили в ччектронном
микроскопе ЕМ-301 (Philips) Кшпрочь осуществлялся как в очищенных
препаратах, так и прямым методом (Brandcs |Ч57, Проиенко 1966)
Методы нммуносорбции и декорирования пеполмовалн в
модификациях Вишниченко В К, Стельмащук В Я , Завркева С К (1996)
Пассаж ХВШ-подобного вируса ш Narcissus L (сорт Super Star)
проводили на 2-х недельные сеянцы шалота A ascalomcum (cr Creation)
методом механической инокуляции при температуре 25°С и отнооггечьной
влажности 70% Тест-растения содержались в контролируемых условиях в
течений 3-4 недель Присутствие в них капсилного белка ХВШ-подобного
регистрировали на основании результатов нммуноблотинга с использованием
As I 4
Оздоровление растений от вирусных болезней проводили методом
культуры апикальных меристем Поверхностная стерилизация
осуществлялась 0,1 % раствором сулемы или 0 I % раствором диацида, время
зкепозиции 7 минут (Высоцкий, Шершень, 1993) Апексы выделяли при
помощи препаровальной ипы и малого глазного скальпеля Техника
приготовления питатепьных сред, стерилизация бокса, инструментов,
табораторной посуды, растительного материала, методика вычленения и
- 6 -
Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис»
9. посадки апексов, а также выращивание растений-регснсрантов общепринятые
(Бугснко, 1964; Калинин. 1980; Трофимец, Остапенко, Бойко, 1985).
Основная питательная среда содержала макро- и микроэлементы по
Мураснге-Скугу (Murashige, Scoog, 1962), сачарочу 30 г/л; агар-агар 7 г/л: рН
среды 5,6-5,8. Размер экспланта контролировали с помощью
окулярмпкрометра.
3. РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЙ
Симптоматический анализ чаболсваний, вычываемых вирусами
на рачличных сортах NARCISSUS L.
, . Таблица I.
Симптоматический анализ чаболсваний на некоторых
сортах Narcissus L.
Тип симптомов
Свстло-челеная крапчатость
Ь'слесая крапчатость •...,. >.'
Желто-челсная полосчатость . • •
Желто-белая полосчатость
Желто-челеная штриховатость
Светло-челеная илриховатость
Краевой хлороз •
Деформация (морщинистость),
краевой хлороз
Гофрнрованность листовой пластинки
Пестролепестность цветков ;
Измельчение растений, отсутствие
цветения
Сорт
She; Gipantic Star; I.ady Luck
Yellow Star; Selebrito;
Artist's Model; Sioux•
KissprolT; Bridal Rose; Shane's
Cas'le; Ullimus; Romi Barrow; .
Lord Nelson; Vivex
Fxplorer; Victory; Credo;
Spectacular
Scarlett О' Нага; Lime Chiffon; .
Biscaine; Gigantic Star
Am bergate. Explorer,
White Plum
Lord Nelson, Walt Disney,
Carlton
Undertone, Soldier Brave, Credo,
Selebrito, Honic Tires
Ambergate, Scarlett О' Нага
Daydream, Spectacular, .
Lemon Show, Artist's Model
Credo, Patriarch,
Feeling ducky. Kindled
Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис»
10. Исосшнания iipomi ШМЫС нами в IW^-1998 г г, свидетельствуют о
широком pticiipocip.iiK.Mnn и накоплении вирчеов pa зычных
ыксоиомическич ipyini млпро leonine IHсем Amaryllidaccac в жосистемах
ГЬС Раысния с нрншаками нирченон инфекции выяв 1с'ны во всех
коллемшоннмч насажденпяч
Н реч ibiaie обе ic um.iniiii КОЛЛСКЦИОННЫЧ насаждений Narcissus L В
течение |ЧЧ*-1ЧУ8 i i ciaiiouiciio что внешние пришакн вирусных
заболеваний варьирмог По пш симптомов их можно рдиыигь на
неско ibko ipymi (laui I)
Основной спектр симиюмов - MOIJIIMI иолосатос1ь шгрнчонаюсть,
песгро iciicciiiocib цветков деформация лиыьсн краевой viopo-»,
измельчение pacieunn oicMcmiie цвепенпя —отмечен _ нами на
коллекшюнныч поса.1кач нарциссов
Установлено, "то нреоо иыаюишмн на ку|ылрс являются прильнем
жечю-ic leiioH по юсагости и ^формация (моршиннсюсть)
11а некоторых copiax 01мечено сочетание симптомов, например,
деформация шегьев и ипрнчоваюыь (Scarlett О liar* Ambergate),
деформация и iiiMc н.чение растении (Credo), красной хлороз и желго-«лен<1я-
полосатость (1 ord Nelson)
Количественный учет больных растений в динамике свидетельствует о
том. что уве шчнваегся и пропет поражения сортов (габл 2), причем данная
тенденция отмечена не только на культуре Narcissus L. но и на других
луковичных культурах
Таблица 2
Распространение вирусных болезней в культуре Narcissus L
по годам изучения
Период
изучения
(года)
1986
1995-96
1997-98
Культура
Нарциссы
Нарциссы
Нарциссы
Количество сортов (шт )/% от общего числа
сортов
Обсле-
довано
сортов
457/100
239/100
239/100
% пораженных растений в сорте
до 10%
386/84,4
30/12.6
16/6.7
10-50
%
36/7,9
79/33.1
20/8,4
>50 %
6/1,3
85/35.6
42У17.6
100 %
25/5,5
45/18.8
161/67,4
-2-
Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис»
11. Из данных таблицы следует, что вирусологическая ситуация в
коллекционных насаждениях за период с 1986 г. Иретерпсла значительные
изменения. Сорта, в которых было поражено 100% растений, в 1986 г.
составляли лишь незначительную долю от всей коллекции ( 5,5 %). К 1998
году больше половины обследованных сортов нарциссов оказались
пораженными на 100%.
В связи с данными по расширению спектра хозяев вирусов,
поражающих Narcissus L., за период 1996 - 1997 гг. были проведены
исследования, в частности, визуальная диагностика, на представителях
порядка Liliaies (открытый и закрытый ipyirr). • . .'
Визуальный анализ и обследования растений из различных семейств
порядка l.iliales показали наличие растений с симптомами вирусных
заболеваний.
Таким образом, отмечена тенденция распространения н увеличения
степени поражения, а также стабильное присутствие вирусной инфекции, в
целом типичное для большинства сортов.
Мониторинг распространения вирусов в коллекциях нарциссов.
Методом двойной диффузии в. геле было испытано 9 сывороток к
различным вирусам и проанализировано более 100 сортов Narcissus L. с
выраженными вирусоподобными симптомами.
Согласно полученным данным, в коллекционных насаждениях
открытого грунта из основных возбудителей, зарегистрированных на
нарциссах, нами выявлены: Tobacco mosaic virus (TMV) - на 5 сортах;
Cucumis mosaic virus (CMV) - на 9 сортах. Из несвойственных возбудителей
выявлены: Carnation mottle virus (CrnMV) - на 13 сортах; Soybean mosaic virus
(SMV) - на 19 сортах; Chrysanthemum virus В (ChrVB) - на 18 сортах.
• По данным ДДА уровень распространения на изучаемых сортах таких
вирусов, как CrnMV, SMV, ChrBV, TMV и CMV составляет соответственно
54,2; 79,1; 75,0; 20,8 и 57,5 %.
Согласно данным . серологического анализа, проведенного : методом
двойной диффузии, в коллекционных насаждениях преобладают: SMV;
CrnMV и ChrVB.
Растения различных сортов Narcissus были также проанализированы с
помощью ИФА (ELISA), как одного из наиболее чувствительных и точных
методов. В результате анализа, проведенного в культуре Narcissus L. были
выявлены: Narcissus mosaic virus (NMV) - на 5 сортах; TBV - на 3 сортах;
TMV - на 14 сортах; ALMV - на 6 сортах; AMV - на 1 сорте; CMV-Hal6
Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис»
12. юртах, Cml V - на 15 сортах CmMV - на 3 сортах TobRV - на 2 сортах
Potato virus S (PVS) - на 1 сорте, PVY - на 7 сортах, lobNV - на 4 сортах
TotnRSV - на 2 сортах Hean yellow mosaic virus (BYMV) - на 4 сортах RRSV
- на 2 сортах
IJKIIM образом но данным ИФА, на ьол юкцнонных насаждениях
Narcissus I к числу доминирующих можно отнести TMV, CMV и Cml V
Таблица 3
Распространение вир)сов па Narcissus I и раыичных представите1ях
порядка 1 lhales
Количество видов/соргов
Lilialcs* S видов
Marcissus L ** 13 сортов
3
6
1
4
1
5
6
14
4
9
11
16
4
15
-
3
1
2
[ pyuiui вирусов
Pol-
Л1 MV-
1 obacco Nccrosis-
Potex-
ГоЬапю-
Nepo-
Cucumo-
Carla-
Carmo-
Tobra-
Ro {будиre in
PVY, FBV, BYMV
AIMV
i
lobNV
NMV
TMV
RRSV, TomRSV,
AMV
CMV IAV
CrnLV, PVS
CmMV
TobRV
* - HIпртсстнроваиных 16видов
** - in прпгесгированиых »4 сортов
Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис»
13. На представителях тропической и субтропической флоры по нашим
данным были зарегистрированы: TBV - на 3 видах (Polianthes tuberosa;
Tupistm sp.; Amaryllis beladonna); NMV - на Semele androgina; CrnLV - на 4
видах (Crinum asiaticum; Chlorophytum sp., I; Polianthes tuberosa; Amaryllis
beladonna); ALMV - на 3 видах; CMV - на 10 видах; TMV - на 6 видах;
Tomato aspermy virus (TAV) на Asparagus setaceus; AMV - на видах; TobNV -
на Tupistra sp.; TobRV - на Zcphyranthes Candida; TomRSV на Chlorophytum
sp.2; BYMV - на 2 видах.
Таким образом, по данным H<t>Ai на растениях сем. Liliales также
преобладают TMV и CMV. •
На культуре Narcissus L. и представителях порядка Liliales обнаружены
основные: NMV, TMV, CMV и несвойственные вирусы: CmLV, CmMV,
RRSV, TomRSV, PVY, PVS, TBV, BYMV, AMV, принадлежащие к
различным таксономическим группам (Табл. 3).
Изучение характера распространения вирусов на различных сортах
Narcissus L., а также в пределах видов порядка Liliales, в коллекциях выявило
преобладание смешанных инфекций(табл. 4).
Таблица 4.
Распространение смешанной инфекции на Narcissus L. и
видах порядка Liliales по результатам ИФА
Число '
сортов и видов
Narcissus L;
34 сорта
порядок Liliales
16 видов
Количество сортов и видов со смешанной
инфекцией/%
моноин-
фекция
6/17,6
5/31,3
2 возбудителя
8/23,5
5/31,3
3 возбудителя
11/32,4
3/18,8
более 3-х
возбудите-лей
9/26,5
1/6,3
Показано, что, как правило, в составе комплексной инфекции
присутствуют от 2 (сорта Undertone, Credo) до 6 (PasteUna) компонентов у
Narcissus L. и от 2 (Veltheimia viridifolia, Asparagus setaceus) до 4 (Polianthes
tuberosa) у видов из порядка Liliales.
Присутствие TMV, CMV, NMV, PVY, TobRV было подтверждено
данными биологического тестирования. Иэоляты NMV, CMV, TobRV и
TomRSV, выделенные из нарциссов, в некоторой мере отличаются по
физическим показателям и эффективности передачи от типовых штаммов, а
. / ; ' •"
;
' •• • - и -
Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис»
14. также июлягов н« бобовых кльг>Р юмагов и тюльпанов ( Волощк, 1985,
Зитикаите 1488 Тертяк 1490)
Но морфоло! ическим свойствам мрегнырнрована идентичность
типовых штаммов (по pew штатам яектронпой микроскопии)
4. И1УЧ1ПИЕ РОЛИ ПИ И В РАСПРОСТРАНЕНИИ ВИРУСОВ
НА NARCISSUS I
Извиню, чго распространение фитовирусов тесно свжано с
ра1лнчными переносчиками которые являннея )ффективнымн факторами их
передачи в прирохе (Развяшша, 1475 I иббе Харрисон 1978) Исхош lit
»гого для разработки мероприятий по ищите раосний от вирусной инфекции
необходимо шучение фпны переносчиков и их выимоотношепии с
вирусами Наиболее активную и чногочиеченную фуппу переносчиков
вирусов растениП представляют I m (Aphididae)
Нами в экосистемах текоративных ЛУКОВИЧНЫХ кутыур выявлено 15
видов i.iL-и Данные полученные на основании исполыования жсл1ых чашек
Мерике, свидетсльстнют о наличии в составе сборов ви юв г icft
приуроченных к pat шчным кульivрам (Aulacorthum solani (Kail) M>/us cerasi
(F), Hyalopieras pruni CJCOITT D;.aphi!> ы>гЫ Kalt ) наряду с вшами,
характерными для цветочных растений (Dsaphis tulipac Ud Ь Macrosiphum
rosae(l ), Macrobiphum Iih (L ) My/us ornatus I amg)
По речу чьтатам вщуальных набпюдений (в динамике) на нарциссах
зарегистрированы - Myzus percicae Su!z A solani
Таким образом, отмеченные вилы глей правомерно рассматривать в
качестве потенциальных векторов вирусов на тучаемых кучьтурах
В современной чкологической обстановке наблюдается усиление
вредоносности и распространения несвойственных ряду культур рапичных
вирусов Огому способствуют номейетвия стрессовых, а1ггропогснных
факторов и приемов, используемых при интенсивных технолошяч (Келдыш,
Помазков 1985. Кетдыш 1995) При этом формирование новых
патологических комплексов происходит на фоне количественного и
качественного изменения динамики распределения вирусов переносчиков и
состояния их ПОПУЛЯЦИЙ Векторы (переносчики) яв1яюгся одним ш
существенных факторов изменения видового сос-ава и расширешгя круга
растений-чозясв вирусов (Келдыш Помажов Червякова, Арушанова, 1998)
Результаты жепериментов по изучению роли тлей в распространении
вирусов на нарциссы претставлены в таблице 5
-12-
Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис»
15. l.]f> мша5
И<>чение векторной негк, ычн вирусов на Narcissus 1
1переносчика | Bupve | ')ффск|ив|шс1ь , Koinpo iwioe
пере ычн
К, pcrsicae Sul/ [ СMV __ ^ 4Х
Mac rosae (I )
M cerasi (I ) CMV 4»
JVIJIUSIJUIC Sul/ _ J IJYMV I 1
Л labacScop *
M регмеас Sul/ J PVY I _ 22 I »
Л labaeScop J I'VY Jf 26 f - ~ -1-
M omatus 1aign I PVY L
П i ••
В poiv ii.idic нронсленпыч >KciicpiiMciiiOH HiiKaiano ч ю наряд с
lUHCiTHMM переносчиком M pi,rsit.ie ы н ш ш и iitpe ыча u.i napiiiitchi CMV
двумя iiccnatiu|)ii4ttKii"
<
ii ни lavin i itn M rosat и M itrasi HYMV - Л fabac
a I
J
VY - Л labat и M uniatut причем н|)фскшн|икгь перешчи
in.ciiciuuLinnipiiHjnni 1ми ни lavui i ILKtociaii IH ы П -40"o
1аким обра(ом мнимая » tipMpc афи юфапы ihonii4iiu
лскорагивных кук.гур танин 1ьное ч ш о они ioii шр.иь оире ш ICIIIIMO
ро 1Ь в иерешчс инфекции PVY BW1V и CMV Причем ия ни ы М terasi
была показана tnotoonocib к пере ыче CMV HI OUIOKIIOIO Минина как
крылатыми так и бхкрылымн (.та.шями
Исполыопание еортов и BICIOB об ia.iaiomii чсюичиноегью к векторам,
пре'лставпяст наиболее (ффекшвиый способ (апшгы pacieiniii от паюгенов
вир)спой >гиоло1ии причем оеоб>ю ценность ия пракшкн пре ктавляют
topTa и В1ЫЫ об 1алающпс фчпповой чеюйчивоел i ю
Нами npoBoaii.iaci.paGoia по оценке еюичнвосги 12 еоргов Narcissusк
S видам пей регулярно выяв шемых в поеалкач нарцисса
Анализ устойчивости рашичпыч сортов нарциссов не выявил обра}цон.
облаланшшх абсолютно!!УСТОЙЧИВОСТЬЮ (табт 6)
Реакция нарциссов на все тчаемые вп ил г км в не н>м выровнена, на
всех сортах тли способны питаться в |счснпе перио ы лослагочною JLX
инфицирования Исключение сосчавляеч ниш. I) sorbi коюрая на всехсортах
нарциссов присутствовала не более I часа
Таким образом все 1есшремые topia Narcissus L опюсягся к
(асе (яемым а сорта Ноше Ьгсь и I ord Nelson являкпея кормовыми для М
ccrasi и Л Fabac В pci n.iaic nccie ювашш нылс ICHM уешичипые к
-/3-
Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис»
16. населению различными видимп rjieii-псреносчиков: M.persicae - 3 сорта: II.
pruni - 4; М ccrasi - 3. -
Таблица 6.
Оценка устйчиноет пско'юр'мх сорюн Narcissus L. к тлям-нереноечикам
Тестируемым
сорт
Super Siar
(Ionic 1 ires
Bridal Rose
Ambcrjiaie
Undertone
Credo
Lord Nelson
l.imcChilTon
Daydream
Patriarch
Tedstone
Sentinel
Число сохранпншихся in 5 подсаженных особей
черсч 1/3/24 часа
M.persicae
5/5/4
6/6/2
• 3/3/2
6/4/3
5/4/0
6/4/2
5/5/4
-
5/5/1
4/3/0
5/4/1
5/1/0
Л.ГаЪае
2/1/0
2/2/7
2/1/У
1/2/1
-
3/4/2
4/2/6
2/0/0
4/3/1
4/1/0
3/2/0
4/1/1
D.sorbi
3/2/0
1/1/0
0/0/0
0/0/0
2/0/0
0/0/0
1/1/0
1/0/0
2/1/0
1/1/1
0/0/0
1/0/0
II.pruni
4/3/1
2/2/2
4/2/0
5/1/0
-
6/4/0
2/3/2
2/2/2
2/1/1
6/4/2
5/3/0
2/2/1
М.ccrasi
2/1/0
2/2/7
2/1/9
1/2/1
-
3/4/2
4/2/6
5/2/1 n
5/3/1
1/1/0
2/2/1
1/0/0
5. идштиФИКл! 1ия iшевойс mi:i иibix ВИРУСОВ IIA КУЛЬТУРЕ
NARCISSUS L.
Наряду с традиционными вирусами нами выявлены и несвойственные
возбудители на видах, входящих в семейство Amaryllidaceae, порядок Liliales
(Amaryllis L., Narcissus I..)-
Задачей нашего ,исследования был поиск вирусов, серологически
родственных ХВШ на представ1ггелях таксонов эволюшюнно близких роду
Allium. В результате проведенных исследований в растениях ряда видов,
принадлежащих к семействам Liliaceae и Amaryllidaceae, был обнаружен
вирус, серологически родственный ХВШ - первый представитель ХВШ-
подобных вирусов, инфицирующих растения, не принадлежащих к роду
Allium . Антиген, серологически родственный капсндному белку ХВШ, был
обнаружен в двух видах рода Chlorophytum, в нескольких сортах Lilium L., :
Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис»
17. dsupit uiiium и нарциссов
Д|я alumina распространения X1H1I на KV н.прс Narcissus (
itcno (ыовали 2 aiiniCbiBopoiMi к HJIIUI UIOVIV бе IKV - As >7 it As I 4 - к
lunakTHMM вирионам в очищенном upcnapaic
Чналш нрово ныи с 7 lopi.ivui Narcissus I j рис IЛ it Ib
про ician ILIII.I имм>нобло|Ы ж е ф а м о в (рис 1А1 и копненфированпых
препаратов(рис 1Ь)
В жефактах и конциприроианпых препарат* ирису ICIBMOI 2 к lacca
вирусного капси шого белка с мо ICK |ярнымм массами 47 кДа и 28 кДа
Причем ее ш в Ь сортач приемсшонл,! н> 1ько (к юк 28 кДа (рис 1 Л, Ь
лорожкн 1-4 и 6-7) н copie Super Star ( шрожка ^) оЛнару-женм "ба класса
калек ним о бе жа
Максимальная коннешраиия UIHHOIO анипсна наб по юлась н шеи.ях
нарциссов в фаю цветения IIOMDMV IUIIIMII p icime ч.нын Maicpiiui
испо 1ыова.1ся .vi» нолчсния омишеннпч нирC1U.I4 ирснар.пон В таких
препаратах прис icntoiia^ui 2 к lacca вирчепою кансн пни о б е ж а с
мо1скмярными массами 2К кДа и ^7 кДа (рис 2А) Aiiliici niopoiKa прошв
рекомбинацию!о капси llioi о бе |ка BIIl s 37 peai npon.ua с бетком 28 кДа
(рис 2b) lot ia как антнемнорожа полученная прошн иысоюючшцепных
1
•37*4а -
•Ziru.IL-
— I
6 7 Ь 9 С 5 а о
Ь
в 9
Рис I Имммюбтоттнг жеграктов и концентрированных
препаратов ХШП-подобною ииреа нарписсон Дорожки I - 7 -
сортообраэиы Narcissus I (Davdreain Sentinel I ord Nelson
Credo Super Star 12 5 12 2") юрожки 8 Q - контр» ib
(проана.Ш1ированные ранее жырамм iKa-ina.iora)
Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис»
18. препарат» XBIII As 1.4 реагировала с белками обоих классов (рис. 2В). В
результате обработки -экстрактов листьев Narcissus L. неионным летергекгом
Тритон х 100 освобождался и селимеш провал в стандартных условиях
11ситрнф> гиропашм (SW 2Х, 25 000 об/мин. 2.5 ч) реагирующий с As 37 белок
с молекулярной .массой 55 кДа (рис. 21).
Рис. 2. Элекгрофоретнческни и серологический ana.ni»
очищенных препаратов XIUII-модобного >*вируса нарциссов: А
- -электрофорез вирусного препарата в 10 % ИААГ; В, В -
иммуноблопинг препарата, полученного с использованием
соответственно As37 и Asl.4 : Г- иммупоблоттинг препарата,
полученного с использованием пененного дегергента тритон X-
100, As37; Д - иммуноблоттинг очищенного препарата
выделенного стандартным методом.
По-видимому, данный белок представляет собой димер капищного
белка с молекулярной массой 28 кДа, однако механизм их образования и
структура в настоящее время неизвестны. Неясно также, какие различия в
первичной структуре 28 кДа и 37 кДа капсидных белков ХВШ-подобного
вируса нарциссов обуславливает столь существенную разницу их кажущихся
молекулярных масс. Существование двух классов капсклного белка ХВШ-
подобного вируса нарциссов может быть связано с гетерогенностью молекул
капсидного белка этого вируса по степени гидрофильное™, однако, трудно
объяснить, почему при серологическом анализе методом иммуноблотинга 37
кДа калсидный белок реагирует с антисывороткой Asl.4 и не реагирует с
антисывороткой As 37. • .
Исследование очищенных вирусных препаратов из листьев Narcissus L.
методами иммуноэлектронной микроскопии выявило наличие в них массы
гибких частиц длиной около 800 нм и диаметром 12 нм (рис 3).
Однако на основании факта декорирования незначительной части
вирусных частиц можно сделать вывод о достаточно низкой степени
-/е-. • • • • - - . • ' " • • : , . • : • ; . . • , . • ;
Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис»
19. Рис З Иммупо1лск1ронная фотография очищенных ирспаратон
ХВШ-полобиого вируса нарцисса
ссроло! нческого родства выявленного вирусаXBL1J
Результаты (.вилетсльствуюг о том, что в растениях нарциссов,
амариллисов присутствует вирус, серологически родственный XDU1 и
принадлежащий, как мы полагаем, к ХВШ-подобным фитовирусам Наши
исследования показали, что данный вирус легко передается механически и
способен репродуцироваться в сеянцах талоiа в условиях моновирусной
инфекции и накапливаться в них в значительных концентрациях
6 РАЗРАБОТКА ЭЛЕМЕНТОВ ОЗДОРОВЛЕНИЯ NARCISSUS L
МЕТОДОМ КУЛЬТУРЫ ТКАНИ
При разработке методов получения безвирусного растительного
материала необходимо учитывать влияние генетических, физиологических,
гормональных и физических факторов
По данным наших экспериментов наибольший выход безвирусных
растений (до 75 % при культивировании экешгантов в 0,2 мм) наблюдали у
сорта Super Star Приживаемость эксплантов малого размера была
значительно ниже по сравнению с более крупными Оздоровительный эффект
(по данным ИФА и ЭМ) был выше и достигал 57,1 - 75,0 % от числа
регенерировавших Данные таблицы 7 свидетельствуют и о сортовой разнице
в приживаемости эксплантов и в выходе безвирусных растений по трем
размерам, хотя зависимость от размера экспланта сохраняется посортам
Согласно модели «Скуга-Миллера» (Scoog, Miller, 1957), образование
побегов стимулируется при наличии преобладающих концентраций
Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис»
20. Влияние размера жеиланта па выход безвпрусных
pacicitiiii Narcissus L.
Сорт
Super Star
Patriarch
Lord Nelson
Pil'iMCp
жеплашов.*
MM
0.2
0.3
- 0,5
0.2
0.3
0,5
. 0.2
0,3
0.5
•
HIT.
X
13
15
7 -j
10
13
X
12
13
Регенерировано
icero '
Го
26,6
43.3
50.0
23.3
33.3
43,3
26.6
40.0
43,3
Таблица 7.
Бечвирусных
шт.
6
3
1
4
3
0
• 5
3
%
75.0
23,1
6,6
57,1
30.0
0
62,5
25,0
15,3
•- 30 'жеплантов меристема!ической iканн.
цитокимииа но отношению к ауксину, гогла как обратное соотношение
способствует образованию корней. Данная модель приемлема для большого
числа растений, но. ее нелыя считать универсальной. Концентрации
гормонов, необходимые для органогенеза, широко варьируют и для каждого
вида определяются эмпирически (табл. 8).
При повышения концентрации а-нафтилуксусной кислоты до 5 мг/л
сильно возрастает процент образования кадлусной ткани ( 31,0 % у сорта Lord
Nelson), что является нежелательным из-за генетической нестабильности
(Balzan, 1978, Williams, Collin, 1976) и достаточно трудно добиться
контролируемого морфогенеза (Катаева. Австисов, 1981).
В результате проведенных "кепернментов показано, что оптимальные
концентрации гормонов для сортов Narcissus L.: БАП - 10 мг/л, ПУК - I мг/л,
при которых получено наибольшее количество растений-регенерантов (до
40,3 % у сорта Super Star), при этом процент каллусообразовапия невысок (до
6,2 %)(табл. 9).
Таким образом, проведенные- исследования показали, что
приживаемость эксплаптов разного размера и выход безвирусных растений-
регенерантов зависит от многих условий: сортовых особенностей, состава
среды, физических факторов выращивания. Однако, увеличить выход
безвирусных растений возможно путем сочетания метода культуры • .
Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис»
21. Liu HUM8
Морфогсне-i ме'рнсгсм Narcissus I на pa«личных ере ia
I lit)IV
Сорт ДЛИ IНО Ilipo
I
Состав ере И•
(MI/0
i
пе-
| Чарамер I ПоIVMCHO
npiaiioicfic la ] pacicmiii
noiKiMili KOil ive peieiie- |
ванных
MtpiltlCM*
i INCH lairra
I
| Super Маг _ J
I фиююр-
моиои
(K.I
фимнор-
MOHOB
204
174
П
1
0 0
00
I 00
I pjiiion
10 H
Super Star
Patriarch
I ordNelson
Super Slar
Patriarch
1 ordNelson
Super Star
Patriarch
Lord Nelson
MC<
ЬЛП 10 0
11УК 05
MC -
ЬЛП 10 0
ПУК 1 0
MC t-
ЬЛП 100
11УК s о
1 MC 1-
ЬЛП 10 0
' НУКО^
MC +
1 ЬЛП100
1 ПУК 10
MC ~
' ЬЛП 10 0
1 НУКso
1
i
1
44 1
43 4
M) 4
4SX
40 0
167
1 8
2 4
0 0
2 1
1
00
1
S 1
il*2 *Г
1
23 I
i 219 1
, 304 1
, 3 1 0 X
14 4
17 9
21 2
40 1
38 7
30 4
1 4
II 2
00
—1
-
* -20 "жсшшшов меристема!ическои ткани
Pel операционная способноегь меристем Narcissus I
Табчииа 9
Сорт
Super Star
Patriarch
Lord Nelson
Погибло апексов•
от инфек-
ций.
5 7
4 2
43
в процессе
культиви-
рования.
Характер
opiaiioieHcia"
побеги in
жепланга
"'о
43 2 | 4->8
49 4
56 9
400
36 7
ка.1ivc
53
I10TV4CIIO
растенмн-
pei енерантов.
40 1
6 2 | 38 7
2 3 | 30 4
* -i n20 жеплатов
* * -cpeja содержащая ЬЛП - 10 мг/I П У К - 1,0 MI/ I
-iS-
Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис»
22. апикальных меристем с хемо- и термотерапией. Устойчивость сортов к
инфекции также, несомненно, оказывает влияние на результативность
оздоровления рода Narcissus L. от вирусов.
ВЫВОДЫ
1. Вирусные заболевания выявлены на 239 сортах Narcissus L. различного
происхождения в насаждениях коллекционного типа, а также на 33 видах
представителей тропической и субтропической флоры.
Отмечена устойчивая тенденция их распространения по сравнению с
1986 годом. Заражение комплексом вирусов отмечено практически на-100 %
изучаемых сортов Narcissus L. Комплексная вирусная инфекция доминирует и
на обследованных видах порядка Liliales, причем число компонентов
вирусного комплекса варьирует от. 2 до 6, . .
2. Доминирующими симптомами в насаждениях Narcissus • I-. являются
мозаика, полосатость, краевой хлороз, пестроленестность цветков,
деформация листьев, измельчение растений. На изученных представителях
тропической и субтропической флоры порядка Liliales доминировала
мозаичность. . . ,->• . "' " ~" *'-
3. Данные симптоматического, серологического, индикаторного и
электронно-микроскопического анализов свидетельствуют о широком
распространении TMV; CMV; CmMV; PVY; CrnLV; NMV; AMV; RRSV;
TobNV; TomRSV; BYMV и TobRV на культуре Narcissus L.
4. Установлено, что большинство возделываемых сортов поражены
комплексом вирусов; 23,5 *Л сортов поражены 2-мя возбудителями, 32,4 %
сортов - 3-мя возбудителями, а на 26,5 % сортов обнаружено более 3-х
в о з б у д и т е л е й . '"••. '• ' . < . - ' " " " ' . . л - , * - * " / ,- ;' , ., ' -. • ••• .'.-'••
5. В насаждениях Narcissus L. установлен состав комплексных инфекций,
видовой состав возбудителей, выявлено широкое ^ варьирование,- и
трансформаиия признаков Проявления вирусных комплексов. Наибольшая'
стабильность проявления симптомов характерна для сортов: Lord Nelson,
Scarlett ОНага, Super Star, Patriarch.
6. Среди обследованных сортов Narcissus L. не было выявлено
представителей, обладающих комплексной устойчивостью к возбудителям..
Показана тенденция расширения ареала меспеиифическнх возбудителей
(PVY; ShVX; CmtV; CroMV), что обуславливает необходимость
оздоровленияхозяйсткенио-иенныхсортовNswcissusL..» " ;' •.!: 7
7. Все тестируемые сорта нарциссов относятся к заселяемым, а сорт Honic
Tires и Lord Nelson являются кормовыми для М. cerasi и A.fabae. В результате
' . • ' * '•- " • ' ' - > - г о - . " -' ; ' ; . : ' ' , . ' . " . ; . ; - ; ' . " ' " . .
;
: •" " - : : ;
:
Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис»
23. исследований выделены устойчивые к заселению различными видами тлей-
персиосчикон, М persicae - 3 сорта Л fabae - 4 сорта, Н pruni - 4 сорта, М
cerasi 1 сорта Выживаемость тлей на различных сортах значительно
колеблется
8 В результате проведенных исследований в растениях ряда видов,
принадлежащих к семейстшам Liliaccae и Amaryllidaceae был обнаружен
вирус, серологически родственный ShVX Антиген, серологически
родственный капсидному белку ХВШ обнаружен в fleyv видах Chlorophytum,
4 сортах Amaryltis и 14 сортах Narcissus L
9 В экстрактах и концентрированных препаратах присутствовали 2 класса
вирусного капенлиого белка с молекулярными массами 37 и 28 кДа
Исспедованив очищенных вирусных препаратов ш листьев нарциссов
методами иммуноэлектроннои микроскопии показало наличие в них массы
гибких нитевидных частиц длиной ~ 800 им и диаметром ~ 12 нм XBI1I-
полобный вирус легко перелается механически и способен репродуцироваться
в растениях шалота и нарцисса в условиях моноинфекции
10 С целью получения оздоровленных растений был апробирован метод
культуры апикальных меристем Оптимальная величина экспланта составляла
0,2 мм для получения безвирусных растений, а концентрация
гормонов БАП - 10 мг/л, НУК - 1 мг/л. при этом процент каллусообразования
составлял ~ 6 2 % Для индукции ризогенеза уменьшали вдвое содержание
минеральных солей в среде МС, концентрация НУК составляла 0,5 мг/л
ЗАКЛЮЧЕНИЕ
При разработке системы защиты цветочных культур, и, в частности,
Narcissus L, от вирусов необходимо учитывать особенности их
эпидемиологии в условия коллекций и экспозиций Исходная позиция
заключается в квалифицированной оценке экологической и фигосанитарной
обстановки (состав вирусов и их переносчиков, состояние их популяций,
биолого-экологические свойства растений хозяев и уровень взаимодействия
между ними) Вирусы являются неотъемлемыми сочленами любой
экосистемы, в этой связи, очевидно, нереально содержание во времени в
коллекциях «безвирусных» линий, клонов и форм растений Оптимальная
методология противовирусной защиты на современном этане ориентируется
на формирование агроценозов, в которых реализуется возможность
механизмов регуляции плотности вредных организмов и включает
следующие основные этапы
• направленное формирование коллекций, экспозиций, ограничивающих
-«?•-
Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис»
24. уровень распространения и непрерывность циркуляции традиционных и
«новых» вирусов и переносчиков (введение устойчивых сортов и видов, в
том числе с латентной реакцией); .
• внедрение системы оздоровления при производстве посадочного и
семенного материала (тестирование, термо (химио-) терапия, культура
. меристемы);
• оздоровление отдельных сортов, представляющих ценностьлпя генофонда,
• удаление из коллекций и экспозиций восприимчивых видов и сортов,
перевод ценного материала в генные банки; .
• проведение профилактических мероприятий (фитосанитарное
тесгирование, биологический и химический контроль переносчиков,
соблюдение карантинных требований). .
В результате таких подходов реализуется возможность создания
экосистем, ограничивающих вредоносность вирусов и их переносчиков.
Синеок работ, опубликованных нотеме диссертации:
1. Келдыш М.Л., Червякова О.П., Лрушанова Е.С. Вирусные заболевания
новых нетрадиционных культур// Тез. докл. Всерос. съезда по защите
растений,- Пушкин. - 1995. С. 570-571. •*
2. Keldish -M., Arushanova E., Pomazkov Y., Cervyakova О. Incidence of pome
fruil viruses in ornamentals // XYU int. Symp. on virus diseases of Fruit trees. -
1997. -p.« 174. о
3. Keldish M, Pomazkov Y., Cervyakova O., Arushanova E. Vectors as a factor in
widening host range for viruses of stone fruit trees // XYU int. Symp. on virus
diseases of Fruit trees. - 1997.-p. 171 •
4. Арушанова E.C., Тимохнна Е.Т., Байкалова О.С. Фнтосаннтарное
состояние коллекционных посадок Narcissus L. и перспективы его
оптимизации //Тез. докл. Ill межд. конф.- 1998.- с. 26-27."
5. Арушанова Е.С, Келдыш , М.А., Червякова О.Н. Роль декоративных
растений в распространении вирусов на садовых культурах // Тез. докл.
Всерос. совещ.: Актуальные вопросы теории и практики зашиты растений в
условиях многоукладное™ с.-.х.- 1998. -с. 261-263. •
6. Келдыш М.А., Помазков Ю.И., Червякова О.Н., Арушанова Е.С. Векторы
как фактор изменения видового состава и расширения круга растений-
хозяев вирусов плодовых культур //Тез. докл. Всерос. совещ.: Актуальные
-22-
Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис»
25. вопросы теории и практики laniuihi растений в условиях чноюуклалносш
i , . 4
. |99Х -с 261-261 ,
7 Kcldish М , Pomazkov Y , Arushanova L , Cervyakova О Vectors as a factor in
widening host rangt for viruses ot Iruit trees and ыпа11 fruit crops (some Ijctors
of virus tpidemiology)// Aua horticulture -472 -v I -p 23-26
8 Вишниченко В К , Арушаноиа С С Ке |дыш М А Калошин А А Заврие»
С К Сероло1ичсски родственный X вирусу шалота (XB11I) гибкий
питспнлнми вирус, не приншшежашип к роду Allium // Докл PACXII -
1994 -№2 - t 23-26
-23-
Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис»
26. Объем i 5 п л Заъ,аз 342 Тираж 100
Типография Издательства VCXA
127550, Москва И 550, Тимирязевская у ч , 44
Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис»