Metode spektrofotometri digunakan untuk menentukan kadar piridoksin hidroklorida dalam tablet vitamin B kompleks. Tablet dihancurkan dan diekstrak dengan larutan isopropanol-air untuk membentuk larutan uji. Larutan standar juga dibuat. Kedua larutan direaksikan dengan 2,6-diklorokuinon klorimida untuk membentuk kompleks berwarna pada 650 nm. Serapannya diukur dan digunakan untuk menghitung kad
3. Prinsip
Pembentukan senyawa
berwarna hasil reaksi
piridoksin hidroklorida
dengan 2,6 diklorokuinon
dalam isopropanol
memberikan serapan
maksimum pada panjang
gelombang lebih kurang
650 nm.
Spektrofotometer
6. Disiapkan alat dan
bahan
Ditimbang saksama 20
tablet dan diserbukkan.
Ditimbang serbuk setara
dengan ± 30mg Piridoksin
HCl
Dimasukkan kedalam labu
ukur 10 ml.Dilarutkan
dengan larutan isopropanol
– air (1:1)
Disonifikasi
selama 15menit
Ditambahkan 1 ml
larutan iodium 0,25%
dalam isopropanol (di
dapat warna kuning
tetap)
Dipipet 1ml larutan
masukkan kedalam
labu ukur 100 ml
Diencerkan dengan
larutan isopropanol –
air (1:1) sampai tanda
(pengenceran 10x)
Di encerkan dengan
isopropanol sampai
tanda (pengenceran
1000x)
8. Ditimbang saksama 30 baku
Piridoksin HCl
Dimasukkan kedalam labu
ukur 10 ml.Dilarutkan
dengan larutan isopropanol.
Disonifikasi
selama 15menit
Ditambahkan 1 ml
larutan iodium 0,25%
dalam isopropanol (di
dapat warna kuning
tetap)
Dipipet 1ml larutan
masukkan kedalam
labu ukur 100 ml
Diencerkan dengan
larutan isopropanol
(pengenceran 10x)
Di encerkan dengan
isopropanol sampai
tanda (pengenceran
1000x)
10. + 1,0 ml larutan 2,6
diklorokuinon
klorimida 0,06%
dalam isopropanol
+ 1,0 ml larutan
TEA 50% dalam
isopropanol
1 ml Larutan A 1 ml Larutan B
Dibiarkan bereaksi selama 5 menit dan diencerkan dengan isopropanol sampai tanda
(Pengenceran 25 X)
Serapan larutan A dan B diukur 10-40 menit, Setelah penambahan larutan 2,6
diklorokuinon klorimidi pada panjang gelombang serapan maksimum lebih kurang
650nm menggunakan blanko air yang dikerjakan dengan cara yang sama
14. LarutanUji
Sejumlah serbuk setara 30 mg
piridoksin hidroklorida, di adkan
isopropanol –air (1:1) sampai
10,0 ml = 10X
Diambil 1 ml di adkan dengan
isopropanol sampai 100,0 ml =
100 X
Total pengenceran : 10 X 100 =
1.000X (Larutan A)
LarutanBlanko
Sejumlah 30 mg piridoksin
hidroklorida, di adkan
isopropanol –air (1:1) sampai
10,0 ml = 10X
Diambil 1 ml di adkan dengan
isopropanol sampai 100,0 ml =
100 X
Total pengenceran : 10 X 100 =
1.000X (Larutan B)
15. PenetapanKadar
Diambil 1 ml Larutan A dan
larutan B lalu ditambah
isopropanol sampai 25 ml = 25X
Total pengenceran : 25 X 1.000 =
25.000X