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Utilità del microarray
nelle gravi allergopatie
Filippo Fassio
AOU Careggi – SOD Immunoallergologia
(Direttore Prof. E. Maggi)
Università degli Studi di Firenze SOD Immunoallergologia Winter School SIAIC 20 Febbraio 2010
Università degli Studi di Firenze SOD Immunoallergologia Winter School SIAIC 20 Febbraio 2010
Diagnosi delle allergie: l’evoluzione…
Introduzione: la CRD…
Università degli Studi di Firenze SOD Immunoallergologia Winter School SIAIC 20 Febbraio 2010
Introduzione: le metodiche…
Università degli Studi di Firenze SOD Immunoallergologia Winter School SIAIC 20 Febbraio 2010
Introduzione: il microarray…
Università degli Studi di Firenze SOD Immunoallergologia Winter School SIAIC 20 Febbraio 2010
Introduzione: il microarray…
Università degli Studi di Firenze SOD Immunoallergologia Winter School SIAIC 20 Febbraio 2010
103
Il microarray: analisi in parallelo…
Università degli Studi di Firenze SOD Immunoallergologia Winter School SIAIC 20 Febbraio 2010
Array = disposizione, matrice
Micro = microscopica
Il microarray: pannello standard…
Università degli Studi di Firenze SOD Immunoallergologia Winter School SIAIC 20 Febbraio 2010
Il microarray: nella pratica…
Università degli Studi di Firenze SOD Immunoallergologia Winter School SIAIC 20 Febbraio 2010
Allergopatie respiratorie
Allergia al latex
Allergeni meno frequenti
Allergia alimentare
Discriminare tra co-sensibilizzazione e cross-reazione
Identificare i pazienti più idonei all’immunoterapia
CRD: allergopatie respiratorie…
Università degli Studi di Firenze SOD Immunoallergologia Winter School SIAIC 20 Febbraio 2010
…può fare il “vaccino”?
CRD: allergopatie respiratorie…
Università degli Studi di Firenze SOD Immunoallergologia Winter School SIAIC 20 Febbraio 2010
Michele, 47 anni, soffre da alcuni anni di
rinocongiuntivite nel periodo primaverile. Il suo
medico lo invia all’allergologo, che effettua prick test.
Graminacee +++
Betulla ++
Olivo ++
…co-sensibilizzazione o cross-reazione?
CRD: allergopatie respiratorie…
Università degli Studi di Firenze SOD Immunoallergologia Winter School SIAIC 20 Febbraio 2010
Co-sensibilizzazione!
(Graminacee, Olivo, Betulla)
CRD: questa “ovviamente” è…
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Cross-reazione!
(solo Graminacee con Phl p 12: Profilina)
CRD: oppure no?
Università degli Studi di Firenze SOD Immunoallergologia Winter School SIAIC 20 Febbraio 2010
La stessa determinazione, poteva essere eseguita
con ImmunoCAP?
SI!
…ma sarebbe stato necessario richiedere
singolarmente 18 allergeni molecolari….
CRD: allergopatie respiratorie…
Università degli Studi di Firenze SOD Immunoallergologia Winter School SIAIC 20 Febbraio 2010
Il microarray: nella pratica…
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Allergopatie respiratorie
Allergia al latex
Allergeni meno frequenti
Allergia alimentare
CRD: latex…
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Marta, paziente di 38 aa, lavora come cuoca.
Soffre di asma bronchiale di grado lieve, con sporadici
attacchi d’asma in vari momenti della giornata, sia a casa
che al lavoro.
Marta sa già di essere allergica ad alcuni pollini ed
all’acaro della polvere, ma….
CRD: latex…
Università degli Studi di Firenze SOD Immunoallergologia Winter School SIAIC 20 Febbraio 2010
CRD: latex…
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CRD: latex…
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CRD: latex…
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Università degli Studi di Firenze SOD Immunoallergologia Winter School SIAIC 20 Febbraio 2010
Allergopatie respiratorie
Allergia al latex
Allergeni meno frequenti
Allergia alimentare
CRD: allergeni meno frequenti…
Università degli Studi di Firenze SOD Immunoallergologia Winter School SIAIC 20 Febbraio 2010
Franco, 44 anni, con rinite ed asma bronchiale, giunge all’osservazione per
recente peggioramento della sintomatologia
Continua la tp già in atto da 3 anni con CCS nasali ed associazione CCS +
beta2agonista inalatorio, che fino a pochi mesi prima aveva garantito un ottimo
controllo della sintomatologia
Il PT conferma le precedenti polisensibilizzazioni a pollini ed acari, senza
sostanziali modifiche
Il paziente nega sostanziali modifiche al proprio stile di vita (casa,lavoro, sport,
hobbies…)
CRD: allergeni meno frequenti…
Università degli Studi di Firenze SOD Immunoallergologia Winter School SIAIC 20 Febbraio 2010
Sarebbe emersa la positività senza un test
multiplex?
CRD: allergeni meno frequenti…
Università degli Studi di Firenze SOD Immunoallergologia Winter School SIAIC 20 Febbraio 2010
Il microarray: nella pratica…
Università degli Studi di Firenze SOD Immunoallergologia Winter School SIAIC 20 Febbraio 2010
Allergopatie respiratorie
Allergia al latex
Allergeni meno frequenti
Allergia alimentare
CRD: allergia alimentare…
Università degli Studi di Firenze SOD Immunoallergologia Winter School SIAIC 20 Febbraio 2010
Una giovane paziente si rivolge allo specialista
allergologo a causa di episodi recidivanti di
angioedema...
gli episodi erano iniziati fin dall’infazia ed erano
scatenati dall’assunzione di frutta con guscio...
CRD: allergia alimentare…
Università degli Studi di Firenze SOD Immunoallergologia Winter School SIAIC 20 Febbraio 2010
…10 giorni prima della visita...
...appena dopo aver assaggiato
un gelato artigianale, si è
verificato un angioedema…
CRD: allergia alimentare…
Università degli Studi di Firenze SOD Immunoallergologia Winter School SIAIC 20 Febbraio 2010
La paziente è stata trattata con:
• Anti-H1 per os
• Corticosteroidi per os
Il quadro clinico è regredito in circa 1 ora
(non è stato necessario invio in PS)
CRD: allergia alimentare…
Università degli Studi di Firenze SOD Immunoallergologia Winter School SIAIC 20 Febbraio 2010
Oltre alle reazioni avverse ad alimenti:
• Non dermatite atopica
• Non allergopatie respiratorie
• Non reazioni avverse ad altri alimenti
• Non reazioni avverse a farmaci o imenotteri
CRD: allergia alimentare…
Università degli Studi di Firenze SOD Immunoallergologia Winter School SIAIC 20 Febbraio 2010
Il prick test è risultato positivo per:
• Nocciola (+++)
• Noce (+/-)
• Pinolo (+/-)
CRD: allergia alimentare…
Università degli Studi di Firenze SOD Immunoallergologia Winter School SIAIC 20 Febbraio 2010
Dosaggio IgE totali (RIST): 37 kU/l
Dosaggio IgE specifiche per inalanti: tutte < 0.10 kUI/l
Dosaggio IgE specifiche per alimenti:
• Nocciola 3,07 kUI/l
• Noce 0,12 kUI/l
CRD: allergia alimentare…
Università degli Studi di Firenze SOD Immunoallergologia Winter School SIAIC 20 Febbraio 2010
Cor a 1: Bet v 1-homologue (PR-10)
Cor a 2: profilina (omologo Bet v 2)
Cor a 8: LTP
Cor a 9: 11S globulin (omologo Ara h 3)
CRD: allergia alimentare…
Università degli Studi di Firenze SOD Immunoallergologia Winter School SIAIC 20 Febbraio 2010
I pazienti con reazioni più gravi hanno una sensibilizzazione alla
nocciola “polline-indipendente”, e più spesso sono allergici a:
- Cor a 8
- Cor a 9
Queste molecole sono omologhe ad altri allergeni
maggiori presenti in atri tipi di noci e noccioline!
Curr Op Allergy Clin Immunol, 2008
CRD: allergia alimentare…
Università degli Studi di Firenze SOD Immunoallergologia Winter School SIAIC 20 Febbraio 2010
Studio condotto su pazienti allergici alla betulla:
- Cor a 1: 16/17
- Cor a 2: 2/17
- Cor a 8: nessuno
Nessun caso di anafilassi!
Allergy, 2003
CRD: allergia alimentare…
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Studio condotto su 57 pazienti allergici alla nocciola:
- Cor a 1: 75% (100% nord europa, 17% sud europa)
- Cor a 2: 42%
- Cor a 8: 28% (5-15% nord europa, 71% sud europa)
Cor a 1 + Cor a 8 = 96%
JACI, 2009
CRD: allergia alimentare…
Università degli Studi di Firenze SOD Immunoallergologia Winter School SIAIC 20 Febbraio 2010
Cor a 8 nel 71% delle reazioni “severe”
JACI, 2009
CRD: allergia alimentare…
Università degli Studi di Firenze SOD Immunoallergologia Winter School SIAIC 20 Febbraio 2010
Cor a 1: Bet v 1-homologue (PR-10)
Cor a 2: profilina (omologo Bet v 2)
Cor a 8: LTP
Cor a 9: 11S globulin (omologo Ara h 3)
CRD: allergia alimentare…
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A cosa è allergica la paziente?
Cor a 1
Cor a 8
Cor a 2
Cor a 9
CRD: allergia alimentare…
Università degli Studi di Firenze SOD Immunoallergologia Winter School SIAIC 20 Febbraio 2010
…ed il risultato esatto è…
Negativo!
…confermato su ImmunoCAP
(Cor a 1, Cor a 8, Bet v 2)
CRD: allergia alimentare…
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…perché 103 molecole sono molte…
…ma in natura ce ne sono DI PIU’…
Ed alla fine…
Università degli Studi di Firenze SOD Immunoallergologia Winter School SIAIC 20 Febbraio 2010
…alla prossima puntata…
Grazie!
fil.fassio@tin.it
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  • 1. Utilità del microarray nelle gravi allergopatie Filippo Fassio AOU Careggi – SOD Immunoallergologia (Direttore Prof. E. Maggi) Università degli Studi di Firenze SOD Immunoallergologia Winter School SIAIC 20 Febbraio 2010
  • 2. Università degli Studi di Firenze SOD Immunoallergologia Winter School SIAIC 20 Febbraio 2010 Diagnosi delle allergie: l’evoluzione…
  • 3. Introduzione: la CRD… Università degli Studi di Firenze SOD Immunoallergologia Winter School SIAIC 20 Febbraio 2010
  • 4. Introduzione: le metodiche… Università degli Studi di Firenze SOD Immunoallergologia Winter School SIAIC 20 Febbraio 2010
  • 5. Introduzione: il microarray… Università degli Studi di Firenze SOD Immunoallergologia Winter School SIAIC 20 Febbraio 2010
  • 6. Introduzione: il microarray… Università degli Studi di Firenze SOD Immunoallergologia Winter School SIAIC 20 Febbraio 2010
  • 7. 103 Il microarray: analisi in parallelo… Università degli Studi di Firenze SOD Immunoallergologia Winter School SIAIC 20 Febbraio 2010 Array = disposizione, matrice Micro = microscopica
  • 8. Il microarray: pannello standard… Università degli Studi di Firenze SOD Immunoallergologia Winter School SIAIC 20 Febbraio 2010
  • 9. Il microarray: nella pratica… Università degli Studi di Firenze SOD Immunoallergologia Winter School SIAIC 20 Febbraio 2010 Allergopatie respiratorie Allergia al latex Allergeni meno frequenti Allergia alimentare
  • 10. Discriminare tra co-sensibilizzazione e cross-reazione Identificare i pazienti più idonei all’immunoterapia CRD: allergopatie respiratorie… Università degli Studi di Firenze SOD Immunoallergologia Winter School SIAIC 20 Febbraio 2010
  • 11. …può fare il “vaccino”? CRD: allergopatie respiratorie… Università degli Studi di Firenze SOD Immunoallergologia Winter School SIAIC 20 Febbraio 2010 Michele, 47 anni, soffre da alcuni anni di rinocongiuntivite nel periodo primaverile. Il suo medico lo invia all’allergologo, che effettua prick test. Graminacee +++ Betulla ++ Olivo ++
  • 12. …co-sensibilizzazione o cross-reazione? CRD: allergopatie respiratorie… Università degli Studi di Firenze SOD Immunoallergologia Winter School SIAIC 20 Febbraio 2010
  • 13. Co-sensibilizzazione! (Graminacee, Olivo, Betulla) CRD: questa “ovviamente” è… Università degli Studi di Firenze SOD Immunoallergologia Winter School SIAIC 20 Febbraio 2010
  • 14. Cross-reazione! (solo Graminacee con Phl p 12: Profilina) CRD: oppure no? Università degli Studi di Firenze SOD Immunoallergologia Winter School SIAIC 20 Febbraio 2010
  • 15. La stessa determinazione, poteva essere eseguita con ImmunoCAP? SI! …ma sarebbe stato necessario richiedere singolarmente 18 allergeni molecolari…. CRD: allergopatie respiratorie… Università degli Studi di Firenze SOD Immunoallergologia Winter School SIAIC 20 Febbraio 2010
  • 16. Il microarray: nella pratica… Università degli Studi di Firenze SOD Immunoallergologia Winter School SIAIC 20 Febbraio 2010 Allergopatie respiratorie Allergia al latex Allergeni meno frequenti Allergia alimentare
  • 17. CRD: latex… Università degli Studi di Firenze SOD Immunoallergologia Winter School SIAIC 20 Febbraio 2010 Marta, paziente di 38 aa, lavora come cuoca. Soffre di asma bronchiale di grado lieve, con sporadici attacchi d’asma in vari momenti della giornata, sia a casa che al lavoro. Marta sa già di essere allergica ad alcuni pollini ed all’acaro della polvere, ma….
  • 18. CRD: latex… Università degli Studi di Firenze SOD Immunoallergologia Winter School SIAIC 20 Febbraio 2010
  • 19. CRD: latex… Università degli Studi di Firenze SOD Immunoallergologia Winter School SIAIC 20 Febbraio 2010
  • 20. CRD: latex… Università degli Studi di Firenze SOD Immunoallergologia Winter School SIAIC 20 Febbraio 2010
  • 21. CRD: latex… Università degli Studi di Firenze SOD Immunoallergologia Winter School SIAIC 20 Febbraio 2010
  • 22. Il microarray: nella pratica… Università degli Studi di Firenze SOD Immunoallergologia Winter School SIAIC 20 Febbraio 2010 Allergopatie respiratorie Allergia al latex Allergeni meno frequenti Allergia alimentare
  • 23. CRD: allergeni meno frequenti… Università degli Studi di Firenze SOD Immunoallergologia Winter School SIAIC 20 Febbraio 2010
  • 24. Franco, 44 anni, con rinite ed asma bronchiale, giunge all’osservazione per recente peggioramento della sintomatologia Continua la tp già in atto da 3 anni con CCS nasali ed associazione CCS + beta2agonista inalatorio, che fino a pochi mesi prima aveva garantito un ottimo controllo della sintomatologia Il PT conferma le precedenti polisensibilizzazioni a pollini ed acari, senza sostanziali modifiche Il paziente nega sostanziali modifiche al proprio stile di vita (casa,lavoro, sport, hobbies…) CRD: allergeni meno frequenti… Università degli Studi di Firenze SOD Immunoallergologia Winter School SIAIC 20 Febbraio 2010
  • 25. Sarebbe emersa la positività senza un test multiplex? CRD: allergeni meno frequenti… Università degli Studi di Firenze SOD Immunoallergologia Winter School SIAIC 20 Febbraio 2010
  • 26. Il microarray: nella pratica… Università degli Studi di Firenze SOD Immunoallergologia Winter School SIAIC 20 Febbraio 2010 Allergopatie respiratorie Allergia al latex Allergeni meno frequenti Allergia alimentare
  • 27. CRD: allergia alimentare… Università degli Studi di Firenze SOD Immunoallergologia Winter School SIAIC 20 Febbraio 2010 Una giovane paziente si rivolge allo specialista allergologo a causa di episodi recidivanti di angioedema... gli episodi erano iniziati fin dall’infazia ed erano scatenati dall’assunzione di frutta con guscio...
  • 28. CRD: allergia alimentare… Università degli Studi di Firenze SOD Immunoallergologia Winter School SIAIC 20 Febbraio 2010 …10 giorni prima della visita... ...appena dopo aver assaggiato un gelato artigianale, si è verificato un angioedema…
  • 29. CRD: allergia alimentare… Università degli Studi di Firenze SOD Immunoallergologia Winter School SIAIC 20 Febbraio 2010 La paziente è stata trattata con: • Anti-H1 per os • Corticosteroidi per os Il quadro clinico è regredito in circa 1 ora (non è stato necessario invio in PS)
  • 30. CRD: allergia alimentare… Università degli Studi di Firenze SOD Immunoallergologia Winter School SIAIC 20 Febbraio 2010 Oltre alle reazioni avverse ad alimenti: • Non dermatite atopica • Non allergopatie respiratorie • Non reazioni avverse ad altri alimenti • Non reazioni avverse a farmaci o imenotteri
  • 31. CRD: allergia alimentare… Università degli Studi di Firenze SOD Immunoallergologia Winter School SIAIC 20 Febbraio 2010 Il prick test è risultato positivo per: • Nocciola (+++) • Noce (+/-) • Pinolo (+/-)
  • 32. CRD: allergia alimentare… Università degli Studi di Firenze SOD Immunoallergologia Winter School SIAIC 20 Febbraio 2010 Dosaggio IgE totali (RIST): 37 kU/l Dosaggio IgE specifiche per inalanti: tutte < 0.10 kUI/l Dosaggio IgE specifiche per alimenti: • Nocciola 3,07 kUI/l • Noce 0,12 kUI/l
  • 33. CRD: allergia alimentare… Università degli Studi di Firenze SOD Immunoallergologia Winter School SIAIC 20 Febbraio 2010 Cor a 1: Bet v 1-homologue (PR-10) Cor a 2: profilina (omologo Bet v 2) Cor a 8: LTP Cor a 9: 11S globulin (omologo Ara h 3)
  • 34. CRD: allergia alimentare… Università degli Studi di Firenze SOD Immunoallergologia Winter School SIAIC 20 Febbraio 2010 I pazienti con reazioni più gravi hanno una sensibilizzazione alla nocciola “polline-indipendente”, e più spesso sono allergici a: - Cor a 8 - Cor a 9 Queste molecole sono omologhe ad altri allergeni maggiori presenti in atri tipi di noci e noccioline! Curr Op Allergy Clin Immunol, 2008
  • 35. CRD: allergia alimentare… Università degli Studi di Firenze SOD Immunoallergologia Winter School SIAIC 20 Febbraio 2010 Studio condotto su pazienti allergici alla betulla: - Cor a 1: 16/17 - Cor a 2: 2/17 - Cor a 8: nessuno Nessun caso di anafilassi! Allergy, 2003
  • 36. CRD: allergia alimentare… Università degli Studi di Firenze SOD Immunoallergologia Winter School SIAIC 20 Febbraio 2010 Studio condotto su 57 pazienti allergici alla nocciola: - Cor a 1: 75% (100% nord europa, 17% sud europa) - Cor a 2: 42% - Cor a 8: 28% (5-15% nord europa, 71% sud europa) Cor a 1 + Cor a 8 = 96% JACI, 2009
  • 37. CRD: allergia alimentare… Università degli Studi di Firenze SOD Immunoallergologia Winter School SIAIC 20 Febbraio 2010 Cor a 8 nel 71% delle reazioni “severe” JACI, 2009
  • 38. CRD: allergia alimentare… Università degli Studi di Firenze SOD Immunoallergologia Winter School SIAIC 20 Febbraio 2010 Cor a 1: Bet v 1-homologue (PR-10) Cor a 2: profilina (omologo Bet v 2) Cor a 8: LTP Cor a 9: 11S globulin (omologo Ara h 3)
  • 39. CRD: allergia alimentare… Università degli Studi di Firenze SOD Immunoallergologia Winter School SIAIC 20 Febbraio 2010 A cosa è allergica la paziente? Cor a 1 Cor a 8 Cor a 2 Cor a 9
  • 40. CRD: allergia alimentare… Università degli Studi di Firenze SOD Immunoallergologia Winter School SIAIC 20 Febbraio 2010 …ed il risultato esatto è… Negativo! …confermato su ImmunoCAP (Cor a 1, Cor a 8, Bet v 2)
  • 41. CRD: allergia alimentare… Università degli Studi di Firenze SOD Immunoallergologia Winter School SIAIC 20 Febbraio 2010 …perché 103 molecole sono molte… …ma in natura ce ne sono DI PIU’…
  • 42. Ed alla fine… Università degli Studi di Firenze SOD Immunoallergologia Winter School SIAIC 20 Febbraio 2010 …alla prossima puntata…
  • 43. Grazie! fil.fassio@tin.it Università degli Studi di Firenze SOD Immunoallergologia Winter School SIAIC 20 Febbraio 2010

Editor's Notes

  1. vengono analizzate singolarmente.