Teknik bioteknologi seperti kultur jaringan dan rekayasa genetika memungkinkan perbanyakan tanaman secara masal dan menciptakan varietas baru dengan sifat yang diinginkan seperti tahan hama dan penyakit. Teknik ini penting untuk melestarikan plasma nutfah dan mendukung pertanian modern.

1. KELOMPOK 2XII IPA2
BIOTEKNOLOGI

2. Teknik perbanyakan tanaman secara
vegetative buatan yang didasarkan
pada sifat totipotensi tumbuhan,
totipotensi tumbuhan adalah
kemampuan sel atau jaringan
organisme untuk tumbuh menjadi
individu baru.

3.  Dilakukan di tempat yang steril
 Alat dan tempat pelaku kultur jaringan juga harus dalam keadaan steril,
dengan cara mengautaklafnya selama 15 menit pada suhu 115 derajat
celcius
 Tangan pelaku harus dicuci bersih dan disemprot dengan alcohol
 Untuk memperbesar keberhasilan,tanaman yang dikulturkan sebaiknya
berupa jaringan muda yang sedang tumbuh, jaringan yang di gunakan untuk
kultur jaringan disebut eksplan
 Sejak diambil dari tumbuhan induk sampai dengan dikulturkan, eksplan
harus dalam keadaan steril
 Perrsiapan eksplan sampai penanaman dalam medium buatan harus
dilakukan di dalam entkas atau Laminar air flow
Prinsip dalam teknik kultur jaringan

4.  Eksplan yang di sterilkan dikultur dalam botol yang berisi
medium zat cair yang terdiri atas zat nutrisi dan pengatur
zat tumbuh (ZPT)
 Supaya nutrisi dapat meresap eksplan, media kultur harus
disimpan diatas pengocok atau Shaker
 Dari eksplan akan tumbuh jaringan seperti kalus berwarna
putih yang disebut Protocorm like body (PLB)
 PLB Dapat dipecah-pecah dan ditumbuhkan menjadi banyak
PLB, PLB kemudian di subkultur dalam media padat.
 PLB akan berkembang menjadi tanaman kecil yang disebut
Plantlet,setelah plantlet memventuk tanaman sempurna
dapat dipindahkan ke Polyabag
Prinsip dalam teknik kultur jaringan

6.  Melestarikan sifat tanaman induk
 Menghasilkan tanaman yang memiliki sifat seragam
 Menghasilkan tanaman baru dalam jumlah besar
 Dapat menghasilkan tanaman yang bebas Virus
 Dapat dijadikan sebagai sarana untik melestarikan plasma
nutfah
 Untuk menciptakan varietas baru dalam rekayasa genetika

7. Kultur Meristem menggunakan jaringan
(akar,atang,daun) yang muda
Kultur Anter menggunakan kepala sari sebagai
eksplan
Kultur Embrio menggunakan embrio
Kultur Protoplas Menggunakan sel jaringan hidup
sebagai eksplan tanpa dinding
Kultur Polen menggunakan serbuk sari

8. Persiapan
 Media yang digunakan media cair dan padat
 Kedua media ini diapkan dalam botol Erlenmeyer yang ditutup
dengan kain kasa steril dan aluminium steril
 Botol kemudian di panaskan dalam autoklaf yang bersuhu 120
derajat celcius dan tekanan 1,5 kg selama 20 menit
 Setelah di sterilkan, media kultur disimpan dalam tempat steril
atau kulkas
 Ruangan dan peralatan harus di sterilkan dengan larutan
antiseptic (alcohol atau sodium Hipoklorit). Lampu UV dalam
ruangan entkas atau laminar air flow dinyalakan 1 jam sebelum
digunakan, tujuannya adalah mensterilkan ruangan tersebut

9. Pengambilan dan perawatan eksplan
 Eksplan dapat diambil dari tunas pucuk,ketiak daun,ujung akar atau daun
muda
 Bahan Eksplan disterilkan dengan cara merendamnya dalam kalsium
hipoklorit 5% selama 5 menit
 Setelah itu. Eksplan dibilas beberapa kali menggunakan akuades steril, ahan
eksplan yang steril dimasukkan kedalam entkas
 Bagian luar eksplan dikupas memakai pisau tajam yang steril sampai eksplan
berukuran 1-1,5 mm
 Setelah eksplan siap tanam,tutup botol Erlenmeyer dibuka dan eksplan
diambil memakai pinset, lalu dimasukkan kedalam media cair. Otol yang
sudah ditanami eksplan ditutup kembali dengan kain steril dan aluminium steril

10. Pengocokan
 Botol yang sudah ditanami eksplan diletakkan diatas meja pengocok (shaker) yang
sudah dinyalan dengan dengan frekuensi pengocokan sekitar 60-70 kali permenit
 Pengocokan dilakukan 6 jam sehari selama 1,5-2 bulan.
 Tujuan Pengocokan
 Menggiatkan kontak antara permukaan eksplan dengan larutan media
 Memudahkan peresapan larutan nutrisi kedalam jaringan eksplan
 Melancarkan sirkulasi udara, sehingga udara dapat masuk ke dalam media
 Menjaga homogenitas atau keseragaman larutan nutrisi dalam media
 Merangsang terpisahnya PLB yang terbentuk

11. Media
 Media tanaman terdiri atas 2 jenis yaitu media cair dan media padat,
Media cair digunakan untik menumbuhkan eksplan sampai terbentuk PLB
 Media padat digunakan digunakan untuk menumbuhkan PLB sampai
terentuk plantlet
 Media padat dibuat dengan melarutkan nutrisi dan agar ke dalam
akuades yang di sterilkan. Media kultur harus mengandung nutrisi
lengkap yang terdiri dari unsur makro,unsur mikro,vitamin,gula dan ZPT

12. Rekayasa genetika dapat
diartikan sebagai kegiatan
manipulasi gen untuk
mendapatkan produk baru
dengan cara membuat
DNA rekombinan melalui
penyisipan gen.
DNA rekombinan
adalah DNA yang urutannya
telah direkomendasikan
agar memiliki sifat – sifat
atau fungsi yang kita
inginkan sehingga
organisme penerimanya
mengekspresikan sifat atau
melakukan fungsi yang kita
inginkan.

13. Teknik Plasmid
Plasmid adalah gen yang melingkar yang terdapat dalam
sel bakteri, tak terikat pada kromosom. Melalui teknik
plasmid dalam rekayasa genetika tersebut, para ahli di
bidang bioteknologi dapat mengembangkan tanaman
transgenic yang resisten terhadap hama dan penyakit,
adaptif terhadap kekeringan dan kondisi tanah yang tidak
subur, dan lain – lain.

14. Teknik Hibrida
Teknik hibridoma adalah penggabungan dua sel dari organisme yang
sama atau pun dari sel organisme yang berbeda sehingga
menghasilkan sel tunggal berupa sel hybrid (hibridoma) yang
memiliki kombinasi sifat dari kedua sel tersebut. Teknik hibridoma
ini penting untuk menghasilkan antibodi dan hormone dalam jumlah
besar.

15. Terapi Genetik
Terapi Genetik adalah perbaikan kelainan genetik dengan
memperbaiki gen. Dala m rekayasa genetika ada kode etik
yang melarang kerass percobaan ini pada manusia karena
dikhawatirkan disalahgunakan untuk mengubah gen pembawa
sifat manusia, misal untuk membuat manusia super.
Maka pada tahun 1990 ,Komite Nasional dari Nasional
Institute of Health (NIH) mengeluarkan dispensasi yang
mengizinkan penerapan terapi genetik untu dua jenis
penyakit,yaitu: penyakit menurun yang sangat jarang seperti
Adenosine Deaminase Deficiency(ADD) atau penyakkit dimana
penderita tidak memiliki daya tahan tubuh sama sekali. Dan
untuk sejenis penyakit kanker kulit ganas.

16. Kloning
Berasal dari bahasa Yunani kuno (clone) yang berarti
ranting atau cangkokan. Dalam bahasa Inggris
(clone/klona) digunakan untuk menyebut mahluk hidup
yang lahir tanpa proses seksual.
Tahun 1962, John B. Gurdon juga mencoba teknik kloning
pada katak, namun percobaannya menghasilkan banyak
katak yang abnormal atau cacat. Gurdon kemudian
menyempurnakan percobaannya seperti berikut:

17. Pertama-tama, ia mentransplantasikan inti sel kulit ke dalam sel
telur yang intinya sudah dikeluarkan / dihilangkan, kemudian
menumbuhkannya sampai terbentuk embrio. Kemudian ia
memisahkan sel-sel embrio itu dan mentransplantasikan inti sel
embrio itu ke dalam sel telur katak lain yang inti selnya sudah
dibuang. Individu hasil kloning tumbuh dari sel-sel telur itu.
Percobaan ini menghasilkan banyak katak yang tumbuh normal dan
berkembang menjadi dewasa.
Pada tahun 1986, Steen Willadsen (Inggris) mengklona sapi dengan
tujuan komersial dengan metode transfer inti. Ia bekerja sama
dengan Lembaga Grenada Genetics.