БЕКЕТОВА Г.В. – международный эксперт по пробиотикам

1. ПРОБИОТИКИ В ПРАКТИКЕПРОБИОТИКИ В ПРАКТИКЕ
ПЕДИАТРА И ДЕТСКОГОПЕДИАТРА И ДЕТСКОГО
ГАСТРОЭНТЕРОЛОГАГАСТРОЭНТЕРОЛОГА

2. наука не стоит на месте…наука не стоит на месте…
…чем больше мы познаём, тем…чем больше мы познаём, тем
больше появляется непознанного…больше появляется непознанного…
(Jenifer Akkerman, 2012)
CC ЧЕГО ЖЕ ВСЁ
ЧЕГО ЖЕ ВСЁ
НАЧАЛОСЬ?...
НАЧАЛОСЬ?...

3. - 1681 г. – Антони ван Левенгук обнаружил
микроорганизмы в зубном налёте и фекалиях с помощью микроскопа
“Я нашел, к моему великому удивлению, множество мелких молекул,“Я нашел, к моему великому удивлению, множество мелких молекул,
наблюдать за движением которых было очень приятно”наблюдать за движением которых было очень приятно”
- основоположником учения о симбионтной микрофлоре и ее влиянии
на организм человека стал лауреат Нобелевской премии (1908г.)
Илья Мечников, который в 1888 г.
предположил, что причиной возникновения многих болезней
является действие токсинов и метаболитов бактерий ЖКТ. Их
многочисленные
- ассоциации определяют духовное и физическое здоровье человека
- с 1912 г. немецкий ученый Альфред Ниссле изучал
антагонистическое действие бактерий
- 70–е годы ХХ века – учение А.Уголева о роли
симбионтной флоры в развитии патологии человека. Очень низкие
возможности выделения (культивирования) микроорганизмов
- начало ХХІ века – “микробиом”, расшифровка
……НОВЫЕ МЕТОДЫ ПОЗНАНИЯ ДАЛИ
НОВЫЕ МЕТОДЫ ПОЗНАНИЯ ДАЛИ
НАЧАЛО НОВЫМ
НАЧАЛО НОВЫМ
ТЕХНОЛОГИЧЕСКИМ
ТЕХНОЛОГИЧЕСКИМ
ВОЗМОЖНОСТЯМ…
ВОЗМОЖНОСТЯМ…

4. количество публикаций в миреколичество публикаций в мире
по теме:по теме: ““МИКРОБИОММИКРОБИОМ
ЧЕЛОВЕКАЧЕЛОВЕКА””
(PubMed. http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/?term=microbiome#)

5. (Human Microbiome Project Consortium (2012). Structure, function and diversity of the healthy human microbiome. Nature 486: 207-214.)
МИКРОБИОММИКРОБИОМ ЧЕЛОВЕКАЧЕЛОВЕКА – это– это
совокупность всех микроорганизмовсовокупность всех микроорганизмов
во всех его биотопах…во всех его биотопах…

6. : +концепция ЧЕЛОВЕК ЕГО МИКРОБИОМ: +концепция ЧЕЛОВЕК ЕГО МИКРОБИОМ
“ ”как СУПЕРОРГАНИЗМ с“ ”как СУПЕРОРГАНИЗМ с
-взаимодействующими генно метаболическими-взаимодействующими генно метаболическими
( )сетями метаболомика( )сетями метаболомика
(Mayer et al. Gut Microbes and the Brain: Paradigm Shift in Neuroscience. The Journal of Neuroscience 2014. 34:15490-15496.)
Human Microbiome Project, 2007

7. ЧЕЛОВЕК И ЕГО МИКРОБИОМ:ЧЕЛОВЕК И ЕГО МИКРОБИОМ:
два организма в одной оболочкедва организма в одной оболочке
((““виртуальный зоопарк микроорганизмоввиртуальный зоопарк микроорганизмов””))
(HMP consortium. Structure, function and diversity of the healthy human microbiome. Nature 2012 Jun 14.)

8. тотальная микробная интервенциятотальная микробная интервенция
Fleur Ponton mail, Kenneth Wilson, Sheena C. Cotter, David Raubenheimer, Stephen
J. Simpson (2011) DOI: 10.1371/journal.ppat.1002223

9. МИКРОБЫ ТВОРЯТ
МИКРОБЫ ТВОРЯТ
ЧЕЛОВЕКА
ЧЕЛОВЕКА

10. …если бы какой-нибудь гений выпарил все 10
триллионов клеток человеческого организма,
то ничего бы не осталось, кроме…
облака бактерий, вирусов и других бывших
“безбилетных пассажиров”
нашего организма…
покинув этот мир, мы вместо себяпокинув этот мир, мы вместо себя
оставляем свойоставляем свой
микробиоммикробиом……
““ПЕРЕПИСЬ МИКРОБНОГОПЕРЕПИСЬ МИКРОБНОГО
НАСЕЛЕНИЯ”НАСЕЛЕНИЯ”
(Human Microbiome Project Consortium (2012). Structure, function and diversity of the healthy human microbiome. Nature 486: 207-214.)

11. -- методом секвенирования выявленометодом секвенирования выявлено 10-30 тысяч10-30 тысяч
видов и 70 тысяч штаммоввидов и 70 тысяч штаммов микроорганизмовмикроорганизмов
-- 18 видов есть у всех людей; 75 – у 50%; 57 – у 90%18 видов есть у всех людей; 75 – у 50%; 57 – у 90%
-- видовой состав микробиома стабилен и имеетвидовой состав микробиома стабилен и имеет
выраженный индивидуальный характервыраженный индивидуальный характер
-- толькотолько 700-1000 видов700-1000 видов можно культивироватьможно культивировать NB!NB!
(Peregrin T. The Inside Tract: What RDs Need to Know about the Gut Microbiome. J Acad Nutr Diet. 2013; 113(8): 1019-102.)

12. НЕВЕРОЯТНЫЙ ФАКТ
1,5-2 кг массы тела человека
составляют бактерии

13. (N. Segata еt. al. (2012) The Human Microbiome Consortium. Structure, function and diversity of the healthy human
microbiome. //Nature.486(7402):207–214.
здоровый взрослый человекздоровый взрослый человек
содержит 100 триллионов бактерий,содержит 100 триллионов бактерий,
вирусов и грибоввирусов и грибов
(в 10 раз больше, чем соматических и зародышевых клеток),
чточто расширяет его собственный генныйрасширяет его собственный генный
репертуар как минимум на два порядкарепертуар как минимум на два порядка

14. J.S. Foster , R.M. Wheeler, R. Pamphile Host-Microbe Interactions in Microgravity: Assessment and Implications. //
Life 2014, 4(2), 250-266

15. ...в 1 см дистальной части толстой кишки...в 1 см дистальной части толстой кишки
живёт и работает больше микробов,живёт и работает больше микробов,
чем всех людей, которые когда-либочем всех людей, которые когда-либо
жили на Земле…жили на Земле…
(Peregrin T. The Inside Tract: What RDs Need to Know about the Gut Microbiome. J Acad Nutr Diet. 2013; 113(8): 1019-102.)

17. (Peregrin T. The Inside Tract: What RDs Need to Know about the Gut Microbiome. J Acad Nutr Diet. 2013; 113(8): 1019-
ЧЕЛОВЕЧЕСТВО РАЗДЕЛЕНОЧЕЛОВЕЧЕСТВО РАЗДЕЛЕНО
КИШЕЧНЫМИ МИКРОБИОМАМИКИШЕЧНЫМИ МИКРОБИОМАМИ
(надёжными кластерами, типовыми наборами бактерий)
на ТРИ ЭНТЕРОТИПАна ТРИ ЭНТЕРОТИПА
http://www.echo.msk.ru/programs/granit/775450-echo/#element-texthttp://www.echo.msk.ru/programs/granit/775450-echo/#element-text
(Arumugam, M. et al., Enterotypes of the human gut microbiome. Nature, 20 April
2011.http://www.nature.com/nature.)

18. (Peregrin T. The Inside Tract: What RDs Need to Know about the Gut Microbiome. J Acad Nutr Diet. 2013; 113(8): 1019-
ЭНТЕРОТИПЫЭНТЕРОТИПЫ выделены на основании полнойвыделены на основании полной
расшифровки генома микроорганизмов из каларасшифровки генома микроорганизмов из кала
добровольцев США, Японии, европейских стран…добровольцев США, Японии, европейских стран…
http://www.echo.msk.ru/programs/granit/775450-echo/#element-texthttp://www.echo.msk.ru/programs/granit/775450-echo/#element-text
(Arumugam, M. et al., Enterotypes of the human gut microbiome. Nature, 20 April
2011.http://www.nature.com/nature.)
ЭНТЕРОТИПЭНТЕРОТИП ЗАВИСИТЗАВИСИТ ОТОТ (гипотеза):
 группы крови
 особенностей обмена веществ (3 основных
биохимические пути утилизации О2 в кишечнике)
 с какими микроорганизмами иммунная система
ребёнка сталкивается сразу после рождения
ЭНТЕРОТИПЭНТЕРОТИП НЕ ЗАВИСИТНЕ ЗАВИСИТ ОТОТ:
 пола
 возраста
 национальности

19. рискуриску
ожиренияожирения
рискуриску
развития язвразвития язв
рискуриску
развития СДразвития СД
BacteroidesBacteroides PrevotellaPrevotella RuminococcusRuminococcus
нарушения энтеротипа микробиома, которыйнарушения энтеротипа микробиома, который
участвует в экспрессии генов человека(!)участвует в экспрессии генов человека(!), ведёт к:, ведёт к:
ЭНТЕРОТИП ІЭНТЕРОТИП І ЭНТЕРОТИП ІІЭНТЕРОТИП ІІ ЭНТЕРОТИП ІІІЭНТЕРОТИП ІІІ
(Turnbaugh et al. (2006) Nature.444(7122):1027-31.)

21. изменения в энтеротипе могут приводить к…изменения в энтеротипе могут приводить к…
ожирение
диабет/
инулинорезистент
ность
системное
воспаление
эндотоксемия/
септицемия
метаболический
синдром
кардиоваскулярные болезни
ревматоидный
артрит
неалкогольная жировая
болезнь печени
гипертензия
эндокринный дисбаланс
колоректальный рак
диарея / запор
целиакия /
гастроэнтерит
воспалительные
заболевания кишечникабронхиальная астма
(Peregrin T. The Inside Tract: What RDs Need to Know about the Gut Microbiome. J Acad Nutr Diet. 2013; 113(8): 1019-102.)

22. ОСНОВНЫЕ ЭФФЕКТЫ МИКРОБИОМАОСНОВНЫЕ ЭФФЕКТЫ МИКРОБИОМА
ДЛЯ ЧЕЛОВЕКАДЛЯ ЧЕЛОВЕКА
ФИЗИЧЕСКОЕ и ПСИХИЧЕСКОЕ ЗДОРОВЬЕФИЗИЧЕСКОЕ и ПСИХИЧЕСКОЕ ЗДОРОВЬЕ
КАЧЕСТВО и ПРОДОЛЖИТЕЛЬНОСТЬ ЖИЗНИКАЧЕСТВО и ПРОДОЛЖИТЕЛЬНОСТЬ ЖИЗНИ
МИКРОБИОММИКРОБИОМ
ЧЕЛОВЕКАЧЕЛОВЕКА
ПОДДЕРЖАНИЕПОДДЕРЖАНИЕ
ИНТЕЛЛЕКТАИНТЕЛЛЕКТА
ПСИХО-ПСИХО-
ЭМОЦИОНАЛЬНЫЕЭМОЦИОНАЛЬНЫЕ
ФУНКЦИИФУНКЦИИ
ИММУНИТЕТИММУНИТЕТ
(ЗАЩИТА ОТ(ЗАЩИТА ОТ
ИНФЕКЦИЙ)ИНФЕКЦИЙ)
ВСЕ ВИДЫВСЕ ВИДЫ
ОБМЕНАОБМЕНА
ВЕЩЕСТВВЕЩЕСТВ
ПИЩЕВАРЕНИЕПИЩЕВАРЕНИЕ
(УСВОЕНИЕ ПИЩИ,(УСВОЕНИЕ ПИЩИ,
СИНТЕЗСИНТЕЗ
ВИТАМИНОВ)ВИТАМИНОВ)
ДЕТОКСИКАЦИЯДЕТОКСИКАЦИЯ
(выведение токсинов(выведение токсинов
канцерогенов,канцерогенов,
аллергенов)аллергенов)
(Peregrin T. The Inside Tract: What RDs Need to Know about the Gut Microbiome. J Acad Nutr Diet. 2013; 113(8): 1019-102.)

23. микробиологическое
окружение (МИКРОБИОМ)(МИКРОБИОМ)
такой же параметр среды, как
температура, содержание О2 и
др. и во взаимодействии с ним
ведущую роль играет
иммунная система

24. Dr. Karen Madsen, 2013
посколькупоскольку иммунокомпетентныеиммунокомпетентные
клеткиклетки постояннопостоянно “общаются” с“общаются” с
бактериями, вирусами и грибамибактериями, вирусами и грибами, их, их
реакцияреакция влияетвлияет на обмен веществна обмен веществ
макроорганизма, механизмы егомакроорганизма, механизмы его
нейроэндокринной регуляции и, внейроэндокринной регуляции и, в
конечном итоге, –конечном итоге, – на состояниена состояние
здоровьяздоровья (физическое и психическое)(физическое и психическое)

25. биоплёнки ацидофильной палочкибиоплёнки ацидофильной палочки (х 1100)(х 1100)
(О. Рыбальченко, 2007)(О. Рыбальченко, 2007)
микробиом формируют биоплёнки микроорганизмовмикробиом формируют биоплёнки микроорганизмов

26. ……прочная уникальная система, котораяпрочная уникальная система, которая
сохраняет стабильность в меняющихсясохраняет стабильность в меняющихся
условиях внешней и внутренней среды…условиях внешней и внутренней среды…
МИКРОБИОМ (биоплёнки)МИКРОБИОМ (биоплёнки)
……имеет единую генетическую системуимеет единую генетическую систему
(плазмиды) – кольцевые ДНК, определяющие поведенческий(плазмиды) – кольцевые ДНК, определяющие поведенческий
код членов биоплёнки, пищевые и энергетические связи – т.н.код членов биоплёнки, пищевые и энергетические связи – т.н.
“социальное поведение”“социальное поведение” (МИКРОБНЫЙ КОНСОРЦИУМ)…(МИКРОБНЫЙ КОНСОРЦИУМ)…
……контролируется Quorum sensingконтролируется Quorum sensing
(находится под контролем определённых генов)…(находится под контролем определённых генов)…
(Human Microbiome Project Consortium (2012). Structure, function and diversity of the healthy human microbiome. Nature 486: 207-214.)

27. ““...человек не имеет всех необходимых...человек не имеет всех необходимых
ферментов для переваривания еды…ферментов для переваривания еды…
……много видов белков, жиров и углеводовмного видов белков, жиров и углеводов
диеты могут быть расщепленыдиеты могут быть расщеплены
только определёнными кишечнымитолько определёнными кишечными
микроорганизмами...микроорганизмами...
……а это значит, что…”а это значит, что…”
(L. Proctor, 2012)(L. Proctor, 2012)

28. ……эти бактерии неэти бактерии не
просто транзитныепросто транзитные
пассажиры в нашем ипассажиры в нашем и
на нашем теле…на нашем теле…
……ониони
метаболическиметаболически
активны, входят вактивны, входят в
нашу общуюнашу общую
экосистему и мыэкосистему и мы
должны с нимидолжны с ними
считаться…считаться…(М.Tarr., 2011)

29. исследования, посвященные
сообществам микроорганизмов,
т.е. микробиомам
признаны одним из 10 величайших
научных достижений начала XXI века
Human Microbiome Project, 2007

30. “…“…мы находимся внутри наибольшегомы находимся внутри наибольшего
эксперимента в истории человечества…”эксперимента в истории человечества…”
(Professor Sue Karter, 2014)(Professor Sue Karter, 2014)
“…“…выявление микроскопических событий до и вовыявление микроскопических событий до и во
время рождения ребёнка может стать ключом квремя рождения ребёнка может стать ключом к
будущему человечества…”будущему человечества…”((Source: http://microbirth.com/downloads/))
ПОЗВОЛИТ РАЗРУШИТЬ МИФЫ, КОТОРЫЕ
ПОЗВОЛИТ РАЗРУШИТЬ МИФЫ, КОТОРЫЕ
СЛОЖИЛИСЬ ИЗ-ЗА ДЕФИЦИТА ЗНАНИЙ В
СЛОЖИЛИСЬ ИЗ-ЗА ДЕФИЦИТА ЗНАНИЙ В
ОТНОШЕНИИ МИКРОБИОМА
ОТНОШЕНИИ МИКРОБИОМА

31. The characteristics of human microbiota change over time in response to varying environmental conditions and life stages. //Ottman N, Smidt H,
de Vos WM and Belzer C (2012) The function of our microbiota: who is out there and what do they do? Front. Cell. Inf. Microbio. 2:104. doi:
10.3389/fcimb.2012.00104//
ещё недавно считалось, что плодещё недавно считалось, что плод
стерилен, однако благодаря новейшимстерилен, однако благодаря новейшим
методам исследований доказано, что…методам исследований доказано, что…

32. - во время беременности бактерии транслоцируются изво время беременности бактерии транслоцируются из
пищеварительного тракта матери к плодупищеварительного тракта матери к плоду (Jimenez et al, 2007(Jimenez et al, 2007))
-- т.е. микробиом ребёнка формируется до рожденият.е. микробиом ребёнка формируется до рождения (H. Dunning, 2012)(H. Dunning, 2012)
- и дети рождаются не стерильными- и дети рождаются не стерильными (P.Francino, 2013)(P.Francino, 2013)
(Сarl Zimmer, 2012)

33. ……и к этими к этим
микроорганизмаммикроорганизмам
вырабатываетсявырабатывается
толерантность...толерантность...
т.е. дружественныет.е. дружественные
бактерии готовятбактерии готовят
плод к внеутробнойплод к внеутробной
жизни…жизни…

34. материнскoе молозиво
и молоко
ПРИРОДНЫЙ
СИНБИOTИК,
который coдержит
OЛИГOСAХAРИДЫ, ТФ
(прeбиoтики)
(играют незаменимую рoль в мoдуляции взаимоотношений “микроб-хозяин” в кишечнике
младенцев) и
БАКТЕРИИ (пpoбиoтики)
(в грудном молоке более 700 видов микробов, полезных для младенцев
(Lacto- и Bifidobacteria, а также Streptococcus, Staphylococcus, Serratia, Corynebacteria)
1. Walker A. Breast milk as the gold standard for protective nutrients. J Pediatr. 2010;156:S3–7.
2. Zivkovic AM, German JB, Lebrilla CB, Mills DA. Human milk glycobiome and its impact on the infant gastrointestinal microbiota.
Proc Natl Acad Sci U S A. 2011;108 Suppl 1:4653–8.

35. мы получаем свой микробиоммы получаем свой микробиом
внутриутробновнутриутробно (Аctinobacteria, Proteobacteria и Bacteroides),,
вв
первые моменты жизнипервые моменты жизни
(при прохождении через родовые(при прохождении через родовые
пути –пути – Lactobacillus),), а такжеа также
с

36. т.о. микробиом ребёнка схож с
материнской флорой (вагинальной,
фекальной) и с микроорганизмами
грудного молока
(P.Broun, 2007)

37. E. Daniell, Elizabeth P. Ryan (2012). The Nutrigenome and Gut Microbiome: Chronic Disease Prevention with Crop Phytochemical
Diversity, The Molecular Basis of Plant Genetic Diversity, Prof. Mahmut Caliskan (Ed.), ISBN: 978-953-51-0157-4

38. каждый человек уникаленкаждый человек уникален
(дерматоглифика, радужка, микробиом)(дерматоглифика, радужка, микробиом)
(Human Microbiome Project Consortium (2012). Structure, function and diversity of the healthy human microbiome. Nature 486: 207-214.)

39. (Peregrin T. The Inside Tract: What RDs Need to Know about the Gut Microbiome. J Acad Nutr Diet. 2013; 113(8): 1019-102.)
НОВЫЕ ЗНАНИЯ ОТКРЫВАЮТНОВЫЕ ЗНАНИЯ ОТКРЫВАЮТ
НОВЫЕ ПЕРСПЕКТИВЫНОВЫЕ ПЕРСПЕКТИВЫ
культуральное выращивание
МИКРОЭКОСИСТЕММИКРОЭКОСИСТЕМ
в скором будущем позволит эффективно и безвредно для
человека бороться с инфекционными заболеваниями,
сахарным диабетом и ожирением
индивидуальный генетический паспортиндивидуальный генетический паспорт
(информация о геноме и метагеноме человека)
новый подход к лечению заболеваний –
МЕДИЦИНСКАЯ ЭКОЛОГИЯМЕДИЦИНСКАЯ ЭКОЛОГИЯ
(разумное и дифференцированное управление
микробиомом человека в противовес традиционному
подходу
“массового убийства микробов”) - пробиотики

40. …“…“ХОРОШИЕ” МИКРООРГАНИЗМЫ,ХОРОШИЕ” МИКРООРГАНИЗМЫ,
КОТОРЫЕ МОГУТ УЛУЧШАТЬКОТОРЫЕ МОГУТ УЛУЧШАТЬ
СОСТОЯНИЕ ФИЗИЧЕСКОГО ИСОСТОЯНИЕ ФИЗИЧЕСКОГО И
МЕНТАЛЬНОГО ЗДОРОВЬЯМЕНТАЛЬНОГО ЗДОРОВЬЯ
ЧЕЛОВЕКА…ЧЕЛОВЕКА…

41. ““……до настоящего временидо настоящего времени
нереальной казалось идея о том, чтонереальной казалось идея о том, что
пробиотичные микробы,пробиотичные микробы,
введенные в кишечник, могутвведенные в кишечник, могут
влиять на мозг… …однако этотвлиять на мозг… …однако этот
факт подтвердилсяфакт подтвердился
(Light, 2011):(Light, 2011):
микробы действительномикробы действительно
синтезируютсинтезируют нейроактивныенейроактивные
вещества,вещества, которые влияют накоторые влияют на
работу нервной и иммуннойработу нервной и иммунной
систем реципиента…”систем реципиента…”
профессор Gregor Reidпрофессор Gregor Reid
(президент Международной научной(президент Международной научной
ассоциации пробиотиков)ассоциации пробиотиков)
Mayer et al. Gut Microbes and the Brain: Paradigm Shift in Neuroscience. The Journal of Neuroscience 2014. 34:15490-15496.

42. ……многочисленными исследованиямимногочисленными исследованиями
доказано, что эффективностьдоказано, что эффективность
пробиотиков состоитпробиотиков состоит
НЕНЕ в нормализации микрофлорыв нормализации микрофлоры
организма!организма!
они НЕНЕ становятся членами микробиома
организма! и исчезают из кишечника через
некоторое время после окончания их приема
(Lauener R.P., 2003; 2014)

43. ……пробиотические бактериипробиотические бактерии
влияют, прежде всего, навлияют, прежде всего, на
экспрессию геновэкспрессию генов NB!NB!
которые кодируют разныекоторые кодируют разные
функции организма…функции организма…
(Lauener R.P., 2003; 2014)

44. ……через 10 лет использование микроорганизмов счерез 10 лет использование микроорганизмов с
подтверждённой пробиотичностью снизитподтверждённой пробиотичностью снизит
необходимость лекарственной терапии на 80%...необходимость лекарственной терапии на 80%...
ПЕРСПЕКТИВЫПЕРСПЕКТИВЫ
(Peregrin T. The Inside Tract: What RDs Need to Know about the Gut Microbiome. J Acad Nutr Diet. 2013; 113(8): 1019-102.)

45. перечень микроорганизмов сперечень микроорганизмов с
подтверждённойподтверждённой
пробиотической активностьюпробиотической активностью
не очень большой и включает:не очень большой и включает:

46. ПРОБИОТИКИПРОБИОТИКИ::классификацияклассификация
Lactobacillus sppLactobacillus spp
• casei spp
• rhamnosus
• reuteri
• acidophilus
• delbrueckii, sp. Bulgaricus
• plantarum
Грам – позитивные коккиГрам – позитивные кокки
• Streptococcus thermophilus
• Enterococcus faecium
• Streptococcus intermedieus
• Streptococcus alfa-emoliticus
Грам – негативные BacillusГрам – негативные Bacillus
• Escherichia coli Nissle (1917)
Грам – позитивные BacillusГрам – позитивные Bacillus
• Bacillus clausii
лечебные дрожжилечебные дрожжи
• Saccharomyces boulardii
Bifidobacterium sppBifidobacterium spp
• bifidum
• infantum
• longum
• thermophilum
• lactis
• brevis
(Guarino A. Bruzzese E. 2001; FAO/WHO, 2001)

47. Bacillus clausiiBacillus clausii
таксономическая идентификациятаксономическая идентификация
ратифицирована Институтомратифицирована Институтом
ПастераПастера (Париж, Франция)

48. BACILLUS CLAUSIIBACILLUS CLAUSII
ПОЛНОСТЬЮ РАСШИФРОВАН
ПОЛНОСТЬЮ РАСШИФРОВАН
ГЕНОМ
ГЕНОМ
Bacillus clausii
Bacillus clausii (опубликовано в мaрте 2005:
http://wishart.biology.ualberta.ca/BacMap/)
 алкалофильная, Г(+) бактерия
 убиквитарная (распространённая повсеместно, непатогенная)
 спорообразующая бактерия с высокой резистентностью к
зическим и химическим факторам

49. •СПОРООБРАЗОВАНИЕСПОРООБРАЗОВАНИЕ
(высокая(высокая
резистентность крезистентность к
химическимхимическим (кислота и желчь) ии
физическимфизическим (повышение
температуры) факторам)факторам)
•ПРОРАСТАНИЕПРОРАСТАНИЕ
(в подвздошной /(в подвздошной /
тощей кишке)тощей кишке)
BACILLUS CLAUSIIBACILLUS CLAUSII
(бактерия, формирующая эндоспоры)
(Nakano Ann Rev Microbiol 1998, Jadamus Anim Physiol Nutr 2002, Casula Appl Env Micro 2002)

50. 52
(Senesi S et el. Appl Environ Microbiol 2001; 67:834–9)
комплекс прoбиoтичеcкихпрoбиoтичеcких
спорообразующих
aнтибиотикорезистентных штаммов
Bacillus (N/R, O/C, SIN,
and T), которые
классифицированы как
Bacillus clausii

51. анализ физиологических ианализ физиологических и
биохимических признаков, генныхбиохимических признаков, генных
последовательностей 16S рРНКпоследовательностей 16S рРНК
подтвердил, что все штаммыподтвердил, что все штаммы BacillusBacillus
clausiiclausii имеютимеют геныгены с очень низкимс очень низким
уровнем внутривидового разнообразияуровнем внутривидового разнообразия
геномагенома
(каждый штамм остался прежним на(каждый штамм остался прежним на
протяжении последних 25 лет)протяжении последних 25 лет)
Senesi S, Celandroni F, Tavanti A, Ghelardi E.Molecular characterization and identification of Bacillus clausii Strains
marketed for use in oral bacteriotherapy. //Appl Environ Microbiol. 2001; 67(2):834-9.
(генетическая стабильность)(генетическая стабильность)

53. Bacillus ClausiiBacillus Clausii
• анализ последовательности генаанализ последовательности гена 16S rRNA16S rRNA
доказал наличие Bacillus clausii удоказал наличие Bacillus clausii у 20%20%
здоровых людейздоровых людей
• противовирусная активностьпротивовирусная активность
(рота-, аденовирусы)
• прямой антимикробный эффектпрямой антимикробный эффект
против Clostridium difficile, ClostridiumClostridium difficile, Clostridium
perfringens, Listeria monocytogenes,perfringens, Listeria monocytogenes,
Staphylococcus aureusStaphylococcus aureus (Нoyles, Res Microbiol, 2012)
(Urdaci MC et al. J Clin Gastroenterol 2004; 38(Suppl 2):S86–S90)

54. O/C - 37°CO/C - 37°C
3 дня3 дня
O/C - 30°CO/C - 30°C
3 дня3 дня
подавление ростаподавление роста S. aureusS. aureus (зона подавления)
S. aureusS. aureus пятнопятно B. clausiiB. clausii S. aureusS. aureus пятнопятно B. clausiiB. clausii
(Hoyles, Res Microbiol, 2012)

55. - продуцируютпродуцируют КЛАУЦИН –КЛАУЦИН –
лантибиотик типа “A”лантибиотик типа “A”
(взаимодействует с липидами, участвующими
в синтезе полимеров
бактериальной стенки и способствует образованию
пор в клеточной мембране, приводя к лизису
микроорганизмов)
- бактериоцины- бактериоцины
- дипиколиновую кислоту- дипиколиновую кислоту
(энтеросептическое вещество)
(Bouhss et al, Biophys J., 2009)
Bacillus ClausiiBacillus Clausii

56. АНТИБИОТИКОРЕЗИСТЕНТНОСТЬАНТИБИОТИКОРЕЗИСТЕНТНОСТЬ
B. ClausiiB. Clausii
чтобы выжить при применении нескольких
антибиотиков B. Clausii проявляет
МУЛЬТИАНТИБИОТИКОРЕЗИСТЕНТНОСТЬМУЛЬТИАНТИБИОТИКОРЕЗИСТЕНТНОСТЬ
(Courvalin P, DLD., 2006)

57. АНТИБИОТИКОРЕЗИСТЕНТНОСТЬАНТИБИОТИКОРЕЗИСТЕНТНОСТЬ
Bacillus clausiiBacillus clausii
хромосомная резистентностьхромосомная резистентность
вертикальная передача путём делениявертикальная передача путём деления
(Courvalin P, DLD., 2006)
нет риска переноса
антибиотикорезистентности

58. • индуцирует продукцию
TNF-aTNF-a в моноцитах
• активирует ThTh11 иммунный
ответ
(использование при лечении аллергических
болезней) (Miyanashi, J Biosci Bioeng., 2003)
(Di Caro and Gasbarrini, Eur J Gastro Hep 2005)
Bacillus ClausiiBacillus Clausii

59. (Cipriand G et al, Pediatr Allergy Immunol 2004: 15: 148–151)
BACILLUS CLAUSIIBACILLUS CLAUSII при АТОПИЧЕСКОМ РИНИТЕАТОПИЧЕСКОМ РИНИТЕ
Th1
Th1
Th2
регуляторные
цитокины
Исходные
показатели
После
лечения
Исходные
показатели
После
лечения
Рис. 2. Уровень цитокинов до и после применения B. clausii
Исходные
показатели
После
лечения
Исходные
показатели
После
лечения
Исходные
показатели
Исходные
показатели

60. сравнение профилей экспрессии геновсравнение профилей экспрессии генов
в образцах до и после леченияв образцах до и после лечения
158158 генов повышающих
регуляцию
265265 генов, снижающих
регуляцию
профиль экспресии геновпрофиль экспресии генов
при использованиипри использовании B.clausiiB.clausii
(Di Caro and Gasbarrini, Eur J Gastro Hep., 2005)

61. 63
cтимуляция выработкиcтимуляция выработки гамма-интерферонагамма-интерферона
спорообразующимиспорообразующими BACILLUS CLAUSIIBACILLUS CLAUSII

62. Defensin –
β 126
в 4.3 раза по
сравнению с группой
контроля
дефензиныдефензины – это наши собственные
антибиотики, имеющие важное значение
в иммунологической реакции защиты от
вторжения патогенов
BACILLUS CLAUSII … и барьерBACILLUS CLAUSII … и барьер
пищеварительного трактапищеварительного тракта
(Di Caro and Gasbarrini, Eur J Gastro Hep., 2005)

63. -dihydrolipoamide dehydrogenase
-succinate dehydrogenase
-dihydrolipoamide dehydrogenase
-acetyl CoA synthetase
-glucose-6-phosphate isomerase
-enolase
-alcohol dehydrogenase
-malate dehydrogenase
-sugar phosphate epimerase
-alkaline protease
-aminopeptidase
-carbonic anhydrase
-superoxide dismutase
-catalase
R. Lippolis, R. A. Siciliano, M. F. Mazzeo, A. Abbrescia, A. Gnoni, A. M. Sardanelli,
S. Papa Comparative secretome
analysis of four isogenic Bacillus clausii probiotic strains. //Proteome Science 2013, 11:28
спорообразующие ВACILLUS CLAUSIIспорообразующие ВACILLUS CLAUSII
имеют METAБOЛИЧЕСКУЮ AКTИВНОСТЬимеют METAБOЛИЧЕСКУЮ AКTИВНОСТЬ
и клиническуюи клиническую
эффективность при диарееэффективность при диарее

64. показания к применениюпоказания к применению B.ClausiiB.Clausii
согласно рекомендациямсогласно рекомендациям Всемирной ОрганизацииВсемирной Организации
ГастроэнтерологииГастроэнтерологии (WGO,(WGO, 20112011))
профилактикапрофилактика
антибиотик-антибиотик-
ассоциированой диареиассоциированой диареи
(ААД) –(ААД) – с 1 дня леченияс 1 дня лечения
антибиотикамиантибиотиками
штаммштамм
пробиотика впробиотика в
дозедозе
рекомендованнаярекомендованная
дозадоза
уровеньуровень
доказательностидоказательности
BacillusBacillus
clausiiclausii
2x109
спор
3р /день
11bb
коадъювантнаякоадъювантная
терапия, направленнаятерапия, направленная
на эрадикацию H. рyloriна эрадикацию H. рylori
штаммштамм
пробиотикапробиотика
рекомендованнаярекомендованная
дозадоза
уровеньуровень
доказательностидоказательности
BacillusBacillus
clausiiclausii
2x109
спор
3р в день
11bb

65. ПОДТВЕРЖДЁННАЯПОДТВЕРЖДЁННАЯ
БЕЗОПАСНОСТЬБЕЗОПАСНОСТЬ
 Bacillus clausii нe колонизируютнe колонизируют
слизистую оболочку кишечника и
выводятсявыводятся из пищеварительного тракта
 Bacillus clausii признаны безопаснымипризнаны безопасными
EFSAEFSA (European Food Safety Authority)
 Bacillus clausii можно
использовать у
беременных и кормящих
женщин, а также у детейу детей
с 28 дня жизнис 28 дня жизни

66. дизайн открытого сравнительногодизайн открытого сравнительного
клинического исследованияклинического исследования
“случай-контроль”“случай-контроль”
 обследовано 196 детейобследовано 196 детей
первых 3 лет жизнипервых 3 лет жизни
((1.87 ±0.15 лет1.87 ±0.15 лет) с острой) с острой
секреторной диареейсекреторной диареей
 112 детей получали стандартную терапию
рекомендованную ВOЗ + Bacillus clausii
 84 ребёнка получали только стандартную
терапию

67. 0
1
2
3
4
5
6
7
0 день
3 день
5 день
7 день
стандартнаятерпия +
Энтерожермина
стандартнаятерапия
частота дефекации у дeтей первых
3 лет жизни с острой диареей (n = 196)
p<0.05

68. 0
1
2
3
4
5
6
7
0 день 3 день 5 день 7 день
стандартная терапия +
Энтерожермина
стандартная терапия
интенсивность вздутия кишечника
(в баллах) у детей первых 3
лет жизни при острой диарее (n = 196)
p<0.05

69. 0
0,5
1
1,5
2
2,5
3
3,5
4
4,5
5
0 день 3 день 5 день 7 день
стандартная терапия+
Энтерожермина
стандартная терапия
интенсивность абдоминальной боли
(в баллах) у детей первых 3
лет жизни при острой диарее (n = 196)
p<0.05

70. т.о., у детей первых 3 лет жизни, послет.о., у детей первых 3 лет жизни, после
включениявключения ВACILLUS CLAUSIIВACILLUS CLAUSII вв
стандартную терапию острой диареи,стандартную терапию острой диареи,
отмечалось более быстроеотмечалось более быстрое уменьшениеуменьшение
интенсивности абдоминальной болиинтенсивности абдоминальной боли
((2.61±0.152.61±0.15 дней),дней), вздутиявздутия ((3.27±0.263.27±0.26 дней) идней) и
частоты дефекациичастоты дефекации ((1.96±0.111.96±0.11 дней),дней), чем учем у
пациентов, получавших толькопациентов, получавших только
стандартную терапиюстандартную терапию

71. отличная
очень хорошая
хорошая
плохая81.8%
13.6%
ОЦЕНКА ПЕРЕНОСИМОСТИОЦЕНКА ПЕРЕНОСИМОСТИ Bacillus clausii ®Bacillus clausii ®
РОДИТЕЛЯМИ БЫЛА ПОЗИТИВНОЙРОДИТЕЛЯМИ БЫЛА ПОЗИТИВНОЙ
22 мамы детей, которые получали ЭНТЕРОЖЕРМИНу как дополнение к стандартной
терапии острой диареи позитивно оценили переносимость препарата
4.6%

72. дизайн открытогодизайн открытого
cравнительного клиническогоcравнительного клинического
исследования “случай-контроль”исследования “случай-контроль”
 обследовано 209 детей oт 10 дo 16 летобследовано 209 детей oт 10 дo 16 лет
((12.07 ±0.54 лет12.07 ±0.54 лет) с H.p. – aссоциированным) с H.p. – aссоциированным
хроническим гастродуоденитомхроническим гастродуоденитом
 142 ребёнка получали стандартную тройную142 ребёнка получали стандартную тройную
терапию (Д+A+M) +терапию (Д+A+M) + Bacillus clausii
 67 детей получали только стандартную67 детей получали только стандартную
тройную терапию (Д+A+M)тройную терапию (Д+A+M)

73. 0
1
2
3
4
5
6
7
0 день
3 день
5 день
10 день
стандартная тройная
терапия+ Энтерожермина
стандартная тройная
терапия
интенсивность вздутия кишечникаинтенсивность вздутия кишечника (в баллах)(в баллах)
у детей су детей с H. pyloriH. pylori – ассоциированным– ассоциированным
хроническим гастродуоденитомхроническим гастродуоденитом (n = 209)(n = 209)

74. 0
0,5
1
1,5
2
2,5
3
3,5
4
4,5
5
0 день 3 день 5 день 10 день
стандартная тройная
терапия+
Энтерожермина
стандартная тройная
терапия
интенсивность абдоминальной болиинтенсивность абдоминальной боли (в баллах)(в баллах)
у детей су детей с H. pyloryH. pylory-aссоциированным-aссоциированным
хроническим гастродуоденитомхроническим гастродуоденитом (n = 209)(n = 209)

75. 0
1
2
3
4
5
стандартная тройная
терапия+ Энтерожермина
стандартная тройная
терапия
частота побочных эффектовчастота побочных эффектов (тошнота, рвота,(тошнота, рвота,
диарeя, aллергия, стоматит, анорексия, запор) (в %)диарeя, aллергия, стоматит, анорексия, запор) (в %)
при лечениипри лечении H. pyloriH. pylori-aссоциированного-aссоциированного
хронического гастродуоденитахронического гастродуоденита (n = 209)(n = 209)

76. т.о., после включеният.о., после включения ВACILLUS CLAUSIIВACILLUS CLAUSII
в стандартную терапию Н.р.-в стандартную терапию Н.р.-
ассоциированного хроническогоассоциированного хронического
гастродуоденита у детей,гастродуоденита у детей, отмечалосьотмечалось
более быстроеболее быстрое уменьшениеуменьшение
абдоминальной боли (абдоминальной боли (3.94±0,453.94±0,45 дня),дня),
вздутия кишечника (вздутия кишечника (4.61±0,13 дня4.61±0,13 дня) и) и
снижение частоты побочных эффектовснижение частоты побочных эффектов
по сравнению со стандартнойпо сравнению со стандартной
антихеликобактерной терапиейантихеликобактерной терапией

77. ГИППОКРАТ
……исцеление –исцеление –
это делоэто дело
ВРЕМЕНИ,ВРЕМЕНИ, ноно
иногда это делоиногда это дело
ВОЗМОЖНОСТИВОЗМОЖНОСТИ