1. SYMPOSIUM
SIMPOSIUM NASIONAL
Riset dan Abdimas Inovatif Berkelanjutan 2022 - SENASTEK IX dan SENASDIMAS I
PERBEDAAN KANDUNGAN,
KOLAGEN BMP-2 ANTARA EKSTRAK
TULANG IKAN KAKAP MERAH DENGAN
EKSTRAK CANGKANG KEPITING
I Gede Eka Wiratnaya
Hans Kristian Nugraha
Ida Bagus Deny Prayudi
2. SYMPOSIUM
SIMPOSIUM NASIONAL
Riset dan Abdimas Inovatif Berkelanjutan 2022 - SENASTEK IX dan SENASDIMAS I
OUTLINE
PENDAHULUAN
METODE DAN PROSEDUR
HASIL DAN PEMBAHASAN
KESIMPULAN
4. SYMPOSIUM
SIMPOSIUM NASIONAL
Riset dan Abdimas Inovatif Berkelanjutan 2022 - SENASTEK IX dan SENASDIMAS I
PENDAHULUAN
Kekayaan Indonesia
dari hasil laut yang
melimpah
Tingginya angka
industri perikanan di
Indonesia, pada
tahun 2019 sebesar
30-40% (±8,6 juta
ton) menjadi limbah
Tulang dan Cangkang
kepiting memiliki
kandungan kalsium
bila diolah dengan
tepat
Tablet Kalsium yang
cenderung Mahal di
pasaran
Straub, D. A. Calcium supplementation in clinical practice: A review of forms, doses, and indications. (2007). In Nutrition in
Clinical Practice. https://doi.org/10.1177/0115426507022003286
P. H. Luu, & Nguyen, M. H. Recovery and Utilization of Calcium from Fish Bones by Products as A Rich Calcium Source.oor,
An Introduction to Signal Detection and Estimation. (2009). New York: Springer-Verlag, 1985, ch. 4.
5. SYMPOSIUM
SIMPOSIUM NASIONAL
Riset dan Abdimas Inovatif Berkelanjutan 2022 - SENASTEK IX dan SENASDIMAS I
PENDAHULUAN
Kalsium
merupakan
mineral yang
krusial dalam
mempertahankan
kepadatan tulang
dan berperan
dalam pencegahan
penyakit-penyakit
pada sistem
musculoskeletal
Konsumsi
makanan kaya
kalsium efektif
untuk mencegah
atau menunda
osteoporosis pada
wanita pra dan
pasca menopause
serta pada lelaki
usia tua
Kebutuhan
kalsium harian
pada manusia
dipengaruhi oleh
berbagai faktor
seperti usia, jenis
kelamin,
kehamilan, dan
sebagainya
Alternatif lain
sumber kalsium
yang berasal dari
“Waste Product”
dengan harga
lebih terjangkau
Straub, D. A. Calcium supplementation in clinical practice: A review of forms, doses, and indications. (2007). In Nutrition in
Clinical Practice. https://doi.org/10.1177/0115426507022003286
P. H. Luu, & Nguyen, M. H. Recovery and Utilization of Calcium from Fish Bones by Products as A Rich Calcium Source.oor,
An Introduction to Signal Detection and Estimation. (2009). New York: Springer-Verlag, 1985, ch. 4.
6. SYMPOSIUM
SIMPOSIUM NASIONAL
Riset dan Abdimas Inovatif Berkelanjutan 2022 - SENASTEK IX dan SENASDIMAS I
PENDAHULUAN
Tulang ikan merupakan
sumber yang berharga dan
komponen elemen esensial
untuk meningkatkan
Kesehatan
Tulang ikan mengandung
kandungan kalsium (Ca) dan
fosfor (P) yang menyusun
sekitar 2% (20 g/kg berat
kering) dari ikan
Terdapat senyawa yang
identik dengan growth factor
untuk tulang yang salah
satunya yaitu bone
morphogenetic protein
(BMP) yang berperan penting
dalam diferensiasi osteoblast
Salah satu jenis ikan yang
mungkin dapat dimanfaatkan
tulangnya sebagai bahan
dasar pembuatan suplemen
kalsium adalah ikan kakap
merah
Limbah tulang ikan kakap
merah dapat dimanfaatkan
sebagai bahan dasar
pembuatan suplemen
kalsium
Straub, D. A. Calcium supplementation in clinical practice: A review of forms, doses, and indications. (2007). In Nutrition in
Clinical Practice. https://doi.org/10.1177/0115426507022003286
P. H. Luu, & Nguyen, M. H. Recovery and Utilization of Calcium from Fish Bones by Products as A Rich Calcium Source.oor,
An Introduction to Signal Detection and Estimation. (2009). New York: Springer-Verlag, 1985, ch. 4.
7. SYMPOSIUM
SIMPOSIUM NASIONAL
Riset dan Abdimas Inovatif Berkelanjutan 2022 - SENASTEK IX dan SENASDIMAS I
PENDAHULUAN
Selain tulang ikan, cangkang
kepiting juga mengandung
kalsium karbonat yang sangat
melimpah, dan bervariasi
menurut spesiesnya
Kalsium karbonat dapat diproses
lebih lanjut menjadi kalsium
hidroksiapatit, yang secara kimia
dan secara fisik kandungan
mineralnya sama dengan tulang
dan gigi pada manusia
Bahan baku yang melimpah
antara lain cangkang kepiting
merupakan salah satu komoditas
ekspor utama Indonesia
Cangkang kepiting mengandung
15,60%-23,90% protein, 53,70%-
78,40% kalsium karbonat, dan
18,70%-32,20% kitin
Straub, D. A. Calcium supplementation in clinical practice: A review of forms, doses, and indications. (2007). In Nutrition in
Clinical Practice. https://doi.org/10.1177/0115426507022003286
P. H. Luu, & Nguyen, M. H. Recovery and Utilization of Calcium from Fish Bones by Products as A Rich Calcium Source.oor,
An Introduction to Signal Detection and Estimation. (2009). New York: Springer-Verlag, 1985, ch. 4.
8. SYMPOSIUM
SIMPOSIUM NASIONAL
Riset dan Abdimas Inovatif Berkelanjutan 2022 - SENASTEK IX dan SENASDIMAS I
PENDAHULUAN
Potensi dari “Waste Product” masih belum
dimanfaatkan secara sepenuhnya
Tulang ikan dan Cangkang Kepiting sebagai
inovasi yang diharapkan dapat memberikan
manfaat lintas sektorial dengan kandungan
kalsium karbonat, kolagen dan BMP-2
Straub, D. A. Calcium supplementation in clinical practice: A review of forms, doses, and indications. (2007). In Nutrition in
Clinical Practice. https://doi.org/10.1177/0115426507022003286
P. H. Luu, & Nguyen, M. H. Recovery and Utilization of Calcium from Fish Bones by Products as A Rich Calcium Source.oor,
An Introduction to Signal Detection and Estimation. (2009). New York: Springer-Verlag, 1985, ch. 4.
10. SYMPOSIUM
SIMPOSIUM NASIONAL
Riset dan Abdimas Inovatif Berkelanjutan 2022 - SENASTEK IX dan SENASDIMAS I
METODE DAN PROSEDUR
Studi deskriptif-analitik untuk mengetahui perbandingan kadar kalsium karbonat, kolagen, dan BMP-2 antara
ekstrak tulang ikan dengan ekstrak cangkang kepiting dengan purposive sampling
Kriteria Inklusi:
• Tulang Ikan Kakap Merah spesies Lutjanus campechanus
• Cangkang Kepiting spesies Brachyura
Kriteria Eksklusi:
• Tulang Ikan dan Cangkang Kepiting yang tidak termasuk Spesies diatas
11. SYMPOSIUM
SIMPOSIUM NASIONAL
Riset dan Abdimas Inovatif Berkelanjutan 2022 - SENASTEK IX dan SENASDIMAS I
PERHITUNGAN KADAR KALSIUM KARBONAT
Sampel kering dipindahkan ke bilik porselen tidak berpori, yang sebelumnya dicuci dengan menggunakan asam
nitrat (HNO3)
Sampel dipanaskan dalam kompor pada suhu 450OC selama 48 jam untuk menghilangkan bahan organik yang
ada pada sampel, hingga tersisa hanya abu yang mengandung mineral
Abu ditimbang dan diencerkan dalam 50mL HNO3 dan disimpan dalam digestor selama 6 jam
12. SYMPOSIUM
SIMPOSIUM NASIONAL
Riset dan Abdimas Inovatif Berkelanjutan 2022 - SENASTEK IX dan SENASDIMAS I
PERHITUNGAN KADAR KALSIUM KARBONAT
Sampel ditambah 2 mL hydrogen peroksida (H2O2) untuk memungkinkan klarifikasi dari larutan yang
dihasilkan
Sampel diencerkan seratus kali dan lima aliquots masing-masing 25mL diambil untuk penentuan kalsium
menggunakan Ethylenediamino Tetracetic Acid Dissodic (EDTA)
13. SYMPOSIUM
SIMPOSIUM NASIONAL
Riset dan Abdimas Inovatif Berkelanjutan 2022 - SENASTEK IX dan SENASDIMAS I
PERHITUNGAN KADAR KOLAGEN
Menggunakan SircolTM Collagen Assay
Persiapan reagen kosong dengan 100 l air deionisasi, 0,5 M asam asetat, dan buffer ekstraksi, dengan
menggunakan larutan yang sama dengan sampel pengujian
Siapkan sampel uji dengan volume antara 10 dan 100 l , pada setiap tabung, tambahkan 1ml reagen pewarna
SircolTM, campur isinya dengan menutup dan membalik tabung, kemudian tempatkan pada mesin pengocok
mekanis selama 30 menit
Sentrifugasi pada 13.600 g selama 10 menit, setelah itu singkirkan supernatant dengan cara mengeringkan
tabung
14. SYMPOSIUM
SIMPOSIUM NASIONAL
Riset dan Abdimas Inovatif Berkelanjutan 2022 - SENASTEK IX dan SENASDIMAS I
PERHITUNGAN KADAR KOLAGEN
Tambahkan 750 l reagen cuci asam basah dan disentrifugasi pada 13.600 g selama 10 menit. Melepas cairan
sisa dari tabung dengan cotton wool buds
Tambahkan 250 l reagen alkali ke tabung kosong, standar, dan sampel, kemudian tutup tabung dan lepaskan
kolagen ke dalam cairan menggunakan mixer vortex
Pindahkan 200 l dari tiap sampel
Hitung konsentrasi kolagen dalam sampel yang diuji.
15. SYMPOSIUM
SIMPOSIUM NASIONAL
Riset dan Abdimas Inovatif Berkelanjutan 2022 - SENASTEK IX dan SENASDIMAS I
PENGUKURAN KADAR BMP-2
Pengukuran dengan menggunakan Coomassie Plus Protein Assay
Hasil pengukuran diperoleh dengan cara menempatkan tiga puluh milligram sampel dalam tabung 1,5ml
Eppendorf dengan 1,9ml 4 M Guanidine HCl, 50 mM phenylmethylsulfonyl, dan 0,1mM asam aminocaproic
17. SYMPOSIUM
SIMPOSIUM NASIONAL
Riset dan Abdimas Inovatif Berkelanjutan 2022 - SENASTEK IX dan SENASDIMAS I
METODE DAN PROSEDUR
Data yang telah terkumpul dianalisis dengan program SPSS for Windows versi 22.0
Besar sampel dihitung dengan menggunakan rumus: 𝑛=2[(𝑍𝛼+𝑍𝛽)𝑆𝑑/𝑑]^2
Besaran 𝛼 ditetapkan =0,05; Z𝛼 ditetapkan =1,96; 𝛽 ditetapkan =2, dan Z𝛽 ditetapkan =0,824
Dari penghitungan dengan rumus besar tersebut, dengan memperhitungkan adanya drop out
sebesar 10%, maka didapatkan jumlah sampel adalah 16 sampel dari tiap kelompok, sehingga total
sampel yang dibutuhkan adalah 32 sampel
18. SYMPOSIUM
SIMPOSIUM NASIONAL
Riset dan Abdimas Inovatif Berkelanjutan 2022 - SENASTEK IX dan SENASDIMAS I
METODE DAN PROSEDUR
Karakteristik sampel penelitian diolah untuk disajikan secara deskriptif, dengan menggunakan grafik dan tabel
Uji normalitas dengan Kolmogorov Smirnoff dan uji homogenitas data dengan Levene T test.
Uji inferensial menggunakan uji T-Test berpasangan dan uji regresi logistik.
19. SYMPOSIUM
SIMPOSIUM NASIONAL
Riset dan Abdimas Inovatif Berkelanjutan 2022 - SENASTEK IX dan SENASDIMAS I
HIPOTESIS
Kadar Kolagen cangkang kepiting lebih tinggi dibanding kadar kolagen tulang ikan kakap
Kadar BMP-2 cangkang kepiting lebih tinggi dibanding kadar BMP-2 tulang ikan kakap
Kadar Kalsium Karbonat cangkang kepiting lebih tinggi dibanding kadar kalsium karbonat tulang ikan kakap
22. SYMPOSIUM
SIMPOSIUM NASIONAL
Riset dan Abdimas Inovatif Berkelanjutan 2022 - SENASTEK IX dan SENASDIMAS I
Karakteristik Kolagen pada Cangkang Kepiting
dan Tulang Ikan Kakap
Independent Samples Test
Levene's Test for
Equality of
Variances
t-test for Equality of Means
F Sig. t df Sig. (2-
tailed)
Mean
Difference
Std. Error
Difference
95% Confidence
Interval of the
Difference
Lower Upper
kadar_kolag
en
Equal variances
assumed
3.002 .091 25.222 38 .000 25.11930 .99595 23.10311 27.13549
Equal variances
not assumed
25.222 33.41
3
.000 25.11930 .99595 23.09398 27.14462
23. SYMPOSIUM
SIMPOSIUM NASIONAL
Riset dan Abdimas Inovatif Berkelanjutan 2022 - SENASTEK IX dan SENASDIMAS I
Karakteristik Kolagen pada Cangkang Kepiting
dan Tulang Ikan Kakap
• Kadar kolagen cangkang kepiting
secara signifikan lebih tinggi
dibanding kadar kolagen tulang
ikan kakap (p< 0,001)
Cangkang
Kepiting
(n=20)
Tulang
Ikan
Kakap
(n=20)
Nilai p
Kadar kolagen
(µg/100mg),
mean ± SD
73,88 ± 3,68 48,76 ±
2,49
0,000
25. SYMPOSIUM
SIMPOSIUM NASIONAL
Riset dan Abdimas Inovatif Berkelanjutan 2022 - SENASTEK IX dan SENASDIMAS I
Karakteristik BMP-2 pada Cangkang Kepiting
dan Tulang Ikan Kakap
26. SYMPOSIUM
SIMPOSIUM NASIONAL
Riset dan Abdimas Inovatif Berkelanjutan 2022 - SENASTEK IX dan SENASDIMAS I
Karakteristik BMP-2 pada Cangkang Kepiting
dan Tulang Ikan Kakap
• Berdasarkan uji independent T-
test didapatkan hasil p <0,001
sehingga kadar BMP-2 cangkang
kepiting secara signifikan lebih
tinggi dibanding kadar BMP-2
tulang ikan kakap
Cangkang
Kepiting
(n=20)
Tulang
Ikan
Kakap
(n=20)
Nilai p
Kadar BMP-2
(µg/100mg),
mean ± SD
35 ± 10,20 21,7 ±
10,12
0,000
28. SYMPOSIUM
SIMPOSIUM NASIONAL
Riset dan Abdimas Inovatif Berkelanjutan 2022 - SENASTEK IX dan SENASDIMAS I
Karakteristik Kalsium Karbonat pada Cangkang
Kepiting dan Tulang Ikan Kakap
29. SYMPOSIUM
SIMPOSIUM NASIONAL
Riset dan Abdimas Inovatif Berkelanjutan 2022 - SENASTEK IX dan SENASDIMAS I
Karakteristik Kalsium Karbonat pada Cangkang
Kepiting dan Tulang Ikan Kakap
• Kadar kalsium karbonat cangkang
kepiting secara signifikan lebih
tinggi dibanding kadar kalsium
karbonat tulang ikan kakap
(p<0,001)
Cangkang
Kepiting
(n=20)
Tulang
Ikan
Kakap
(n=20)
Nilai p
Kadar BMP-2
(µg/100mg),
mean ± SD
65,3 ± 6,00
µg/100mg
35,9 ±
4,56
µg/100m
g
<0,001
31. SYMPOSIUM
SIMPOSIUM NASIONAL
Riset dan Abdimas Inovatif Berkelanjutan 2022 - SENASTEK IX dan SENASDIMAS I
KESIMPULAN
Kadar Kolagen cangkang kepiting secara signifikan lebih tinggi dibanding kadar kolagen tulang ikan kakap
Kadar BMP-2 cangkang kepiting secara signifikan lebih tinggi dibanding kadar BMP-2 tulang ikan kakap
Kadar Kalsium Karbonat cangkang kepiting secara signifikan lebih tinggi dibanding kadar kalsium karbonat
tulang ikan kakap
32. SYMPOSIUM
SIMPOSIUM NASIONAL
Riset dan Abdimas Inovatif Berkelanjutan 2022 - SENASTEK IX dan SENASDIMAS I
DAFTAR PUSTAKA
1. Carreira, A. C., Lojudice, F. H., Halcsik, E., Navarro, R. D., Sogayar, M. C., & Granjeiro, J. M. Bone morphogenetic proteins:
Facts, challenges, and future perspectives. (2014). Journal of Dental Research. https://doi.org/10.1177/0022034513518561
2. H Aihanuwa, U.-E., Chukwujekwu, K., & Chukwuemeke, C. Bone Morphogenetic Proteins an Update and Review. (2017).
Tropical Journal of Natural Product Reseach. https://doi.org/10.26538/tjnpr/v1i1.2
3. Straub, D. A. Calcium supplementation in clinical practice: A review of forms, doses, and indications. (2007). In Nutrition in
Clinical Practice. https://doi.org/10.1177/0115426507022003286
4. P. H. Luu, & Nguyen, M. H. Recovery and Utilization of Calcium from Fish Bones by Products as A Rich Calcium Source.oor, An
Introduction to Signal Detection and Estimation. (2009). New York: Springer-Verlag, 1985, ch. 4.
5. Darmanto, Y. S., Agustini, T. W., Swastawati, F., & Al Bulushi, I. The effect of fish bone collagens in improving food quality.
(2014). International Food Research Journal.
6. Liao, W. L., Lu, H. H., Huang, S. K., Wu, J. L., Huang, J. H., & Lin, E. C. Study of growth and body composition of red snapper
Lutjanus erythropterus fed diets containing Escherichia coli expressing recombinant tilapia insulin-like growth factor-I. 2008.
Fisheries Science. https://doi.org/10.1111/j.1444-2906.2008.01533.x.
7. Asphama, A. I., Amir, F., Malina, A. C., & Fujaya, Y. (2015). Habitat Preferences of Blue Swimming Crab (Portunus pelagicus)
Species Complex. Aquacultura Indonesiana, 16(1). https://doi.org/10.21534/ai.v16i1.10
8. Raya, I., Mayasari, E., Yahya, A., Syahrul, M., & Latunra, A. I. (2015). Shynthesis and Characterizations of Calcium
Hydroxyapatite Derived from Crabs Shells (Portunus pelagicus) and Its Potency in Safeguard against to Dental Demineralizations.
International Journal of Biomaterials, 2015. https://doi.org/10.1155/2015/469176