1. PENGAWET
SUSPENSI KERING
Kelompok II
16 Oktober 2012

2. Mikroba Uji
• Candida albicans (ATCC No. 10231)
• Aspergillus niger (ATCC No. 16404)
• Escherichia coli (ATCC No. 8739)
• Pseudomonas aeruginosa (ATCC No. 9027)
• Staphylococcus aureus (ATCC No. 6538)

3. Medium
Soybean-Casein Digest Agar Medium
• Digesti pankreatin kasein P 15 g
• Digesti papain tepung kedelai P 5 g
• Natrium klorida P 5 g
• Agar P 15 g
• Air ad 1000 ml
pH setelah sterilisasi 7,3

4. Pembuatan Inokula
• Inkubasi biakan bakteri pada suhu 300 sampai 350
selama 18-24 jam
• Inkubasi biakan Candida albicans pada suhu 200
hingga 250 selama 48 jam
• Inkubasi biakan Aspergillus niger pada suhu 200
hingga 250 selama 1 minggu

5. Pemanenan Mikroba
Candida albicans
• Cuci permukaan pertumbuhan dengan natrium
klorida P 0,9% steril
• Hasil cucian dimasukkan ke dalam wadah yang
sesuai
• Tambahkan larutan natrium klorida P 0,9% steril
secukupnya untuk untuk mengurangi angka
mikroba hingga lebih kurang 100 juta per ml.

6. Pemanenan Mikroba
Aspergillus niger
• Cuci permukaan pertumbuhan dengan natrium
klorida P 0,9% steril yang mengandung polisorbat
80 P 0,05%
• Hasil cucian dimasukkan ke dalam wadah yang
sesuai
• Atur angka spora hingga lebih kurang 100 juta per
ml dengan penambahan larutan natrium klorida P
0,9% steril

7. Pemanenan Mikroba
Mikroba dapat ditumbuhkan di dalam media cair yang
sesuai, dan panenan sel dilakukan dengan cara
sentrifugasi, dicuci, dan disuspensikan kembali dalam
larutan natrium klorida P 0,9% steril sedemikian rupa
hingga dicapai angka mikroba atau spora yang
dikehendaki.
• Suspensi bakteri keruh pada jumlah lebih dari
107/mL
• Suspensi ragi dan kapang keruh pada jumlah 10-
100 kali lebih rendah dari bakteri

8. Pengujian Mikroba Uji
• Diambil 1 mL (~30-300 koloni)
• Dimasukkan ke dalam dua cawan petri
• Tambahkan 15-20 mL media SCDA bersuhu ~45°C
• Inkubasi 48-72 jam, amati pertumbuhan koloni
Tetapkan CFU/mL dari setiap suspensi, gunakan untuk
menentukan banyaknya inokula yang akan digunakan
pada pengujian

9. Prosedur Uji Efektivitas
• Larutkan suspensi kering sesuai dengan aturan
• Dimasukkan 20 mL suspensi ke dalam 5 tabung
bakteriologik bertutup, sesuai, dan steril
• Inokulasi 0,1 mL mikroba uji ke dalam setiap
tabung
• Tambahkan mikroba uji dengan jumlah yang sesuai
sedemikian rupa hingga jumlah mikroba di dalam
sediaan uji segera setelah inokulasi adalah antara
100.000 dan 1.000.000 per mL
• Tetapkan jumlah mikroba viabel di dalam tiap
suspensi inokula

10. Prosedur Uji Efektivitas
• Hitung angka awal mikroba tiap mL sediaan yang
diuji dengan metode lempeng
• Inkubasi pada suhu 200 hingga 250
• Amati pada hari ke 7, ke 14, ke 21 dan ke 28
sesudah inokulasi
• Catat tiap perubahan yang terlihat dan tetapkan
jumlah mikroba viabel pada tiap selang waktu
tersebut dengan metode lempeng
• Dengan menggunakan bilangan teoritis mikroba
pada awal pengujian, hitung perubahan kadar
dalam persen (%) tiap mikroba selama pengujian

11. Penafsiran Hasil
• Jumlah bakteri viabel pada hari ke-14 berkurang
hingga tidak lebih dari 0,1% dari jumlah awal
• Jumlah kapang dan khamir viabel pada hari ke-14
berkurang hingga tidak lebih dari 0,1% dari jumlah
awal
• Jumlah tiap mikroba uji selama hari tersisa dari 28
hari pengujian adalah tetap atau kurang dari
bilangan yang disebut diatas

12. Thank You !
Any Question