Downloaded 86 times
7.1 (1)
- 1. 1 ปฏิ บติการที่ 7 ในสิ่ งมีชีวิตมีสารเคมี ั กิ จกรรมที่ 7.1 กรดนิ วคลีอิก เรื่องการสกัดDNA จากหัวหอมและมะเขือเทศ ชื่อกลุ่ม............................................................................... สมาชิ ก 1.....................................................................ห้อง....................รหัสนักศึกษา........................... 2.....................................................................ห้อง....................รหัสนักศึกษา........................... 3......................................................................ห้อง....................รหัสนักศึกษา........................... 4......................................................................ห้อง....................รหัสนักศึกษา........................... 5......................................................................ห้อง....................รหัสนักศึกษา........................... 6......................................................................ห้อง....................รหัสนักศึกษา........................... จุดประสงค์ 1. เพือศึกษาวิธการสกัด DNA จากหอมหัวใหญ่และมะเขือเทศ ่ ี 2.เพือศึกษาการแปลงสภาพของโปรตีน ่ สมมติ ฐาน ในหอมหัวใหญ่และมะเขือเทศมี DNA ซึงเป็ น สารทางพันธุกรรม ทีสามารถสกัด ่ ่ ออกมาได้ ตัวแปรต้น หอมหัวใหญ่ , มะเขือเทศ ตัวแปรตาม สายทางพันธุกรรม DNA
- 2. 2 ตัวแปรควบคุม ปริ มาณสารสกัด DNA ปริ มาณของหอมหัวใหญ่ , มะเขือเทศ ปริ มาณ Alcohol 95 % ,เวลาที่ใช้ในการปัน ่ บทนา DNA หรือ Deoxyribonucleic acid เป็ นสารพันธุกรรมทีโดยทัวไป จะพบอยูในนิวเคลียส ่ ่ ่ ของสิงมีชวต นอกจากนี้ยงพบได้ในไมโทคอนเดรียด้วย DNA ไม่สามารถมองเห็นได้ดวยตา ่ ีิ ั ้ เปล่า แต่สามารถศึกษาได้จากการมองผ่านกล้องจุลทรรศน์ หรือการสกัดออกมาโดยใช้เทคนิค ชันสูง (ซึงมีความยุงยากซับซ้อนในขันตอนการทดลอง) แต่การทดลองนี้จะแสดงให้เห็นถึง ้ ่ ่ ้ วิธการง่ายๆ ทีจะสกัด DNA ออกมา โดยใช้สารต่างๆ ทีมอยูในห้องปฏิบตการในมหาวิทยาลัย ี ่ ่ ี ่ ั ิ หรือโรงเรียน อุปกรณ์ 1.หัวหอม 6 หัว มะเขือเทศ 6 หัว 2.น้ ายาล้างจาน 1 ขวด(เล็ก) 3. NaCl 50 g 4.แอลกอฮอร์ 95% (แช่ในตูเย็นช่องแช่เย็นจัด ทิงไว้ขามคืน) ้ ้ ้ 5.บีกเกอร์ 250 ml 12 อัน หลอดทดลอง 12 อัน 6.กระดาษกรองหรือกระชอนกรองกาก (หรือผ้าพันแผลทบหลายชัน) ้ 7. กรวยกรอง,แท่งแก้ว,มีดปอกผลไม้,ถุงมือพลาสติก ั่ 8.เครื่องปนน้ าผลไม้ วิ ธีการทดลอง 1. ปอกหัวหอม 1 หัว ล้างให้สะอาด และหันให้เป็นชินเล็กๆ ใส่ไว้ในบีกเกอร์ ่ ้ 2. เจือจางน้ ายาล้างจาน เข้มข้น10% โดยเติมน้ ายาล้างจาน 10 มิลลิลตร ลงในน้ ากลัน ิ ่ 90 มิลลิลตร ิ
- 3. 3 3. เทน้ ายาล้างจานเจือจาง 10 mlและNaCl 3 กรัม ลงในบีกเกอร์ทใส่ชนหัวหอม ่ี ้ิ ั่ ั่ 4. เทส่วนผสมทังหมด ลงในเครื่องปนน้ าผลไม้ และปนด้วยความเร็วสูงสุดประมาณ ้ 15 วินาที ั่ 5. เทหัวหอมปนลงในบีกเกอร์ใบเดิม 6. กรองเอากากออกด้วยกระชอน หรือใช้ผาพันแผลทบหลายชันวางในกรวยพลาสติกใบ ้ ้ ใหม่ กระดาษกรอง 7. เทน้ าหัวหอมลงในหลอดทดลองประมาณ 10 มิลลิลตร ิ 8. ค่อยๆ เทแอลกอฮอร์ 95% แช่เย็นจัด ประมาณ 10 มิลลิลตร ลงตามข้างหลอด ให้ ิ สังเกตเห็นการแยกชันของของเหลว โดยน้ าหัวหอมจะอยูดานล่างและแอลกอฮอร์อยู่ ้ ่ ้ ด้านบน (การเทแอลกอฮอร์อย่างแรงจะทาให้ไม่เกิดการแยกชัน) ้ 9. ถือหลอดทดลองไว้นิ่งๆ (ห้ามเขย่า) จะเริ่ มเห็นสายดีเอ็นเอปรากฏขึนในชันของ ้ ้ แอลกอฮอล์ที่อยู่ด้านบน 10. ใช้แท่งแก้วด้านปลายแบน หรือไม้แหลมค่อยๆ จุมลงไปเหนือรอยต่อของสารละลาย ่ ทัง 2 ชัน หมุนแท่งแก้วอย่างช้าๆ เพือเก็บ DNA ทีมลกษณะเป็ นเมือกเหนียวให้ตด ้ ้ ่ ่ ีั ิ ขึนมากับแท่งแก้ว ้ 11. ทาซาข้อ 1 - 10 แต่เปลี่ยนหอมหัวใหญ่เป็ นมะเขือเทศ ้ ผลการทดลอง พืชที่ใช้สกัด ลักษณะของ DNA ที่สงเกตเห็น ั หอมหัวใหญ่ มะเขือเทศ
- 4.
- 5. 5 คาถามหลังการทดลอง 1. ทาไมการทดลองครังนี้ตองมีน้ ายาล้างจานและNaClแล้วปน ้ ้ ั่ ............................................................................................................................................... ............................................................................................................................................... ............................................................................................................................................... 2. ทาไมการทดลองครังนี้ตองเติม Alcohol 95 % ้ ้ ............................................................................................................................................... ............................................................................................................................................... ............................................................................................................................................... 3. ในการทดลองครังนี้อะไรทีทาให้โปรตีนเกิดการแปรสภาพทางธรรมชาติ ้ ่ .............................................................................................................................................. 4. นอกจากข้อ 3 มีอะไรอีกบ้างทีทาให้โปรตีนเกิดการแปรสภาพทางธรรมชาติ ่ .............................................................................................................................................. ............................................................................................................................................... ............................................................................................................................................... ............................................................................................................................................... ............................................................................................................................................... ............................................................................................................................................... ............................................................................................................................................... 5. นักศึกษาคิดว่าการทดลองครังนี้มประโยชน์ อย่างไรต่ออนาคตของนักศึกษาบ้าง ้ ี ............................................................................................................................................... ............................................................................................................................................... ............................................................................................................................................... ............................................................................................................................................... ............................................................................................................................................... .............................................................................................................................................
- 6.