1. РЕСПУБЛИКА КАЗАХСТАН
(19) KZ (13) A4 (11) 29747
(51) C12N 1/16 (2006.01)
МИНИСТЕРСТВО ЮСТИЦИИ РЕСПУБЛИКИ КАЗАХСТАН
ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ
К ИННОВАЦИОННОМУ ПАТЕНТУ
(21) 2014/0309.1
(22) 14.03.2014
(45) 15.04.2015, бюл. №4
(72) Тен Олег Андреевич; Балпанов Дархан
Серикович; Парамонова Ирина Евгеньевна
(73) Товарищество с ограниченной
ответственностью "Научно-аналитический центр
"Биомедпрепарат"
(56) RU 2370529 C1, 2009
(54) ШТАММ ДРОЖЖЕЙ METSCHNIKOWIA
PULCHERRIMA CД-ПРОДУЦЕНТ
КОРМОВОГО БЕЛКА
(57) Изобретение относится к биотехнологии и
может быть использовано для получения микробной
биомассы.
Штамм Metschnikowia pulcherrima СД выделен в
естественных условиях из стеблей сахарного сорго.
Штамм выращивается на питательной среде из сока
сахарного сорго и характеризуется высоким
выходом биомассы. Выход сухой биомассы
составляет 18,6 - 20,5 г/л, содержание условного
белка в ней - 51,7%, а количество истинного белка -
31,6%. Штамм депонирован в коллекции ТОО
«Казахский НИИ перерабатывающей и пищевой
промышленности» г.Алматы под номером В-484.
(19)KZ(13)A4(11)29747

2. 29747
2
Изобретение относится к биотехнологии,
сельскому хозяйству и может быть использовано
для промышленного получения биомассы дрожжей
Известны дрожжи Saccharomices cerevisiae расы
У-1986 - [Патент RU №2183666, C12F 3/10, опубл.
2002г]. Дрожжи данной расы используют для
сбраживания зернового сусла в спиртовом
производстве. Их функцией является переработка
сахаров сусла в спирт. Кормовой продукт при этом
не является целевым продуктом, его утилитарное
назначение не определено. Он является отходом
спиртового производства, загрязняющим
окружающую среду.
Известен штамм дрожжей Candida tropicalis ВСБ-
928К - продуцент кормового белка [Патент RU
№2042713, С12Р 1/100, опубл. 20.06.2002г.].
Недостатком данного известного штамма является
использование для получения кормового белка
дрожжей рода Candida, которые являются условно
патогенным микроорганизмом, что требует
выполнения дополнительного процесса термолиза и
наличия специального оборудования, сложной
системы обезвреживания стоков и воздушных
выбросов при значительных объемах используемого
воздуха. Санитарно-эпидемиологическими
правилами СанПиН 2.3.2.1078-01 дрожжи рода
Candida включены в перечень веществ, которые
оказывают вредное воздействие на здоровье
человека.
Известны штаммы грибов, применяемые для
получения кормового и пищевого белка. Так, описан
штамм продуцент белка Fusarium graminearum
[Патент RU №2177699, A23L 1/29, A23L 1/30, A23L
1/054, опубл. 10.01.2002], позволяющий получать
при глубинном культивировании на сложных
синтетических средах белковую массу с общим
содержанием азота до 7%. Недостатком данного
штамма является невысокое содержание белка в
биомассе и необходимость использования для его
выращивания многокомпонентных синтетических
сред.
Известен штамм продуцент белка Flammulina
velutipes НБК F-112, который выращивают как в
глубинной, так и в поверхностной культуре.
Получаемая биомасса может быть использована как
полноценная по белку кормовая добавка [А. с. СССР
№727687, кл. С12N 1/14, 1977, Федоров Н.Е.,
Неустроева Л.М., Паромчик И.И. Рост мицелия
зимнего гриба на средах с безбелковым
концентратом картофельного сока. Лесоведение и
лесное хозяйство, 1982, вып. 17, с.100-103]. Однако
недостатком штамма является использование для
его выращивания минеральных сред с высоким
содержанием глюкозы, а также отходов пищевой
промышленности, которые сами по себе являются
кормовыми добавками.
Наиболее близким по технической сущности и
достигаемому результату является штамм дрожжей
Metschnikowia pulcherrima ВКПМ - Y-3147
(прототип), выделенный в естественных условиях с
поверхности айвы. Штамм выращивается на
питательной среде из зеленой массы горца
сахалинского. Выход биомассы составляет 12-
18,5 г/л [Патент RU №2370529, C12N 1/16, опубл.
20.10.2009].
Задачей изобретения является получение нового
штамма, более продуктивного по белку, способного
расти на более широком спектре относительно
дешевых и простых по составу питательных сред.
Предлагаемый штамм Metschnikowia pulcherrima
СД выделен в естественных условиях из стеблей
сахарного сорго и депонирован в коллекции ТОО
«Казахский НИИ перерабатывающей и пищевой
промышленности» г. Алматы под номером В-484.
Штамм идентифицирован по методике И.П.
Бабьевой и В.И. Голубева (1979) и методом
определения прямой нуклеотидной
последовательности ITS региона (межгенного
транскрибируемого региона), с последующим
определением нуклеотидной идентичности с
последовательностями, депонированными в
международной базе данных Gene Bank.
Штамм хранится при температуре 4-6°С в
дистиллированной воде, физиологическом растворе,
6%-ном растворе желатина и при температуре
(12±1)°С и в 20%-ном растворе глицерина.
Культурально-морфологические и
биохимические свойства.
При росте на плотной среде сусло-агар штамм
образует круглые колонии розового цвета,
приподнятые, гладкие, с ровным краем, плотной
густой консистенции. Культура образует красный
пигмент пульхерримин, который диффундирует в
среду (фиг.1).
Фиг.1 - Колонии штамма Metschnikowia
pulcherrima шт. СД при культивировании на сусло-
агаре.
Клетки круглые, овальные или эллипсовидные
размером 6-15×5-14 мкм. Псевдомицелий
отсутствует. Аски булавовидные, аскоспоры
игловидные, заостренные с двух концов, 1-2 в сумке
(фиг.2).
Фиг.2 - Клетки культуры Metschnikowia
pulcherrima шт. СД (препарат «раздавленная капля»,
увеличение в 2050 раз).
Дрожжи способны сбраживать сахара: глюкозу,
сахарозу, галактозу, фруктозу, а также их
ассимилировать. Кроме того, штамм способен к
гидролизу мочевины, разжижению желатины.
Продуктивность штамма изучали на глюкозо-
аммонийной среде и на среде из сока сахарного
сорго.
Для засева питательных сред используют
посевной материал (10% от объема питательной
среды в колбе), полученный при культивировании
штаммов на глюкозо-аммонийной питательной
среде. Посевной материал выращивают в колбах
Эрленмейера вместимостью 250 мл (объем среды
50 мл) иа термостатируемой качалке с числом
оборотов 260 мин-1
при температуре (29±1)°С в
течение 20-24 ч.
Культивирование дрожжей Metschnikowia
pulcherrima шт. СД осуществляют в колбах
Эрленмейера вместимостью 750 мл (объем среды
100 мл) на термостатируемой качалке с числом

3. 29747
3
оборотов 260 мин-1
при температуре (29±1)°С в
течение 72 ч.
Пример 1.
Глюкозо - аммонийная среда (pH-5,0±0,1)
содержит, г/л:
Глюкоза - 10,0
Аммоний сернокислый - 5,0
Калий фосфорнокислый однозамещенный - 10,0
Магний сернокислый -1,5
Биотин - 0,01
Кальций хлористый - 0,05
Калий хлористый - 0,15
Дрожжевой автолизат - 10,0 мл/л
Вода водопроводная - до 1 л.
Выход биомассы штамма Metschnikowia
pulcherrima CD составляет - 18,6 г/л.
Пример 2.
Питательная среда на основе сока сахарного
сорго, pH-(5,0±0,1) содержит:
Сок сахарного сорго -3% по РВ
Вода водопроводная - до 1 л.
Выход сухой биомассы штамма Metschnikowia
pulcherrima CD составляет - 20,5 г/л.
Содержание условного белка в биомассе
дрожжей составило 51,7%, а количество истинного
белка - 31,6%.
Как видно из приведенных данных,
предлагаемый новый штамм дрожжей
Metschnikowia pulcherrima CD, найденный в
естественных условиях и выделенный из стеблей
сахарного сорго, хорошо приспособлен к местным
условиям среды, прост в культивировании, может
использовать в качестве питательной среды
доступное дешевое питательное сырье - сок
сахарного сорго и обладает высокой
продуктивностью.
ФОРМУЛА ИЗОБРЕТЕНИЯ
Штамм дрожжей Metschnikowia pulcherrima СД,
депонирован в коллекции ТОО «Казахский НИИ
перерабатывающей и пищевой промышленности»,
под номером В-484, используемый для получения
микробной биомассы.
Верстка Ж. Жомартбек
Корректор К. Сакалова