1. 以反轉遺傳學質體系統備置對克流感具
抗藥性之流感病毒並與流感病毒比較對
細胞及小鼠的影響
長榮大學生物科技系
實習單位：中央研究院 基因體研究中心
指導老師：詹家琮老師
Abstract 實習學生：許郁聆
流感病毒屬於正黏液病毒科，它會造成急性上呼吸道感染， Results
藉由空氣傳播，產生世界大流行。了解流感病毒對於人類影 (圖一) (圖一)
響，對於人類在對抗流感病毒時有很大的貢獻。
藉由測試病毒TCID-50來觀察病毒對細胞影響。給於老鼠流 給予流感病毒感染細胞
感病毒和突變的流感病毒分別餵食RO水和克流感藥物對老鼠 三天後在顯微鏡底下觀
存活和老鼠lung中病毒TCID-50進行實驗，我們可以知道兩 察細胞情形，觀察出感
種病毒毒性的能力和藥物對病毒所造成的影響。 染突變病毒珠有CPE行
藉由流感細胞的克流感藥物位於細胞進行實驗，使藥物對
成，而感染wild type病
病毒影響不像動物實驗複雜，可以了解突變病毒是否對於藥
物具有抗藥性，使突變病毒不會受到克流感藥物影響。
毒珠明顯觀察細胞聚縮、
漂浮死亡。
control 感染突變病毒珠 感染 wild type病毒珠
Aim
現在許多研究都已經知道流感病毒是一種突變程度非常高
(圖二)
的病毒，每年都會季節性大流行，我想探討藉由Reverse
Genetics Plasmids system來製備對克流感具抗藥性之流 (圖二)
感病毒並比較其對細胞及小鼠之毒力影響，進行觀察突變
數據為取分別24 hour、48
病毒的影響能力，觀察對細胞和小鼠影響。希望對突變流
感病毒研究可以引發人類流感之潛藏能力探究有所貢獻。 hour、72hou測試老鼠lung中
病毒量之變化情形，可以看見
process WSN/RO病毒量明顯上升許多，
而WSN/克流感藥物很明顯下降
到不會危害生物體聲明安全的
情形，表示克流感藥物對於流
感病毒抑制性是肯定的，而突
變病毒珠(H274Y病毒珠)給予
水和克流感藥物病毒量，。
(圖四)
(圖三)
以反轉遺傳學系統被置對克流感具抗藥性病毒
測試wild type virus
和mutation virus的
TCID-50
(圖三) (圖四)
尚未給予病毒。老鼠毛色平順、 給予流感病毒。老鼠約在四天
光滑，食慾加且活潑好動。 後老鼠會開始逐漸死亡，毛色
粗糙，體溫下降變得異常冰冷，
給予細胞流感病毒 給予小鼠流感病 且食慾降低，不好動。
珠(H1N1)和突變流 毒(H1N1)和突變 discussion
感病毒珠(H274Y) 流感病毒(H274Y)
以反轉遺傳學系統做出突變病毒珠進行測試wild type virus和
mutation virus TCID-50(病毒效價)測試，觀察對於細胞影響情形，觀
察出細胞產生CPE，細胞漂浮，死亡。
給予不同濃度之克流感藥 分別餵食RO水和克流 之後進行老鼠實驗實驗，再分別餵食RO水和克流感藥物觀察出wild
物，觀察不同病毒和不同 感藥物，觀察小鼠 type virus和mutation virus 兩種病毒珠的在餵食不同物質情況下
藥物濃度情況下，細胞存 lung病毒量，和小鼠 lungu影響，明顯觀察克流感藥物確實對wild type virus具有抑制的效
活情形。 存活情形
果，而mutation virus餵食克流感藥物病毒量比餵水病毒量低，推測雖
然mutation virus雖然具抗藥性，但藥物或多或少還是有影響此病毒特
性存在。
在測試mutation virus抗藥性質後，在未來可以對篩選對於抗藥流感病
毒的藥物，在未來可以對於社會有更多造福的機會。
誌謝
首先感謝系上的安排和昭菱老師的推薦，讓我有這個難得機會到校外學習、進行研究。也很感謝 中研研究院 基因體研究中心 詹家琮老師給
我這機會去學習，讓我更加學習運用掌管時間，來安排實驗的進行，也很感謝秀華學姊、富元學長和妍伶學姊教導，讓我對實驗知識更加專
業也讓我實驗技術更加熟練、也非常感謝實驗室整理環境的阿姨，讓我們有更好的環境順利進行實驗