Enzim amilase bekerja pada pH optimum 6-7. Pada pH di luar kisaran tersebut, aktivitas enzim menurun akibat proses denaturasi. Uji aktivitas enzim amilase pada berbagai pH menunjukkan aktivitas tertinggi pada pH 7.

1. DEPARTMENT OF PHARMACY
UNIVERSITY OF MUHAMMADIYAH MALANG
2016
PENGARUH pH PADA
REAKSI ENZIMATIK

2. Dasar Teori
Enzim
Enzim adalah sekelompok protein yang berperan sebagai pengkatalis dalam reaksi-
reaksi biologis. Enzim akan mampu mengkatalis suatu reaksi biologis bila berada
dalam kondisi nyamannya, misalnya pH. (Poedjiadi, 2006).
Salah satu enzim yang bereperan penting dalam tubuh adalah enzim amilase.
Enzim amilase berfungsi dalam proses pencernaan makanan khususnya ketika
berada di dalam mulut. Enzim amilase berfungsi untuk memecah molekul
karbohidat menjadi senyawa yang lebih sederhana sehingga memudahkan untuk
proses pencernaan berikutnya. Enzim amilase dapat bekerja maksimal pada suhu,
pH, serta konsentrasi yang optimum (Iman, 2005).
Pada umumnya enzim tidak kuat bila berada dalam lingkungan yang terlalu asam
atau terlalu basa. Namun pada beberapa enzim justru bekeja optimum pada pH
yang sangat asam, seperti enzim-enzim dalam lambung. Enzim amilase pada
rongga mulut bekerja maksimum pada pH 6-7 (Iman, 2005).

3. Prosedur Praktikum
 Bejana Erlenmeyer
 stopwatch
 Pipet volumetric
 Pipet tetes
 Tabung reaksi
 Gelas beaker
Alat
 Larutan enzim “E”
 Larutan NaCl 0,9%
 Larutan HCL 0,005N
 Larutan substrat
(Amylum solani 2%)
 Larutan dapar pH 4,0;
6,0; 7,0 dan 8,0
 Larutan KI-I2
Bahan

4. Gambar skema
. Isi erlenmeyer
15 ml larutan penyangga pH
tertentu
6 ml larutan NaCl 0.9%
10 ml larutan substrat
Digoyangkan memutar bbrp
waktu
Dilakukan pada suhu kamar
1
. Isi tabung reaksi 1 s/d
masing-masing 10 ml HCl 0,05
N
2
4 . Masukkan 1 ml larutan enzim pada
erlenmeyer dan catat waktunya
. Masukkan 1 ml dari
erlenmeyer ke tabung 2 dst tiap 5
menit
5
1 2 3 4 5
0’ 5’ 10’ 15’ 20’
3 . 1 ml
6 .1 ml larutan KI-I2  campur  ad 5’  620 nm

5. Data Hasil Praktikum
Menit Ke- pH 4,0 pH 6,0 pH 7,0 pH 8,0
0’ 1,3037 0,5792 0,6570 0,7738
5’ 1,1605 0,5703 -0,0040 0,6171
10’ 0,7020 0,5697 0,1180 0,7346
15’ 0,6189 0,5331 0,1070 0,6047
20’ 0,6128 0,5245 0,0970 0,7474
Data hasil praktikum minggu
pertama (preparasi 1)

6. Menit Ke- pH 4,0 pH 6,0 pH 7,0 pH 8,0
0’ 0% 0% 0% 0%
5’ 10,98% 1,54% 100,61% 20,25%
10’ 46,15% 1,64% 82,04% 5,07%
15’ 52,53% 7,96% 83,71% 21,85%
20’ 53,00% 9,44% 85,24% 3,41%
Jumlah substrat yang tercerna (%)

7. Menit Ke- pH 4,0 pH 6,0 pH 7,0 pH 8,0
0’ 0,3843 0,4491 0,5161 0,2411
5’ 0,3273 0,0385 0,3491 0,0055
10’ 0,3882 0,0371 0,3378 0,0045
15’ 0,3865 0,0342 0,2460 0,0176
20’ 0,3678 0,0352 0,2941 0,0026
Data hasil praktikum minggu kedua (preparasi 2)

8. Menit Ke- pH 4,0 pH 6,0 pH 7,0 pH 8,0
0’ 0% 0% 0% 0%
5’ 14,83% 91,43% 32,36% 97,72%
10’ -1,01% 91,74% 34,55% 98,13%
15’ -0,57% 92,38% 52,33% 92,70%
20’ 4,29% 92,16% 43,01% 98,92%
Jumlah substrat yang tercerna (%)

9. Progress Curve Substrat yang Tercerna
0%
10.98%
46.15%
52.53%
53%
0%
14.83%
-1.01%
0.57%
4.29%
0%
10%
20%
30%
40%
50%
60%
70%
0' 5' 10' 15' 20'
JUMLAHSUBSTRATYANGTERCERNA(%)
MENIT KE-
PROGRESS CURVE PH 4,0
kelompok 1 kelompok 5

10. 0%
1.54%
1.64%
7.96%
9.44%
0%
91.43% 91.74%
92.38% 92.16%
0%
20%
40%
60%
80%
100%
120%
0' 5' 10' 15' 20'
JUMLAHSUBSTRATYANGTERCERNA(%)
MENIT KE-
PROGRESS CURVEPH 6,0
kelompok 2 kelompok 6

11. 0% 0
82.04%
83.71%
85.24%
0%
32.26%
34.55%
2.33%
43.01%
0%
20%
40%
60%
80%
100%
120%
140%
0' 5' 10' 15' 20'
JUMLAHSUBSTRATYANGTERCERNA(%)
MENIT KE-
PROGRESS CURVE PH 7,0
KELOMPOK 3 KELOMPOK 7

12. 0%
20.25%
5.07%
21.85%
00%
97.72%
98.13%
92.70%
98.92%
0%
20%
40%
60%
80%
100%
120%
140%
0' 5' 10' 15' 20'
JUMLAHSUBSTRATYANGTERCERNA(%)
MENIT KE-
PROGRESS CURVE PH 8,0
KELOMPOK 4 KELOMPOK 8

13. 0%
97.72%
98.13%
92.70%
98.92%
0%
32.36% 34.55% 52.33%
43.01%
0%
91.43%
91.74%
92.38%
92.16%
0%
14.83%
-1.01% -0.57% 4.29%
0%
20.25%
5.07%
21.85%
3.41%
0%
0
82.04% 83.71% 85.24%
0%
1.54%
1.64%
7.96%
9.44%
0%
10.98%
46.15%
52.53%
53.00%
0%
50%
100%
150%
200%
250%
300%
350%
400%
450%
0' 5' 10' 15' 20'
JUMLAHSUBSTRATYANGTERCERNA(%)
MENIT KE-
PROGRESS CURVE PH SEMUA KELOMPOK
kelompok 8 kelompok 7 kelompok 6 kelompok 5 kelompok 4 kelompok 3 kelompok 2 kelompok 1

14. Pembahasan
Pada masing-masing tabung dengan interval waktu 0’, 5’, 10’, 15’ dan 20’ saat uji ukur
absorbasinya dengan menggunakan Spektormeter didapatkan hasil hasil yang berbeda-
beda pada setiap pH. Pada praktikum minggu pertama didapatkan hasil persentase substrat
yang dicerna yang paling besar adalah pada pH 7, yaitu mencapai 100%.
Namun pada pH 4,0 hasil persentase substrat yang dicerna lebih besar dari pH 6,0 yang
dimana seharusnya pH 6,0 lebih besar dari pada pH 4,0 karena menurut (Iman, 2005)
Enzim amilase pada rongga mulut bekerja maksimum pada pH 6-7. Begitupula dengan
pH 8,0 menunjukkan nilai substrat yang dicerna mengalami penurunan dikarenakan pH
yang mulai basa makan enzim mengalami penurunan aktivitas.
Menurut Williamson dan Fieser Sebenarnya enzim juga memiliki pH optimum tertentu,
pada umumnya sekitar 4.5 – 8 dan pada kisaran pH tersebut enzim mempunyai
kestabilan yang tinggi, namun disini enzim yang digunakan adalah amilase dan menurut
Iman, enzim amilase bekerja optimum pada pH 6-7. Kesalahan disini dapat disebebkan
karena tidak ketelitian para praktikan dalam praparasi atau pada pengenceran enzim
yang terlau banyak.

15. Kesimpulan
Enzim memiliki
aktivitas maksimal
pada pH optimumnya
(pH optimum enzim
amilase saliva adalah
pH 6-7).
Pada pH yang terlalu
asam atau basa enzim
akan mengalami
denaturasi
Enzim amilase
bekerja pada pH 6-7

16. pH 7,0
pH 8,0
pH 4,0
pH 6,0

17. THANK YOU