Dokumen tersebut memberikan informasi tentang berbagai metode pewarnaan jamur dan khamir serta cara isolasi jamur dan khamir dari berbagai sumber seperti bahan pangan, biji-bijian, tumbuhan, cairan, dan udara."

1. MIKOLOGI
Kelompok V
1. Heru Cahyono ( A103.06.014 )
2. Ida Nurshanti ( A103.06.015 )
3. Ika Artiyastuti ( A103.06.016 )

2. Pewarnaan Jamur
dan Reagent
Isolasi Jamur

3. MACAM – MACAM PEWARNAAN
1. Pewarnaan KOH
2. Pewarnaan Lacto Phenol Cotton Blue
3. Pewarnaan Haematoxylin - Eosin
4. Pewarnaan Periodic Acid Schiff
5. Pewarnaan Gomori Methenamine Silver ( GMS )
6. Pewarnaan GMS - HE

4. 1. Pewarnaan KOH
 Reagent yang digunakan
1. KOH 10 %
2. Tinta Parker ( warna blue – black )
 Cara Kerja
1. 1 tetes KOH 10 % diatas object glass
2. Ambil sampel,campur dengan KOH 10 %
3. Tambahkan 1 tetes tinta Parker
4. Tutup dengan deck glass
5. Panaskan beberapa saat diatas nyala api
6. Sediaan siap diperiksa dibawah mikroskop

5. 2. Pewarnaan Lacto Phenol Cotton Blue (
LCB )
 Reagent
1. Phenol ( 20 gram )
2. Lactic acid ( 20 ml )
3. Glycerol ( 40 gram )
4. Cotton blue ( 0,05 gram )
 Cara Kerja
1. Ambil cat LCB diatas object glass
2. Tambahkan sampel,campur
3. Tutup dengan deck glass
4. Periksa dibawah mikroskop

6. 3. Pewarnaan Haematoxylin & Eosin
 Reagent
1. Aquadest
2. Gill”s Haematoxylin
3. Ammonia Water
4. Alkohol 70 %
5. Alkoholik Eosin 1 %

7. 4. Pewarnaan Periodic Acid Schiff
 Reagent
1. Reagent schiff
2. Ammonia water
3. Gill’s haematoxylin
4. Larutan periodic acid 1 %

8. 5. Pewarnaan Gomori
Methenamine Silver ( GMS )
 Reagent
1. Aquadest
2. Chromic acid 5 %
3. Sodium bisulfite 1 %
4. Gold Chloride 0,1 %
5. Sodium thiosulfate 2 %
6. Light green
7. Aquabidest

9. 6. Pewarnaan Gomori Methenamine Silver –
Haematoxylin & Eosin ( GMS – H & E )
 Reagent
1. Aquadest
2. Chromic acid 5 %
3. Sodium bisulfite 1 %
4. Gold chlorida 0,1 %
5. Sodium thiosulfat 2 %
6. Aquabidest
7. Gill’s haematoxylin
8. Ammonia water
9. Alkohol 70 %
10. Alkoholik eosin 1 %

10. ISOLASI
 Isolasi Jamur
1. Isolasi dari bahan pangan padat
2. Isolasi fungi dari biji – bijian
3. Isolasi fungi endofit
4. Isolasi kapang dari substrat cair
5. Isolasi kapang dari udara
 Isolasi Khamir
1. Isolasi dan pemurnian khamir dari buah
2. Isolasi dan pemurnian khamir dari bunga
3. Isolasi dan pemurnian khamir dari air

11. ISOLASI JAMUR

12. 1. Cara isolasi umum kapang dari
bahan pangan padat
Langkah – langkah :
1. Makanan yang berjamur diambil ± 5 gram
dihaluskan,masukkan pada erlenmeyer / tabung
reaksi
2. Tambahkan larutan garam fisiologi 0,8% /
aquadest steril
3. Lakukan penanaman pada media yang sesuai
dengan metode gores
4. Inkubasi pada 28 – 30 ºC selama 2 – 3 hari
5. Ambil 1 koloni untuk dimurnikan

13. 2. Isolasi fungi dari biji - bijian
1. Biji dicuci dengan air keran,alkohol 70 % ( 2
menit ),air aquadest kemudian keringkan
2. Letakkan biji pada median,inkubasi pada suhu 28
– 30 ºC selama 2 – 4 hari ( sudah berjamur )
3. Ambil biji yang sudah berjamur masukkan pada
erlenmeyer yang berisi aquadest steril,kocok
selama 1 menit
4. Kemudian tanam pada media yang sesuai dengan
metode gores atau dengan meneteskan 1 tetes
diatas media
5. Inkubasi 1 – 2 hari pada suhu 28 – 30 ºC
6. Ambil 1 koloni untuk dimurnikan

14. 3. Isolasi fungi endofit
1. Potong bagian tumbuhan < 1 cm,cuci dengan air
mengalir ( 10 mnt ),rendam pada alkohol 75 % ( 2
menit ),keringkan
2. Kemudian potong tipis dan letakkan diatas
permukaan media yang sesuai kemudian diinkubasi
3. Potongan yang sudah berjamur masukkan pada
erlenmeyer berisi aquadest steril,kocok dan
tanam dengan metode gores
4. Inkubasi 2 – 7 hari
5. Ambil 1 koloni untuk dimurnikan

15. 4. Isolasi kapang dari substrat cair
Sampel yang berupa cairan ( sirup,air
laut,saliva,cairan vagina ) dapat
langsung ditanam pada media yang
sesuai.Inkubasi pada suhu yang sesuai.

16. 5. Isolasi kapang dari udara
1. Media yang sesuai dibiarkan tanpa
tutup selama 15 – 20 menit ditempat
fungi akan diperiksa
2. Tutup dan inkubasi pada suhu yang
sesuai
3. Ambil 1 koloni untuk dimurnikan

17. ISOLASI KHAMIR

18. 1. Isolasi dan pemurnian khamir
dari buah
1. Usapkan jarum ohse pada permukaan /
daging buah kemudian goreskan pada
media YMA
2. Inkubasi pada suhu yang sesuai

19. 2. Isolasi dan pemurnian khamir
dan bunga
1. Ambil pada bagian madu bunga dengan
jarum ohse kemudian goreskan pada
media YMA
2. Inkubasi pada suhu yang sesuai

20. 3. Isolasi dan pemurnian khamir
dari air
1. Sampel air disaring dengan filter
membran Milipor berpori 0,45 mm
2. Kemudian filter membran diletakkan
pada media YMA dan inkubasi pada
suhu yang sesuai
3. Jika sampel berasal dari air laut maka
pada media YMA ditambahkan NaCl 1,5
–4%

21. TERIMA
KASIH