4. Documenting sample
collection
Nomor Identifikasi
Nomor laboratorium
Nama pasien
Usia
Provinsi (wilayah)
Kode Negara
Tanggal vaksinasi campak dan/atau rubella terakhir
Apakah pasien sesuai dengan kasus?
Jenis spesimen
Tanggal pengambilan spesimen
Spesimen tanggal dikirim ke laboratorium
Semua sampel yang dikumpulkan untuk analisis harus dijelaskan
secara tertulis, idealnya menggunakan formulir permintaan
laboratorium standar. Informasi dasar yang wajib disertakan
dalam formulir permintaan laboratorium yang dapat diterima
mencakup:
1.
2.
3.
4.
5.
6.
7.
8.
9.
10.
11.
7. Serological samples for antibody
detection
Memerlukan sampel non-invasif
Hanya memerlukan satu sampel saja
Dapat menggunakan sampel yang dikumpulkan pada kontak pertama
dengan pasien
Sangat sensitif dan spesifik
Memiliki nilai prediksi positif yang tinggi
Mudah dilakukan dan memberikan hasil yang cepat dan akurat
Untuk mendiagnosis penyakit campak dan rubella tes yang ideal untuk
digunakan yaitu tes yang sesuai dengan kriteria sebagai berikut:
1.
2.
3.
4.
5.
6.
8. Tes yang direkomendasikan oleh WHO untuk tes
laboratorium campak dan rubella adalah tes ELISA
untuk mendeteksi antibodi IgM spesifik virus. Tes ELISA
tersedia secara komersial dan hasilnya menunjukkan
hasil korelasi yang sangat baik untuk mendeteksi
peningkatan IgG sebanyak 4 kali lipat. Laboratorium
disarankan untuk melaporkan hasil tes IgM dari kasus
rutin dalam waktu 7 hari setelah sampel diterima.
Rekomendasi Tes Dari WHO?
9. Tes ELISA IgM untuk campak dan rubella lebih sensitif antara hari ke 4-28
setelah timbulnya ruam. Sampel serum pertama dapat diambil kapan saja
dalam 28 hari setelah onset ruam. Namun, dalam 72 jam pertama setelah
ruam muncul, tes IgM campak dapat memberikan hasil negatif palsu hingga
30%, dan tes IgM rubella dapat memberikan hasil negatif palsu hingga 50%.
Dalam wabah dengan banyak sampel, diagnosis individu tidak penting,
tetapi dalam kasus sporadis, sampel serum kedua mungkin diperlukan saat
keadaan:
Waktu Pengambilan Sampel darah
untuk Campak dan Rubella
10. Sampel darah pertama diserahkan untuk pemeriksaan
IgM yang dikumpulkan dalam waktu 4 hari setelah
munculnya ruam dan hasil tes ELISA menunjukan hasil
negatif.
01
02 Hasil tes IgM ELISA tidak pasti atau samar-samar
03
Dokter perlu pemeriksaan ulang untuk diagnosis pasti
pada pasien yang hasil tes awalnya negatif
Sampel serum kedua untuk pengujian IgM dapat diambil dalam rentang waktu
4-28 hari setelah setelah munculnya ruam. Pengambilan sampel kedua 10-20
hari setelah yang pertama akan memungkinkan saat uji lab tidak hanya untuk
menguji IgM saja, tetapi juga menguji peningkatan level antibodi IgG.
11. Darah dikumpulkan dengan venipuncture dalam tabung steril (5 ml untuk anak
yang lebih besar, 1 ml untuk orang dewasa dan untuk bayi dan anak kecil harus
memadai)
Jika memungkinkan dapat dilakukan dengan tusukan jari atau tumit ke kertas
saring dan diberi label dengan milik pasien identifikasi dan tanggal
pengumpulan
Darah utuh disimpan pada suhu 4-8oC hingga 24 jam sebelum serum
dipisahkan, tetapi tidak boleh dibekukan
Darah utuh harus dibiarkan menggumpal dan kemudian disentrifugasi pada
1000 x g untuk 10 menit untuk memisahkan serum
Prosedur Pengumpulan dan
Penanganan Serum atau darah
kering
12. Jika tidak ada alat sentrifugasi, darah harus disimpan dalam lemari es sampai bekuan
darah benar-benar tercabut dari serum (tidak lebih dari 24 jam)
Serum harus dikeluarkan dengan hati-hati menggunakan pipet halus untuk menghindari
pengambilan sel darah merah
Dipindahkan secara aseptik ke dalam botol berlabel steril dengan nama atau identitas
pasien, tanggal pengumpulan dan jenis spesimen
Darah kering harus dibiarkan kering dan kemudian disegel dalam kantong plastik atau
amplop yang dapat ditutup rapat, jika memungkinkan dengan bahan pengering
Meskipun sampel darah kering stabil pada suhu kamar untuk jangka waktu terbatas, sampel
tersebut harus disimmpan pada suhu 4oC, jika memungkinkan hingga dapat dikirim ke
laboratorium
Prosedur Pengumpulan dan
Penanganan Serum atau darah
kering
13. Sampel yang telah diterima
untuk analisis IgM diuji
sesegera mungkin setelah di
terima di laboratorium.
Penyimpanan sampel serum
jangka pendek (1-7 hari) darus
pada suhu 4oC dan jangka
panjang harus pada suhu
-20oC
Penyimpanan dan Pengiriman
Sampel ke kertas
Spesimen serum yang telah diberi
label harus ditempatkan dalam
kantong plastik yang bisa disegel.
Sampel kemudian ditempatkan di
tengah dan lebih banyak kantong es
ditempatkan diatasnya. Tanggal
pengiriman diatur antara pengumpul
sampel dan laboratorium. Penerima
harus diberitahu tentang waktu dan
cara transportasi.
Sampel serum harus disimpan pada
suhu 4–8°C selama maksimal 7 hari
sebelum pengiriman. Jika disimpan
lebih lama, sampel serum harus
dibekukan pada suhu -20°C atau
lebih rendah dan diangkut dengan
es beku. Spesimen serum sebaiknya
dikirim ke laboratorium secepat
mungkin tanpa menunda
pengiriman untuk mengumpulkan
lebih banyak spesimen.
1
1 2
2 3
3
15. Idealnya, sampel harus dikumpulkan bersamaan dengan sampel
darah untuk diagnosis serologis dan konfirmasi virus campak atau
rubella sebagai penyebab wabah. Direkomendasikan agar
sampel klinis (swab tenggorokan atau nasofaring, aspirasi hidung
atau 10 hingga 50 ml urin) untuk isolasi virus campak dikumpulkan
sesegera mungkin setelah munculnya ruam. Sampel harus
dikumpulkan pada kontak pertama dengan kasus dugaan campak
ketika sampel serum untuk diagnosis diambil.
Samples for virus isolation
17. Sampel RT-PCR merupakan contoh atau bahan biologis yang diambil
dari seseorang atau sesuatu yang akan dianalisis menggunakan
metode Reverse Transcription Polymerase Chain Reaction (RT-PCR).
Sampel ini dapat berupa berbagai jenis materi biologis, seperti cairan
tubuh, jaringan, atau produk biologi lainnya, yang mengandung materi
genetik (RNA) dari organisme yang ingin dideteksi atau diidentifikasi.
Dalam konteks yang Anda sebutkan sebelumnya, sampel RT-PCR dapat
berupa sampel yang mengandung virus campak dan rubella, yang
dianalisis untuk deteksi dan isolasi virus tersebut.
Samples for RT-PCR
19. Bercak darah kering telah digunakan untuk berbagai studi
epidemiologi sebagai alternatif serum. Antibodi stabil dalam
bentuk bercak darah kering dan karenanya sangat berharga
ketika kurangnya rantai dingin menjadi masalah. Teknik ini
baru-baru ini telah berhasil diterapkan pada kasus campak,
dan ada banyak bukti yang menunjukkan bahwa teknik ini juga
dapat diterapkan pada kasus rubella.
Alternative sampling techniques
(dried blood samples and oral
fluid)
20. Setiap jari pasien, atau tumit untuk anak-anak yang masih kecil,
dibersihkan dengan alkohol, kemudian ditusuk dengan microlancet
steril sekali pakai. Hingga empat tetes darah lengkap dikumpulkan
di atas kertas saring standar. Kertas saring harus dibiarkan
mengering secara menyeluruh (setidaknya 60 menit) sebelum
dimasukkan ke dalam kantong untuk disimpan. Setiap kertas saring
harus dibungkus secara terpisah, disarankan untuk menyimpan
sampel di tempat yang sejuk dan dibawa ke laboratorium
sesegera mungkin.
Dried blood samples
21. Metode pengambilan dan penyimpanan sampel cairan oral untuk tes IgM dan
RT-PCR dikembangkan untuk mengumpulkan cairan sulkus, yang merupakan
cairan yang keluar dari antarmuka antara gusi dan gigi. Cairan sulkus
mengandung kadar IgM yang rendah, yang dapat digunakan untuk mendeteksi
infeksi tertentu. Cairan oral diekstraksi dengan menambahkan medium
transportasi virus ke dalam tabung yang berisi swab. Medium transportasi virus
membantu untuk menjaga cairan oral tetap stabil dan mencegahnya dari
kontaminasi. Cairan oral yang diekstraksi kemudian dapat disimpan pada suhu
+4°C atau -20°C hingga diuji. Metode pengambilan dan penyimpanan
sampel cairan oral ini penting untuk memastikan bahwa hasil tes IgM dan RT-
PCR akurat.
Oral fluids collection, storage
and shipment procedures
23. Tindakan pencegahan keselamatan umum pada penerimaan sampel:
Setelah sampel atau bahan tiba di laboratorium, karton atau pengangkut
pengiriman harus segera dibongkar di tempat yang telah ditentukan.
Tempat bongkar harus dilengkapi dengan wadah pembuangan, penyeka
alkohol, dan tisu.
Keselamatan pekerja laboratorium menjadi prioritas utama.
Jika tersedia, Bio Safety Cabinet (BSC) Kelas II dapat digunakan untuk
membatasi paparan staf laboratorium terhadap patogen potensial. Jika BSC
tidak tersedia, meja kerja yang bersih dapat digunakan sebagai alternatif.
Laboratorium harus memiliki penutup permukaan yang mudah didesinfeksi.
General safety precautions on receipt
24. Pembongkaran dan pencatatan spesimen sebaiknya dilakukan oleh dua
orang:
a. Satu orang mencatat data.
b. Orang lain bersarung tangan dan bertanggung jawab untuk membuka
kemasan, memeriksa pecah dan bocornya wadah sampel, serta kontaminasi
pada dokumen yang menyertainya.
Dokumen orang yang terkontaminasi harus ditempatkan sementara di BSC,
sementara informasinya dicatat secara manual pada selembar kertas bersih.
Dokumen orang yang terkontaminasi harus ditangani dengan cara yang sama
seperti limbah menular.
Direkomendasikan agar setiap laboratorium mengembangkan prosedur
operasi standar khusus untuk pembukaan kemasan dan pencatatan spesimen.
General safety precautions on receipt