1. Определение и интерпретация
ER, PgR и HER2/neu статуса
Е.Н. Имянитов
НИИ онкологии им. Н.Н. Петрова
Кафедра онкологии МАПО
Кафедра медицинской генетики Педиатрической
академии
С.-Петербург

2. George Beatson
1848-1933
1896 г. – овариэктомия для лечения РМЖ

3. 1973 г.: ligand-binding assay

4. ER+/PR+ (HR+) РМЖ
• 60-70% РМЖ
• «Благополучное» течение
• Низкая метастатическая активность
• Чувствительность к антагонистам
эстрогенов
• Низкая чувствительность к химиотерапии
• Некоторое сходство с доброкачественными
опухолями

5. Иммуногистохимия (ИГХ)
Флюорофор
Красящее анти-антитело
(кролик, мышь)
Специфическое антитело
(кролик, мышь)
Клетка
• Присутствие/количество белка
• Локализация белка
• Плохая воспроизводимость
• Нет внутреннего стандарта

7. Allred Immunohistochemistry Score
Proportion
(0–1  1/100) — (2  1/10) — (3  1/3) — (4  2/3) — (5  1)
score
Intensity
0 = negative 1 = weak 2 = intermediate 3 = strong
score
Total score = proportion score + intensity score (range 0, 2–8)
Allred D, et al. Mod Pathol. 1998;11:155-168

8. Univariate DFS curves for all possible total IHC scores in patients receiving any adjuvant
endocrine therapy (almost always tamoxifen).
Harvey J M et al. JCO 1999;17:1474-1474
©1999 by American Society of Clinical Oncology

9. Проблемы
• Интерпретация статуса рецепторов
прогестерона (ER+/PgR-; ER-/PgR+)
• Стандарты интерпретации результатов ИГХ
• Методические ограничения ИГХ

10. Herceptin : от лаборатории к
®
клинике
1981 1985 1987 1990 1992 1993 1995 1998 2000
Клонирован Фаза I EU
ие Фаза III approval
мышиного
HER2/neu
US
Клонирова approval
ние HER2 Фаза II
человека Моноклональные
антитела
Прогностическая
значимость
HER2

11. Амплификация HER2 (ERBB2)
Breast 35/142 (25%)
Ovary 1/36 (3%)
Thyroid 1/27 (4%)
Colon 1/19 (5%)
Lung 0/34 (-)
Sarcomas 0/6 (-)
Melanomas 0/3 (-)
Imyanitov et al., 1990

12. ERBB2 amplification and breast
cancer relapse (St.-Petersburg)
8%
Relapse
No relapse 86%
92%
14%
N=25 N=7
Single copy Amplification
Imyanitov et al., 1990

14. HER2+ РМЖ
• 20-25% РМЖ
• Амплификация гена, сильная
гиперэкспрессия
• Высокий метастатический потенциал
• Плохой прогноз
• Чувствительность к цитостатической
терапии
• Чувствительность к антагонистам HER2

15. Проблемы
• ИГХ +/- FISH или FISH ?
• Разные алгоритмы для рака молочной
железы и желудка!!!

16. Флюоресцентная гибридизация in situ (FISH)
Детектирует
количество
копий гена
(амплификации)
HER2 – красный сигнал
Внутренний стандарт-
зелѐный сигнал

17. Алгоритм исследования
статуса HER2
Образец опухоли пациента
ИГХ
0 +1 +2 +3
ISH
– + Подходят для лечения
трастузумабом
Hofmann M et al/.. Histopathology 2008; 52:797–805.

19. FISH
• Амплификация – более стабильный маркер
активации HER2 (чем гиперэкспрессия)
• Хорошая воспроизводимость (по сравнению
с ИГХ)
• Высокая стоимость (?)
• Метод выбора для РМЖ в
некоторых клиниках США
Dennis Slamon

20. Новое в HER2-диагностике
• РМЖ ИГХ 3+: сильное, полное
мембранное окрашивание >30% клеток

21. Новое в HER2-диагностике
• Особенности рака желудка
- всегда сначала ИГХ
- нет требования к полному
мембранному окрашиванию
- внутриопухолевая гетерогенность
- порог для ИГХ 3+: 10% клеток (как раньше
для РМЖ)

22. Показания для HER2-
диагностики
• Метастатический рак молочной железы
• Метастатический рак желудка – только
терапия первой линии!!!

23. Показания для HER2-
диагностики
• Адъювантная терапия рака молочной
железы, кроме самого благополучного
варианта РМЖ [N0 и ER+/PR+ и < 2 см
и степень злокачественности 1 и >35
лет]
• Карциномы in situ часто экспрессируют
HER2, но не являются кандидатами на
адъювантное лечение

24. Анализ экспрессии HER2 на уровне РНК
ERCC1 SDHA HER2
SDHA
ПЦР в режиме
реального времени
24

25. Перспективы HER2-диагностики:
ДНК или РНК?
• ДНК-анализ (FISH, CISH): >2-кратное
увеличение копийности
• РНК-анализ (ПЦР в режиме реального
времени): >100-кратное увеличение
уровня экспрессии, легче выявлять

26. Межлабораторная воспроизводимость
• < 80% для ИГХ
• ER/PR: чаще ложно-негативн.
• HER2: чаще ложно-позитивн.
• FISH, CISH: воспроизводиость ~95%

27. Статус первичной опухоли и
отсроченного рецидива
• ~15% расхождений
• Истинная гетерогенность или плохая
воспроизводимость методов?
• Влияние лечения (отбор клеток?)
• NCCN рекомендует ре-биопсию (по
возможности)