Mikroskop fluoresensi adalah mikroskop yang menggunakan cahaya ultraviolet untuk menerangi sampel yang telah diberi zat pewarna fluoresen. Mikroskop ini memungkinkan pengamatan spesimen secara langsung dengan perbesaran hingga 1000 kali dan banyak digunakan dalam bidang mikrobiologi dan penelitian biologi.
2. Sir George G. Stokes
Fenomena fluoresensi
dikenal pada pertengahan abad
kesembilan belas. Ilmuwan
Inggris Sir George G.
Stokes pertama membuat
pengamatan bahwa fluorspar
mineral pameran fluoresensi
ketika diterangi dengan sinar
ultraviolet, dan ia menciptakan
kata "fluoresensi"
3. Penemuan Fluorescens Mikrobiologi
Mikroskop fluoresensi telah
dibuat di bagian awal abad kedua
puluh bulan Agustus, antara lain
Köhler, Carl Reichert, dan Heinrich
Lehmann. Namun, selama beberapa
dekade, potensi alat ini tidak disadari
namun sekarang mikroskop
fluoresensi merupakan alat yang
penting (dan mungkin diperlukan)
dalam biologi seluler.
4. Mikroskop Fluoresensi
Fluoresensi adalah cahaya yang dihasilkan oleh suatu
zat ketika dirangsang oleh cahaya lain .
Fluoresensi disebut " cahaya dingin " karena tidak
berasal dari sumber panas seperti
bola lampu pijar .
Sedangkan mikroskop flouresensi adalah mikroskop
yang mempunyai sumber cahaya khusus yang didapat
dari sinar UV ( ultra violet ) yang bergelombang
pendek.
5. • Digunakan untuk mengamati spesimen yang mampu
berpendar, yaitu memancarkan suatu jenis cahaya jika
cahaya lain mengenainya
• Pendaran yang terjadi pada spesimen disebabkan karena
secara alamiah mengandung zat pendar, misalnya klorofil
atau diberi perlakuan dengan zat warna yang mampu
berpendar.
Mikroskop Fluoresensi
6. • Mikroskop fluoresen membantu mikroskopis melihat objek
secara langsung dan dapat memperbesar objek hingga 1000
kali ukuran sebenarnya.
• Mengeksplorasi spesimen dengan cahaya ultraviolet, atau
cahaya biru
• Lensa kondensor terbuat dari kwarts
• Banyak digunakan pada mikrobiologi klinik atau
mikrobiologi lingkungan.
7. Spesimen yang akan bernoda
Sebagian besar spesimen untuk
mikroskop fluoresensi harus ternoda.
Fluorescent noda disebut
"fluorochromes." Acridine orange,
Auramine O, dan antibodi fluorescent
(FA) adalah fluorochromes yang
paling digunakan.
8. Mikroskop Fluorescence diterapkan dalam Banyak
Cabang Sains dan Kedokteran
Penggunaan fluoresensi
mikroskop banyak dan
bervariasi. Mereka berada di
kedokteran, kesehatan masyarakat,
penelitian biologi, dan pemantauan
lingkungan.
Yang paling umum aplikasi medis
diagnosis laboratorium.
9. Prinsip Mikroskop Fluoresens
1. Tenaga diserap oleh atom yang akan tereksitasi
2. Elektron melompat ke tahap tenaga yang lebih tinggi.
3. Elektron kembali ke keadaan dasar, memancarkan photon (paket
cahaya) kemudian atom akan berfluoresen.
10. Perbedaan antara Mikroskop Konvensional
dan Mikroskop Fluorescens
• Mikroskop konvensional
menggunakan cahaya tampak
(400-700 nanometer) untuk
menerangi dan menghasilkan
gambar diperbesar dari sampel.
• Sebuah mikroskop fluoresensi,
menggunakan intensitas sumber
cahaya yang jauh lebih tinggi.
Spesies fluorescent ini pada
dasarnya memancarkan energi
cahaya yang lebih rendah dari
gelombang yang lebih panjang
yang menghasilkan.
11. Keuntungan Mikroskop Fluorescent
• Mikroskop fluoresensi adalah metode yang paling populer untuk
mempelajari perilaku dinamis dipamerkan dalam pencitraan sel hidup. Ini
berasal dari kemampuannya untuk mengisolasi protein individu dengan
tingkat tinggi spesifisitas tengah bahan non-fluorescing.
• Sensitivitas cukup tinggi untuk mendeteksi sedikitnya 50
molekul per mikrometer kubik.
• Molekul yang berbeda sekarang dapat diwarnai dengan warna yang berbeda,
memungkinkan beberapa jenis molekul yang akan dilacak secara bersamaan.
Faktor-faktor ini bergabung untuk memberikan fluoresensi mikroskopi
keuntungan jelas atas pencitraan optik lainnya teknik, baik in vitro dan in
vivo pencitraan.