Immunohistochemistry with primary antibodies.

1. IINNMMUUNNOOHHIISSTTOOQQUUIIMMIICCAA
DDppttoo ddee AAnnaattoommííaa PPaattoollóóggiiccaa
FFccoo JJaavviieerr AAllvveess FFeerrrreeiirraa

2. DDeeffiinniicciióónn
iinnmmuunnoo--.. ((DDeell llaatt.. iimmmmūūnniiss)).. ((DDee iinnmmuunnee))..11.. eelleemm..
ccoommppooss.. BBiiooqquuíímm.. yy MMeedd.. IInnddiiccaa rreellaacciióónn ccoonn llooss
mmeeccaanniissmmooss iinnmmuunniittaarriiooss.. IInnmmuunnoollooggííaa,,
iinnmmuunnootteerraappiiaa..
hhiissttoo--..((DDeell ggrr.. ἱἱσσττόόςς,, tteejjiiddoo))..11.. eelleemm.. ccoommppooss.. BBiiooll..
SSiiggnniiffiiccaa ''tteejjiiddoo oorrggáánniiccoo''.. HHiissttoollooggííaa,,
hhiissttooccoommppaattiibbiilliiddaadd..
qquuíímmiiccoo,, ccaa..((ddeell ggrr.. χχυυμμεείίαα,, mmeezzccllaa ddee llííqquuiiddooss ))..
44.. ff.. CCiieenncciiaa qquuee eessttuuddiiaa llaa eessttrruuccttuurraa,,
pprrooppiieeddaaddeess yy ttrraannssffoorrmmaacciioonneess ddee llaa mmaatteerriiaa aa
ppaarrttiirr ddee ssuu ccoommppoossiicciióónn aattóómmiiccaa..

3. ESTU DIO
A N A TOM OPA TOLOGIC O
MMOO IIHHQQ BBMM

4. DDeeffiinniicciióónn
EEll eelleemmeennttoo pprriinncciippaall eenn eessttaa ttééccnniiccaa eess::
AANNTTIICCUUEERRPPOO

5. IInnmmuunnoogglloobbuulliinnaass
PPrrootteeíínnaass..
IIggGG,, IIggAA,, IIggMM,, IIggDD,, IIggEE..
DDooss ccaaddeennaass ppeessaaddaass yy ddooss lliiggeerraass
((kkaappppaa yy llaammbbddaa)) ((22::11))..
EEnn rraattoonneess eell 9955%% ssoonn kkaappppaa..
EEnn iinnddiivviidduuoo llaa mmááss aabbuunnddaannttee:: IIggGG..
LLaa pprriimmeerraa eenn aappaarreecceerr eess llaa IIggMM ((11 sseemm))..
EEnn 22 sseemm pprreeddoommiinnaa llaa IIggGG..

6. DDooss ttiippooss ddee IIgg
IgG
(150kD)
IgM
(900kD)
Vida media: 3 sem Vida media:
4-6 días

7. MMééttooddooss ddee vviissuuaalliizzaacciióónn

8. AAcc ppoolliicclloonnaalleess
RReeaacccciioonnaann ccoonn
vvaarriiooss eeppiittooppooss ddee uunn
aannttííggeennoo..
CCoonneejjoo..
CCaabbrraa..
CCeerrddoo..
OOvveejjaa..
Inyección de 10-200 μg de Ag CCaabbaalllloo..
Intradérmicamente o subcutáneo
Intraperitoneal

9. AAcc MMoonnoocclloonnaalleess
UUnn cclloonn ddee ccéélluullaass
ppllaassmmááttiiccaass..
RRaattoonneess..
EElleevvaaddaa
hhoommooggeenneeiiddaadd..
SSiinn AAcc iinneessppeeccííffiiccooss..
FFáácciill ccaarraacctteerriizzaacciióónn..
SSiinn vvaarriiaabbiilliiddaadd..
Especificidad: El epítopo del antígeno debe ser único.

10. AAffiinniiddaadd ddeell AAcc
IInnttrríínnsseeccaa..
 RReessiiddee eenn llaa rreeggiióónn vvaarriiaabbllee..
 AA mmaayyoorr eessppeecciiffiicciiddaadd mmeejjoorr aaffiinniiddaadd..
FFuunncciioonnaall..
 TTiieemmppoo rreeqquueerriiddoo ppaarraa aallccaannzzaarr eell eeqquuiilliibbrriioo ccoonn eell AAgg
ttiissuullaarr..
 EEll AAcc qquuee aallccaannzzaa uunnaa mmeesseettaa ddee mmááxxiimmaa iinntteennssiiddaadd
ddee ttiinncciióónn aanntteess ttiieennee mmááss aaffiinniiddaadd ffuunncciioonnaall..
LLaa uunniióónn AAgg--AAcc eess rreevveerrssiibbllee..
 EEvviittaarr aallttaass ccoonncceennttrraacciioonneess ddee ssaall,, aallttaass ttª yy ppHH bbaajjoo..
 EEvviittaarr eexxcceessiivvooss llaavvaaddooss..

11. RReeaaccttiivviiddaadd ccrruuzzaaddaa
AAccttiivviiddaadd eennttrree uunn AAcc yy ddooss oo mmááss AAgg oo
vviicceevveerrssaa..
AAnnttii--llaammbbddaa  ccoonn vvaarriiaass IIgg..
CCEEAA  CCEEAA,, AAgg ddee GGrruuppoo ssaanngguuíínneeoo yy
pprrootteeíínnaass ttiissuullaarreess..
EExxppeerriimmeennttaall oo aacccciiddeennttaallmmeennttee ssee iinndduucceenn
ccaammbbiiooss eenn uunnoo oo vvaarriiooss eeppííttooppooss..
RReeaacccciióónn ccrruuzzaaddaa ddee AAcc ccoonnttrraa AAgg hhuummaannooss yy
ddee oottrraass eessppeecciieess..

12. TTiittuullaacciióónn ddeell AAcc
ÓÓppttiimmaa::
 LLaa mmaayyoorr ddiilluucciióónn ddee uunn aannttiiccuueerrppoo qquuee
rreessuullttaa eenn llaa mmááxxiimmaa ttiinncciióónn eessppeeccííffiiccaa ccoonn eell
mmeennoorr ffoonnddoo..
PPoolliicclloonnaalleess::
 11::110000 –– 11::22000000
MMoonnoocclloonnaalleess::
 11::1100 –– 11::11000000

13. IInnttrroodduucccciióónn
EEss ddiiffíícciill ppeennssaarr eenn uunnaa ttééccnniiccaa ddee
mmaayyoorr iimmppaaccttoo eenn eell ccaammppoo ddee llaa AAPP,,
eessppeecciiaallmmeennttee eenn eell ddiiaaggnnóóssttiiccoo..
PPaattoollooggííaa qquuiirrúúrrggiiccaa,, hheemmaattooppaattoollooggííaa,,
cciittooppaattoollooggííaa..

14. 1045
INMUNOHISTOQUIMICA
Biopsias IHQ Cristales
5556
164015731643
7445
1922
2006
7620
8116
1991
10880
9660
2243
2400
12000
10000
8000
6000
4000
2000
0
1996 1998 2000 2002 2004

15. EElleemmeennttooss ccllaavvee
PPaattóóllooggoo..
TTééccnniiccoo..
MMééttooddooss yy rreeaaccttiivvooss..
CCoonnttrrooll ddee ccaalliiddaadd..

16. MMééttooddooss yy rreeaaccttiivvooss
AAnnttiiccuueerrppooss ddee ccaalliiddaadd..
VVaarriieeddaadd ddee mmééttooddooss..
““KKiittss uunniivveerrssaalleess””..
PPeerrooxxiiddaassaa yy ddiiaammiinnoobbeenncciiddiinnaa ((DDAABB))..
““NNoo ccrreeaass aall ffaabbrriiccaannttee hhaassttaa vvaalliiddaarr eell
aannttiiccuueerrppoo eenn ttuu pprrooppiioo llaabboorraattoorriioo””..
SSee ddeebbeenn vvaalliiddaarr llooss ttííttuullooss ddee ccaaddaa AAcc eenn ttuu
llaabboorraattoorriioo..
NNoo eexxiissttee:: ““AAcc pprreeddiilluuiiddooss lliissttooss ppaarraa ssuu uussoo””..

17. CCoonnttrrooll ddee ccaalliiddaadd
VVaarriiaabblleess pprree--IIHHQQ
CCoommiieennzzaa eenn llaa ssaallaa ddee
ttaallllaaddoo..
22 mmmm ddee ggrroossoorr..
““GGaarrbbaaggee iinn--ggaarrbbaaggee oouutt””..
DDeeccaallcciiffiiccaacciióónn ((CCDD4433,,
KKii6677,, EERR yy PPRR))..
FFoorrmmooll
((eennmmaassccaarraammiieennttoo
aannttiiggéénniiccoo)).. NNoo mmááss ddee
2244 hhoorraass..

18. CCoonnttrrooll ddee ccaalliiddaadd
VVaarriiaabblleess pprree--IIHHQQ
DDeesseennmmaassccaarraammiieennttoo aannttiiggéénniiccoo..
 DDiiggeessttiióónn ccoonn pprrootteeaassaass.. ((ttrriippssiinnaa,, DDNNaassaa,,
pprrootteeiinnaassaa KK,, ppeeppssiinnaa,, pprroonnaassaa,, ffiicciinnaa ……
 HHIIEERR ((HHeeaatt IInndduucceedd EEppiittooppee RReettrriieevvaall))..
RReeccuuppeerraacciióónn aannttiiggéénniiccaa ppoorr ccaalloorr..
SShhaann--RRoonngg SShhii eett aall.. 11999911..JJ HHiissttoocchheemm CCyyttoocchheemm 3399::774411--88..
MMiiccrroooonnddaass,, eessttuuffaass,, oollllaa aa pprreessiióónn ……
PPoorr mmeeccaanniissmmoo ddeessccoonnoocciiddoo ((CCaa22++))..
EEDDTTAA ((qquueellaannttee ddeell ccaallcciioo))..

19. CCoonnttrrooll ddee ccaalliiddaadd
VVaarriiaabblleess pprree--IIHHQQ
DDeesseennmmaassccaarraammiieennttoo aannttiiggéénniiccoo..
 TTiieemmppoo..
 TTeemmppeerraattuurraa..
 ppHH..
NNoo hhaayy nniinngguunnaa ssoolluucciióónn iiddeeaall ppaarraa ttooddooss llooss
aannttííggeennooss::
 00,,11MM bbuuffffeerr cciittrraattoo ((ppHH66)..
 00,,11MM EEDDTTAA ((ppHH88)..
 00,,55MM TTrriiss bbuuffffeerr ((ppHH1100)..
 00,,0055MM gglliicciinnaa--HHCCll bbuuffffeerr ……

20. CCoonnttrrooll ddee ccaalliiddaadd
VVaarriiaabblleess pprree--IIHHQQ
HHIIEERR ccoonn mmiiccrroooonnddaass..
 CCaaddaa mmiiccrroooonnddaass ttiieennee ssuu
““ppeerrssoonnaalliiddaadd””.. ((RRTT MMiilllleerr)..
 CCaannttiiddaadd ddee mmaatteerriiaall ddeennttrroo ddeell
aappaarraattoo..
OOllllaa aa pprreessiióónn::
 CCaalleennttaammiieennttoo uunniiffoorrmmee..
 NNoo ssee pprroodduuccee eebbuulllliicciióónn..
 MMaayyoorr ttª:: 112200ºCC..
 MMeennoorr ttiieemmppoo.. ((22--99 mmiinnuuttooss)..

21. CCoonnttrrooll ddee ccaalliiddaadd
VVaarriiaabblleess pprree--IIHHQQ
AAuuttooccllaavveess..
BBaaññooss ddee aagguuaa ccaalliieennttee..
EEssttuuffaass..
UUllttrraassoonniiddooss..
EEttcc..

22. CCoonnttrrooll ddee ccaalliiddaadd
VVaarriiaabblleess pprree--IIHHQQ
SSuussttiittuuttooss ddeell ffoorrmmooll..
 PPrreeppaarraaddooss aaccuuoossooss..
 PPrreeppaarraaddooss aallccoohhóólliiccooss..
EEvviittaarr ssoobbrreeffiijjaacciióónn eenn ffoorrmmooll..
 TTiieemmppoo ddee eessppeerraa eenn aallccoohhooll ddee 7700%%..
OOttrrooss ffiijjaaddoorreess::
 BB55.. ((GGaanngglliioo yy MMOO;; eexxeelleennttee mmoorrffoollooggííaa)
CCDD55,, CCDD3300,, CCDD2233 …… CCDD1155,, kkaappppaa,, llaammbbddaa
 ZZeennkkeerr..
 BBoouuiinn.. ((ffoorrmmooll,, aacciiddoo ppííccrriiccoo yy aaccééttiiccoo)..
CCDD55,, CCDD1100,, CCiicclliinnaa DD11

23. CCoonnttrrooll ddee ccaalliiddaadd
VVaarriiaabblleess ddee iinnmmuunnoottiinncciióónn
NNoo eexxiissttee uunn mmééttooddoo ““ssttaannddaarrdd””..
CCaaddaa llaabboorraattoorriioo eess ddiiffeerreennttee..
MMééttooddooss ddee aavviiddiinnaa--bbiioottiinnaa ssoonn llooss mmááss uussaaddooss::
11.. CCoorrtteess ssoobbrree ccrriissttaalleess aaddhheessiivvooss..
22.. DDeessppaarraaffiinnaarr eenn xxiillooll yy rreehhiiddrraattaarr..
33.. BBllooqquueeaarr llaa ppeerrooxxiiddaassaa eennddóóggeennaa.. BBuuffffeerr..
44.. IInnccuubbaarr ssoonn ssuueerroo ““BBllooqquueeaannttee””..BBuuffffeerr..
55.. RReeccuuppeerraacciióónn aannttiiggéénniiccaa ((ccaalloorr oo pprrootteeiinnaassaa)..BBuuffffeerr..
66.. AAnnttiiccuueerrppoo pprriimmaarriioo:: iinnccuubbaarr yy llaavvaarr eenn bbuuffffeerr..
77.. AAnnttiiccuueerrppoo sseeccuunnddaarriioo:: iinnccuubbaarr yy llaavvaarr eenn bbuuffffeerr..
88.. CCoommpplleejjoo ddee ddeetteecccciióónn:: iinnccuubbaarr yy llaavvaarr eenn bbuuffffeerr..
99.. RReeaacccciióónn ccoonn ccrroommóóggeennoo..
1100.. CCoonnttrraattiinncciióónn,, ddeesshhiiddrraattaarr,, ccuubbrriirr yy vveerr..

24. CCoonnttrrooll ddee ccaalliiddaadd
VVaarriiaabblleess ddee iinnmmuunnoottiinncciióónn
AAddhheessiióónn ttiissuullaarr::
 SSee rreeqquuiieerree mmééttooddoo ddee aaddhheessiióónn..
 EEssppeecciiaallmmeennttee eenn tteejjiiddooss mmaall ffiijjaaddooss..
 AAzzuull ddee EEllmmeerr,, ccrroommoo--aalluummiinniioo,, LL--llyyssiinnaa oo ssiillaannoo..
SSeeccaaddoo ddee pprreeppaarraacciioonneess::
 5566--6600ºCC dduurraannttee 11 hhoorraa ((mmeejjoorr ttooddaa llaa nnoocchhee)..
 MMiiccrroooonnddaass::33--44 mmiinnuuttooss..
DDeessppaarraaffiinniizzaacciióónn::
 XXiillooll..
 OOmmiissiióónn ddee sseeccaaddoo yy ddeessppaarraaffiinniizzaacciióónn:: ccaalleennttaannddoo
llaass pprreeppaarraacciioonneess eenn mmiiccrroooonnddaass eenn jjaarrrraa ddee CCoopplliinn
ccoonn bbuuffffeerr..

25. CCoonnttrrooll ddee ccaalliiddaadd
VVaarriiaabblleess ddee iinnmmuunnoottiinncciióónn
DDeess--ZZeennkkeerriizzaacciióónn::
 PPaarraa bbiiooppssiiaass eenn BB55 oo ZZeennkkeerr..
 SSiieemmpprree aall ffiinnaall ddeell pprroocceessoo yy aanntteess ddee llaa
ccoonnttrraattiinncciióónn ((nnoo aanntteess ddee llaa aapplliiccaacciióónn ddeell aannttiiccuueerrppoo
pprriimmaarriioo)..
HHIIEERR oo pprrootteeaassaa..
BBllooqquueeoo ddee llaa ppeerrooxxiiddaassaa eennddóóggeennaa..
 HHeemmaattííeess oo nneeuuttrróóffiillooss..
 00,,33%% HH22OO22 eenn PPBBSS ccoonn 11%% aazziiddaa ssóóddiiccaa aa
tteemmppeerraattuurraa aammbbiieennttee..
 AAnntteess ddeell aannttiiccuueerrppoo pprriimmaarriioo.. ((oo ddeessppuuééss ddeell 22º)

26. CCoonnttrrooll ddee ccaalliiddaadd
VVaarriiaabblleess ddee iinnmmuunnoottiinncciióónn
SSuueerroo bbllooqquueeaannttee..
 NNoo eenn ttooddooss llooss llaabboorraattoorriiooss..
 AAnntteess ddeell pprriimmaarriioo oo ccoommoo ddiilluuyyeennttee..
 SSuueerroo ddee llaa mmiissmmaa eessppeecciiee qquuee pprroodduuccee eell AAcc oo
ccaasseeíínnaa..
BBllooqquueeoo ddee llaa bbiioottiinnaa eennddóóggeennaa..
 GGrráánnuullooss cciittoopplláássmmiiccooss ((hhííggaaddoo,, rriiññóónn)..
 HHIIEERR ((ccaalloorr)  ++ bbiioottiinnaa..
 00,,0055%% PPBBSS ccoonn aavviiddiinnaa ++ 1155 mmiinn eenn 00,,0055--00,,22%% ddee
bbiioottiinnaa eenn PPBBSS..
 22 hhuueevvooss bbllaannccooss eenn 220000 mmll aagguuaa ddeessttiillaaddaa..

27. CCoonnttrrooll ddee ccaalliiddaadd
VVaarriiaabblleess ddee iinnmmuunnoottiinncciióónn
DDiilluuyyeenntteess ddee AAcc..
 BBuuffffeerr ccoonn aaggeennttee eessttaabbiilliizzaannttee ((BBSSAA)..
 00,,0055%% TTrriiss bbuuffffeerr ccoonn 1155 mmMM aazziiddaa ssóóddiiccaa
((SSiiggmmaa SS--88003322)..
BBuuffffeerr ddee llaavvaaddoo..
 PPBBSS oo TTBBSS.. ((TTwweeeenn2200)..
 TTwweeeenn2200 ((00,,22%%) yy aagguuaa ddeessttiillaaddaa..

28. CCoonnttrrooll ddee ccaalliiddaadd
VVaarriiaabblleess ddee iinnmmuunnoottiinncciióónn
AAnnttiiccuueerrppoo pprriimmaarriioo..
 MMuuyy iimmppoorrttaannttee..
 NNoo eexxiissttee eell ““aannttiiccuueerrppoo pprreeddiilluuiiddoo lliissttoo ppaarraa
ssuu uussoo””..
 NNuunnccaa ccrreeaass aall ffaabbrriiccaannttee eenn llaass
rreeccoommeennddaacciioonneess ddee ““ddiilluucciióónn”” ddeell AAcc
pprriimmaarriioo..
 11::220000  11::5500..000000
 CCaaddaa llaabboorraattoorriioo ddeebbee ddeetteerrmmiinnaarr ssuuss
ddiilluucciioonneess ddee ttrraabbaajjoo aanntteess ddee uussaarrlloo ppaarraa
ddiiaaggnnóóssttiiccoo..

29. CCoonnttrrooll ddee ccaalliiddaadd
VVaarriiaabblleess ddee iinnmmuunnoottiinncciióónn
DDiilluucciióónn ddeell aannttiiccuueerrppoo..
 EEss llaa pprriinncciippaall rraazzóónn ddee mmaallooss rreessuullttaaddooss..
 IIddeennttiiffiiccaarr ffaallssooss ppoossiittiivvooss yy nneeggaattiivvooss..
 AAnntteess aasseegguurraarr eell mmeejjoorr mmééttooddoo ddee rreeccuuppeerraacciióónn
aannttiiggéénniiccaa..
 11::5500
11::110000 ----11::220000 ---- 11::440000 ---- 11::880000
 EEjj..:: 11::22..000000..000000 ppaarraa aannttii--llaammbbddaa

30. CCoonnttrrooll ddee ccaalliiddaadd
VVaarriiaabblleess ddee iinnmmuunnoottiinncciióónn
DDiilluucciióónn ddeell aannttiiccuueerrppoo..
 EEss iimmppoorrttaannttee aasseegguurraarr qquuee llooss ccaassooss
nneeggaattiivvooss sseeaann nnoo rreeaaccttiivvooss..
 LLaa mmaayyoorrííaa ddee llaabboorraattoorriiooss nnoo eemmpplleeaann
mmuucchhoo ttrraabbaajjoo eenn ttiittuullaarr aannttiiccuueerrppooss..
 ““SSaannddwwiicchh”” ddee tteejjiiddooss ((8800 ttuummoorreess)..

31. CCoonnttrrooll ddee ccaalliiddaadd
VVaarriiaabblleess ddee iinnmmuunnoottiinncciióónn
PPoossiittiivvooss vveerrddaaddeerrooss yy ffaallssooss..
 TTooddoo lloo mmaarrrróónn nnoo eess rreeaall,, nnii ccoonn eell ffoonnddoo lliimmppiioo..
 ““LLaass ccéélluullaass qquuee ccoonnttiieenneenn eell aannttííggeennoo ssoonn
hheetteerrooggéénneeaass””..
 FFuueerrttee ttiinncciióónn ddee mmeemmbbrraannaa..
 TTiinncciióónn ddeell nnúúcclleeoo cceelluullaarr..
 BB55 oo ZZeennkkeerr,, áácciiddooss ffuueerrtteess..
 TTiinncciióónn nnuucclleeoollaarr ddeell CCDD2200..
 HHííggaaddoo oo rriiññóónn eenn ssiisstteemmaass aavviiddiinnaa--bbiioottiinnaa..

32. CCoonnttrrooll ddee ccaalliiddaadd
VVaarriiaabblleess ddee iinnmmuunnoottiinncciióónn
TTiieemmppooss ddee iinnccuubbaacciióónn..
TTeemmppeerraattuurraa..
 RReeffrriiggeerraaddoorr..
 3377ºCC..
 LLaa óóppttiimmaa eess » 2255ºCC..
PPéérrddiiddaa ddee aaccttiivviiddaadd..
 EEssttrraappttaavviiddiinnaa--HHRRPP..

33. CCoonnttrrooll ddee ccaalliiddaadd
VVaarriiaabblleess ddee iinnmmuunnoottiinncciióónn
IInnccuubbaacciióónn ddeell sseeccuunnddaarriioo..
 MMoonnooeessppeeccííffiiccooss..
 MMuullttii--lliinnkk..
CCoommpplleejjoo ddee ddeetteecccciióónn ((AABBCC)..
 PPeerrooxxiiddaassaa 44 vveecceess mmááss sseennssiibbllee qquuee llaa ffoossffaattaassaa aallccaalliinnaa..
CCrroommóóggeennoo..
 DDAABB..
BBuueennaa ttiinncciióónn ddee ccoolloorr mmaarrrróónn..
MMoonnttaajjee eenn mmeeddiioo eessttaannddaarr..
NNoo ssee ddeessttiiññee ccoonn eell ttiieemmppoo..
 AAEECC ((aammiinnooeettiillccaarrbbaazzooll)..
TTiinncciióónn ddee ccoolloorr rroojjoo..
MMoonnttaajjee eenn mmeeddiioo aaccuuoossoo..

34. CCoonnttrrooll ddee ccaalliiddaadd
VVaarriiaabblleess ppoosstt--iinnmmuunnoo
SSoolluucciioonneess qquuee mmeejjoorraann llaa DDAABB..
 SSuullffaattoo ddee ccoobbrree..
 TTeettrróóxxiiddoo ddee oossmmiioo..
 CClloorruurroo ddee ccoobbaallttoo..
CCoonnttrraattiinncciióónn..
 HHeemmaattooxxiilliinnaa ((HHaarrrriiss,, GGiillll)..
 AAzzuurree BB,, GGiieemmssaa--HHeemmaattooxxiilliinnaa ((mmeellaanniinnaa)..

35. Técnica ddee iinnmmuunnoohhiissttooqquuíímmiiccaa
11.. DDeessppaarraaffiinnaarr ee hhiiddrraattaarr eenn aallccoohhoolleess ddeeccrreecciieenntteess ((110000º--9900º--8800º--7700º) hhaassttaa eell aagguuaa
ddeessttiillaaddaa..
22.. AAññaaddiirr eell iinnhhiibbiiddoorr ddee llaa ppeerrooxxiiddaassaa eennddóóggeennaa ee iinnccuubbaarr dduurraannttee 1100 mmiinnuuttooss..
33.. LLaavvaaddoo eenn aagguuaa ddeessttiillaaddaa..
44.. LLaass pprreeppaarraacciioonneess ssee ssuummeerrggeenn eenn EEDDTTAA ((pprreeccaalleennttaaddoo eenn eell mmiiccrroooonnddaass) yy ssee mmeetteenn eenn
llaa eessttuuffaa aa 115500 ggrraaddooss dduurraannttee 4455 mmiinnuuttooss:: eell EEDDTTAA ssee pprreeppaarraa ccoonn 880000 mmll.. ddee aagguuaa
ddeessttiillaaddaa,, 11,,55 mmll.. ddee EEDDTTAA yy 22 ggoottaass ddee CCllHH;; ttooddoo eelllloo aa ppHH ddee 88,,22..
55.. LLaavvaaddoo eenn aagguuaa ddeessttiillaaddaa..
66.. LLaavvaaddoo eenn bbuuffffeerr TTrriiss aa tteemmppeerraattuurraa aammbbiieennttee..
77.. IInnccuubbaacciióónn ccoonn eell aannttiiccuueerrppoo pprriimmaarriioo aa llaa ddiilluucciióónn óóppttiimmaa ((vveerr aappaarrttaaddoo ddee aannttiiccuueerrppooss
pprriimmaarriiooss) dduurraannttee 3300 mmiinnuuttooss..
88.. LLaavvaaddoo eenn bbuuffffeerr TTrriiss..
99.. AApplliiccaarr eell aannttiiccuueerrppoo sseeccuunnddaarriioo ccoonnjjuuggaaddoo ((ppoollíímmeerroo ddee EEnnvviissiioonn®) dduurraannttee 3300 mmiinnuuttooss..
1100.. LLaavvaaddoo eenn bbuuffffeerr TTrriiss..
1111.. AApplliiccaacciióónn ddeell ccrroommóóggeennoo DDAABB dduurraannttee 55 mmiinnuuttooss:: ((11 mmll.. ddeell ssuussttrraattoo nnúúmmeerroo 55 ddeell KKiitt yy 11
ggoottaa ddeell ssuussttrraattoo nnúúmmeerroo 66 ddeell kkiitt)..
1122.. LLaavvaaddoo eenn bbuuffffeerr TTrriiss..
1133.. LLaavvaaddoo eenn aagguuaa ddeessttiillaaddaa..
1144.. HHeemmaattooxxiilliinnaa dduurraannttee 55 mmiinnuuttooss
1155.. LLaavvaaddoo eenn aagguuaa ddeessttiillaaddaa..
1166.. PPaassoo ppoorr aallccoohhoolleess ccrreecciieenntteess ppaarraa ddeesshhiiddrraattaarr ((7700--8800--9900--110000)..
1177.. XXiillooll yy mmoonnttaajjee ddee llaass pprreeppaarraacciioonneess

36. PPoollíímmeerrooss
EEnnvviissiioonn ((DDaakkoo)..
 NNoo uussaa aavviiddiinnaa--bbiioottiinnaa..
 NNoo ssee nneecceessiittaa bbllooqquueeaarr bbiioottiinnaa eennddóóggeennaa..
 CCoommbbiinnaa aacc sseeccuunnddaarriioo ccoonn ccoommpplleejjoo ddee
ddeetteecccciióónn  ssee aahhoorrrraa uunn ppaassoo..
 EEss ccaarroo..
PPoowweerrVViissiioonn ((IImmmmuunnoovviissiioonn TTeeccnnoollooggiieess)..

37. VVaarriiaabblleess ppoosstt--iinnmmuunnoo
NNoo bbaassttaa ccoonn ccoonnoocceerr eell nnoommbbrree ddeell AAcc..
 EENNEE:: EEnnoollaassaa NNeeuurroonnaall EEssppeeccííffiiccaa..
UUnnoo ssóólloo vvee lloo qquuee ccoonnooccee..
PPaanneell iinnssuuffiicciieennttee..  eerrrroorreess
ddiiaaggnnóóssttiiccooss..

38. CCoonnttrrooll ddee ccaalliiddaadd
CCoonn pprreeppaarraacciioonneess mmuullttiitteejjiiddoo..
 6600--8800 ttuummoorreess ddiiffeerreenntteess..
PPaarraa tteesstt ddee AAcc nnuueevvooss..
MMoonnttaaddoo eenn eell ffoonnddoo ddee llaa pprreeppaarraacciióónn ddee uunn
ccaassoo sseerrvviirrííaa ccoommoo ccoonnttrrooll ppoossiittiivvoo..
VViimmeennttiinnaa ccoommoo ccoonnttrrooll ttiissuullaarr..
 CCéélluullaass eessttrroommaalleess,, eennddootteelliiooss..
 DDéébbiill  ssoobbrreeffiijjaacciióónn ccoonn ffoorrmmooll..
CCoonnttrrooll nneeggaattiivvoo.. ((IIgguuaall rreeccuuppeerraacciióónn))
CCoonnttrrooll ppoossiittiivvoo..

39. IIHHQQ eenn cciittoollooggííaa
BBllooqquuee cceelluullaarr.. ((lloo mmeejjoorr))
FFiijjaaddaass eenn aallccoohhooll..
EEvviittaarr llaass sseeccaaddaass aall aaiirree..
TThhiinnPPrreepp..((lliissaa llooss GGRR,, llaavvaa pprrootteeíínnaass))
SSiinn rreeccuuppeerraacciióónn aannttiiggéénniiccaa..

40. IIHHQQ eenn cciittoollooggííaa
PPrroobblleemmaass
NNoo eess nneecceessaarriiaa rreeccuuppeerraacciióónn..
 SSee hhaa vviissttoo mmeejjoorraaddaa ccoonn oollllaa aa pprreessiióónn..
 EEssppeecciiaallmmeennttee mmuueessttrraass ““eenn sseeccoo””..
 AAllgguunnaass eenn aallccoohhooll:: vviimmeennttiinnaa,, CCKK77,,RRPP..

41. AAvvaanncceess eenn IIHHQQ
EEnnvviissiioonn

42. AAvvaanncceess eenn IIHHQQ
TTeecchhmmaattee 550000

43. AAvvaanncceess eenn IIHHQQ
AAuuttoossttaaiinneerr

44. IINNMMUUNNOOHHIISSTTOOQQUUIIMMIICCAA --IIII
DDppttoo ddee AAnnaattoommííaa PPaattoollóóggiiccaa
FFccoo JJaavviieerr AAllvveess FFeerrrreeiirraa

45. PPaanneelleess ddee IIHHQQ

46. PPaanneelleess ddee IIHHQQ

47. PPaanneelleess ddee IIHHQQ

48. PPaanneelleess ddee IIHHQQ

49. PPaanneelleess ddee IIHHQQ

50. Neoplasias nnoo hheemmaattoolliinnffooiiddeess
ppoorr ppaattrróónn ddee ccrreecciimmiieennttoo

51. Neoplasias nnoo hheemmaattoolliinnffooiiddeess ppoorr
óórrggaannoo oo tteejjiiddoo ddee oorriiggeenn

52. PPaattrroonneess ddee ttiinncciióónn::
mmeemmbbrraannaa ((yy GGoollggii))
CCDD1155

53. Patrones ddee ttiinncciióónn:: nnuucclleeaarr
MMiibb--11

54. PPaattrroonneess ddee ttiinncciióónn::
nnúúcclleeoo yy cciittooppllaassmmaa
AALLKK

55. Patrones ddee ttiinncciióónn:: ggrraannuullaarr
PPeerrffoorriinnaa

56. DDooss ppaattrroonneess ddee ttiinncciióónn
CCDD55

57. FFaallssoo ppoossiittiivvoo:: FFoonnddoo
CCDD2200

58. FFaallssoo ppoossiittiivvoo:: FFoonnddoo
IIggEE

59. FFaallssoo ppoossiittiivvoo:: ffoonnddoo
SS--110000

60. Falso positivo: eenn ccéélluullaass nnoorrmmaalleess
EEMMAA
Plasmaticas Células LH

61. Falso positivo: eenn ccéélluullaass nnoorrmmaalleess
CCDD1155
Células de
Hodgkin
PMN

62. Falsos nneeggaattiivvooss ppoorr ffiijjaacciióónn
CCDD1155
Formol B5

63. Falso nneeggaattiivvoo:: ccoonn ccoonnttrrooll iinntteerrnnoo
ccrroommooggrraanniinnaa

64. NNeeggaattiivvoo vveerrddaaddeerroo::
BBCCLL--22

65. AArrtteeffaaccttooss eenn IIHHQQ
Escamas
córneas
AE1/AE3
Burbujas de
aire