Dokumen tersebut menjelaskan tentang eksperimen isolasi pigmen pada tumbuhan menggunakan kromatografi kertas. Metode ini digunakan untuk mengetahui berat molekul pigmen dengan menghitung nilai faktor retensi setelah pigmen dipisahkan pada kertas. Peserta diminta melakukan eksperimen tersebut menggunakan ekstrak empat bahan alami dan mengisi tabel hasil serta menjawab beberapa pertanyaan.

1. OSN SD/IM Bidang IPA 2014 No. : __________________
Nama: __________________
1
Praktikum Biologi
Isolasi Pigmen Pada Tumbuhan
Warna pada tumbuhan (misalnya bunga dan daun) tersusun dari berbagai pigmen.
Setiap pigmen memiliki berat molekul yang berbeda. Kita dapat mengetahui berat molekul
pigmen tersebut dengan cara pemisahan zat warna (kromatografi). Salah satu metode
kromatografi sederhana ialah dengan menggunakan kertas. Perbedaan berat molekul dari
hasil pemisahan pigmen pada kertas dapat dihitung dengan menggunakan rumus nilai
faktor retensi (Rf) sebagai berikut:
Prinsip dari rumus tersebut adalah membandingkan panjangnya pigmen tumbuhan yang
merambat pada kertas dengan panjang pelarut yang merambat.
Di hadapan kalian terdapat empat jenis cairan berwarna (cairan A, B, C dan D) yang
diekstrak dari bahan alami. Cairan berwarna tersebut dapat tersusun dari satu atau lebih
pigmen. Masing-masing pigmen tersebut memiliki berat molekul yang berbeda. Buatlah
suatu eksperimen untuk mengetahui nilai faktor retensi pigmen dari masing-masing ekstrak
bahan alami yang disediakan.
Alat dan Bahan
1. Ekstrak bahan alami (A, B, C, dan D) di dalam empat (4) tabung reaksi
2. Satu tabung reaksi kosong
3. Bunga Kembang Sepatu Hibiscus rosa-sinensis L.
4. Alkohol 70 % dalam wadah plastik
5. Air
6. Lima kertas berbentuk pita
7. Baki
8. Gelas plastik
9. Pengaduk kayu (sumpit)
10. Penggaris
11. Gunting
12. Pensil
13. Kertas A4
14. Lem

2. OSN SD/IM Bidang IPA 2014 No. : __________________
Nama: __________________
2
Cara Kerja
1. Gunting kelopak bunga menjadi bagian-bagian yang sangat kecil sehingga mudah untuk
ditumbuk.
2. Masukkan hasil guntingan tersebut ke dalam gelas plastik, lalu geruslah dengan
pengaduk kayu (sumpit) hingga zat warnanya keluar.
3. Tuangkan sedikit alkohol ke dalam gelas tersebut.
4. Gerus dan aduk kembali.
5. Tuangkan cairan warna yang dihasilkan ke dalam tabung reaksi E kurang lebih
sebanyak cairan di ke empat tabung reaksi yang lain.
6. Buatlah tanda sejauh 2 cm dari ujung atas pada setiap kertas berbentuk pita, dan
lipatlah pada tanda tersebut, yang akan digunakan untuk mengaitkan kertas pada
tabung reaksi
7. Tuliskan juga huruf A, B, C, D dan E pada lipatan kertas tersebut
8. Masukkan ujung bagian bawah kertas tersebut ke dalam tabung reaksi sampai
mengenai larutan berwarna.
9. Kaitkan lipatan bagian atas ujung kertas ke tepi lubang tabung reaksi, sehingga kertas
tergantung di dalam tabung.
10. Perhatikan pergerakan larutan di kertas saring.
11. Angkatlah kertas saring saat larutan hampir mencapai lubang tabung reaksi.
12. Kertas saring dikeringkan dan dilekatkan pada kertas A4 dengan menggunakan lem..
13. Tandai batas cairan dan setiap pigmen yang terpisahkan dengan pensil
14. Ukur jarak perpindahan pigmen tersebut dan jarak perpindahan zat pelarutnya dari
bagian bawah kertas.
15. Hitunglah nilai faktor retensinya.
16. Isilah tabel hasil yang telah disediakan dan jawablah pertanyaan.

3. OSN SD/IM Bidang IPA 2014 No. : __________________
Nama: __________________
3
Tabel hasil pengamatan:
Bahan Jumlah warna yang
terurai
Warna dengan nilai Rf
Larutan Ekstrak A
Larutan Ekstrak B
Larutan Ekstrak C
Larutan Ekstrak D
Larutan Ekstrak E
Pertanyaan:
1. Buatlah tabel urutan warna hasil dari seluruh percobaan kalian berdasarkan berat
molekul nilai Rf masing-masing warna (dari yang paling ringan ke berat).

4. OSN SD/IM Bidang IPA 2014 No. : __________________
Nama: __________________
4
2. Tentukanlah pigmen yang memiliki berat molekul paling berat.
Pigmen yang memiliki berat paling besar adalah _______________
dengan nilai Rf ______________________________
Jelaskan mengapa kamu memilih warna tersebut yang mempunyai berat molekul
paling besar?
_______________________________________________________
_______________________________________________________
3. Apakah mungkin warna yang sama memiliki nilai Rf yang berbeda? __
Jelaskan, mengapa? _______________________________
_______________________________________________________
4. Tahukah kalian dibagian manakah dari sel tumbuhan pigmen tersebut disimpan?
__________________________________________________
5. Peristiwa apakah yang terjadi ketika air naik pada kertas pita? ________

5. OSN SD/IM Bidang IPA 2014 No. : __________________
Nama: __________________
5
Lembar Hasil Pengamatan
Lekatkan kelima kertas saring hasil penelitian kalian di bawah ini:
Cairan A Cairan B Cairan C Cairan D Cairan E