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0
RFU(Ex/Em=490/525nm)
未処理  処理済
1mM H2O2
0.1mM
H2O2
Control
RFU(Ex/Em=540/570nm)
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0
未処理  処理済
1mM
H2O2
100µM TBHP
Control
A B
RFU(Ex/Em=540/570nm)
40,000
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20,000
10,000
0
未処理  処理済
1mM
H2O2
100µM TBHP
Control
A B
12,000
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8,000
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4,000
2,000
0
RFU(Ex/Em=490/530nm)
Peroxynitrite Concentration ( µM )
0 5 10 15 20
SIN-1 Treatment Untreated Control
(A) 1時間 (B)16時間
Count
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Count
0200400600800
103 104 105 106 102 103 104 105 106
FITC FITC
Control
SIN-1
Control
SIN-1
Control pyocyanin, 0.1 mM Pyo/NAC
ROS
Superoxide
Bright
Field
Green
Filter
Orange
Filter
Control Pyo TBHP AMA
R1
R2
80
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60
50
40
30
20
10
0
ROS positive cell %
superoxide
positive cell %
®
®
キサンチン 青色
XOD
H2O2+尿酸 2O2-・
2O2
SOD
ReadiViewTM
SOD560
O2+H2O2
A. 色素と抗酸化物質を添加
B. フリーラジカル開始剤を添加
細胞膜透過
細胞膜透過
DCFH-DA
(非蛍光)
DCFH-DA
(非蛍光)
DCFH
(非蛍光)
細胞由来
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抗酸化物質
ROS
DCFH
(非蛍光)
DCF
(蛍光)
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開始剤
抗酸化物質
抗酸化物質
フリーラジカル
開始剤
18
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14
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10
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2
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Fluorecence(RFUs)
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Quercetin
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Quercetin(µM)
CAAUnits
20 200 2000
Colorimetric Assay Colorimetric Assay
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RFU
RFU
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RFU
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MDA ( µM )MDA ( µM )
Fluorometric Assay
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0.2
0.1
0.0
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・
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Br-Guanosine
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NO2-Guanine
NO2-Guanosine
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0
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B B
A
P
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492
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10
10
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100
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比活性(%)
100
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Single bands recovered from
protein ladder gel slices by our kit
Protein
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250
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50
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MW
kDa
①   ②   ③
希釈血液
血漿
単核球
顆粒球・赤血球
LymphoprepTM
LymphoprepTM
800×g 20分
20℃
100 µm100 µm100 µm100 µm
ScienCellResearchLaboratories
TM
®
Four Parameter Logistic (4-PL) Curve Fit10
0.01
0.1
1
OpticalDensity
APOL1 Concentration (ng/㎖)
0.1 1 10 20
R2
=0.9999
作用点公知  細胞増殖抑制 生物活性未知
作用機構研究ツール
アッセイコンセプト確認
陽性化合物
創薬リード化合物 / 構造展開
用途特許出願
など、幅広い利用法
18.4   29.7   51.9
酵素阻害
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1,200
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1,400
-1,500>
1,500
66 kd→
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18 kd→
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① Control IgG
② MYL2
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① ② ③
70 kd→
50 kd→
40 kd→
30 kd→
20 kd→ ←19 kd
IP
116 kd→
66 kd→
45 kd→
35 kd→
コスモバイオニュース No.133 (2017年9月)
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