SlideShare a Scribd company logo
1 of 26
ĐẠI HỌC QUỐC GIA HÀ NỘI
TRƯỜNG ĐẠI HỌC CÔNG NGHỆ
NINH VĂN QUYẾT
PH¸T HIÖN GI¸N TIÕP §éT BIÕN GEN EGFR
TRONG UNG TH¦ BIÓU M¤ TUYÕN CñA PHæI
B»NG Kü THUËT HãA M¤ MIÔN DÞCH
TÓM TẮT LUẬN VĂN THẠC SĨ CÔNG NGHỆ NANO SINH HỌC
HÀ NỘI - 2017
ĐẠI HỌC QUỐC GIA HÀ NỘI
TRƯỜNG ĐẠI HỌC CÔNG NGHỆ
NINH VĂN QUYẾT
PH¸T HIÖN GI¸N TIÕP §éT BIÕN GEN EGFR
TRONG UNG TH¦ BIÓU M¤ TUYÕN CñA PHæI
B»NG Kü THUËT HãA M¤ MIÔN DÞCH
Chuyên ngành: Công nghệ Nano Sinh học
Mã số: Chuyên ngành đào tạo thí điểm
TÓM TẮT LUẬN VĂN THẠC SĨ CÔNG NGHỆ NANO SINH HỌC
Cán bộ hướng dẫn: 1. TS. Trần Đăng Khoa
2. PGS.TS. Nguyễn Văn Hưng
HÀ NỘI - 2017
1
ĐẶT VẤN ĐỀ
Trong những năm gần đây, trên toàn thế giới, bệnh ung thư đã
vượt qua bệnh tim mạch để trở thành căn nguyên gây tử vong hàng
đầu với tỷ lệ mắc bệnh cao và độ tuổi mắc bệnh ngày càng giảm [1].
Với tốc độ phát triển dân số và sự gia tăng tuổi thọ như hiện nay thì
ước tính đến năm 2050, thế giới sẽ có thêm khoảng 27 triệu trường
hợp ung thư mới mắc và khoảng 17,5 triệu bệnh nhân tử vong mỗi
năm [1]; trong đó phải kể đến ung thư phổi (UTP), căn nguyên gây
tỷ lệ mắc và tử vong hàng đầu với thể ung thư biểu mô tuyến của
phổi chiếm đến 40% các trường hợp.
Việc phân tích tình trạng các gen đóng vai trò chủ chốt trong
quá trình phát sinh khối u giúp các bác sĩ lựa chọn pháp đồ điều trị
phù hợp nhất để nâng cao hiệu quả điều trị đích cho người bệnh. Qua
nhiều công trình nghiên cứu cũng như sự kiểm duyệt khắt khe của
các Tổ chức quản lý y dược uy tín trên thế giới (FDA-Hoa Kì,
EMEA-Liên Minh Châu Âu), liệu pháp điều trị trúng đích
(LPĐTTĐ) đã chứng tỏ hiệu quả rất tốt trong việc điều trị cho các
bệnh nhân ung thư biểu mô tuyến của phổi giai đoạn cuối: kích thước
các khối u giảm đáng kể, thời gian sống kéo dài hơn, chất lượng cuộc
sống được cải thiện, … Tuy nhiên, mức độ đáp ứng với thuốc điều trị
đích ở mỗi bệnh nhân phụ thuộc phần lớn vào tình trạng một số gen,
mà quan trọng nhất là gen EGFR. Việc xác định đột biến gen hay sự
tương tác protein bị đột biến có ý nghĩa rất lớn giúp bác sĩ lựa chọn
được phác đồ điều trị thích hợp để nâng cao hiệu quả điều trị đích
2
cho bệnh nhân. Tháng 6/2009, Cục Quản lý Thực phẩm và Dược
phẩm Hoa kỳ (FDA) chính thức đưa ra khuyến cáo: bệnh nhân trước
khi được chỉ định dùng thuốc ức chế EGFR cần phải được làm xét
nghiệm tình trạng gen.
Tại Việt Nam, số lượng bệnh nhân bệnh ung thư ngày càng
nhiều, nhu cầu sử dụng LPĐTTĐ ngày càng tăng, trên thị trường đã
có một số dược phẩm điều trị đích đang được lưu hành; tuy nhiên bệnh
nhân muốn sử dụng LPĐTTĐ cần phải được làm xét nghiệm đột biến
gen. Xuất phát từ thực tiễn đó, đề tài nghiên cứu “Phát hiện gián tiếp
đột biến gen EGFR trong ung thư biểu mô tuyến của phổi bằng kỹ
thuật hóa mô miễn dịch” được thực hiện với các mục tiêu sau:
1. Khảo sát kỹ thuật hóa mô miễn dịch xác định đột biến gen
EGFR.
2. Xác định tỷ lệ đột biến gen EGFR trong ung thư biểu mô tuyến
của phổi.
3
Chương 1
TỔNG QUAN TÀI LIỆU
1.1. Sơ lược về dịch tễ học ung thư phổi và các yếu tố nguy cơ
1.1.1. Dịch tễ học
 Thế giới
Kể từ năm 1985, UTP đã đứng đầu trong các bệnh lý ung thư
cả về tỉ lệ mắc và tử vong trên toàn cầu [10]. Tính tại thời điểm năm
2012, cả thế giới có khoảng 1,8 triệu ca UTP mới mắc (chiếm 12,9%
tổng số ca ung thư mới mắc), 1,59 triệu ca tử vong (chiếm 19,4%
tổng số ca tử vong do ung thư) [11]. Tại Hoa Kỳ, theo số liệu năm
2016 của American Cancer Society, số ca mắc mới UTP là 224390 ca
(chiếm khoảng 13% tổng số ca ung thư mới mắc), số ca tử vong do
UTP là 158080 ca. Cũng theo đó, tổng số ca tử vong do ung thư đại
tràng (49190 ca), vú (40890 ca), tiền liệt tuyến (26120 ca) chỉ chiếm
xấp xỉ gần 3/4 tổng số ca tử vong của UTP [1].
 Việt Nam
Ở Việt Nam, theo thống kê của Bộ Y tế, UTP đứng hàng thứ
hai về tỉ lệ tử vong của các loại ung thư hằng năm ở cả hai giới nam và
nữ. Mỗi năm cả nước có hơn 20000 bệnh nhân UTP mới được phát
hiện và có tới 17000 trường hợp tử vong. Riêng tại Bệnh viện Phổi
Trung ương, theo Lê Trung Thọ, tính đến năm 2012, số người mắc
bệnh này đến khám và điều trị đã lên tới 16677 người [13]. Theo số
liệu ghi nhân ung thư tại Hà Nội giai đoạn 2001 – 2004, ước tính hằng
năm có 17073 trường hợp mắc mới UTP, trong đó có 12958 nam và
4
4115 nữ và là ung thư đứng đầu ở nam giới [2]. Theo Phạm Duy Hiển
và cộng sự, nghiên cứu trên 1151 trường hợp UTP tại thành phố Hồ
Chí Minh, UTBMT chiếm tỉ lệ rất cao, lên tới 48,54% [14]. Theo
Phạm Nguyên Cường (2015), trong tổng số 258 trường hợp UTP có
67,1% là týp UTBMT, týp UTBM vảy chỉ chiếm 11,4%, các týp chiếm
tỉ lệ rất nhỏ [15].
1.2. Một số đặc điểm lâm sàng – cận lâm sàng của ung thư phổi
và ung thư biểu mô tuyến của phổi
1.2.1. Lâm sàng
 Biểu hiện hô hấp
 Biểu hiện toàn thân
- Biểu hiện di căn
hoàng đảm, đau xương…
1.2.2. Một số đặc điểm cận lâm sàng khác
1.2.2.1. Xquang thường quy (thẳng, nghiêng)
1.2.2.2. Chụp cắt lớp vi tính
1.2.2.3. Nội soi phế quản
1.3. Đặc điểm mô bệnh học ung thư biểu mô tuyến của phổi [3], [24]
1.3.1. Ung thư biểu mô tuyến xâm nhập thông thường
 Dạng phát triển Lepidic (Lepidic growth pattern)
Dạng phát triển chùm nang (Acinar growth pattern)
 Dạng phát triển nhú (Papillary growth pattern)
Dạng phát triển vi nhú (Micropapillary growth pattern)
 Dạng phát triển đặc (Solid growth pattern)
5
1.3.2. Các biến thể đặc biệt của ung thư biểu mô tuyến xâm nhập
 Ung thư biểu mô tuyến nhầy xâm nhập (Invasive mucinous
adenocarcinoma)
Ung thư biểu mô tuyến dạng keo (Colloid adenocarcinoma)
 Ung thư biểu mô tuyến týp ruột (Enteric adenocarcinoma)
 Ung thư biểu mô tuyến bào thai (Fetal adenocarcinoma)
1.3.3. Ung thư biểu mô tuyến tại chỗ (Adenocarcinoma in situ - AIS)
1.3.4. Ung thư biểu mô tuyến xâm nhập tối thiểu (Minimally
invasive adenocarcinoma - MIA)
1.4. Đột biến gen EGFR trên bệnh nhân ung thư biểu mô tuyến
của phổi
1.4.1. Đặc điểm phân tử EGFR
EGFR hay thụ thể yếu tố phát triển biểu bì, là một thành viên
thuộc nhóm thụ thể xuyên màng có hoạt tính tyrosine kinase gồm 4
loại: ERBB1/Her1/EGFR, ERBB/Her2, ERBB/Her3 và ERBB/Her4
[28]. EGFR là glycoprotein có trọng lượng phân tử khoảng 170 kDa,
xuất hiện ở một số mô có nguồn gốc biểu mô, trung mô và mô thần
kinh [29].
EGFR có cấu trúc gồm 3 phần: phần ngoại màng có khả năng
gắn đặc hiệu với ligand (EGF, TGFα…), phần xuyên màng và phần
nội màng. Phần nội màng bao gồm một vùng ngắn cạnh màng dài 38
axit amin và vùng tyrosine kinase chiếm khoảng 50% chiều dài vùng
nội màng và đuôi carboxyl tận cùng [30].
1.4.2. Đột biến gen EGFR trong ung thư biểu mô tuyến của phổi
Đột biến gen EGFR chủ yếu xảy ra ở người Đông Á, không
hút thuốc, phụ nữ [37]. Trong các týp MBH của UTP thì UTBMT có
tần suất mắc đột biến gen EGFR cao nhất. Các loại đột biến gen
6
EGFR chủ yếu gây ra sự phosphoryl hóa không phụ thuộc ligand của
phân tử EGFR, dẫn đến sự kích hoạt liên tục các trục tín hiệu
RAS/RAF, PI3K/AKT, STAT…Hậu quả là sự tăng sinh tế bào, ức
chế quá trình chết theo chương trình, tăng sinh mạch máu, thoát khỏi
kiểm soát miễn dịch của cơ thể đối với tế bào u.
1.5. Hóa mô miễn dịch
1.5.1. Kỹ thuật hóa mô miễn dịch
Hóa mô miễn dịch (HMMD) là sự kết hợp giữa mô học và
miễn dịch học nhằm xác định sự biểu hiện của một kháng nguyên
riêng biệt của một mô và tình trạng kháng nguyên khác nhau của các
tế bào trong cùng một mô, dựa vào tính chất đặc hiệu cao của các
kháng thể để xác định các kháng nguyên riêng biệt. Từ đó nhận dạng
đặc hiệu dòng các quần thể tế bào, xác định được các đặc tính sinh
học và chức năng các tế bào trong cùng một dòng.
1.5.2. Các nguyên lý của phương pháp hóa mô miễn dịch
HMMD là một kỹ thuật nhuộm đặc biệt, sử dụng kháng thể
(KT) đặc hiệu để xác đinh sự hiện diện của các kháng nguyên (KN)
tương ứng trên các lát cắt mô học hoặc trên các loại tế bào có trong
mô. Nguyên tắc là cho KT đặc hiệu lên mô, nếu trong mô có KN sẽ
có phản ứng kết hợp KN – KT. Khi phản ứng xảy ra sẽ cho kết hợp
với chất hiện màu và có thể nhìn thấy trên kính hiển vi quang học.
1.5.3. Yêu cầu kỹ thuật
Một chất được định vị trong mô trên HMMD phải có các tiêu
chuẩn sau:
- Chất đó đã được tinh chế sẵn dưới dạng kháng nguyên tương
đối thuần khiết (để sản xuất kháng thể đặc hiệu)
- Sự bảo toàn (ít nhất một phần) của chất kháng nguyên muốn
7
định vị trong quá trình thao tác kỹ thuật mô học và HMMD.
Khi cả hai điều trên được tôn trọng, kỹ thuật HMMD có thể
được thực hiện hiệu quả.
1.5.4. Phương pháp
- Vật liệu kháng nguyên (KN) có mặt trong một mô và đặc
biệt hơn trong một lát cắt mô phản ứng đặc hiệu với một kháng thể
(KT) chống lại nó. Phản ứng miễn dịch này gây một lắng đọng của một
KT đặc hiệu trên vùng mô có KN. Kháng thể này được gắn với một
enzym, ban đầu người ta gắn với phosphatase acid, nhưng sự kết hợp
này khó và không ổn định. Hiện nay người ta gắn với Peroxydase ổn
định hơn và có thể bảo quản lâu hơn ở 4 độ C.
Các bước tiến hành
- Chuẩn bị tiêu bản
- Chuẩn bị dung dịch Tris – Buffer – Saline (TBS)
- Phục hồi nhóm quyết định kháng nguyên (Epitop Retrieval
Techniques)
- Khử hoạt động men nội sinh
- Pha loãng kháng thể
- Nhuộm tiêu bản
Phương pháp nhuộm HMMD được thực hiện theo các bước:
1. Tiêu bản sau khi tẩy paraffin được nhúng nước cất 2 lần
x 5 phút
2. Khử peroxydase nội sinh bằng dung dịch H2O2 x 20 phút
3. Rửa tiêu bản bằng nước cất 2 lần x 2 phút
4. Bộc lộ kháng nguyên bằng protein K hoặc nồi áp suất, lò
vi sóng
5. Rửa nước cất 2 lần x 2 phút
8
6. Rửa tiêu bản bằng dung dịch TBS 2 lần x 2 phút
7. Phủ KT thứ nhất x 30 phút
8. Rửa tiêu bản TBS 2 lần x 5 phút
9. Phủ KT thứ hai x 30 phút
10. Rửa tiêu bản TBS 2 lần x 5 phút
11. Phủ dung dịch Diaminno Benzidine (DAB) x 1 phút
12. Rửa nước chảy x 5 phút
13. Nhuộm nhân bằng hematoxyline 1 phút
14. Khử nước, làm sạch tiêu bản rồi đọc kết quả trên kính hiển vi
quang học
Điều kiện đọc kết quả:
- Sử dụng kháng thể EGFR clone DAK – H1- WT là kháng
thể đơn dòng pha sẵn của hãng Dako
- Phải có chứng dương và âm trên tiêu bản
Đánh giá kết quả nhuộm EGFR trong UTBMT của Phổi theo Dako:
- 0(Âm tính): Không bắt màu trên màng bào tương hoặc bắt
màu trong bào tương
- 1+: Màng bào tương bắt màu nhạt <10% tế bào u, bắt màu
một phần màng bào tương
- 2+: Màng bào tương bắt màu trung bình >10% tế bào u, bắt
màu hoàn toàn hoặc một phần màng bào tương
- 3+: Màng bào tương bắt màu đậm >10% tế bào u, bắt màu
hoàn toàn màng bào tương tạo hình ảnh mạng lưới.
1.6. Một số phương pháp khác phát hiện đột biến gen EGFR
 PCR – RFLP
 Giải trình tự gen
 Kĩ thuật Scorpion ARMS
9
Chương 2
ĐỐI TƯỢNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU
2.1. Đối tượng nghiên cứu
2.1.1. Đối tượng
Bao gồm khoảng 120 bệnh nhân được chẩn đoán trên sinh
thiết là UTBMT nguyên phát của phổi, và được thực hiện xét nghiệm
hóa mô miễn dịch tìm đột biến gen EGFR, tại Trung tâm Giải phẫu
bệnh, Bệnh viện Bạch Mai, trong thời gian từ tháng 01/2015 đến
tháng 06/2017, thỏa mãn các tiêu chuẩn nghiên cứu.
2.1.2. Tiêu chuẩn lựa chọn
 Thỏa mãn tiêu chuẩn chẩn đoán UTBMT phổi nguyên phát
hoặc hướng tới UTBMT trên sinh thiết theo tiêu chuẩn và
hướng dẫn chẩn đoán của WHO năm 2014, không phân biệt
tuổi, giới.
 Được làm xét nghiệm tìm đột biến gen EGFR trên bệnh phẩm
sinh thiết.
 Các trường hợp hồi cứu còn đủ tiêu bản nhuộm HE, PAS, block
còn đủ bệnh phẩm đảm bảo cắt nhuộm, nhuộm thêm hóa mô
miễn dịch nếu cần.
2.1.3. Tiêu chuẩn loại trừ
 Mọi trường hợp không thỏa mãn bất kì một tiêu chuẩn lựa chọn nào
kể trên.
 Người bệnh có 2 ung thư.
 Người bệnh đã điều trị UTP ở nơi khác chuyển đến (hóa trị,
xạ trị, điều trị đích hoặc phối hợp).
 Vùng mô u trên sinh thiết quá ít hoặc hoại tử quá nhiều.
10
2.1.4. Địa điểm nghiên cứu
 Trung tâm Giải phẫu bệnh và Đơn vị Gen trị liệu Bệnh viện
Bạch Mai
2.1.5. Thời gian nghiên cứu: Nghiên cứu được thực hiện trong
khoảng thời gian từ tháng 01/2015 đến tháng 06/2017.
2.2. Phương pháp nghiên cứu
2.2.1. Thiết kế nghiên cứu: Nghiên cứu mô tả cắt ngang
2.2.2. Cỡ mẫu và chọn mẫu:
- Chọn mẫu không xác suất, loại mẫu mục đích dự kiến gồm
120 bệnh nhân hồi cứu, thỏa mãn tiêu chuẩn lựa chọn trong thời gian
nghiên cứu.
2.2.3. Biến số nghiên cứu
 Đặc điểm đối tượng nghiên cứu
 Thời gian phủ chất hiện màu DAB
 Đột biến gen EGFR
 Mối liên quan giữa mức độ biểu hiện đột biến gen EGFR trên
hóa mô miễn dịch và phương pháp PCR
2.2.4. Các bước tiến hành nghiên cứu
 Thu thập số liệu về tuổi, giới theo hồ sơ bệnh án.
 Thu thập các tiêu bản (nhuộm HE, PAS), block nến, tiến hành
định týp UTBMT và cắt nhuộm hóa mô miễn dịch xét nghiệm
tìm đột biến EGFR.
 Lấy 20 block dương tính cắt 20 tiêu bản, nhuộm hóa mô
miễn dịch với quy trình như trên, thay đổi thời gian phủ DAB
ở 1 phút và 3 phút. Mỗi khoảng thời gian ta nhuộm 10 tiêu
11
bản và đánh giá chất lượng tiêu bản.
 Lấy 30 block bệnh phẩm (EGFR dương tính 1+, 2+, 3+; mỗi
loại chọn ngẫu nhiên 10 blcok), khoanh vùng có nhiều tế bào
ung thư gửi đơn vị Gen trị liệu Bệnh viện Bạch Mai để làm
xét nghiệm tìm đột biến gen EGFR.
2.2.5. Xử lí số liệu
Các số liệu và kết quả thu thập được lưu trữ và xử lí trên máy
vi tính, sử dụng phần mềm excel để thống kê.
2.2.6. Khía cạnh đạo đức nghiên cứu
 Đề cương nghiên cứu đã được Hội đồng chấm đề cương luận
văn thạc sỹ trường Đại học Công Nghệ - Đại học Quốc gia
Hà Nội thông qua.
 Tất cả thông tin khai thác trên bệnh nhân và hồ sơ bệnh án
đều được giữ bí mật.
 Tất cả biến số, chỉ số đều được thu thập, tính toán trung thực và
khoa học.
 Nghiên cứu chỉ nhằm mục đích nâng cao chất lượng chẩn
đoán, điều trị, đánh giá tiên lượng bệnh, phục vụ công tác
chăm sóc sức khỏe nhân dân và nâng cao chất lượng cuộc
sống cho bệnh nhân.
12
Chương 3
KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU
120 bênh nhân ung thư biểu mô tuyến của phổi được nghiên
cứu và thực hiện xét nghiệm phát hiện đột biến gen EGFR với các kết
quả như sau
3.1. Phân bố bệnh theo tuổi và giới
Biểu đồ 3.1: Phân bố bệnh theo giới
Bảng 3.1: Phân bố bệnh theo nhóm tuổi và giới
Giới
Nhóm tuổi
Nam Nữ
n % n %
< 30 tuổi 0 0.00 0 0.00
30 – 39 tuổi 3 3.57 2 5.56
40 – 49 tuổi 10 11.90 5 13.89
50 – 59 tuổi 27 32.14 11 30.56
60 – 69 tuổi 26 30.95 14 38.89
> 70 tuổi 18 21.43 4 11.11
Tổng 84 100 36 100
Nam
Nữ
13
Nhận xét: Nhóm tuổi 50 – chiếm tỉ lệ cao nhất (32,14%), đứng
thứ hai là nhóm 60 – 69 với tỉ lệ 30,95%. Như vậy, hai nhóm tuổi này
chiếm tới 63,05%.
3.2. Chất lượng tiêu bản được phủ chất hiện màu ở thời gian 1
phút và 3 phút
Bảng 3.2: Chất lượng tiêu bản được nhuộm HMMD và phủ DaB
ở thời gian 1 phút và 3 phút
Thời gian
phủ DAB
Chất lượng tiêu bản
Phủ DAB 1 phút Phủ DAB 3 phút
Số ca Tỷ lệ % Số ca Tỷ lệ %
Tiêu bản đạt 10 100 08 80
Tiêu bản không đạt 0 0 2 20
Nhận xét: Trong 10 tiêu bản nhuộm hóa mô miễn dịch có thời
gian phủ DAB là 1 phút cho kết quả 100% số tiêu bản đạt chất lượng.
Còn với thời gian phủ DAB 3 phút thì có 20% số tiêu bản không đạt
chất lượng, tiêu bản bị nền và gấp bệnh phẩm.
Hình 3.1: Tiêu bản nhuộm lỗi, phủ DAB lâu bị nền
14
Hình 3.2: Tiêu bản nhuộm HMMD bị lỗi, tiêu bản bị gấp xước
3.3. Hóa mô miễn dịch đột biến gen EGFR
3.3.1. Bộc lộ dấu ấn EGFR
Bảng 3.3: Bộc lộc dấu ấn EGFR
Dấu ấn EGFR Số ca Tỉ lệ (%)
Dương tính 100 83.33
Âm tính 20 16.67
Tổng 120 100
Nhận xét: 100/120 trường hợp bộc lộ dấu ấn EGFR dương tính,
chiếm 83,33%; 20 trường hợp âm tính với EGFR (16,67%)
15
3.3.2. Bộc lộ dấu ấn EGFRđánh giá theo mức độ biểu hiện trên HMMD
Bảng 3.4: Bộc lộ dấu ấn EGFR đánh giá theo mức độ biểu hiện
trên HMMD
Cường độ
biểu hiện
Số ca
0+ 1+ 2+ 3+
Nam giới 15 27 34 8
Nữ giới 5 15 11 5
Tổng 20 42 45 13
Nhận xét: có 87/120 trường hợp dương tính 1+ và 2+ với dấu ấn
EGFR(72,50%); chỉ có 20 trường hợp âm tính với EGFR chiếm 24%.
3.4. Một số mối liên quan
3.4.1. Bộc lộ dấu ấn EGFR theo tuổi
Bảng 3.5: Bộc lộ dấu ấn EGFR theo tuổi
EGFR
Tuổi
Dương tính Âm tính
Số ca Tỷ lệ % Số ca Tỷ lệ %
<60 tuổi 51 87.93 7 12.06
≥60 tuổi 49 79.03 13 20.96
Tỷ lệ chung 100 83.33 20 16.67
Nhận xét: Trong số những bệnh nhân <60 tuổi có 51/58
trường hợp EGFR dương tính (87,93%) và 7/58 trường hợp âm tính
(12,06%). Với bệnh nhân ≥60 thì có 49/62 trường hợp dương tính
(79,03%) và 13/62 trường hợp âm tính (20,96%).
16
3.4.2. Bộc lộ dấu ấn EGFR theo giới
Bảng 3.6: Bộc lộ dấu ấn EGFR theo giới
EGFR
Giới
Dương tính Âm tính
Số ca Tỷ lệ % Số ca Tỷ lệ %
Nam 69 82.14 15 17.86
Nữ 31 86.11 5 13.39
Tỷ lệ chung 100 83.33 20 16.67
Nhận xét: Trong 84 trường hợp nam có 69/84 có EGFR
dương tính (82,14%) và 15/84 trường hợp âm tính (17,85%). Với nữ
giới là 31/36 trường hợp dương tính (86,11%) và 5/36 trường hợp âm
tính (13,89%).
3.5. Đối chiếu kết quả giữa hóa mô miễn dịch và phương pháp
PCR phát hiện đột biến gen EGFR trong UTBMT phổi
Bảng 3.7: kết quả giữa phương pháp HMMD và phương pháp
PCR trong phát hiện đột biến gen EGFR
HMMD
PCR
1+ 2+ 3+
Số ca Tỷ lệ
%
Số ca Tỷ lệ
%
Số ca Tỷ lệ
%
Dương tính 2 20 9 90 10 100
Âm tính 8 80 1 10 0 0
Nhận xét: Với mẫu bộc lộ dương tính 2+ và 3+ trên hóa mô
miễn dịch thì cũng phát hiện đột biến gen EGFR bằng phương pháp
PCR với tỷ lệ tương ứng là 90% và 100%.
17
Chương 4
BÀN LUẬN
Qua nghiên cứu 120 bệnh nhân ung thư biểu mô tuyến phổi
đến xét nghiệm tại Trung tâm Giải phẫu bệnh – Tế bào học Bệnh
viện Bạch Mai, chúng tôi nhận thấy:
4.1. Một số đặc điểm về giới và tuổi
Kết quả của chúng tôi cho thấy có 84/120 trường hợp bệnh
nhân là nam (70%), có 36/120 bệnh nhân nữ (30%). Tỷ lệ UTBMT
của nam so với nữ là 2,33/1. Về kết quả nghiên cứu của chúng tôi và
các tác giả khác đều nhận thấy nam giới có tỷ lệ mắc bệnh nhiều hơn
nữ giới. Khi so sánh kết quả này với các tác giả khác thì tỷ lệ nam/nữ
của chúng tôi khá tương đồng: Theo Burns D.M 1994 tỷ lệ nam/nữ là
3,2/1. Greenlee R.T, Murray T, Bolden và cộng sự 2000 tỷ lệ nam/nữ
là 2,53/1. Theo Nguyễn Tiến Tuân 2004 tỷ lệ nam/nữ là 2,75/1. Lê
Trung Thọ 2007 tỷ lệ nam/nữ 2,87/1. Như vậy, kết quả nghiên cứu
của chúng tôi phù hợp với xu hướng phụ nữ mắc UTBMT phổi ngày
càng cao trên thế giới.
Nghiên cứu đặc điểm tuổi của 120 bệnh nhân, chúng tôi thấy
tuổi mắc thấp nhất là 32 tuổi, tuổi mắc cao nhất là 80 tuổi, tuổi mắc
trung bình là 60 tuổi; nhóm tuổi có nhiều bệnh nhân UTBMT phổi
nhất là nhóm tuổi 60-69 (có 40 trường hợp, chiếm 33,33%), tiếp đến
là nhóm tuổi 50 -59 (có 38 trường hợp, chiếm 31,67%). Nhóm tuổi
<30 không có bệnh nhân nào. Tính chung nhóm tuổi trung niên và
tuổi già (trên 40 tuổi), tỷ lệ UTBMT phổi chiếm 95,94%. Kết quả
nghiên cứu của chúng tôi tương tự với kết quả nghiên cứu của một số
tác giả khác, như:
18
Nguyễn Tiến Tuân (2004) nghiên cứu 60 bệnh nhân UTBMT
phổi thấy độ tuổi có tỷ lệ mắc cao nhất là 51 -60 (chiếm 30,5%), lứa
tuổi >41 chiếm 91,66%
Theo Hoàng Đình Chân (1996), tỷ lệ UTBMT phổi phân bố
theo các nhóm như sau: 20 -40 tuổi chiếm 10,3%, nhóm tuổi 40 -60
chiếm 75,9%, lứa tuổi trên 60 chiếm 13,8%.
Nghiên cứu của Phùng Thị Phương Anh (1999) thì lứa tuổi
<40 chiếm 7,75%, 40 -60 tuổi chiếm 59,68% và lứa tuổi >60 chiếm
32,56%.
Theo Lê Trung Thọ (2002), phân bố UTBMT phổi như sau:
nhóm bệnh nhân <30 tuổi chiếm 0,35%, từ 30 - 40 tuổi chiếm 25,4%,
nhóm tuổi 41 -50 chiếm 25,8%, nhóm tuổi 51 -60 chiếm 24,82%, từ
61 – 70 tuổi chiếm 31,56% và nhóm tuổi >70 chiếm 8,86%
Đa số các tác giả đều ghi nhận UTBMT phổi mắc nhiều nhất ở
nhóm tuổi trung niên và người cao tuổi.
4.2. Thời gian phủ chất hiện màu ảnh hưởng đến chất lượng tiêu bản
Trong nghiên cứu của chúng tôi, tiến hành thử nghiệm với 02
mốc thời gian phủ chất hiện màu DAB là 01 phút và 03 phút, nhận
thấy tất cả các tiêu bản được phủ ở 1 phút đều đạt chất lượng, tiêu
bản không bị nền, bắt màu lan tỏa. Còn ở khoảng thời gian là 03 phút
thì chỉ có 80% tiêu bản đạt chất lượng và có thể đánh giá được. Từ đó
chúng tôi xây dựng được quy trình tối ưu cho kỹ thuật hóa mô miễn
dịch phát hiện đột biến gen EGFR với thời gian phủ chất hiện màu
khoảng 01 phút.
19
4.3. Bộc lộ EGFR
Ung thư phổi là một bệnh lý phổ biến có thể gây tử vong và là
nguyên nhân gây tử vong hàng đầu trong các ca tử vong do bệnh ung
thư trên toàn thế giới. Ở những bệnh nhân có bệnh khu trú và chưa di
căn qua hạch, phẫu thuật có thể mang lại tỷ lệ thời gian sống trong
khoảng thời gian 5 năm là 40%
Kể từ khi ghi nhận có sự biểu hiện và hoạt động quá mức
EGFR ở các khối u ở người và có liên quan đến hậu quả xấu trên lâm
sàng; các thuốc ức chế EGFR – Tyrosine Kinase (EGFR – TKI) đã
được phát triển và chứng minh hiệu quả điều trị ở những bệnh nhân
UTBM tế bào không nhỏ đã thất bại với hóa trị trước đó. Điều trị
đích phân tử tập trung chủ yếu vào các dấu ấn, con đường sinh học
của tế bào có liên quan đến bệnh sinh gây ung thư. Trong hầu hết các
trường hợp, bao gồm cả những bất thường phân tử liên quan đến
chuyển dạng ác tính, các thụ thể trên bề mặt tế bào, các protein hoặc
enzyme truyền tín hiệu, những enzyme liên quan đến phân bào, chết
theo chương trình, di cú, xâm nhập hoặc biến đổi DNA. Những điều
trị đích can thiệp vào những bước cụ thể liên quan đến sự hình thành
và duy trì bệnh lý ác tính. Với các cơ chế tác động đặc hiệu, điều trị
đích nhìn chung cải thiện được tình trạng dung nạp điều trị so với các
điều trị hóa chất hiện tại. Tiến bộ trong sinh học ung thư phổi dẫn
đến việc xác định các thụ thể yếu tố tăng trưởng biểu bì (EGFR) tín
hiệu dường như là một mục tiêu điều trị hàng đầu cho EGFR – TKI
bao gồm erlotinib và gefitinib. Đáp ứng EGFR – TKI được Fukuoka
M, Kris MG và CS báo cáo ở 10 -27% bệnh nhân ung thư phổi không
tế bào nhỏ sau thất bại với hóa trị liệu. Theo một số nghiên cứu trên
20
thế giới, tỷ lệ đáp ứng EGFR – TKI là 70 – 80% cho các khối u có
đột biến EGFR và 10% cho các khối u không có đột biến. Các nhóm
thuốc điều trị đích hiện nay được nghiên cứu hầu như đều có mục
đích chính là ngăn chặn dòng thác tín hiệu đường truyền vào trong tế
bào của EGFR. Hai nhóm thuốc chính hiện nay là: Kháng thể đơn
dòng ức chế EGFR ở phần ngoài màng tế bào, chất ức chế tiểu phân
tử tyrosine kinase EGFR. Việc nghiên cứu EGFR là để tiên lượng và
tìm ra phương pháp điều trị hiệu quả cho bệnh nhân.
Qua nghiên cứu 120 bệnh nhân UTBMT phổi, tỷ lệ dương tính
của EGFR là 83,335, tỷ lệ âm tính của EGFR là 16,67%. Kết quả
nghiên cứu của chúng tôi cho thấy tỷ lệ dương tính EGFR tương
đồng với một số tác giả:
Nghiên cứu của Trịnh Tuấn Dũng và CS (2011) trên 62
trường hợp UTPKTBN được xét nghiệm bằng hóa mô miễn dịch,
thấy tỷ lệ EGFR dương tính là 79,35%. Nghiên cứu của Hsu KH và
CS có tỷ lệ EGFR dương tính là 74,2%
Tuy nhiên kết quả nghiên cứu của chúng tôi cao hơn kết quả
nghiên cứu của nhiều tác giả khác:
- Kết quả nghiên cứu của Allan R. Li và cs (2008) cho thấy tỷ
lệ EGFR dương tính là 48%.
- Nghiên cứu của Ferenc Pinter (2008), tỷ lệ dương tính của
EGFR là 59%
- Lynette M. Sholl, Beow Y. Yeap, A.John Iafrate và cs
(2009), nghiên cứu trên 65 bệnh nhân UTBMt cho thấy tỷ lệ EGFR
dương tính là 29,2%.
21
- Nghiên cứu của Ferenc Pinter (2008), tỷ lệ dương tính của EGFR
là 59%
- Lynette M.Sholl, Beow Y. Yeap, A. John Iafrate và cs
(2009), nghiên cứu trên 65 bệnh nhân UTBMT cho thấy tỷ lệ EGFR
dương tính 29,2%
Có sự khác biệt về kết quả hóa mô miễn dịch với dấu ấn EGFR
ở một số nghiên cứu trong và ngoài nước so với kết quả nghiên cứu
của chúng tôi vì mấy lý do sau:
- Khác về sử dụng kháng thể kháng protein EGFR đột biến:
hiện trên thị trường có rất nhiều hang sản xuất kháng thể này, do vậy
độ nhạy của chúng không giống nhau.
- Mẫu mô làm xét nghiệm có trong tính trạng tốt hay không: có
được vùi ngay trong dung dịch cố định formol trung tính 10% không.
- Trong cùng một khối u phổi không phải ở mọi vùng mô u các
tế bào u cũng có đột biến giống nhau. Có nghĩa là có vùng tế bào u có
đột biến EGFR, có vùng lại không có đột biến này.
4.4 Liên quan giữa bộc lộ EGFR với các yếu tố
4.4.1. Liên quan giữa bộc lộ EGFR với tuổi
Theo nghiên cứu của chúng tôi thì nhóm bệnh nhân <60 tuổi
có 51/58 trường hợp EGFR dương tính (87,93%) và 7/58 trường hợp
âm tính (12,06%). Với bệnh nhân ≥60 thì có 49/62 trường hợp dương
tính (79,03%) và 13/62 trường hợp âm tính (20,96%).
Kết quả nghiên cứu của chúng tôi tương tự kết quả nghiên cứu
của Zhiyoung Liang và Cs (2010), tỷ lệ EGFR ở nhóm bệnh nhân
<60 tuổi là 68.3% và nhóm bệnh nhân ≥60 là 68.5%.
22
Nghiên cứu của IPASS ở châu Á cho thấy tỷ lệ đột biến EGFR
trong số bệnh nhân <65 tuổi là 56% và ≥65 tuổi là 68%
4.4.2. Liên quan giữa bộc lộ EGFR với giới
Nghiên cứu của chúng tôi thấy trong 84 trường hợp nam có
69/84 có EGFR dương tính (82,14%) và 15/84 trường hợp âm tính
(17,85%). Với nữ giới là 31/36 trường hợp dương tính (86,11%) và
5/36 trường hợp âm tính (13,89%).
Kết quả nghiên cứu của chúng tôi tương tự kết quả nghiên
cứu của Zhiyong Liang và CS (2010) nghiên cứu 133 trường hợp
UTBMT phổi cho thấy tỷ lệ dương tính EGFr ở nam và nữ lần lượt là
66.1% và 70.4%.
Kết quả nghiên cứu của chúng tôi khác với nghiên cứu của
Marius I Ilie và cs (2010), tỷ lệ dương tính ở nữ là 54,5% và ở
nam là 31.2%.
4.5. Đối chiếu kết quả giữa hóa mô miễn dịch và phương pháp
PCR phát hiện đột biến gen EGFR trong UTBMT phổi
Nghiên cứu của chúng tôi nhận thấy với mẫu bộc lộ dương tính
2+ và 3+ trên hóa mô miễn dịch thì cũng phát hiện đột biến gen
EGFR bằng phương pháp PCR với tỷ lệ tương ứng là 90% và 100%.
Độ nhạy và độ đặc hiệu của phương pháp nhuộm hóa mô miễn
dịch gen EGFR đặc hiệu E746 – A750 và L858R là khá cao và chỉ có
hai loại này của đột biến EGFR (hai loại chính chiếm hơn 90%) được
đánh giá bởi hóa mô miễn dịch còn các loại đột biến khác với tần số
thấp hơn có thẻ không được kiểm tra bằng hóa mô miễn dịch vì chưa
có kháng thể đột biến đặc hiệu (chưa sản xuất). Vì vậy nếu ung thư
23
phổi với đột biến EGFR qua kiểm tra âm tính nên tiếp tục làm them
phương pháp PCR. Tuy nhiên hóa mô miễn dịch là một phương pháp
sang lọc hữu ích đầu tay cho việc phát hiện EGFR đột biến có chứa
EGFR đột biến của E746 – A750 hoặc L858R có ý nghĩa cho việc
điều trị nhắm đích.
Thử nghiệm hóa mô miễn dịch có một số ưu điểm hơn so với kỹ
thuật phân tích DNA, chẳng hạn như có thể nghiên cứu mối liên quan
giữa đặc điểm hình thái tế bào u với hiện tượng đột biến gen, trong khi
đó không thể sử dụng kỹ thuật phân tích DNA cho toàn bộ mô u.
Tính không đồng nhất về đột biến EGFR trong mô u đã giải thích
hiện tượng tế bào u tránh được liệu pháp điều trị trúng đích EGFR
tyrosine kinase (TKI). Như vậy, một số tế bào u không bị đột biến
EGFR sẽ vẫn sống sót sau điều trị nên u tiếp tục phát triển trở lại.
Phương pháp hóa mô miễn dịch có thể thực hiện được ngay cả
khi mẫu mô rất nhỏ, thậm chí chỉ có vài tế bào u trong mảnh mô nhỏ
đó. Điều này không thể thực hiện được bằng kỹ thuật phân tích DNA.
Yêu cầu mẫu mô tối thiểu cho phân tích DNA theo kỹ thuật thong
dụng hiện nay là số lượng tế bào u so với tế bào lành có trong mẫu
sinh thiết cần đạt từ 30 – 50%. Nếu không đàm bảo điều này, kết quả
phân tích DNA dễ bị âm tính giả.
Hiện nay, kỹ thuật pyrosequencing được công nhận là kỹ thuật
phân tích DNA có độ nhạy và độ đặc hiệu cao nhất cũng cần số
lượng tế bào u từ 5 – 10%. Tuy nhiên, đây là kỹ thuật phức tạp, trang
thiết bị rất tốn kém nên thế giới mới chỉ có ít cơ sở có khả năng làm
được xét nghiệm này.
24
KẾT LUẬN
Qua nghiên cứu 120 bệnh nhân UTBMT phổi được thực hiện
xét nghiệm đột biến gen EGFR bằng kỹ thuật hóa mô miễn dịch tại
trung tâm Giải phẫu bệnh – Tế bào học Bệnh viện Bạch Mai, chúng
tôi rút ra một số kết luận sau:
1. Phân bố bệnh theo tuổi: nhóm tuổi từ 50 – 69 có tỷ lệ mắc
bệnh ung thư biểu mô tuyến của phổi cao nhất.
2. Tỷ lệ đột biến gen EGFR trong ung thư biểu mô tuyến của
phổi chiếm 83,335

More Related Content

What's hot

Tinh trang khang thuoc uc che tyrosine kinase o benh nhan ung thu phoi co dot...
Tinh trang khang thuoc uc che tyrosine kinase o benh nhan ung thu phoi co dot...Tinh trang khang thuoc uc che tyrosine kinase o benh nhan ung thu phoi co dot...
Tinh trang khang thuoc uc che tyrosine kinase o benh nhan ung thu phoi co dot...Luanvanyhoc.com-Zalo 0927.007.596
 
Danh gia ket qua dieu tri buoc mot ung thu phoi giai doan iv bangerlotinib
Danh gia ket qua dieu tri buoc mot ung thu phoi giai doan iv bangerlotinibDanh gia ket qua dieu tri buoc mot ung thu phoi giai doan iv bangerlotinib
Danh gia ket qua dieu tri buoc mot ung thu phoi giai doan iv bangerlotinibLuanvanyhoc.com-Zalo 0927.007.596
 
Shpt chẩn-đoán-bệnh-final
Shpt chẩn-đoán-bệnh-finalShpt chẩn-đoán-bệnh-final
Shpt chẩn-đoán-bệnh-finalNguyên Trần
 
Nghien cuu tac nhan vi khuan gay viem phoi tho may va gene khang thuoc bang k...
Nghien cuu tac nhan vi khuan gay viem phoi tho may va gene khang thuoc bang k...Nghien cuu tac nhan vi khuan gay viem phoi tho may va gene khang thuoc bang k...
Nghien cuu tac nhan vi khuan gay viem phoi tho may va gene khang thuoc bang k...Luanvanyhoc.com-Zalo 0927.007.596
 
Danh gia ket qua hoa tri vvinorelbine ket hop ttrastuzumab trong ung thu vu d...
Danh gia ket qua hoa tri vvinorelbine ket hop ttrastuzumab trong ung thu vu d...Danh gia ket qua hoa tri vvinorelbine ket hop ttrastuzumab trong ung thu vu d...
Danh gia ket qua hoa tri vvinorelbine ket hop ttrastuzumab trong ung thu vu d...Luanvanyhoc.com-Zalo 0927.007.596
 
Chuyên đề CÂY TRỒNG BIẾN ĐỔI GEN – XU HƯỚNG PHÁT TRIỂN TẠI VIỆT NAM VÀ TRÊN T...
Chuyên đề CÂY TRỒNG BIẾN ĐỔI GEN – XU HƯỚNG PHÁT TRIỂN TẠI VIỆT NAM VÀ TRÊN T...Chuyên đề CÂY TRỒNG BIẾN ĐỔI GEN – XU HƯỚNG PHÁT TRIỂN TẠI VIỆT NAM VÀ TRÊN T...
Chuyên đề CÂY TRỒNG BIẾN ĐỔI GEN – XU HƯỚNG PHÁT TRIỂN TẠI VIỆT NAM VÀ TRÊN T...hieupham236
 
Danh gia ket qua dieu tri phac dopemetrexed carboplatin tren benh nhanung thu...
Danh gia ket qua dieu tri phac dopemetrexed carboplatin tren benh nhanung thu...Danh gia ket qua dieu tri phac dopemetrexed carboplatin tren benh nhanung thu...
Danh gia ket qua dieu tri phac dopemetrexed carboplatin tren benh nhanung thu...Luanvanyhoc.com-Zalo 0927.007.596
 
Nghien cuu ung dung ky thuat sinh thiet u gan theo phuong phap tay tu do duoi...
Nghien cuu ung dung ky thuat sinh thiet u gan theo phuong phap tay tu do duoi...Nghien cuu ung dung ky thuat sinh thiet u gan theo phuong phap tay tu do duoi...
Nghien cuu ung dung ky thuat sinh thiet u gan theo phuong phap tay tu do duoi...Luanvanyhoc.com-Zalo 0927.007.596
 
Danh gia ket qua som dieu tri ung thu da day bang phau thuat noi soi va mo ta...
Danh gia ket qua som dieu tri ung thu da day bang phau thuat noi soi va mo ta...Danh gia ket qua som dieu tri ung thu da day bang phau thuat noi soi va mo ta...
Danh gia ket qua som dieu tri ung thu da day bang phau thuat noi soi va mo ta...quangthu90
 
2017. Nguyễn Thị Ngọc Lan. Nghiên cứu nhận dạng phân tử một số nguồn gen đậu ...
2017. Nguyễn Thị Ngọc Lan. Nghiên cứu nhận dạng phân tử một số nguồn gen đậu ...2017. Nguyễn Thị Ngọc Lan. Nghiên cứu nhận dạng phân tử một số nguồn gen đậu ...
2017. Nguyễn Thị Ngọc Lan. Nghiên cứu nhận dạng phân tử một số nguồn gen đậu ...FOODCROPS
 

What's hot (17)

Tinh trang khang thuoc uc che tyrosine kinase o benh nhan ung thu phoi co dot...
Tinh trang khang thuoc uc che tyrosine kinase o benh nhan ung thu phoi co dot...Tinh trang khang thuoc uc che tyrosine kinase o benh nhan ung thu phoi co dot...
Tinh trang khang thuoc uc che tyrosine kinase o benh nhan ung thu phoi co dot...
 
Danh gia ket qua dieu tri buoc mot ung thu phoi giai doan iv bangerlotinib
Danh gia ket qua dieu tri buoc mot ung thu phoi giai doan iv bangerlotinibDanh gia ket qua dieu tri buoc mot ung thu phoi giai doan iv bangerlotinib
Danh gia ket qua dieu tri buoc mot ung thu phoi giai doan iv bangerlotinib
 
1339502
13395021339502
1339502
 
Shpt chẩn-đoán-bệnh-final
Shpt chẩn-đoán-bệnh-finalShpt chẩn-đoán-bệnh-final
Shpt chẩn-đoán-bệnh-final
 
Nghien cuu tac nhan vi khuan gay viem phoi tho may va gene khang thuoc bang k...
Nghien cuu tac nhan vi khuan gay viem phoi tho may va gene khang thuoc bang k...Nghien cuu tac nhan vi khuan gay viem phoi tho may va gene khang thuoc bang k...
Nghien cuu tac nhan vi khuan gay viem phoi tho may va gene khang thuoc bang k...
 
Giáo trình công nghệ sinh học động vật
Giáo trình công nghệ sinh học động vậtGiáo trình công nghệ sinh học động vật
Giáo trình công nghệ sinh học động vật
 
Luận án: Tỷ lệ nhiễm và genotype của Human Papillomavirus, 9đ
Luận án: Tỷ lệ nhiễm và genotype của Human Papillomavirus, 9đLuận án: Tỷ lệ nhiễm và genotype của Human Papillomavirus, 9đ
Luận án: Tỷ lệ nhiễm và genotype của Human Papillomavirus, 9đ
 
T-vec
T-vec T-vec
T-vec
 
Tính đa hình của các gen TP53 và MDM2 ở bệnh nhân ung thư phổi
Tính đa hình của các gen TP53 và MDM2 ở bệnh nhân ung thư phổiTính đa hình của các gen TP53 và MDM2 ở bệnh nhân ung thư phổi
Tính đa hình của các gen TP53 và MDM2 ở bệnh nhân ung thư phổi
 
Luận án: Tác dụng kháng u sarcoma 180 của cốm cây sói rừng, HOT
Luận án: Tác dụng kháng u sarcoma 180 của cốm cây sói rừng, HOTLuận án: Tác dụng kháng u sarcoma 180 của cốm cây sói rừng, HOT
Luận án: Tác dụng kháng u sarcoma 180 của cốm cây sói rừng, HOT
 
Thực phẩm bd gen (1) (1)
Thực phẩm bd gen (1) (1)Thực phẩm bd gen (1) (1)
Thực phẩm bd gen (1) (1)
 
Danh gia ket qua hoa tri vvinorelbine ket hop ttrastuzumab trong ung thu vu d...
Danh gia ket qua hoa tri vvinorelbine ket hop ttrastuzumab trong ung thu vu d...Danh gia ket qua hoa tri vvinorelbine ket hop ttrastuzumab trong ung thu vu d...
Danh gia ket qua hoa tri vvinorelbine ket hop ttrastuzumab trong ung thu vu d...
 
Chuyên đề CÂY TRỒNG BIẾN ĐỔI GEN – XU HƯỚNG PHÁT TRIỂN TẠI VIỆT NAM VÀ TRÊN T...
Chuyên đề CÂY TRỒNG BIẾN ĐỔI GEN – XU HƯỚNG PHÁT TRIỂN TẠI VIỆT NAM VÀ TRÊN T...Chuyên đề CÂY TRỒNG BIẾN ĐỔI GEN – XU HƯỚNG PHÁT TRIỂN TẠI VIỆT NAM VÀ TRÊN T...
Chuyên đề CÂY TRỒNG BIẾN ĐỔI GEN – XU HƯỚNG PHÁT TRIỂN TẠI VIỆT NAM VÀ TRÊN T...
 
Danh gia ket qua dieu tri phac dopemetrexed carboplatin tren benh nhanung thu...
Danh gia ket qua dieu tri phac dopemetrexed carboplatin tren benh nhanung thu...Danh gia ket qua dieu tri phac dopemetrexed carboplatin tren benh nhanung thu...
Danh gia ket qua dieu tri phac dopemetrexed carboplatin tren benh nhanung thu...
 
Nghien cuu ung dung ky thuat sinh thiet u gan theo phuong phap tay tu do duoi...
Nghien cuu ung dung ky thuat sinh thiet u gan theo phuong phap tay tu do duoi...Nghien cuu ung dung ky thuat sinh thiet u gan theo phuong phap tay tu do duoi...
Nghien cuu ung dung ky thuat sinh thiet u gan theo phuong phap tay tu do duoi...
 
Danh gia ket qua som dieu tri ung thu da day bang phau thuat noi soi va mo ta...
Danh gia ket qua som dieu tri ung thu da day bang phau thuat noi soi va mo ta...Danh gia ket qua som dieu tri ung thu da day bang phau thuat noi soi va mo ta...
Danh gia ket qua som dieu tri ung thu da day bang phau thuat noi soi va mo ta...
 
2017. Nguyễn Thị Ngọc Lan. Nghiên cứu nhận dạng phân tử một số nguồn gen đậu ...
2017. Nguyễn Thị Ngọc Lan. Nghiên cứu nhận dạng phân tử một số nguồn gen đậu ...2017. Nguyễn Thị Ngọc Lan. Nghiên cứu nhận dạng phân tử một số nguồn gen đậu ...
2017. Nguyễn Thị Ngọc Lan. Nghiên cứu nhận dạng phân tử một số nguồn gen đậu ...
 

Similar to Phát hiện đột biến gen EGRF trong ung thư biểu mô tuyến của phổi

Nghiên cứu biến đổi số lượng bản sao ADN ti thể ung thư vú - Gửi miễn phí qua...
Nghiên cứu biến đổi số lượng bản sao ADN ti thể ung thư vú - Gửi miễn phí qua...Nghiên cứu biến đổi số lượng bản sao ADN ti thể ung thư vú - Gửi miễn phí qua...
Nghiên cứu biến đổi số lượng bản sao ADN ti thể ung thư vú - Gửi miễn phí qua...Dịch vụ viết bài trọn gói ZALO: 0909232620
 
Mo benh hoc va ket qua dieu tri ung thu bieu mo amidan tai benh vien k
Mo benh hoc va ket qua dieu tri ung thu bieu mo amidan tai benh vien kMo benh hoc va ket qua dieu tri ung thu bieu mo amidan tai benh vien k
Mo benh hoc va ket qua dieu tri ung thu bieu mo amidan tai benh vien kLuanvanyhoc.com-Zalo 0927.007.596
 
Nhận xét đặc điểm mô bệnh học và bộc lộ thụ thể yếu tố phát triển biểu bì tro...
Nhận xét đặc điểm mô bệnh học và bộc lộ thụ thể yếu tố phát triển biểu bì tro...Nhận xét đặc điểm mô bệnh học và bộc lộ thụ thể yếu tố phát triển biểu bì tro...
Nhận xét đặc điểm mô bệnh học và bộc lộ thụ thể yếu tố phát triển biểu bì tro...Luanvanyhoc.com-Zalo 0927.007.596
 
EHLBIO ImmuneCell Brochure Veitnam
EHLBIO ImmuneCell Brochure VeitnamEHLBIO ImmuneCell Brochure Veitnam
EHLBIO ImmuneCell Brochure VeitnamJuneCS
 
5. Bài BS. Huỳnh Thị Mỹ Huỳnh.pptx
5. Bài BS. Huỳnh Thị Mỹ Huỳnh.pptx5. Bài BS. Huỳnh Thị Mỹ Huỳnh.pptx
5. Bài BS. Huỳnh Thị Mỹ Huỳnh.pptxtNguynHong8
 
EM-VN-101321 Cập nhật RWD - trình tự điều trị tối ưu UTPKTBN với EGFR TKI.pptx
EM-VN-101321 Cập nhật RWD - trình tự điều trị tối ưu UTPKTBN với EGFR TKI.pptxEM-VN-101321 Cập nhật RWD - trình tự điều trị tối ưu UTPKTBN với EGFR TKI.pptx
EM-VN-101321 Cập nhật RWD - trình tự điều trị tối ưu UTPKTBN với EGFR TKI.pptxLunTrn50
 
Đề tài: Kết quả hóa trị bổ trợ phác đồ 4AC+4T kết hợp trastuzumab trên bệnh n...
Đề tài: Kết quả hóa trị bổ trợ phác đồ 4AC+4T kết hợp trastuzumab trên bệnh n...Đề tài: Kết quả hóa trị bổ trợ phác đồ 4AC+4T kết hợp trastuzumab trên bệnh n...
Đề tài: Kết quả hóa trị bổ trợ phác đồ 4AC+4T kết hợp trastuzumab trên bệnh n...Dịch vụ viết thuê Khóa Luận - ZALO 0932091562
 
Danh gia hieu qua dieu tri phac do gemcitabine carboplatin tren benh nhan ung...
Danh gia hieu qua dieu tri phac do gemcitabine carboplatin tren benh nhan ung...Danh gia hieu qua dieu tri phac do gemcitabine carboplatin tren benh nhan ung...
Danh gia hieu qua dieu tri phac do gemcitabine carboplatin tren benh nhan ung...Luanvanyhoc.com-Zalo 0927.007.596
 
Dieu tri hoa chat bo tro phac do 3fec 3d tren benh nhan ung thu vu
Dieu tri hoa chat bo tro phac do 3fec 3d tren benh nhan ung thu vuDieu tri hoa chat bo tro phac do 3fec 3d tren benh nhan ung thu vu
Dieu tri hoa chat bo tro phac do 3fec 3d tren benh nhan ung thu vuLuanvanyhoc.com-Zalo 0927.007.596
 
ĐÁNH GIÁ HIỆU QUẢ ĐIỀU TRỊ UNG THƯ BUỒNG TRỨNG TÁI PHÁT DI CĂN BẰNG LIPODOX
ĐÁNH GIÁ HIỆU QUẢ ĐIỀU TRỊ UNG THƯ BUỒNG TRỨNG TÁI PHÁT DI CĂN BẰNG LIPODOX ĐÁNH GIÁ HIỆU QUẢ ĐIỀU TRỊ UNG THƯ BUỒNG TRỨNG TÁI PHÁT DI CĂN BẰNG LIPODOX
ĐÁNH GIÁ HIỆU QUẢ ĐIỀU TRỊ UNG THƯ BUỒNG TRỨNG TÁI PHÁT DI CĂN BẰNG LIPODOX Luanvanyhoc.com-Zalo 0927.007.596
 
Xét nghiệm genexpert mtb/rif đờm trong chẩn đoán la phổi
Xét nghiệm genexpert mtb/rif đờm trong chẩn đoán la phổiXét nghiệm genexpert mtb/rif đờm trong chẩn đoán la phổi
Xét nghiệm genexpert mtb/rif đờm trong chẩn đoán la phổiThanhTNDoan
 
THỰC TRẠNG VI KHUẨN KHÁNG KHÁNG SINH TẠI MỘT SỐ BỆNH VIỆN Ở MIỀN BẮC VIỆT NAM
THỰC TRẠNG VI KHUẨN KHÁNG KHÁNG SINH TẠI MỘT SỐ BỆNH VIỆN Ở MIỀN BẮC VIỆT NAMTHỰC TRẠNG VI KHUẨN KHÁNG KHÁNG SINH TẠI MỘT SỐ BỆNH VIỆN Ở MIỀN BẮC VIỆT NAM
THỰC TRẠNG VI KHUẨN KHÁNG KHÁNG SINH TẠI MỘT SỐ BỆNH VIỆN Ở MIỀN BẮC VIỆT NAMtaimienphi
 

Similar to Phát hiện đột biến gen EGRF trong ung thư biểu mô tuyến của phổi (20)

Nghiên cứu biến đổi số lượng bản sao ADN ti thể ung thư vú - Gửi miễn phí qua...
Nghiên cứu biến đổi số lượng bản sao ADN ti thể ung thư vú - Gửi miễn phí qua...Nghiên cứu biến đổi số lượng bản sao ADN ti thể ung thư vú - Gửi miễn phí qua...
Nghiên cứu biến đổi số lượng bản sao ADN ti thể ung thư vú - Gửi miễn phí qua...
 
Đề tài: Xác định tính đa hình của các gen TP53 và gen MDM2 ở bệnh nhân ung th...
Đề tài: Xác định tính đa hình của các gen TP53 và gen MDM2 ở bệnh nhân ung th...Đề tài: Xác định tính đa hình của các gen TP53 và gen MDM2 ở bệnh nhân ung th...
Đề tài: Xác định tính đa hình của các gen TP53 và gen MDM2 ở bệnh nhân ung th...
 
Đề tài: Xác định đột biến gen EGFR quyết định tính đáp ứng thuốc trong điều t...
Đề tài: Xác định đột biến gen EGFR quyết định tính đáp ứng thuốc trong điều t...Đề tài: Xác định đột biến gen EGFR quyết định tính đáp ứng thuốc trong điều t...
Đề tài: Xác định đột biến gen EGFR quyết định tính đáp ứng thuốc trong điều t...
 
Mo benh hoc va ket qua dieu tri ung thu bieu mo amidan tai benh vien k
Mo benh hoc va ket qua dieu tri ung thu bieu mo amidan tai benh vien kMo benh hoc va ket qua dieu tri ung thu bieu mo amidan tai benh vien k
Mo benh hoc va ket qua dieu tri ung thu bieu mo amidan tai benh vien k
 
Benh phoi 2
Benh phoi 2Benh phoi 2
Benh phoi 2
 
Nhận xét đặc điểm mô bệnh học và bộc lộ thụ thể yếu tố phát triển biểu bì tro...
Nhận xét đặc điểm mô bệnh học và bộc lộ thụ thể yếu tố phát triển biểu bì tro...Nhận xét đặc điểm mô bệnh học và bộc lộ thụ thể yếu tố phát triển biểu bì tro...
Nhận xét đặc điểm mô bệnh học và bộc lộ thụ thể yếu tố phát triển biểu bì tro...
 
Proto-oncogene
Proto-oncogeneProto-oncogene
Proto-oncogene
 
EHLBIO ImmuneCell Brochure Veitnam
EHLBIO ImmuneCell Brochure VeitnamEHLBIO ImmuneCell Brochure Veitnam
EHLBIO ImmuneCell Brochure Veitnam
 
5. Bài BS. Huỳnh Thị Mỹ Huỳnh.pptx
5. Bài BS. Huỳnh Thị Mỹ Huỳnh.pptx5. Bài BS. Huỳnh Thị Mỹ Huỳnh.pptx
5. Bài BS. Huỳnh Thị Mỹ Huỳnh.pptx
 
EM-VN-101321 Cập nhật RWD - trình tự điều trị tối ưu UTPKTBN với EGFR TKI.pptx
EM-VN-101321 Cập nhật RWD - trình tự điều trị tối ưu UTPKTBN với EGFR TKI.pptxEM-VN-101321 Cập nhật RWD - trình tự điều trị tối ưu UTPKTBN với EGFR TKI.pptx
EM-VN-101321 Cập nhật RWD - trình tự điều trị tối ưu UTPKTBN với EGFR TKI.pptx
 
Luận án: Hóa trị bổ trợ phác đồ 4AC+4T trên bệnh nhân ung thư vú
Luận án: Hóa trị bổ trợ phác đồ 4AC+4T trên bệnh nhân ung thư vúLuận án: Hóa trị bổ trợ phác đồ 4AC+4T trên bệnh nhân ung thư vú
Luận án: Hóa trị bổ trợ phác đồ 4AC+4T trên bệnh nhân ung thư vú
 
Đề tài: Kết quả hóa trị bổ trợ phác đồ 4AC+4T kết hợp trastuzumab trên bệnh n...
Đề tài: Kết quả hóa trị bổ trợ phác đồ 4AC+4T kết hợp trastuzumab trên bệnh n...Đề tài: Kết quả hóa trị bổ trợ phác đồ 4AC+4T kết hợp trastuzumab trên bệnh n...
Đề tài: Kết quả hóa trị bổ trợ phác đồ 4AC+4T kết hợp trastuzumab trên bệnh n...
 
Danh gia hieu qua dieu tri phac do gemcitabine carboplatin tren benh nhan ung...
Danh gia hieu qua dieu tri phac do gemcitabine carboplatin tren benh nhan ung...Danh gia hieu qua dieu tri phac do gemcitabine carboplatin tren benh nhan ung...
Danh gia hieu qua dieu tri phac do gemcitabine carboplatin tren benh nhan ung...
 
Luận án: Tạo kháng thể đặc hiệu kháng nguyên ung thư tuyến tiền liệt
Luận án: Tạo kháng thể đặc hiệu kháng nguyên ung thư tuyến tiền liệtLuận án: Tạo kháng thể đặc hiệu kháng nguyên ung thư tuyến tiền liệt
Luận án: Tạo kháng thể đặc hiệu kháng nguyên ung thư tuyến tiền liệt
 
Dieu tri hoa chat bo tro phac do 3fec 3d tren benh nhan ung thu vu
Dieu tri hoa chat bo tro phac do 3fec 3d tren benh nhan ung thu vuDieu tri hoa chat bo tro phac do 3fec 3d tren benh nhan ung thu vu
Dieu tri hoa chat bo tro phac do 3fec 3d tren benh nhan ung thu vu
 
ĐÁNH GIÁ HIỆU QUẢ ĐIỀU TRỊ UNG THƯ BUỒNG TRỨNG TÁI PHÁT DI CĂN BẰNG LIPODOX
ĐÁNH GIÁ HIỆU QUẢ ĐIỀU TRỊ UNG THƯ BUỒNG TRỨNG TÁI PHÁT DI CĂN BẰNG LIPODOX ĐÁNH GIÁ HIỆU QUẢ ĐIỀU TRỊ UNG THƯ BUỒNG TRỨNG TÁI PHÁT DI CĂN BẰNG LIPODOX
ĐÁNH GIÁ HIỆU QUẢ ĐIỀU TRỊ UNG THƯ BUỒNG TRỨNG TÁI PHÁT DI CĂN BẰNG LIPODOX
 
Xét nghiệm genexpert mtb/rif đờm trong chẩn đoán la phổi
Xét nghiệm genexpert mtb/rif đờm trong chẩn đoán la phổiXét nghiệm genexpert mtb/rif đờm trong chẩn đoán la phổi
Xét nghiệm genexpert mtb/rif đờm trong chẩn đoán la phổi
 
Đề tài: Nghiên cứu tính an toàn và tác dụng kháng u sarcoma 180 của cốm cây s...
Đề tài: Nghiên cứu tính an toàn và tác dụng kháng u sarcoma 180 của cốm cây s...Đề tài: Nghiên cứu tính an toàn và tác dụng kháng u sarcoma 180 của cốm cây s...
Đề tài: Nghiên cứu tính an toàn và tác dụng kháng u sarcoma 180 của cốm cây s...
 
Đề tài: Xạ trị phối hợp với Cisplatin trong ung thư vòm mũi họng
Đề tài: Xạ trị phối hợp với Cisplatin trong ung thư vòm mũi họngĐề tài: Xạ trị phối hợp với Cisplatin trong ung thư vòm mũi họng
Đề tài: Xạ trị phối hợp với Cisplatin trong ung thư vòm mũi họng
 
THỰC TRẠNG VI KHUẨN KHÁNG KHÁNG SINH TẠI MỘT SỐ BỆNH VIỆN Ở MIỀN BẮC VIỆT NAM
THỰC TRẠNG VI KHUẨN KHÁNG KHÁNG SINH TẠI MỘT SỐ BỆNH VIỆN Ở MIỀN BẮC VIỆT NAMTHỰC TRẠNG VI KHUẨN KHÁNG KHÁNG SINH TẠI MỘT SỐ BỆNH VIỆN Ở MIỀN BẮC VIỆT NAM
THỰC TRẠNG VI KHUẨN KHÁNG KHÁNG SINH TẠI MỘT SỐ BỆNH VIỆN Ở MIỀN BẮC VIỆT NAM
 

More from Dịch vụ viết bài trọn gói ZALO 0917193864

Danh sách 200 đề tài luận văn thạc sĩ tài chính ngân hàng, từ sinh viên giỏi
Danh sách 200 đề tài luận văn thạc sĩ tài chính ngân hàng, từ sinh viên giỏiDanh sách 200 đề tài luận văn thạc sĩ tài chính ngân hàng, từ sinh viên giỏi
Danh sách 200 đề tài luận văn thạc sĩ tài chính ngân hàng, từ sinh viên giỏiDịch vụ viết bài trọn gói ZALO 0917193864
 

More from Dịch vụ viết bài trọn gói ZALO 0917193864 (20)

200 de tai khoa luạn tot nghiep nganh tam ly hoc
200 de tai khoa luạn tot nghiep nganh tam ly hoc200 de tai khoa luạn tot nghiep nganh tam ly hoc
200 de tai khoa luạn tot nghiep nganh tam ly hoc
 
Danh sách 200 đề tài luận văn tốt nghiệp ngành khách sạn,10 điểm
Danh sách 200 đề tài luận văn tốt nghiệp ngành khách sạn,10 điểmDanh sách 200 đề tài luận văn tốt nghiệp ngành khách sạn,10 điểm
Danh sách 200 đề tài luận văn tốt nghiệp ngành khách sạn,10 điểm
 
Danh sách 200 đề tài luận văn thạc sĩ ngân hàng, hay nhất
Danh sách 200 đề tài luận văn thạc sĩ ngân hàng, hay nhấtDanh sách 200 đề tài luận văn thạc sĩ ngân hàng, hay nhất
Danh sách 200 đề tài luận văn thạc sĩ ngân hàng, hay nhất
 
Danh sách 200 đề tài luận văn thạc sĩ ngữ văn, hay nhất
Danh sách 200 đề tài luận văn thạc sĩ ngữ văn, hay nhấtDanh sách 200 đề tài luận văn thạc sĩ ngữ văn, hay nhất
Danh sách 200 đề tài luận văn thạc sĩ ngữ văn, hay nhất
 
Danh sách 200 đề tài luận văn thạc sĩ ô tô, 10 điểm
Danh sách 200 đề tài luận văn thạc sĩ ô tô, 10 điểmDanh sách 200 đề tài luận văn thạc sĩ ô tô, 10 điểm
Danh sách 200 đề tài luận văn thạc sĩ ô tô, 10 điểm
 
Danh sách 200 đề tài luận văn thạc sĩ quản lý giáo dục mầm non, mới nhất
Danh sách 200 đề tài luận văn thạc sĩ quản lý giáo dục mầm non, mới nhấtDanh sách 200 đề tài luận văn thạc sĩ quản lý giáo dục mầm non, mới nhất
Danh sách 200 đề tài luận văn thạc sĩ quản lý giáo dục mầm non, mới nhất
 
Danh sách 200 đề tài luận văn thạc sĩ quản trị rủi ro, hay nhất
Danh sách 200 đề tài luận văn thạc sĩ quản trị rủi ro, hay nhấtDanh sách 200 đề tài luận văn thạc sĩ quản trị rủi ro, hay nhất
Danh sách 200 đề tài luận văn thạc sĩ quản trị rủi ro, hay nhất
 
Danh sách 200 đề tài luận văn thạc sĩ tài chính ngân hàng, từ sinh viên giỏi
Danh sách 200 đề tài luận văn thạc sĩ tài chính ngân hàng, từ sinh viên giỏiDanh sách 200 đề tài luận văn thạc sĩ tài chính ngân hàng, từ sinh viên giỏi
Danh sách 200 đề tài luận văn thạc sĩ tài chính ngân hàng, từ sinh viên giỏi
 
Danh sách 200 đề tài luận văn thạc sĩ tiêm chủng mở rộng, 10 điểm
Danh sách 200 đề tài luận văn thạc sĩ tiêm chủng mở rộng, 10 điểmDanh sách 200 đề tài luận văn thạc sĩ tiêm chủng mở rộng, 10 điểm
Danh sách 200 đề tài luận văn thạc sĩ tiêm chủng mở rộng, 10 điểm
 
danh sach 200 de tai luan van thac si ve rac nhua
danh sach 200 de tai luan van thac si ve rac nhuadanh sach 200 de tai luan van thac si ve rac nhua
danh sach 200 de tai luan van thac si ve rac nhua
 
Kinh Nghiệm Chọn 200 Đề Tài Tiểu Luận Chuyên Viên Chính Trị Hay Nhất
Kinh Nghiệm Chọn 200 Đề Tài Tiểu Luận Chuyên Viên Chính Trị Hay NhấtKinh Nghiệm Chọn 200 Đề Tài Tiểu Luận Chuyên Viên Chính Trị Hay Nhất
Kinh Nghiệm Chọn 200 Đề Tài Tiểu Luận Chuyên Viên Chính Trị Hay Nhất
 
Kho 200 Đề Tài Bài Luận Văn Tốt Nghiệp Ngành Kế Toán, 9 điểm
Kho 200 Đề Tài Bài Luận Văn Tốt Nghiệp Ngành Kế Toán, 9 điểmKho 200 Đề Tài Bài Luận Văn Tốt Nghiệp Ngành Kế Toán, 9 điểm
Kho 200 Đề Tài Bài Luận Văn Tốt Nghiệp Ngành Kế Toán, 9 điểm
 
Kho 200 Đề Tài Luận Văn Ngành Thủy Sản, từ các trường đại học
Kho 200 Đề Tài Luận Văn Ngành Thủy Sản, từ các trường đại họcKho 200 Đề Tài Luận Văn Ngành Thủy Sản, từ các trường đại học
Kho 200 Đề Tài Luận Văn Ngành Thủy Sản, từ các trường đại học
 
Kho 200 đề tài luận văn ngành thương mại điện tử
Kho 200 đề tài luận văn ngành thương mại điện tửKho 200 đề tài luận văn ngành thương mại điện tử
Kho 200 đề tài luận văn ngành thương mại điện tử
 
Kho 200 đề tài luận văn tốt nghiệp ngành điện tử viễn thông, 9 điểm
Kho 200 đề tài luận văn tốt nghiệp ngành điện tử viễn thông, 9 điểmKho 200 đề tài luận văn tốt nghiệp ngành điện tử viễn thông, 9 điểm
Kho 200 đề tài luận văn tốt nghiệp ngành điện tử viễn thông, 9 điểm
 
Kho 200 Đề Tài Luận Văn Tốt Nghiệp Ngành Giáo Dục Tiểu Học
Kho 200 Đề Tài Luận Văn Tốt Nghiệp Ngành Giáo Dục Tiểu HọcKho 200 Đề Tài Luận Văn Tốt Nghiệp Ngành Giáo Dục Tiểu Học
Kho 200 Đề Tài Luận Văn Tốt Nghiệp Ngành Giáo Dục Tiểu Học
 
Kho 200 đề tài luận văn tốt nghiệp ngành luật, hay nhất
Kho 200 đề tài luận văn tốt nghiệp ngành luật, hay nhấtKho 200 đề tài luận văn tốt nghiệp ngành luật, hay nhất
Kho 200 đề tài luận văn tốt nghiệp ngành luật, hay nhất
 
Kho 200 đề tài luận văn tốt nghiệp ngành quản trị văn phòng, 9 điểm
Kho 200 đề tài luận văn tốt nghiệp ngành quản trị văn phòng, 9 điểmKho 200 đề tài luận văn tốt nghiệp ngành quản trị văn phòng, 9 điểm
Kho 200 đề tài luận văn tốt nghiệp ngành quản trị văn phòng, 9 điểm
 
Kho 200 Đề Tài Luận Văn Tốt Nghiệp Ngành Sư Phạm Tin Học
Kho 200 Đề Tài Luận Văn Tốt Nghiệp Ngành Sư Phạm Tin HọcKho 200 Đề Tài Luận Văn Tốt Nghiệp Ngành Sư Phạm Tin Học
Kho 200 Đề Tài Luận Văn Tốt Nghiệp Ngành Sư Phạm Tin Học
 
Kho 200 Đề Tài Luận Văn Tốt Nghiệp Ngành Xuất Nhập Khẩu
Kho 200 Đề Tài Luận Văn Tốt Nghiệp Ngành Xuất Nhập KhẩuKho 200 Đề Tài Luận Văn Tốt Nghiệp Ngành Xuất Nhập Khẩu
Kho 200 Đề Tài Luận Văn Tốt Nghiệp Ngành Xuất Nhập Khẩu
 

Recently uploaded

PHƯƠNG THỨC VẬN TẢI ĐƯỜNG SẮT TRONG VẬN TẢI
PHƯƠNG THỨC VẬN TẢI ĐƯỜNG SẮT TRONG VẬN TẢIPHƯƠNG THỨC VẬN TẢI ĐƯỜNG SẮT TRONG VẬN TẢI
PHƯƠNG THỨC VẬN TẢI ĐƯỜNG SẮT TRONG VẬN TẢImyvh40253
 
kinh tế chính trị mác lênin chương hai và hàng hoá và sxxhh
kinh tế chính trị mác lênin chương hai và hàng hoá và sxxhhkinh tế chính trị mác lênin chương hai và hàng hoá và sxxhh
kinh tế chính trị mác lênin chương hai và hàng hoá và sxxhhdtlnnm
 
Các điều kiện bảo hiểm trong bảo hiểm hàng hoá
Các điều kiện bảo hiểm trong bảo hiểm hàng hoáCác điều kiện bảo hiểm trong bảo hiểm hàng hoá
Các điều kiện bảo hiểm trong bảo hiểm hàng hoámyvh40253
 
Danh sách sinh viên tốt nghiệp Đại học - Cao đẳng Trường Đại học Phú Yên năm ...
Danh sách sinh viên tốt nghiệp Đại học - Cao đẳng Trường Đại học Phú Yên năm ...Danh sách sinh viên tốt nghiệp Đại học - Cao đẳng Trường Đại học Phú Yên năm ...
Danh sách sinh viên tốt nghiệp Đại học - Cao đẳng Trường Đại học Phú Yên năm ...hoangtuansinh1
 
GIÁO TRÌNH KHỐI NGUỒN CÁC LOẠI - ĐIỆN LẠNH BÁCH KHOA HÀ NỘI
GIÁO TRÌNH  KHỐI NGUỒN CÁC LOẠI - ĐIỆN LẠNH BÁCH KHOA HÀ NỘIGIÁO TRÌNH  KHỐI NGUỒN CÁC LOẠI - ĐIỆN LẠNH BÁCH KHOA HÀ NỘI
GIÁO TRÌNH KHỐI NGUỒN CÁC LOẠI - ĐIỆN LẠNH BÁCH KHOA HÀ NỘIĐiện Lạnh Bách Khoa Hà Nội
 
Giới thiệu Dự án Sản Phụ Khoa - Y Học Cộng Đồng
Giới thiệu Dự án Sản Phụ Khoa - Y Học Cộng ĐồngGiới thiệu Dự án Sản Phụ Khoa - Y Học Cộng Đồng
Giới thiệu Dự án Sản Phụ Khoa - Y Học Cộng ĐồngYhoccongdong.com
 
TÀI LIỆU BỒI DƯỠNG HỌC SINH GIỎI KỸ NĂNG VIẾT ĐOẠN VĂN NGHỊ LUẬN XÃ HỘI 200 C...
TÀI LIỆU BỒI DƯỠNG HỌC SINH GIỎI KỸ NĂNG VIẾT ĐOẠN VĂN NGHỊ LUẬN XÃ HỘI 200 C...TÀI LIỆU BỒI DƯỠNG HỌC SINH GIỎI KỸ NĂNG VIẾT ĐOẠN VĂN NGHỊ LUẬN XÃ HỘI 200 C...
TÀI LIỆU BỒI DƯỠNG HỌC SINH GIỎI KỸ NĂNG VIẾT ĐOẠN VĂN NGHỊ LUẬN XÃ HỘI 200 C...Nguyen Thanh Tu Collection
 
GNHH và KBHQ - giao nhận hàng hoá và khai báo hải quan
GNHH và KBHQ - giao nhận hàng hoá và khai báo hải quanGNHH và KBHQ - giao nhận hàng hoá và khai báo hải quan
GNHH và KBHQ - giao nhận hàng hoá và khai báo hải quanmyvh40253
 
SLIDE - Tu van, huong dan cong tac tuyen sinh-2024 (đầy đủ chi tiết).pdf
SLIDE - Tu van, huong dan cong tac tuyen sinh-2024 (đầy đủ chi tiết).pdfSLIDE - Tu van, huong dan cong tac tuyen sinh-2024 (đầy đủ chi tiết).pdf
SLIDE - Tu van, huong dan cong tac tuyen sinh-2024 (đầy đủ chi tiết).pdfhoangtuansinh1
 
30 ĐỀ PHÁT TRIỂN THEO CẤU TRÚC ĐỀ MINH HỌA BGD NGÀY 22-3-2024 KỲ THI TỐT NGHI...
30 ĐỀ PHÁT TRIỂN THEO CẤU TRÚC ĐỀ MINH HỌA BGD NGÀY 22-3-2024 KỲ THI TỐT NGHI...30 ĐỀ PHÁT TRIỂN THEO CẤU TRÚC ĐỀ MINH HỌA BGD NGÀY 22-3-2024 KỲ THI TỐT NGHI...
30 ĐỀ PHÁT TRIỂN THEO CẤU TRÚC ĐỀ MINH HỌA BGD NGÀY 22-3-2024 KỲ THI TỐT NGHI...Nguyen Thanh Tu Collection
 
Đề cương môn giải phẫu......................
Đề cương môn giải phẫu......................Đề cương môn giải phẫu......................
Đề cương môn giải phẫu......................TrnHoa46
 
Kiểm tra cuối học kì 1 sinh học 12 đề tham khảo
Kiểm tra cuối học kì 1 sinh học 12 đề tham khảoKiểm tra cuối học kì 1 sinh học 12 đề tham khảo
Kiểm tra cuối học kì 1 sinh học 12 đề tham khảohoanhv296
 
TÀI LIỆU BỒI DƯỠNG HỌC SINH GIỎI LÝ LUẬN VĂN HỌC NĂM HỌC 2023-2024 - MÔN NGỮ ...
TÀI LIỆU BỒI DƯỠNG HỌC SINH GIỎI LÝ LUẬN VĂN HỌC NĂM HỌC 2023-2024 - MÔN NGỮ ...TÀI LIỆU BỒI DƯỠNG HỌC SINH GIỎI LÝ LUẬN VĂN HỌC NĂM HỌC 2023-2024 - MÔN NGỮ ...
TÀI LIỆU BỒI DƯỠNG HỌC SINH GIỎI LÝ LUẬN VĂN HỌC NĂM HỌC 2023-2024 - MÔN NGỮ ...Nguyen Thanh Tu Collection
 
BỘ LUYỆN NGHE VÀO 10 TIẾNG ANH DẠNG TRẮC NGHIỆM 4 CÂU TRẢ LỜI - CÓ FILE NGHE.pdf
BỘ LUYỆN NGHE VÀO 10 TIẾNG ANH DẠNG TRẮC NGHIỆM 4 CÂU TRẢ LỜI - CÓ FILE NGHE.pdfBỘ LUYỆN NGHE VÀO 10 TIẾNG ANH DẠNG TRẮC NGHIỆM 4 CÂU TRẢ LỜI - CÓ FILE NGHE.pdf
BỘ LUYỆN NGHE VÀO 10 TIẾNG ANH DẠNG TRẮC NGHIỆM 4 CÂU TRẢ LỜI - CÓ FILE NGHE.pdfNguyen Thanh Tu Collection
 
30 ĐỀ PHÁT TRIỂN THEO CẤU TRÚC ĐỀ MINH HỌA BGD NGÀY 22-3-2024 KỲ THI TỐT NGHI...
30 ĐỀ PHÁT TRIỂN THEO CẤU TRÚC ĐỀ MINH HỌA BGD NGÀY 22-3-2024 KỲ THI TỐT NGHI...30 ĐỀ PHÁT TRIỂN THEO CẤU TRÚC ĐỀ MINH HỌA BGD NGÀY 22-3-2024 KỲ THI TỐT NGHI...
30 ĐỀ PHÁT TRIỂN THEO CẤU TRÚC ĐỀ MINH HỌA BGD NGÀY 22-3-2024 KỲ THI TỐT NGHI...Nguyen Thanh Tu Collection
 
SÁNG KIẾN ÁP DỤNG CLT (COMMUNICATIVE LANGUAGE TEACHING) VÀO QUÁ TRÌNH DẠY - H...
SÁNG KIẾN ÁP DỤNG CLT (COMMUNICATIVE LANGUAGE TEACHING) VÀO QUÁ TRÌNH DẠY - H...SÁNG KIẾN ÁP DỤNG CLT (COMMUNICATIVE LANGUAGE TEACHING) VÀO QUÁ TRÌNH DẠY - H...
SÁNG KIẾN ÁP DỤNG CLT (COMMUNICATIVE LANGUAGE TEACHING) VÀO QUÁ TRÌNH DẠY - H...Nguyen Thanh Tu Collection
 
ĐỀ CHÍNH THỨC KỲ THI TUYỂN SINH VÀO LỚP 10 THPT CÁC TỈNH THÀNH NĂM HỌC 2020 –...
ĐỀ CHÍNH THỨC KỲ THI TUYỂN SINH VÀO LỚP 10 THPT CÁC TỈNH THÀNH NĂM HỌC 2020 –...ĐỀ CHÍNH THỨC KỲ THI TUYỂN SINH VÀO LỚP 10 THPT CÁC TỈNH THÀNH NĂM HỌC 2020 –...
ĐỀ CHÍNH THỨC KỲ THI TUYỂN SINH VÀO LỚP 10 THPT CÁC TỈNH THÀNH NĂM HỌC 2020 –...Nguyen Thanh Tu Collection
 
Campbell _2011_ - Sinh học - Tế bào - Ref.pdf
Campbell _2011_ - Sinh học - Tế bào - Ref.pdfCampbell _2011_ - Sinh học - Tế bào - Ref.pdf
Campbell _2011_ - Sinh học - Tế bào - Ref.pdfTrnHoa46
 
cac-cau-noi-tthcm.pdf-cac-cau-noi-tthcm-
cac-cau-noi-tthcm.pdf-cac-cau-noi-tthcm-cac-cau-noi-tthcm.pdf-cac-cau-noi-tthcm-
cac-cau-noi-tthcm.pdf-cac-cau-noi-tthcm-KhnhHuyn546843
 

Recently uploaded (20)

PHƯƠNG THỨC VẬN TẢI ĐƯỜNG SẮT TRONG VẬN TẢI
PHƯƠNG THỨC VẬN TẢI ĐƯỜNG SẮT TRONG VẬN TẢIPHƯƠNG THỨC VẬN TẢI ĐƯỜNG SẮT TRONG VẬN TẢI
PHƯƠNG THỨC VẬN TẢI ĐƯỜNG SẮT TRONG VẬN TẢI
 
kinh tế chính trị mác lênin chương hai và hàng hoá và sxxhh
kinh tế chính trị mác lênin chương hai và hàng hoá và sxxhhkinh tế chính trị mác lênin chương hai và hàng hoá và sxxhh
kinh tế chính trị mác lênin chương hai và hàng hoá và sxxhh
 
Các điều kiện bảo hiểm trong bảo hiểm hàng hoá
Các điều kiện bảo hiểm trong bảo hiểm hàng hoáCác điều kiện bảo hiểm trong bảo hiểm hàng hoá
Các điều kiện bảo hiểm trong bảo hiểm hàng hoá
 
Danh sách sinh viên tốt nghiệp Đại học - Cao đẳng Trường Đại học Phú Yên năm ...
Danh sách sinh viên tốt nghiệp Đại học - Cao đẳng Trường Đại học Phú Yên năm ...Danh sách sinh viên tốt nghiệp Đại học - Cao đẳng Trường Đại học Phú Yên năm ...
Danh sách sinh viên tốt nghiệp Đại học - Cao đẳng Trường Đại học Phú Yên năm ...
 
GIÁO TRÌNH KHỐI NGUỒN CÁC LOẠI - ĐIỆN LẠNH BÁCH KHOA HÀ NỘI
GIÁO TRÌNH  KHỐI NGUỒN CÁC LOẠI - ĐIỆN LẠNH BÁCH KHOA HÀ NỘIGIÁO TRÌNH  KHỐI NGUỒN CÁC LOẠI - ĐIỆN LẠNH BÁCH KHOA HÀ NỘI
GIÁO TRÌNH KHỐI NGUỒN CÁC LOẠI - ĐIỆN LẠNH BÁCH KHOA HÀ NỘI
 
Giới thiệu Dự án Sản Phụ Khoa - Y Học Cộng Đồng
Giới thiệu Dự án Sản Phụ Khoa - Y Học Cộng ĐồngGiới thiệu Dự án Sản Phụ Khoa - Y Học Cộng Đồng
Giới thiệu Dự án Sản Phụ Khoa - Y Học Cộng Đồng
 
TÀI LIỆU BỒI DƯỠNG HỌC SINH GIỎI KỸ NĂNG VIẾT ĐOẠN VĂN NGHỊ LUẬN XÃ HỘI 200 C...
TÀI LIỆU BỒI DƯỠNG HỌC SINH GIỎI KỸ NĂNG VIẾT ĐOẠN VĂN NGHỊ LUẬN XÃ HỘI 200 C...TÀI LIỆU BỒI DƯỠNG HỌC SINH GIỎI KỸ NĂNG VIẾT ĐOẠN VĂN NGHỊ LUẬN XÃ HỘI 200 C...
TÀI LIỆU BỒI DƯỠNG HỌC SINH GIỎI KỸ NĂNG VIẾT ĐOẠN VĂN NGHỊ LUẬN XÃ HỘI 200 C...
 
GNHH và KBHQ - giao nhận hàng hoá và khai báo hải quan
GNHH và KBHQ - giao nhận hàng hoá và khai báo hải quanGNHH và KBHQ - giao nhận hàng hoá và khai báo hải quan
GNHH và KBHQ - giao nhận hàng hoá và khai báo hải quan
 
SLIDE - Tu van, huong dan cong tac tuyen sinh-2024 (đầy đủ chi tiết).pdf
SLIDE - Tu van, huong dan cong tac tuyen sinh-2024 (đầy đủ chi tiết).pdfSLIDE - Tu van, huong dan cong tac tuyen sinh-2024 (đầy đủ chi tiết).pdf
SLIDE - Tu van, huong dan cong tac tuyen sinh-2024 (đầy đủ chi tiết).pdf
 
30 ĐỀ PHÁT TRIỂN THEO CẤU TRÚC ĐỀ MINH HỌA BGD NGÀY 22-3-2024 KỲ THI TỐT NGHI...
30 ĐỀ PHÁT TRIỂN THEO CẤU TRÚC ĐỀ MINH HỌA BGD NGÀY 22-3-2024 KỲ THI TỐT NGHI...30 ĐỀ PHÁT TRIỂN THEO CẤU TRÚC ĐỀ MINH HỌA BGD NGÀY 22-3-2024 KỲ THI TỐT NGHI...
30 ĐỀ PHÁT TRIỂN THEO CẤU TRÚC ĐỀ MINH HỌA BGD NGÀY 22-3-2024 KỲ THI TỐT NGHI...
 
Đề cương môn giải phẫu......................
Đề cương môn giải phẫu......................Đề cương môn giải phẫu......................
Đề cương môn giải phẫu......................
 
1 - MÃ LỖI SỬA CHỮA BOARD MẠCH BẾP TỪ.pdf
1 - MÃ LỖI SỬA CHỮA BOARD MẠCH BẾP TỪ.pdf1 - MÃ LỖI SỬA CHỮA BOARD MẠCH BẾP TỪ.pdf
1 - MÃ LỖI SỬA CHỮA BOARD MẠCH BẾP TỪ.pdf
 
Kiểm tra cuối học kì 1 sinh học 12 đề tham khảo
Kiểm tra cuối học kì 1 sinh học 12 đề tham khảoKiểm tra cuối học kì 1 sinh học 12 đề tham khảo
Kiểm tra cuối học kì 1 sinh học 12 đề tham khảo
 
TÀI LIỆU BỒI DƯỠNG HỌC SINH GIỎI LÝ LUẬN VĂN HỌC NĂM HỌC 2023-2024 - MÔN NGỮ ...
TÀI LIỆU BỒI DƯỠNG HỌC SINH GIỎI LÝ LUẬN VĂN HỌC NĂM HỌC 2023-2024 - MÔN NGỮ ...TÀI LIỆU BỒI DƯỠNG HỌC SINH GIỎI LÝ LUẬN VĂN HỌC NĂM HỌC 2023-2024 - MÔN NGỮ ...
TÀI LIỆU BỒI DƯỠNG HỌC SINH GIỎI LÝ LUẬN VĂN HỌC NĂM HỌC 2023-2024 - MÔN NGỮ ...
 
BỘ LUYỆN NGHE VÀO 10 TIẾNG ANH DẠNG TRẮC NGHIỆM 4 CÂU TRẢ LỜI - CÓ FILE NGHE.pdf
BỘ LUYỆN NGHE VÀO 10 TIẾNG ANH DẠNG TRẮC NGHIỆM 4 CÂU TRẢ LỜI - CÓ FILE NGHE.pdfBỘ LUYỆN NGHE VÀO 10 TIẾNG ANH DẠNG TRẮC NGHIỆM 4 CÂU TRẢ LỜI - CÓ FILE NGHE.pdf
BỘ LUYỆN NGHE VÀO 10 TIẾNG ANH DẠNG TRẮC NGHIỆM 4 CÂU TRẢ LỜI - CÓ FILE NGHE.pdf
 
30 ĐỀ PHÁT TRIỂN THEO CẤU TRÚC ĐỀ MINH HỌA BGD NGÀY 22-3-2024 KỲ THI TỐT NGHI...
30 ĐỀ PHÁT TRIỂN THEO CẤU TRÚC ĐỀ MINH HỌA BGD NGÀY 22-3-2024 KỲ THI TỐT NGHI...30 ĐỀ PHÁT TRIỂN THEO CẤU TRÚC ĐỀ MINH HỌA BGD NGÀY 22-3-2024 KỲ THI TỐT NGHI...
30 ĐỀ PHÁT TRIỂN THEO CẤU TRÚC ĐỀ MINH HỌA BGD NGÀY 22-3-2024 KỲ THI TỐT NGHI...
 
SÁNG KIẾN ÁP DỤNG CLT (COMMUNICATIVE LANGUAGE TEACHING) VÀO QUÁ TRÌNH DẠY - H...
SÁNG KIẾN ÁP DỤNG CLT (COMMUNICATIVE LANGUAGE TEACHING) VÀO QUÁ TRÌNH DẠY - H...SÁNG KIẾN ÁP DỤNG CLT (COMMUNICATIVE LANGUAGE TEACHING) VÀO QUÁ TRÌNH DẠY - H...
SÁNG KIẾN ÁP DỤNG CLT (COMMUNICATIVE LANGUAGE TEACHING) VÀO QUÁ TRÌNH DẠY - H...
 
ĐỀ CHÍNH THỨC KỲ THI TUYỂN SINH VÀO LỚP 10 THPT CÁC TỈNH THÀNH NĂM HỌC 2020 –...
ĐỀ CHÍNH THỨC KỲ THI TUYỂN SINH VÀO LỚP 10 THPT CÁC TỈNH THÀNH NĂM HỌC 2020 –...ĐỀ CHÍNH THỨC KỲ THI TUYỂN SINH VÀO LỚP 10 THPT CÁC TỈNH THÀNH NĂM HỌC 2020 –...
ĐỀ CHÍNH THỨC KỲ THI TUYỂN SINH VÀO LỚP 10 THPT CÁC TỈNH THÀNH NĂM HỌC 2020 –...
 
Campbell _2011_ - Sinh học - Tế bào - Ref.pdf
Campbell _2011_ - Sinh học - Tế bào - Ref.pdfCampbell _2011_ - Sinh học - Tế bào - Ref.pdf
Campbell _2011_ - Sinh học - Tế bào - Ref.pdf
 
cac-cau-noi-tthcm.pdf-cac-cau-noi-tthcm-
cac-cau-noi-tthcm.pdf-cac-cau-noi-tthcm-cac-cau-noi-tthcm.pdf-cac-cau-noi-tthcm-
cac-cau-noi-tthcm.pdf-cac-cau-noi-tthcm-
 

Phát hiện đột biến gen EGRF trong ung thư biểu mô tuyến của phổi

  • 1. ĐẠI HỌC QUỐC GIA HÀ NỘI TRƯỜNG ĐẠI HỌC CÔNG NGHỆ NINH VĂN QUYẾT PH¸T HIÖN GI¸N TIÕP §éT BIÕN GEN EGFR TRONG UNG TH¦ BIÓU M¤ TUYÕN CñA PHæI B»NG Kü THUËT HãA M¤ MIÔN DÞCH TÓM TẮT LUẬN VĂN THẠC SĨ CÔNG NGHỆ NANO SINH HỌC HÀ NỘI - 2017
  • 2. ĐẠI HỌC QUỐC GIA HÀ NỘI TRƯỜNG ĐẠI HỌC CÔNG NGHỆ NINH VĂN QUYẾT PH¸T HIÖN GI¸N TIÕP §éT BIÕN GEN EGFR TRONG UNG TH¦ BIÓU M¤ TUYÕN CñA PHæI B»NG Kü THUËT HãA M¤ MIÔN DÞCH Chuyên ngành: Công nghệ Nano Sinh học Mã số: Chuyên ngành đào tạo thí điểm TÓM TẮT LUẬN VĂN THẠC SĨ CÔNG NGHỆ NANO SINH HỌC Cán bộ hướng dẫn: 1. TS. Trần Đăng Khoa 2. PGS.TS. Nguyễn Văn Hưng HÀ NỘI - 2017
  • 3. 1 ĐẶT VẤN ĐỀ Trong những năm gần đây, trên toàn thế giới, bệnh ung thư đã vượt qua bệnh tim mạch để trở thành căn nguyên gây tử vong hàng đầu với tỷ lệ mắc bệnh cao và độ tuổi mắc bệnh ngày càng giảm [1]. Với tốc độ phát triển dân số và sự gia tăng tuổi thọ như hiện nay thì ước tính đến năm 2050, thế giới sẽ có thêm khoảng 27 triệu trường hợp ung thư mới mắc và khoảng 17,5 triệu bệnh nhân tử vong mỗi năm [1]; trong đó phải kể đến ung thư phổi (UTP), căn nguyên gây tỷ lệ mắc và tử vong hàng đầu với thể ung thư biểu mô tuyến của phổi chiếm đến 40% các trường hợp. Việc phân tích tình trạng các gen đóng vai trò chủ chốt trong quá trình phát sinh khối u giúp các bác sĩ lựa chọn pháp đồ điều trị phù hợp nhất để nâng cao hiệu quả điều trị đích cho người bệnh. Qua nhiều công trình nghiên cứu cũng như sự kiểm duyệt khắt khe của các Tổ chức quản lý y dược uy tín trên thế giới (FDA-Hoa Kì, EMEA-Liên Minh Châu Âu), liệu pháp điều trị trúng đích (LPĐTTĐ) đã chứng tỏ hiệu quả rất tốt trong việc điều trị cho các bệnh nhân ung thư biểu mô tuyến của phổi giai đoạn cuối: kích thước các khối u giảm đáng kể, thời gian sống kéo dài hơn, chất lượng cuộc sống được cải thiện, … Tuy nhiên, mức độ đáp ứng với thuốc điều trị đích ở mỗi bệnh nhân phụ thuộc phần lớn vào tình trạng một số gen, mà quan trọng nhất là gen EGFR. Việc xác định đột biến gen hay sự tương tác protein bị đột biến có ý nghĩa rất lớn giúp bác sĩ lựa chọn được phác đồ điều trị thích hợp để nâng cao hiệu quả điều trị đích
  • 4. 2 cho bệnh nhân. Tháng 6/2009, Cục Quản lý Thực phẩm và Dược phẩm Hoa kỳ (FDA) chính thức đưa ra khuyến cáo: bệnh nhân trước khi được chỉ định dùng thuốc ức chế EGFR cần phải được làm xét nghiệm tình trạng gen. Tại Việt Nam, số lượng bệnh nhân bệnh ung thư ngày càng nhiều, nhu cầu sử dụng LPĐTTĐ ngày càng tăng, trên thị trường đã có một số dược phẩm điều trị đích đang được lưu hành; tuy nhiên bệnh nhân muốn sử dụng LPĐTTĐ cần phải được làm xét nghiệm đột biến gen. Xuất phát từ thực tiễn đó, đề tài nghiên cứu “Phát hiện gián tiếp đột biến gen EGFR trong ung thư biểu mô tuyến của phổi bằng kỹ thuật hóa mô miễn dịch” được thực hiện với các mục tiêu sau: 1. Khảo sát kỹ thuật hóa mô miễn dịch xác định đột biến gen EGFR. 2. Xác định tỷ lệ đột biến gen EGFR trong ung thư biểu mô tuyến của phổi.
  • 5. 3 Chương 1 TỔNG QUAN TÀI LIỆU 1.1. Sơ lược về dịch tễ học ung thư phổi và các yếu tố nguy cơ 1.1.1. Dịch tễ học  Thế giới Kể từ năm 1985, UTP đã đứng đầu trong các bệnh lý ung thư cả về tỉ lệ mắc và tử vong trên toàn cầu [10]. Tính tại thời điểm năm 2012, cả thế giới có khoảng 1,8 triệu ca UTP mới mắc (chiếm 12,9% tổng số ca ung thư mới mắc), 1,59 triệu ca tử vong (chiếm 19,4% tổng số ca tử vong do ung thư) [11]. Tại Hoa Kỳ, theo số liệu năm 2016 của American Cancer Society, số ca mắc mới UTP là 224390 ca (chiếm khoảng 13% tổng số ca ung thư mới mắc), số ca tử vong do UTP là 158080 ca. Cũng theo đó, tổng số ca tử vong do ung thư đại tràng (49190 ca), vú (40890 ca), tiền liệt tuyến (26120 ca) chỉ chiếm xấp xỉ gần 3/4 tổng số ca tử vong của UTP [1].  Việt Nam Ở Việt Nam, theo thống kê của Bộ Y tế, UTP đứng hàng thứ hai về tỉ lệ tử vong của các loại ung thư hằng năm ở cả hai giới nam và nữ. Mỗi năm cả nước có hơn 20000 bệnh nhân UTP mới được phát hiện và có tới 17000 trường hợp tử vong. Riêng tại Bệnh viện Phổi Trung ương, theo Lê Trung Thọ, tính đến năm 2012, số người mắc bệnh này đến khám và điều trị đã lên tới 16677 người [13]. Theo số liệu ghi nhân ung thư tại Hà Nội giai đoạn 2001 – 2004, ước tính hằng năm có 17073 trường hợp mắc mới UTP, trong đó có 12958 nam và
  • 6. 4 4115 nữ và là ung thư đứng đầu ở nam giới [2]. Theo Phạm Duy Hiển và cộng sự, nghiên cứu trên 1151 trường hợp UTP tại thành phố Hồ Chí Minh, UTBMT chiếm tỉ lệ rất cao, lên tới 48,54% [14]. Theo Phạm Nguyên Cường (2015), trong tổng số 258 trường hợp UTP có 67,1% là týp UTBMT, týp UTBM vảy chỉ chiếm 11,4%, các týp chiếm tỉ lệ rất nhỏ [15]. 1.2. Một số đặc điểm lâm sàng – cận lâm sàng của ung thư phổi và ung thư biểu mô tuyến của phổi 1.2.1. Lâm sàng  Biểu hiện hô hấp  Biểu hiện toàn thân - Biểu hiện di căn hoàng đảm, đau xương… 1.2.2. Một số đặc điểm cận lâm sàng khác 1.2.2.1. Xquang thường quy (thẳng, nghiêng) 1.2.2.2. Chụp cắt lớp vi tính 1.2.2.3. Nội soi phế quản 1.3. Đặc điểm mô bệnh học ung thư biểu mô tuyến của phổi [3], [24] 1.3.1. Ung thư biểu mô tuyến xâm nhập thông thường  Dạng phát triển Lepidic (Lepidic growth pattern) Dạng phát triển chùm nang (Acinar growth pattern)  Dạng phát triển nhú (Papillary growth pattern) Dạng phát triển vi nhú (Micropapillary growth pattern)  Dạng phát triển đặc (Solid growth pattern)
  • 7. 5 1.3.2. Các biến thể đặc biệt của ung thư biểu mô tuyến xâm nhập  Ung thư biểu mô tuyến nhầy xâm nhập (Invasive mucinous adenocarcinoma) Ung thư biểu mô tuyến dạng keo (Colloid adenocarcinoma)  Ung thư biểu mô tuyến týp ruột (Enteric adenocarcinoma)  Ung thư biểu mô tuyến bào thai (Fetal adenocarcinoma) 1.3.3. Ung thư biểu mô tuyến tại chỗ (Adenocarcinoma in situ - AIS) 1.3.4. Ung thư biểu mô tuyến xâm nhập tối thiểu (Minimally invasive adenocarcinoma - MIA) 1.4. Đột biến gen EGFR trên bệnh nhân ung thư biểu mô tuyến của phổi 1.4.1. Đặc điểm phân tử EGFR EGFR hay thụ thể yếu tố phát triển biểu bì, là một thành viên thuộc nhóm thụ thể xuyên màng có hoạt tính tyrosine kinase gồm 4 loại: ERBB1/Her1/EGFR, ERBB/Her2, ERBB/Her3 và ERBB/Her4 [28]. EGFR là glycoprotein có trọng lượng phân tử khoảng 170 kDa, xuất hiện ở một số mô có nguồn gốc biểu mô, trung mô và mô thần kinh [29]. EGFR có cấu trúc gồm 3 phần: phần ngoại màng có khả năng gắn đặc hiệu với ligand (EGF, TGFα…), phần xuyên màng và phần nội màng. Phần nội màng bao gồm một vùng ngắn cạnh màng dài 38 axit amin và vùng tyrosine kinase chiếm khoảng 50% chiều dài vùng nội màng và đuôi carboxyl tận cùng [30]. 1.4.2. Đột biến gen EGFR trong ung thư biểu mô tuyến của phổi Đột biến gen EGFR chủ yếu xảy ra ở người Đông Á, không hút thuốc, phụ nữ [37]. Trong các týp MBH của UTP thì UTBMT có tần suất mắc đột biến gen EGFR cao nhất. Các loại đột biến gen
  • 8. 6 EGFR chủ yếu gây ra sự phosphoryl hóa không phụ thuộc ligand của phân tử EGFR, dẫn đến sự kích hoạt liên tục các trục tín hiệu RAS/RAF, PI3K/AKT, STAT…Hậu quả là sự tăng sinh tế bào, ức chế quá trình chết theo chương trình, tăng sinh mạch máu, thoát khỏi kiểm soát miễn dịch của cơ thể đối với tế bào u. 1.5. Hóa mô miễn dịch 1.5.1. Kỹ thuật hóa mô miễn dịch Hóa mô miễn dịch (HMMD) là sự kết hợp giữa mô học và miễn dịch học nhằm xác định sự biểu hiện của một kháng nguyên riêng biệt của một mô và tình trạng kháng nguyên khác nhau của các tế bào trong cùng một mô, dựa vào tính chất đặc hiệu cao của các kháng thể để xác định các kháng nguyên riêng biệt. Từ đó nhận dạng đặc hiệu dòng các quần thể tế bào, xác định được các đặc tính sinh học và chức năng các tế bào trong cùng một dòng. 1.5.2. Các nguyên lý của phương pháp hóa mô miễn dịch HMMD là một kỹ thuật nhuộm đặc biệt, sử dụng kháng thể (KT) đặc hiệu để xác đinh sự hiện diện của các kháng nguyên (KN) tương ứng trên các lát cắt mô học hoặc trên các loại tế bào có trong mô. Nguyên tắc là cho KT đặc hiệu lên mô, nếu trong mô có KN sẽ có phản ứng kết hợp KN – KT. Khi phản ứng xảy ra sẽ cho kết hợp với chất hiện màu và có thể nhìn thấy trên kính hiển vi quang học. 1.5.3. Yêu cầu kỹ thuật Một chất được định vị trong mô trên HMMD phải có các tiêu chuẩn sau: - Chất đó đã được tinh chế sẵn dưới dạng kháng nguyên tương đối thuần khiết (để sản xuất kháng thể đặc hiệu) - Sự bảo toàn (ít nhất một phần) của chất kháng nguyên muốn
  • 9. 7 định vị trong quá trình thao tác kỹ thuật mô học và HMMD. Khi cả hai điều trên được tôn trọng, kỹ thuật HMMD có thể được thực hiện hiệu quả. 1.5.4. Phương pháp - Vật liệu kháng nguyên (KN) có mặt trong một mô và đặc biệt hơn trong một lát cắt mô phản ứng đặc hiệu với một kháng thể (KT) chống lại nó. Phản ứng miễn dịch này gây một lắng đọng của một KT đặc hiệu trên vùng mô có KN. Kháng thể này được gắn với một enzym, ban đầu người ta gắn với phosphatase acid, nhưng sự kết hợp này khó và không ổn định. Hiện nay người ta gắn với Peroxydase ổn định hơn và có thể bảo quản lâu hơn ở 4 độ C. Các bước tiến hành - Chuẩn bị tiêu bản - Chuẩn bị dung dịch Tris – Buffer – Saline (TBS) - Phục hồi nhóm quyết định kháng nguyên (Epitop Retrieval Techniques) - Khử hoạt động men nội sinh - Pha loãng kháng thể - Nhuộm tiêu bản Phương pháp nhuộm HMMD được thực hiện theo các bước: 1. Tiêu bản sau khi tẩy paraffin được nhúng nước cất 2 lần x 5 phút 2. Khử peroxydase nội sinh bằng dung dịch H2O2 x 20 phút 3. Rửa tiêu bản bằng nước cất 2 lần x 2 phút 4. Bộc lộ kháng nguyên bằng protein K hoặc nồi áp suất, lò vi sóng 5. Rửa nước cất 2 lần x 2 phút
  • 10. 8 6. Rửa tiêu bản bằng dung dịch TBS 2 lần x 2 phút 7. Phủ KT thứ nhất x 30 phút 8. Rửa tiêu bản TBS 2 lần x 5 phút 9. Phủ KT thứ hai x 30 phút 10. Rửa tiêu bản TBS 2 lần x 5 phút 11. Phủ dung dịch Diaminno Benzidine (DAB) x 1 phút 12. Rửa nước chảy x 5 phút 13. Nhuộm nhân bằng hematoxyline 1 phút 14. Khử nước, làm sạch tiêu bản rồi đọc kết quả trên kính hiển vi quang học Điều kiện đọc kết quả: - Sử dụng kháng thể EGFR clone DAK – H1- WT là kháng thể đơn dòng pha sẵn của hãng Dako - Phải có chứng dương và âm trên tiêu bản Đánh giá kết quả nhuộm EGFR trong UTBMT của Phổi theo Dako: - 0(Âm tính): Không bắt màu trên màng bào tương hoặc bắt màu trong bào tương - 1+: Màng bào tương bắt màu nhạt <10% tế bào u, bắt màu một phần màng bào tương - 2+: Màng bào tương bắt màu trung bình >10% tế bào u, bắt màu hoàn toàn hoặc một phần màng bào tương - 3+: Màng bào tương bắt màu đậm >10% tế bào u, bắt màu hoàn toàn màng bào tương tạo hình ảnh mạng lưới. 1.6. Một số phương pháp khác phát hiện đột biến gen EGFR  PCR – RFLP  Giải trình tự gen  Kĩ thuật Scorpion ARMS
  • 11. 9 Chương 2 ĐỐI TƯỢNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 2.1. Đối tượng nghiên cứu 2.1.1. Đối tượng Bao gồm khoảng 120 bệnh nhân được chẩn đoán trên sinh thiết là UTBMT nguyên phát của phổi, và được thực hiện xét nghiệm hóa mô miễn dịch tìm đột biến gen EGFR, tại Trung tâm Giải phẫu bệnh, Bệnh viện Bạch Mai, trong thời gian từ tháng 01/2015 đến tháng 06/2017, thỏa mãn các tiêu chuẩn nghiên cứu. 2.1.2. Tiêu chuẩn lựa chọn  Thỏa mãn tiêu chuẩn chẩn đoán UTBMT phổi nguyên phát hoặc hướng tới UTBMT trên sinh thiết theo tiêu chuẩn và hướng dẫn chẩn đoán của WHO năm 2014, không phân biệt tuổi, giới.  Được làm xét nghiệm tìm đột biến gen EGFR trên bệnh phẩm sinh thiết.  Các trường hợp hồi cứu còn đủ tiêu bản nhuộm HE, PAS, block còn đủ bệnh phẩm đảm bảo cắt nhuộm, nhuộm thêm hóa mô miễn dịch nếu cần. 2.1.3. Tiêu chuẩn loại trừ  Mọi trường hợp không thỏa mãn bất kì một tiêu chuẩn lựa chọn nào kể trên.  Người bệnh có 2 ung thư.  Người bệnh đã điều trị UTP ở nơi khác chuyển đến (hóa trị, xạ trị, điều trị đích hoặc phối hợp).  Vùng mô u trên sinh thiết quá ít hoặc hoại tử quá nhiều.
  • 12. 10 2.1.4. Địa điểm nghiên cứu  Trung tâm Giải phẫu bệnh và Đơn vị Gen trị liệu Bệnh viện Bạch Mai 2.1.5. Thời gian nghiên cứu: Nghiên cứu được thực hiện trong khoảng thời gian từ tháng 01/2015 đến tháng 06/2017. 2.2. Phương pháp nghiên cứu 2.2.1. Thiết kế nghiên cứu: Nghiên cứu mô tả cắt ngang 2.2.2. Cỡ mẫu và chọn mẫu: - Chọn mẫu không xác suất, loại mẫu mục đích dự kiến gồm 120 bệnh nhân hồi cứu, thỏa mãn tiêu chuẩn lựa chọn trong thời gian nghiên cứu. 2.2.3. Biến số nghiên cứu  Đặc điểm đối tượng nghiên cứu  Thời gian phủ chất hiện màu DAB  Đột biến gen EGFR  Mối liên quan giữa mức độ biểu hiện đột biến gen EGFR trên hóa mô miễn dịch và phương pháp PCR 2.2.4. Các bước tiến hành nghiên cứu  Thu thập số liệu về tuổi, giới theo hồ sơ bệnh án.  Thu thập các tiêu bản (nhuộm HE, PAS), block nến, tiến hành định týp UTBMT và cắt nhuộm hóa mô miễn dịch xét nghiệm tìm đột biến EGFR.  Lấy 20 block dương tính cắt 20 tiêu bản, nhuộm hóa mô miễn dịch với quy trình như trên, thay đổi thời gian phủ DAB ở 1 phút và 3 phút. Mỗi khoảng thời gian ta nhuộm 10 tiêu
  • 13. 11 bản và đánh giá chất lượng tiêu bản.  Lấy 30 block bệnh phẩm (EGFR dương tính 1+, 2+, 3+; mỗi loại chọn ngẫu nhiên 10 blcok), khoanh vùng có nhiều tế bào ung thư gửi đơn vị Gen trị liệu Bệnh viện Bạch Mai để làm xét nghiệm tìm đột biến gen EGFR. 2.2.5. Xử lí số liệu Các số liệu và kết quả thu thập được lưu trữ và xử lí trên máy vi tính, sử dụng phần mềm excel để thống kê. 2.2.6. Khía cạnh đạo đức nghiên cứu  Đề cương nghiên cứu đã được Hội đồng chấm đề cương luận văn thạc sỹ trường Đại học Công Nghệ - Đại học Quốc gia Hà Nội thông qua.  Tất cả thông tin khai thác trên bệnh nhân và hồ sơ bệnh án đều được giữ bí mật.  Tất cả biến số, chỉ số đều được thu thập, tính toán trung thực và khoa học.  Nghiên cứu chỉ nhằm mục đích nâng cao chất lượng chẩn đoán, điều trị, đánh giá tiên lượng bệnh, phục vụ công tác chăm sóc sức khỏe nhân dân và nâng cao chất lượng cuộc sống cho bệnh nhân.
  • 14. 12 Chương 3 KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU 120 bênh nhân ung thư biểu mô tuyến của phổi được nghiên cứu và thực hiện xét nghiệm phát hiện đột biến gen EGFR với các kết quả như sau 3.1. Phân bố bệnh theo tuổi và giới Biểu đồ 3.1: Phân bố bệnh theo giới Bảng 3.1: Phân bố bệnh theo nhóm tuổi và giới Giới Nhóm tuổi Nam Nữ n % n % < 30 tuổi 0 0.00 0 0.00 30 – 39 tuổi 3 3.57 2 5.56 40 – 49 tuổi 10 11.90 5 13.89 50 – 59 tuổi 27 32.14 11 30.56 60 – 69 tuổi 26 30.95 14 38.89 > 70 tuổi 18 21.43 4 11.11 Tổng 84 100 36 100 Nam Nữ
  • 15. 13 Nhận xét: Nhóm tuổi 50 – chiếm tỉ lệ cao nhất (32,14%), đứng thứ hai là nhóm 60 – 69 với tỉ lệ 30,95%. Như vậy, hai nhóm tuổi này chiếm tới 63,05%. 3.2. Chất lượng tiêu bản được phủ chất hiện màu ở thời gian 1 phút và 3 phút Bảng 3.2: Chất lượng tiêu bản được nhuộm HMMD và phủ DaB ở thời gian 1 phút và 3 phút Thời gian phủ DAB Chất lượng tiêu bản Phủ DAB 1 phút Phủ DAB 3 phút Số ca Tỷ lệ % Số ca Tỷ lệ % Tiêu bản đạt 10 100 08 80 Tiêu bản không đạt 0 0 2 20 Nhận xét: Trong 10 tiêu bản nhuộm hóa mô miễn dịch có thời gian phủ DAB là 1 phút cho kết quả 100% số tiêu bản đạt chất lượng. Còn với thời gian phủ DAB 3 phút thì có 20% số tiêu bản không đạt chất lượng, tiêu bản bị nền và gấp bệnh phẩm. Hình 3.1: Tiêu bản nhuộm lỗi, phủ DAB lâu bị nền
  • 16. 14 Hình 3.2: Tiêu bản nhuộm HMMD bị lỗi, tiêu bản bị gấp xước 3.3. Hóa mô miễn dịch đột biến gen EGFR 3.3.1. Bộc lộ dấu ấn EGFR Bảng 3.3: Bộc lộc dấu ấn EGFR Dấu ấn EGFR Số ca Tỉ lệ (%) Dương tính 100 83.33 Âm tính 20 16.67 Tổng 120 100 Nhận xét: 100/120 trường hợp bộc lộ dấu ấn EGFR dương tính, chiếm 83,33%; 20 trường hợp âm tính với EGFR (16,67%)
  • 17. 15 3.3.2. Bộc lộ dấu ấn EGFRđánh giá theo mức độ biểu hiện trên HMMD Bảng 3.4: Bộc lộ dấu ấn EGFR đánh giá theo mức độ biểu hiện trên HMMD Cường độ biểu hiện Số ca 0+ 1+ 2+ 3+ Nam giới 15 27 34 8 Nữ giới 5 15 11 5 Tổng 20 42 45 13 Nhận xét: có 87/120 trường hợp dương tính 1+ và 2+ với dấu ấn EGFR(72,50%); chỉ có 20 trường hợp âm tính với EGFR chiếm 24%. 3.4. Một số mối liên quan 3.4.1. Bộc lộ dấu ấn EGFR theo tuổi Bảng 3.5: Bộc lộ dấu ấn EGFR theo tuổi EGFR Tuổi Dương tính Âm tính Số ca Tỷ lệ % Số ca Tỷ lệ % <60 tuổi 51 87.93 7 12.06 ≥60 tuổi 49 79.03 13 20.96 Tỷ lệ chung 100 83.33 20 16.67 Nhận xét: Trong số những bệnh nhân <60 tuổi có 51/58 trường hợp EGFR dương tính (87,93%) và 7/58 trường hợp âm tính (12,06%). Với bệnh nhân ≥60 thì có 49/62 trường hợp dương tính (79,03%) và 13/62 trường hợp âm tính (20,96%).
  • 18. 16 3.4.2. Bộc lộ dấu ấn EGFR theo giới Bảng 3.6: Bộc lộ dấu ấn EGFR theo giới EGFR Giới Dương tính Âm tính Số ca Tỷ lệ % Số ca Tỷ lệ % Nam 69 82.14 15 17.86 Nữ 31 86.11 5 13.39 Tỷ lệ chung 100 83.33 20 16.67 Nhận xét: Trong 84 trường hợp nam có 69/84 có EGFR dương tính (82,14%) và 15/84 trường hợp âm tính (17,85%). Với nữ giới là 31/36 trường hợp dương tính (86,11%) và 5/36 trường hợp âm tính (13,89%). 3.5. Đối chiếu kết quả giữa hóa mô miễn dịch và phương pháp PCR phát hiện đột biến gen EGFR trong UTBMT phổi Bảng 3.7: kết quả giữa phương pháp HMMD và phương pháp PCR trong phát hiện đột biến gen EGFR HMMD PCR 1+ 2+ 3+ Số ca Tỷ lệ % Số ca Tỷ lệ % Số ca Tỷ lệ % Dương tính 2 20 9 90 10 100 Âm tính 8 80 1 10 0 0 Nhận xét: Với mẫu bộc lộ dương tính 2+ và 3+ trên hóa mô miễn dịch thì cũng phát hiện đột biến gen EGFR bằng phương pháp PCR với tỷ lệ tương ứng là 90% và 100%.
  • 19. 17 Chương 4 BÀN LUẬN Qua nghiên cứu 120 bệnh nhân ung thư biểu mô tuyến phổi đến xét nghiệm tại Trung tâm Giải phẫu bệnh – Tế bào học Bệnh viện Bạch Mai, chúng tôi nhận thấy: 4.1. Một số đặc điểm về giới và tuổi Kết quả của chúng tôi cho thấy có 84/120 trường hợp bệnh nhân là nam (70%), có 36/120 bệnh nhân nữ (30%). Tỷ lệ UTBMT của nam so với nữ là 2,33/1. Về kết quả nghiên cứu của chúng tôi và các tác giả khác đều nhận thấy nam giới có tỷ lệ mắc bệnh nhiều hơn nữ giới. Khi so sánh kết quả này với các tác giả khác thì tỷ lệ nam/nữ của chúng tôi khá tương đồng: Theo Burns D.M 1994 tỷ lệ nam/nữ là 3,2/1. Greenlee R.T, Murray T, Bolden và cộng sự 2000 tỷ lệ nam/nữ là 2,53/1. Theo Nguyễn Tiến Tuân 2004 tỷ lệ nam/nữ là 2,75/1. Lê Trung Thọ 2007 tỷ lệ nam/nữ 2,87/1. Như vậy, kết quả nghiên cứu của chúng tôi phù hợp với xu hướng phụ nữ mắc UTBMT phổi ngày càng cao trên thế giới. Nghiên cứu đặc điểm tuổi của 120 bệnh nhân, chúng tôi thấy tuổi mắc thấp nhất là 32 tuổi, tuổi mắc cao nhất là 80 tuổi, tuổi mắc trung bình là 60 tuổi; nhóm tuổi có nhiều bệnh nhân UTBMT phổi nhất là nhóm tuổi 60-69 (có 40 trường hợp, chiếm 33,33%), tiếp đến là nhóm tuổi 50 -59 (có 38 trường hợp, chiếm 31,67%). Nhóm tuổi <30 không có bệnh nhân nào. Tính chung nhóm tuổi trung niên và tuổi già (trên 40 tuổi), tỷ lệ UTBMT phổi chiếm 95,94%. Kết quả nghiên cứu của chúng tôi tương tự với kết quả nghiên cứu của một số tác giả khác, như:
  • 20. 18 Nguyễn Tiến Tuân (2004) nghiên cứu 60 bệnh nhân UTBMT phổi thấy độ tuổi có tỷ lệ mắc cao nhất là 51 -60 (chiếm 30,5%), lứa tuổi >41 chiếm 91,66% Theo Hoàng Đình Chân (1996), tỷ lệ UTBMT phổi phân bố theo các nhóm như sau: 20 -40 tuổi chiếm 10,3%, nhóm tuổi 40 -60 chiếm 75,9%, lứa tuổi trên 60 chiếm 13,8%. Nghiên cứu của Phùng Thị Phương Anh (1999) thì lứa tuổi <40 chiếm 7,75%, 40 -60 tuổi chiếm 59,68% và lứa tuổi >60 chiếm 32,56%. Theo Lê Trung Thọ (2002), phân bố UTBMT phổi như sau: nhóm bệnh nhân <30 tuổi chiếm 0,35%, từ 30 - 40 tuổi chiếm 25,4%, nhóm tuổi 41 -50 chiếm 25,8%, nhóm tuổi 51 -60 chiếm 24,82%, từ 61 – 70 tuổi chiếm 31,56% và nhóm tuổi >70 chiếm 8,86% Đa số các tác giả đều ghi nhận UTBMT phổi mắc nhiều nhất ở nhóm tuổi trung niên và người cao tuổi. 4.2. Thời gian phủ chất hiện màu ảnh hưởng đến chất lượng tiêu bản Trong nghiên cứu của chúng tôi, tiến hành thử nghiệm với 02 mốc thời gian phủ chất hiện màu DAB là 01 phút và 03 phút, nhận thấy tất cả các tiêu bản được phủ ở 1 phút đều đạt chất lượng, tiêu bản không bị nền, bắt màu lan tỏa. Còn ở khoảng thời gian là 03 phút thì chỉ có 80% tiêu bản đạt chất lượng và có thể đánh giá được. Từ đó chúng tôi xây dựng được quy trình tối ưu cho kỹ thuật hóa mô miễn dịch phát hiện đột biến gen EGFR với thời gian phủ chất hiện màu khoảng 01 phút.
  • 21. 19 4.3. Bộc lộ EGFR Ung thư phổi là một bệnh lý phổ biến có thể gây tử vong và là nguyên nhân gây tử vong hàng đầu trong các ca tử vong do bệnh ung thư trên toàn thế giới. Ở những bệnh nhân có bệnh khu trú và chưa di căn qua hạch, phẫu thuật có thể mang lại tỷ lệ thời gian sống trong khoảng thời gian 5 năm là 40% Kể từ khi ghi nhận có sự biểu hiện và hoạt động quá mức EGFR ở các khối u ở người và có liên quan đến hậu quả xấu trên lâm sàng; các thuốc ức chế EGFR – Tyrosine Kinase (EGFR – TKI) đã được phát triển và chứng minh hiệu quả điều trị ở những bệnh nhân UTBM tế bào không nhỏ đã thất bại với hóa trị trước đó. Điều trị đích phân tử tập trung chủ yếu vào các dấu ấn, con đường sinh học của tế bào có liên quan đến bệnh sinh gây ung thư. Trong hầu hết các trường hợp, bao gồm cả những bất thường phân tử liên quan đến chuyển dạng ác tính, các thụ thể trên bề mặt tế bào, các protein hoặc enzyme truyền tín hiệu, những enzyme liên quan đến phân bào, chết theo chương trình, di cú, xâm nhập hoặc biến đổi DNA. Những điều trị đích can thiệp vào những bước cụ thể liên quan đến sự hình thành và duy trì bệnh lý ác tính. Với các cơ chế tác động đặc hiệu, điều trị đích nhìn chung cải thiện được tình trạng dung nạp điều trị so với các điều trị hóa chất hiện tại. Tiến bộ trong sinh học ung thư phổi dẫn đến việc xác định các thụ thể yếu tố tăng trưởng biểu bì (EGFR) tín hiệu dường như là một mục tiêu điều trị hàng đầu cho EGFR – TKI bao gồm erlotinib và gefitinib. Đáp ứng EGFR – TKI được Fukuoka M, Kris MG và CS báo cáo ở 10 -27% bệnh nhân ung thư phổi không tế bào nhỏ sau thất bại với hóa trị liệu. Theo một số nghiên cứu trên
  • 22. 20 thế giới, tỷ lệ đáp ứng EGFR – TKI là 70 – 80% cho các khối u có đột biến EGFR và 10% cho các khối u không có đột biến. Các nhóm thuốc điều trị đích hiện nay được nghiên cứu hầu như đều có mục đích chính là ngăn chặn dòng thác tín hiệu đường truyền vào trong tế bào của EGFR. Hai nhóm thuốc chính hiện nay là: Kháng thể đơn dòng ức chế EGFR ở phần ngoài màng tế bào, chất ức chế tiểu phân tử tyrosine kinase EGFR. Việc nghiên cứu EGFR là để tiên lượng và tìm ra phương pháp điều trị hiệu quả cho bệnh nhân. Qua nghiên cứu 120 bệnh nhân UTBMT phổi, tỷ lệ dương tính của EGFR là 83,335, tỷ lệ âm tính của EGFR là 16,67%. Kết quả nghiên cứu của chúng tôi cho thấy tỷ lệ dương tính EGFR tương đồng với một số tác giả: Nghiên cứu của Trịnh Tuấn Dũng và CS (2011) trên 62 trường hợp UTPKTBN được xét nghiệm bằng hóa mô miễn dịch, thấy tỷ lệ EGFR dương tính là 79,35%. Nghiên cứu của Hsu KH và CS có tỷ lệ EGFR dương tính là 74,2% Tuy nhiên kết quả nghiên cứu của chúng tôi cao hơn kết quả nghiên cứu của nhiều tác giả khác: - Kết quả nghiên cứu của Allan R. Li và cs (2008) cho thấy tỷ lệ EGFR dương tính là 48%. - Nghiên cứu của Ferenc Pinter (2008), tỷ lệ dương tính của EGFR là 59% - Lynette M. Sholl, Beow Y. Yeap, A.John Iafrate và cs (2009), nghiên cứu trên 65 bệnh nhân UTBMt cho thấy tỷ lệ EGFR dương tính là 29,2%.
  • 23. 21 - Nghiên cứu của Ferenc Pinter (2008), tỷ lệ dương tính của EGFR là 59% - Lynette M.Sholl, Beow Y. Yeap, A. John Iafrate và cs (2009), nghiên cứu trên 65 bệnh nhân UTBMT cho thấy tỷ lệ EGFR dương tính 29,2% Có sự khác biệt về kết quả hóa mô miễn dịch với dấu ấn EGFR ở một số nghiên cứu trong và ngoài nước so với kết quả nghiên cứu của chúng tôi vì mấy lý do sau: - Khác về sử dụng kháng thể kháng protein EGFR đột biến: hiện trên thị trường có rất nhiều hang sản xuất kháng thể này, do vậy độ nhạy của chúng không giống nhau. - Mẫu mô làm xét nghiệm có trong tính trạng tốt hay không: có được vùi ngay trong dung dịch cố định formol trung tính 10% không. - Trong cùng một khối u phổi không phải ở mọi vùng mô u các tế bào u cũng có đột biến giống nhau. Có nghĩa là có vùng tế bào u có đột biến EGFR, có vùng lại không có đột biến này. 4.4 Liên quan giữa bộc lộ EGFR với các yếu tố 4.4.1. Liên quan giữa bộc lộ EGFR với tuổi Theo nghiên cứu của chúng tôi thì nhóm bệnh nhân <60 tuổi có 51/58 trường hợp EGFR dương tính (87,93%) và 7/58 trường hợp âm tính (12,06%). Với bệnh nhân ≥60 thì có 49/62 trường hợp dương tính (79,03%) và 13/62 trường hợp âm tính (20,96%). Kết quả nghiên cứu của chúng tôi tương tự kết quả nghiên cứu của Zhiyoung Liang và Cs (2010), tỷ lệ EGFR ở nhóm bệnh nhân <60 tuổi là 68.3% và nhóm bệnh nhân ≥60 là 68.5%.
  • 24. 22 Nghiên cứu của IPASS ở châu Á cho thấy tỷ lệ đột biến EGFR trong số bệnh nhân <65 tuổi là 56% và ≥65 tuổi là 68% 4.4.2. Liên quan giữa bộc lộ EGFR với giới Nghiên cứu của chúng tôi thấy trong 84 trường hợp nam có 69/84 có EGFR dương tính (82,14%) và 15/84 trường hợp âm tính (17,85%). Với nữ giới là 31/36 trường hợp dương tính (86,11%) và 5/36 trường hợp âm tính (13,89%). Kết quả nghiên cứu của chúng tôi tương tự kết quả nghiên cứu của Zhiyong Liang và CS (2010) nghiên cứu 133 trường hợp UTBMT phổi cho thấy tỷ lệ dương tính EGFr ở nam và nữ lần lượt là 66.1% và 70.4%. Kết quả nghiên cứu của chúng tôi khác với nghiên cứu của Marius I Ilie và cs (2010), tỷ lệ dương tính ở nữ là 54,5% và ở nam là 31.2%. 4.5. Đối chiếu kết quả giữa hóa mô miễn dịch và phương pháp PCR phát hiện đột biến gen EGFR trong UTBMT phổi Nghiên cứu của chúng tôi nhận thấy với mẫu bộc lộ dương tính 2+ và 3+ trên hóa mô miễn dịch thì cũng phát hiện đột biến gen EGFR bằng phương pháp PCR với tỷ lệ tương ứng là 90% và 100%. Độ nhạy và độ đặc hiệu của phương pháp nhuộm hóa mô miễn dịch gen EGFR đặc hiệu E746 – A750 và L858R là khá cao và chỉ có hai loại này của đột biến EGFR (hai loại chính chiếm hơn 90%) được đánh giá bởi hóa mô miễn dịch còn các loại đột biến khác với tần số thấp hơn có thẻ không được kiểm tra bằng hóa mô miễn dịch vì chưa có kháng thể đột biến đặc hiệu (chưa sản xuất). Vì vậy nếu ung thư
  • 25. 23 phổi với đột biến EGFR qua kiểm tra âm tính nên tiếp tục làm them phương pháp PCR. Tuy nhiên hóa mô miễn dịch là một phương pháp sang lọc hữu ích đầu tay cho việc phát hiện EGFR đột biến có chứa EGFR đột biến của E746 – A750 hoặc L858R có ý nghĩa cho việc điều trị nhắm đích. Thử nghiệm hóa mô miễn dịch có một số ưu điểm hơn so với kỹ thuật phân tích DNA, chẳng hạn như có thể nghiên cứu mối liên quan giữa đặc điểm hình thái tế bào u với hiện tượng đột biến gen, trong khi đó không thể sử dụng kỹ thuật phân tích DNA cho toàn bộ mô u. Tính không đồng nhất về đột biến EGFR trong mô u đã giải thích hiện tượng tế bào u tránh được liệu pháp điều trị trúng đích EGFR tyrosine kinase (TKI). Như vậy, một số tế bào u không bị đột biến EGFR sẽ vẫn sống sót sau điều trị nên u tiếp tục phát triển trở lại. Phương pháp hóa mô miễn dịch có thể thực hiện được ngay cả khi mẫu mô rất nhỏ, thậm chí chỉ có vài tế bào u trong mảnh mô nhỏ đó. Điều này không thể thực hiện được bằng kỹ thuật phân tích DNA. Yêu cầu mẫu mô tối thiểu cho phân tích DNA theo kỹ thuật thong dụng hiện nay là số lượng tế bào u so với tế bào lành có trong mẫu sinh thiết cần đạt từ 30 – 50%. Nếu không đàm bảo điều này, kết quả phân tích DNA dễ bị âm tính giả. Hiện nay, kỹ thuật pyrosequencing được công nhận là kỹ thuật phân tích DNA có độ nhạy và độ đặc hiệu cao nhất cũng cần số lượng tế bào u từ 5 – 10%. Tuy nhiên, đây là kỹ thuật phức tạp, trang thiết bị rất tốn kém nên thế giới mới chỉ có ít cơ sở có khả năng làm được xét nghiệm này.
  • 26. 24 KẾT LUẬN Qua nghiên cứu 120 bệnh nhân UTBMT phổi được thực hiện xét nghiệm đột biến gen EGFR bằng kỹ thuật hóa mô miễn dịch tại trung tâm Giải phẫu bệnh – Tế bào học Bệnh viện Bạch Mai, chúng tôi rút ra một số kết luận sau: 1. Phân bố bệnh theo tuổi: nhóm tuổi từ 50 – 69 có tỷ lệ mắc bệnh ung thư biểu mô tuyến của phổi cao nhất. 2. Tỷ lệ đột biến gen EGFR trong ung thư biểu mô tuyến của phổi chiếm 83,335