Narayaniyam is a medieval Sanskrit text, comprising a summary study in poetic form of the Bhagavata Purana. It was composed by Melpathur Narayana Bhattathiri, (1560-1666 A.D.) one of the celebrated Sanskrit poets in Kerala. Even though the Narayaneeyam was completed as early as 1586 A.D., it appeared in print only after more than 250 years. The Bhagavata Purana is a major Hindu scripture consisting of about 18,000 verses, mainly devoted to the worship of Krishna.
Metabolism refers to the set of life-sustaining chemical transformations within living organisms. It includes the breakdown of nutrients and organic matter to harvest energy through cellular respiration as well as using energy to construct cellular components. Metabolic profiling studies the low-molecular weight metabolites and intermediates that reflect genetic and physiological changes in organisms. Each cell and tissue has a unique metabolic fingerprint that can provide specialized or generalized physiological information depending on the biofluid studied, such as urine or plasma. Metabolic engineering aims to optimize genetic and regulatory processes in cells to increase production of desired substances.
ISO 15189 Accreditation - Genetic testing in Hematological neoplasms Georgia Bardi
How to prepare your lab to get accreditation for cytogenetic and molecular genetic tests used in Hematolog
Presented by Georgia Bardi, PhD, in Greek. Volos 2014, Hellenic Society of Hematology, working group on quality issues,
Data produced by Georgia Bardi, Theoni Trangas and Despina Iakovaki
Narayaniyam is a medieval Sanskrit text, comprising a summary study in poetic form of the Bhagavata Purana. It was composed by Melpathur Narayana Bhattathiri, (1560-1666 A.D.) one of the celebrated Sanskrit poets in Kerala. Even though the Narayaneeyam was completed as early as 1586 A.D., it appeared in print only after more than 250 years. The Bhagavata Purana is a major Hindu scripture consisting of about 18,000 verses, mainly devoted to the worship of Krishna.
Metabolism refers to the set of life-sustaining chemical transformations within living organisms. It includes the breakdown of nutrients and organic matter to harvest energy through cellular respiration as well as using energy to construct cellular components. Metabolic profiling studies the low-molecular weight metabolites and intermediates that reflect genetic and physiological changes in organisms. Each cell and tissue has a unique metabolic fingerprint that can provide specialized or generalized physiological information depending on the biofluid studied, such as urine or plasma. Metabolic engineering aims to optimize genetic and regulatory processes in cells to increase production of desired substances.
ISO 15189 Accreditation - Genetic testing in Hematological neoplasms Georgia Bardi
How to prepare your lab to get accreditation for cytogenetic and molecular genetic tests used in Hematolog
Presented by Georgia Bardi, PhD, in Greek. Volos 2014, Hellenic Society of Hematology, working group on quality issues,
Data produced by Georgia Bardi, Theoni Trangas and Despina Iakovaki
Βασικές αρχές Ακτινοπροστασίας στην παιδοακτινολογίαqualityinhealth
Βασικές αρχές Ακτινοπροστασίας στην παιδοακτινολογία
UNIVERSITY OF CRETE MEDICAL SCHOOL
Μαρία Ραϊσάκη, Στέλιος Δημητρίου Ιατρική Σχολή Πανεπιστημίου Κρήτης, ΠΓΝΗ
Συνεχής έμμεση αυθεντικοποίηση χρηστών κινητού τηλεφώνου με συνδυασμό των δεδ...ISSEL
Τα έξυπνα κινητά τηλέφωνα (smartphones) έχουν γίνει πλέον αναπόσπαστο κομμάτι της καθημερινότητας και οι πληροφορίες που αποθηκεύονται σε αυτά συνεχώς αυξάνονται. Προκύπτει λοιπόν το ζήτημα της ασφάλειας αυτών των συσκευών, που είναι κρίσιμο για την εξασφάλιση της προστασίας των δεδομένων του ιδιοκτήτη ενός smartphone από κακόβουλους χρήστες. Οι περισσότερες συσκευές πλέον προσφέρουν ένα επίπεδο ασφάλειας χρησιμοποιώντας διάφορους τρόπους αυθεντικοποίησης, που όμως έχουν χαρακτηριστεί ευάλωτοι και έτσι έχει δημιουργηθεί η ανάγκη για την υλοποίηση καινούργιων μεθοδολογιών. Λύση στο πρόβλημα έρχονται να δώσουν τεχνικές συνεχούς – έμμεσης αυθεντικοποίησης, δηλαδή συστήματα που εκτελούνται συνεχώς στο παρασκήνιο της συσκευής, χωρίς να χρειάζονται την εκτέλεση ενεργειών από την πλευρά του χρήστη. Τα συστήματα αυτά συνήθως χρησιμοποιούν διάφορα δεδομένα του κινητού τηλεφώνου ή άλλων συσκευών, μοντελοποιούν την συμπεριφορά του χρήστη και στην συνέχεια παρέχουν ένα μοναδικό ή συμπληρωματικό επίπεδο ασφαλείας, που εξετάζει αν η συμπεριφορά του χρήστη συμβαδίζει με αυτή του ιδιοκτήτη. Στη συγκεκριμένη εργασία, το σύστημα βασίζει τη λειτουργία του σε δεδομένα αισθητήρων που είναι ήδη εγκατεστημένοι στα περισσότερα smartphones, όπως το επιταχυνσιόμετρο, το γυροσκόπιο και η οθόνη αφής. Η συμπεριφορά του ιδιοκτήτη μοντελοποιείται με αυτά τα δεδομένα μέσω της χρήσης μοντέλων μηχανικής μάθησης που, στη συνέχεια, μπορούν να πάρουν κατάλληλες αποφάσεις. Αυτό που κάνει το εν λόγω σύστημα να ξεχωρίζει είναι η χρήση ενός συνόλου μοντέλων μηχανών διανυσμάτων υποστήριξης μίας κλάσης (One Class Support Vector Machines), με ένα εύρος τιμών για τις παραμέτρους, για κάθε τύπο δεδομένων, που παράγει την πιθανότητα μια συμπεριφορά να συμβαδίζει με αυτή του ιδιοκτήτη και στην συνέχεια καλεί ένα σύστημα εμπιστοσύνης να αποφασίσει αν θα πραγματοποιηθεί το κλείδωμα της συσκευής. Όπως αποδεικνύεται, ένα τέτοιο σύστημα είναι εύκολα υλοποιήσιμο, μπορεί να προσαρμόζεται στον τύπο δεδομένων που είναι διαθέσιμος κάθε στιγμή και έτσι μπορεί να επιφέρει σημαντικές βελτιώσεις στην αυθεντικοποίηση του χρήστη με έναν συνεχή αλλά και μη παρεμβατικό τρόπο.
3. Θεωρητικό Μέρος - Εισαγωγή
Κυτταρομετρία Ροής (Flow Cytometry – FCM)
ΟΡΙΣΜΟΣ: μεθοδολογία μέτρησης και ανάλυσης σημάτων που παράγονται καθώς
μια μονήρης διάταξη σωματιδίων διέρχεται δια μέσου μιας φωτεινής δέσμης.
ΚΛΙΝΙΚΗ ΠΡΑΞΗ: αυτοματοποιημένη μέθοδος ανάλυσης των φυσικοχημικών
χαρακτηριστικών κυττάρων και σωματιδίων σε δείγμα υπό τη μορφή
εναιωρήματος, με βάση τη σκέδαση της ακτίνας laser και τον φθορισμό
σημασμένων με φθοριοχρώματα μονοκλωνικών αντισωμάτων ή άλλων μορίων .
(www.bioinformin.net)
12. Παροξυσμική Νυκτερινή Αιμοσφαιρινουρία (ΡΝΗ)
(what-when-how.com/proteomics/gpi-anchors-proteomics)(wellnessadvocate.com/?dgl=16717)
PIG-A
>180 μεταλλάξεις Τύπου Ι
Τύπου ΙΙ (<10%)
Τύπου ΙΙΙ
(Devalet et al., 2015)
13. Επιπτώσεις της ΡΝΗ στην υγεία των ασθενών
μυϊκή δυστονία
πόνος στην κοιλιακή χώρα
στυτική δυσλειτουργία
αρτηριακή απόφραξη
μειωμένη παροχή αίματος στα νεφρά
αρτηριακή και πνευμονική υπέρταση
πνευμονικός εμβολισμός
ADP
Θρόμβωση (ηπατικές και
περιφερειακές φλέβες) Ο
πιο συχνός λόγος θανάτου
των ασθενών ΡΝΗ (έως το 1/3)
14. Παρακολούθηση για την αντιμετώπιση των συμπτωμάτων
Ποσοστό του ΡΝΗ κλώνου > 10% Αιμοκάθαρση, μεταγγίσεις
Οξεία αιμολυτικά επεισόδια κορτικοστεροειδή και ανδρογόνα
Λήψη συμπληρωμάτων σιδήρου για ερυθροποίηση
Θρομβωτικά επεισόδια αντιπηκτικά, π.χ. warfarin (>50% GPI-ανώμαλα κοκκιοκύτταρα)
μεταμόσχευση βλαστοκυττάρων και μυελού των οστών απαλλαγή από τον ΡΝΗ κλώνο
Eculizumab
Θεραπευτική προσέγγιση της ΡΝΗ
(Devalet et al., 2015)
15. Οδηγίες της International Clinical Cytometry Society (ICCS)
Περιφερικό αίμα του ασθενούς (όχι μετάγγιση αίματος για τουλάχιστον έναν μήνα). Δείγμα
μυελού των οστών ψευδώς θετικά (στάδιο ωρίμανσης και διαφοροποίησης)
Τουλάχιστον δύο κυτταρικοί πληθυσμοί για δείκτες σχετικούς με την ύπαρξη GPI-μορίων,
(ερυθροκύτταρα και ουδετερόφιλα, ΌΧΙ αιμοπετάλια)
Τουλάχιστον δύο αντιγόνα επιφανείας στα ερυθροκύτταρα (κατά προτίμηση CD59 και
CD235a) ΡΝΗ κλώνος (ΙΙΙ, ΙΙ) > 3% για 2 δείκτες (ή > 30% για έναν)
Διαγνωστική προσέγγιση της ΡΝΗ – Η σημασία της Κυτταρομετρίας Ροής
Κυτταρομετρία
ροής
The Gold Standard
16. Υλικά και Μέθοδοι
Ερυθροκύτταρα (RBCs)
10 μl
+ PBS alb + PBS alb
Δείγμα
προς
διερεύνηση
Ανάλυση κατά προτίμηση αμέσως
Επώαση 10 min με CD235a-FITC και CD59-PE στο σκοτάδι
πλύση
17. Λευκοκύτταρα (WBCs)
Σωληνάριο
Μονοκλωνικά αντισώματα -
Φθοριοχρώματα
Χρησιμότητα
Α
FLAER - Alexa Fluor 488 GPI - AP
CD59-PE GPI - AP
CD33-PC5 Μονοπύρηνα
CD14-PC7 GPI - AP
CD45-APC-Cy750 Λευκοκύτταρα
Β
CD66b-FITC GPI - AP
CD24-PE GPI – AP
CD15-PC5 Ουδετερόφιλα
CD16-PC7 GPI - AP
CD45-APC-Cy750 Λευκοκύτταρα
Απευθείας
επώαση με τα
μονοκλωνικά
αντισώματα
Διάλυμα λύσης
ερυθροκυττάρων Ανάλυση
20. Συζήτηση - Συμπεράσματα
Η Κυτταρομετρία ροής αποτελεί μία μέθοδο συνεχώς εξελισσόμενη, της οποίας οι
δυνατότητες και οι εφαρμογές επεκτείνονται σε διάφορα επιστημονικά πεδία
Η Κυτταρομετρία ροής δίνει τη δυνατότητα ταχείας και άμεσης διάγνωσης της ΡΝΗ,
καθώς επίσης και του διαχωρισμού της από ασθένειες με παρόμοια συμπτώματα, γι’
αυτό και έχει καθιερωθεί ως μέθοδος αναφοράς (gold standard) από την ICCS
Η Κυτταρομετρία ροής παρουσιάζει, σχετικά με τις μοριακές μεθόδους, πολυάριθμα
πλεονεκτήματα
Η Κυτταρομετρία ροής είναι σημαντική προσθήκη στην εργαλειοθήκη του ερευνητή
και του κλινικού ιατρού/βιολόγου
Το μέλλον στη διάγνωση και τον έλεγχο της ΡΝΗ είναι άρρηκτα συνδεδεμένο με την
Κυτταρομετρία ροής (CRISPR-Cas9 σε μακάκους Rhesus, για την δημιουργία ζωικού
μοντέλου knock-out για το PIG-A)
ενδοκυτταρική πολυπλοκότητα, βαθμός κοκκίωσης και περιεκτικότητα σε DNA και στο μέγεθος και σχήμα αυτών
ΠΛΕΟΝΕΚΤΗΜΑΤΑ:
Μεγάλη ταχύτητα μέτρησης
Ανάλυση μεγάλου αριθμού κυττάρων σε ελάχιστο χρόνο
Πολύ μεγάλη ευαισθησία
Επαναληψιμότητα μετρήσεων
Ταυτόχρονη ανάλυση πολλών δεικτών στο ίδιο κύτταρο
Ταυτόχρονη χρήση πολλών αντισωμάτων
Μεγάλη αναλυτική ικανότητα, Αξιοπιστία, Σταθεροποίηση συνθηκών αυστηρός ποιοτικός έλεγχος
Ακρίβεια
Ελάχιστη ποσότητα δείγματος
Εύκολη προετοιμασία δείγματος
Ποσοτικοποίηση αποτελεσμάτων
Αποθήκευση δεδομένων στον Η/Υ
αργού, που εκπέμπει στα 488 nm, ενώ τα πιο σύγχρονα μηχανήματα διαθέτουν και δεύτερη πηγή φωτός στα 635 nm, τρίτη έως και έβδομη.
η ανωμαλία εμφανίζεται συνήθως κατά τα αρχικά στάδια σύνθεσης του μορίου, όπου η Ν-ακετυλο-γλυκοζαμίνη μεταφέρεται στο μόριο της φωσφατιδυλοϊνοσιτόλης