Elektroforesis protein serum digunakan untuk memisahkan protein berdasarkan muatan dan ukuran untuk membantu diagnosis penyakit. Protein dalam serum diberi warna dan dipisahkan menggunakan gel agarosa dengan aliran listrik. Hasil kemudian dibaca menggunakan densitometer untuk menganalisis fraksi protein dan membandingkannya dengan nilai normal untuk mendiagnosis kondisi seperti inflamasi, kanker, dan gangguan hati atau ginjal.

1. SERUM PROTEIN
ELEKTROFORESIS
(SPE)
Dwi Retnoningrum
Moderator: dr. Janti Marbun

2. ELEKTROFORESIS
Pemisahan partikel-partikel dengan muatan
listrik yang berbeda, dengan cara
mengalirkan arus listrik melalui campuran
partikel yang diletakkan pada suatu medium
penyangga
Molekul bergerak dengan kecepatan yang berbeda-beda
kearah elektrode sesuai muatan dan konfigurasinya juga
ditentukan oleh sifat media penyangga yang dipakai

3. PRINSIP ELEKTROFORESIS

4. SERUM PROTEIN ELEKTROFORESIS
SERUM kertas khusus yg dilapisi gel
agarose dan dialiri arus listrik
BERDASARKAN UKURAN & MUATAN LISTRIK
Albumin
-1 globulin -2 globulin β globulin
γ globulin

5. TUJUAN PEMERIKSAAN
Menunjang diagnosis penyakit
terutama penyakit yang disertai dengan
kelainan abnormal protein
- Penyakit Peradangan
- Keganasan
- Sindroma Nefrotik
- Penyakit Hati Kronik
- Status Nutrisi

6. Serum Protein Electrophoresis

7. PRA ANALITIK
• Persiapan Pasien :
– Tidak perlu persiapan khusus
– Hindari obat yang meningkatkan protein total serum
(steroid, androgen, digitalis, insulin, kontrasepsi oral)
– Hindari obat yang menurunkan protein total serum
(laksansia, rifampisin, dekstran, estrogen)
• Persiapan Sampel :
– Hindari pemakaian sampel yang ikterik dan lipemik
– Hindari hemolisis dan torniquet yang lama : hasil
peningkatan palsu

8. PRA ANALITIK
PRINSIP
+ -
pH 8,6
(4,6)
(4,8) (5,2)
(6,4)

9. PRA ANALITIK
ALAT
1. Komponen elektroforesis dan power supply
2. Komponen densitometer
3. Aplikator
4. Bak pewarna (untuk proses staining, destaining, dan
dehydration)
5. Bak/ kotak kaca (untuk proses clearing)
6. Oven/hair dryer

10. PRA ANALITIK
BAHAN
BAHAN :
1. Sampel serum
2. Kertas selulosa asetat
3. Larutan bufer : Tris boric acid EDTA dengan I (Ion
streng) 0,03-0,12
4. Zat pewarna (Ponceau S)
5. Destaining solutio : asam asetat 5% yang dibuat dari
asam asetat glasial 5 ml ditambah akuades 5 ml
6. Dehidration solutio : etanol 96%
7. Clearing solutio : campuran 7 bagian volume asam
asetat + 3 bagian volume etil asetat

11. ANALITIK
1. Kertas /strip yang dilapisi agarose di rendam pada
larutan buffer
2. Ambil sampel cairan serum dari tabung.
3. Tuang sampel pada strip berjejer secara melintang
4. Letakan strip pada bridge secara mendatar &
sambungkan dengan alat elektrophoresis,
5. Pemisahan selesai, kemudian dengan pemulasan
protein (Hasil berupa protein staining), dan dilakukan
penilaian dengan densitometer yang dihubungkan
elektrophoretogram, hasil berupa kurva dan hasil
prosentase masing-masing fraksi protein.

12. PROSEDUR
Persiapan membran dan sampel

13. PROSEDUR
Aplikasi sampel & Elektroforesis

14. PROTEIN STAINING
SAS2
Electrophoresis
CAT 3041

15. QUANTIFICATION /PEMBACAAN
POLYSCAN

16. ELEKTROFORESIS PROTEIN

17. Skema representasi dari protein
Elektroforesis dengan gel agarose
Pemisahan protein dilihat
Dengan densitometer
POST ANALITIK

19. NILAI RUJUKAN
Fraksi % g/dl
Albumin
Alfa 1 globulin
Alfa 2 globulin
Beta globulin
Gamma globulin
58-74
2,0-3,5
5,4-10,6
7,4-14
8,0-18,0
3,3-5,0
0,1-0,4
0,5-1,0
0,7-1,2
0,5-1,6

20. Protein Total ( Normal 6,3- 8,3 g/ dl)
MENINGKAT MENURUN
• Inflamasi kronik
misalnya arteritis
• Dehidrasi,
Makroglobulinemia
• DM asidosis, Leukemia
monositik
• Multipel mieloma
• Sarkoidosis
• Gangguan hati,
Malabsorbsi
• Malnutrisi , Nefrosis
• Luka bakar, DM
• Toksemia gravidarum
• Glomerulonefritis
kronik

21. ALBUMIN
Berfungsi mempertahankan tekanan osmotik plasma yang di
sintesa dalam hati.
Hiperalbuminemia
Dehidrasi, Multiple mieloma
Hipoalbuminemia
– Penyakit hati : cirosis hepatis
– Penyakit ginjal : sindrom nefrotik
– Keganasan
– Malnutrisi
– Inflamasi gastrointestinal
– Kehamilan (normal 8 minggu post partum), usia tua

22. • Gambaran Sindroma Nefrotik
– Kehilangan protein dengan BM rendah yang lama (seperti
albumin, IgG) dan retensi protein BM tinggi (seperti alpha-
2-macroglobulin)
http://erl.pathology.iupui.edu/labmed/Generator.cfm?Image=SPE
Normal

23. ALFA 1 GLOBULIN
Terdiri dari:
- Alfa 1 Antitripsin (AAT)
- Alfa 1 Anti Glikoprotein
(AAG)
- Alfa 1 Lipoprotein
- Alfa 1 Fetoprotein (AFP)
- Thyroid Binding
Globulin (TBG)
- Transcortin
Infeksi akut
Febris
Kehamilan
Nefrosis
Defisiensi alfa
1 antitripsin

24. • Defisiensi Alpha-1-anti-trypsin
– Terdapat pada penyakit paru-paru atau penyakit hati.
– Defisiensi alpha-1-anti-trypsin kongenital pada umumnya
banyak berhubungan emphysema, insufisiensi
pancreatic atau sirosis hati.
Normal
http://erl.pathology.iupui.edu/labmed/Generator.cfm?Image=SPE

25. ALFA 2 GLOBULIN
- α2 Haptoglobin (HAP)  hemolisis
- α2 Macroglobulin (AMG)  sindrome nefrotik
- Ceruloplasmin (CER)  penyakit wilson
• Inflamasi akut
• Sirosis bilier
• Obstruksi bilier
• Nefrosis
• Multipel
mieloma
• Colitis ulseratif
• Anemia
hemolitik

26. • Gambaran pada Inflamasi akut
– Terdapat pada pasien wanita 42 tahun dg diagnosa
pneumonia & pyelonefritis ( Suhu Penderita 40 oC)
– Pada Inflamasi akut gambaran albumin dan gamma globulin
menurun dan alpha-2-globulin akan sangat meningkat
Normal
http://erl.pathology.iupui.edu/labmed/Generator.cfm?Image=SPE

27. BETA GLOBULIN
- Transferin (TRF) : transport Fe  Anemia hipokromik
- β Lipoprotein : Transport Lipid
- Fibrinogen
- β 2 microglobulin (BMG)
• Sirosis bilier
• Obstruksi bilier
• Multipel
mieloma
• Nefrosis

28. • Penyakit Hati :
– Pasien laki-laki, umur 46 tahun dengan penyakit hati
stadium akhir yang disebabkan kecanduan alkohol.
– Pada gambaran sirosis, batas lekukan antara beta dan
gamma kabur dan kadang digambarkan sebagai
gambaran jembatan "beta-gamma”
Normal
http://erl.pathology.iupui.edu/labmed/Generator.cfm?Image=SPE

30. GAMMA GLOBULIN
MENINGKAT MENURUN
• Infeksi kronik :
sarcoidosis
• Penyakit hati
• Multipel mieloma
• Makroglobulinemia
Waldestrom
• Leukemia
• Agammaglobulinemia
• Hipogamaglobulinemia
• Sindrom nefrotik

31. • Polyclonal gammopathy
– Biasanya terjadi pada banyak penyakit kronik. Seperti
sarcoidosis. Peningkatan tinggi dari fraksi gobulin
menggambarkan "sarcoid stepping.”
http://erl.pathology.iupui.edu/labmed/Generator.cfm?Image=SPE
Normal

32. • Gambaran Monoclonal protein
– Pasiem umur 72 tahun laki-
laki dengan lower back pain.
– Penilaian immunoglobulin
memperlihatkan peningkatan
yang sangat tinggi dari serum
IgG, tetapi IgA and IgM
menurun.
– Gambaran diagnosa multiple
myeloma
http://erl.pathology.iupui.edu/labmed/Generator.cfm?Image=SPE

33. • Biclonal gammopathy
– Hasil dari pasien laki-laki
umur 62 tahun yang kurus
dan lemah pada penyakit
multiple myeloma.
– Pada penyakit ini, biclonal
gammopathies adalah
jarang, terjadi pada 1,7 %
pasien.
http://erl.pathology.iupui.edu/labmed/Generator.cfm?Image=SPE

35. Sumber Pustaka
1. Hardjoeno dkk. Interpretasi hasil tes laboratorium
diagnostik. Makasar. Lephas, 2003: 249-64.
2. Jusniati, Benny Rusli, Hardjoeno. Tes Protein Serum. Bagian
Patologi Klinik Fakultas Kedokteran Universitas Hasanuddin
3. O’connell T, Horita T, Kasravi B. Understanding and
Interpreting Serum Protein Electrophoresis. Am Fam
Physician 2005;71:105-12.
4. Interpretive Guide to Clinical Electrophoresis. 2nd Ed: 1988.
Helena Laboratories