scusateme Cocchini ma solo versione DIOtetto... entschueldigen Sie aber diese Version ist Dialektisch in ITALLIANO ... sorry but diese Linguadge it is Dialectal in ITALIANO
Lezione 4.3 del Progetto "L'Ospedale Va a Scuola" a cura dell'Ospedale Pediatrico Bambino Gesù di Roma in collaborazione con l'Istituto Bambino Gesù per la Salute del Bambino e dell'Adolescente.
Presentazione della mia tesi magistrale in Biotecnologie per l'Alimentazione incentrata sullo studio del potenziale alterante su prodotti lattiero caserari del batterio Pseudomonas fluorescens.
scusateme Cocchini ma solo versione DIOtetto... entschueldigen Sie aber diese Version ist Dialektisch in ITALLIANO ... sorry but diese Linguadge it is Dialectal in ITALIANO
Lezione 4.3 del Progetto "L'Ospedale Va a Scuola" a cura dell'Ospedale Pediatrico Bambino Gesù di Roma in collaborazione con l'Istituto Bambino Gesù per la Salute del Bambino e dell'Adolescente.
Presentazione della mia tesi magistrale in Biotecnologie per l'Alimentazione incentrata sullo studio del potenziale alterante su prodotti lattiero caserari del batterio Pseudomonas fluorescens.
PPT Ferrarese "The diagnosis of the disease: laboratory & clinic"StopTb Italia
PPT Ferrarese "The diagnosis of the disease: laboratory & clinic", Symposium on TB, 14 October, III Session (nurses & healthcare providers), Monza, Italy.
X. laevis è un importante organismo modello in biologia evolutiva dello sviluppo, tossicologia, etologia, neurobiologia, endocrinologia e biologia dei tumori; grazie alle recenti tecniche di Genome editing, ha acquisito una posizione rilevante anche nel campo della Genetica.
4. CANDIDOSI
• Provocate da Candida albicans e altre candida
spp. che costituiscono la normale flora nella
bocca, sulla pelle, nella vagina e nell’intestino
• Può manifestarsi in seguito a trattamenti con
antibiotici che sopprimono la normale flora
batterica e ne permettono una crescita maggiore
5. Infezioni sistemiche da
Candida si manifestano
• In pazienti fortemente debilitati (es. cancro)
• In diabetici
• In pazienti sottoposti a chemioterapia
• Soggetti sottoposti a trapianto
(immunosoppressi)
• Nei leucemici
• Nei malati di AIDS
7. La transizione
lievito ife
in vitro viene indotta da:
•Aumento della temperatura (25° → 37°C)
•Aumento del pH del mezzo (acido → basico)
•Limitazione dei nutrienti (es. glucosio)
•Siero
15. 3. Tests specifici
• Test di blastèse:
Mette in evidenza i tubi germinativi: filamenti che si formano
a partire dalle blastospore (nessun restringimento alla
base)
• Ricerca di clamidospore:
Spore (endosporulazione) sferiche o ovali prodotte in
condizioni avverse.
16. 3.1. Test di blastèse:
Agitare
Incubare 3h a
37°C
Coltura 1 ml
liquida siero
17.
18. 3.2. Ricerca di clamidospore
Una goccia Mettere un vetrino
di coltura
Incubare
24 - 48h
a 28°C
Guardare al
Terreno a microscopio
base di mais
23. Omologia di CaGS con trasportatori
e sensori di glucosio
Identità Similarità Tipo di proteina Organismo
47% 67% Snf3p S.cerevisiae
46% 67% Rgt2p “
47% 65% Rag4 K.lactis
44% 61% Rco3 N.crassa
35% 59% Hxt2 S.cerevisiae
33% 60% CaHgt1 C.albicans
E’ presente la sequenza consensus tipica dei trasportatori e sensori
per il glucosio: 334-[-G-I-i-l-V-E-t-W-G-R-R-p-l-l-m-a-g-S-]-351
31. Aspergillus fumigatus
Può riprodursi fino a 50°C : uccelli infezioni
mortali (in particolare A. fumigatus).
Nei rifiuti organici quando la T ↑, gli
aspergilli coltura pura.
miceli simili a polvere verde-bluastro:
fumigatus (latino fumoso).
I conidiofori lunghezza di 500um, conidi
formano catene parallele verdastri
(Aspergillus in latino significa spazzola)
34. Aspergillus fumigatus
Fattori di Virulenza
•dimensioni del tallo fungino maggiori di quelle delle
cellule fagocitarie
•dimensioni della spora 2 a 3 µm
•l’energia meccanica del conidio in germinazione
•Micotossine
35. Micotossine
Le micotossine (un gruppo di circa 100 sostanze)
metaboliti secondari di alcuni funghi filamentosi
Aspergillus sp Penicillium sp Fusarium sp
36. Alimenti per lattanti e prima infanzia
Regolamento N. 683/2004
aflatossina B1 0,10 µg/kg
aflatossina M1 0,025 µg/kg
ocratossina A 0,50 µg/kg
38. Una sostanza antifungina ottimale
dovrebbe avere...
• Un ampio spettro di attività
• Proprietà farmacocinetiche
ottimali HOST FUNGUS
• Adeguata efficacia in vivo
• Bassa tossicità
• Basso costo
DRUG
39. Al momento esistono solo
Fungistatici Tossici
se somministrati
per lunghi periodi
• Amphotericin B
• Nystatin
• Ketoconazole
• Fluconazole
• Itraconazole
40. Candida è in grado di sopravvivere
adattandosi agli ambienti più ostili,
come quello all’interno dei macrofagi
•Regolazione dell’espressione genica
•Secrezione di proteinasi (SAP)
•Produzione di ife
41. Isolamento di geni differenzialmente espressi
durante l’infezione dei macrofagi
Studio della funzione dei geni isolati, per
poter individuare potenziali antifungini sui prodotti
proteici
43. Azoles
• Azoles
Imidazoles Triazoles
• Causes Inhibition of
C-14 α demethylase,
(an enzyme required
for the synthesis of
ergosterol) by binding
to cytochrome P450
45. Allyamines
• Inhibits squalene
epoxidase, an enzyme
essential for synthesis
of ergosterol
• Drug acculmulates in
nails, skin and fat
• Very useful for nail
infections
46. Polyenes
• Amphotericin, nystatin
• Antifungal activity by
binding to membrane
sterols such as
ergosterol and they
increase membrane
permeability and leads
to cell death
47. Amphotericin B
è in uso clinico dal 1960
• Un poliene macrolide
• Isolato dallo
Streptomyces nodosus
• Insolubile in acqua
• Solubilizzato in sodio
deossicolato
48. Amphotericin B
é attiva in vitro contro
• Candida spp.
(incluse le specie azolo-resistenti)
• Aspergillus spp.
• Cryptococcus neoformans
• Mucor spp.
• Blastomyces dermatitidis
• Coccidioides immitis
• Histoplasma capsulatum
• Paracoccidioides brasiliensis
49. Ridotta suscettibilità
(resistenza) all’ amphotericin B
• C. lusitaniae • S. apiospermum
• C. krusei • Fusarium spp.
• C. neoformans • C. carrionii
• Trichosporon spp. • F. pedrosoi
• A. terreus • ...
Walsh et al. JCM 1990; 28: 1616
Sutton et al. JCM 1999; 37: 2343
Arikan et al. JCM 1999; 37: 3946
Arikan et al. JCM 2002; 40: 1406
50. Resistenza all’ Amphotericin B
• Resistenza all’ amphotericin B è
frequentemente osservata in vivo
• Generalmente è dovuta ad una riduzione
dell’attività del sistema immunitario
51. Amphotericin B
Amphotericin B è tossica
Effetti collaterali dell’ AmB
Nefrotossicità
Disfunzioni epatiche
Anemia,..