alternanza scuola lavoro

1. ESPERIENZA GOLINELLI
Bologna
26-28 febbraio 2019
Matteo Zivelli VD

2. Obbiettivi
• Rendere dei batteri immuni agli antibiotici(ampicillina) ed in
grado di sintetizzare una proteina (GFP)
• Riconoscere frammenti di DNA tramite la tecnica del
fingerprinting

3. Conoscenze necessarie
• Struttura batterica
• Ricombinazione genica dei batteri
• Funzionamento degli enzimi di restrizione
• Elettroforesi

4. Ricombinazione batterica
Per rendere dei batteri competenti occorre far integrare nel loro
materiale genetico dei particolari frammenti chiamati plasmidi.
Per far in modo che la maggioranza di essi integri i plasmidi si può
ricorrere al cloruro di calcio che apre dei pori nella membrana
cellulare oppure si possono porare tramite piccole scariche elettriche

5. Una volta fatto cio si pongono i batteri in speciali contenitori contenenti
diversi terreni di coltura.

7. DNA FINGERPRINTING
Per confrontare del materiale genetico si ricorre alla tecnica del fingerprinting.
Prima di tutto occorre evere dei frammenti di DNA; essi si ottengono tramite l
utilizzo di ENZIMI DI RESTRIZIONE, questi particolari enzimi hanno la funzione
di tagliare il dna in particolari zone riconoscendo sequenze palindromiche

8. Una volta ottenuti i frammenti, il materiale genetico viene posto un una
VASCA ELETTROFORETICA, che presenta un particolare gel per
elettroforesi chiamato GEL DI AGAROSIO.
L’elettroforesi sfrutta la carica negativa
del DNA data dalla presenza del gruppo
fosfato per farne muovere i framenti. I
frammenti piu piccoli percorreranno un
maggiore percorso rispetto a quelli piu
grandi