طريقة المرشحات الغشائية لتحليل المياه ميكروبياً من كتاب أساسيات علم الأحياء الدقيقة (عملي ) تأليف دكتور يوسف الشريك Dr. Yousef Elshrek

1. ‫المياه‬ ‫لتحليل‬ ‫الغشائية‬ ‫المرشحات‬ ‫طريقة‬
‫ميكروبيا‬
‫الدقيقة‬ ‫األحياء‬ ‫علم‬ ‫أساسيات‬ ‫كتاب‬ ‫من‬
(‫عملي‬)
‫الشريك‬ ‫يوسف‬ ‫دكتور‬ ‫تأليف‬
Dr. Yousef Elshrek

2. •‫طريقة‬‫المرشحات‬‫الغشائية‬‫لتحليل‬‫ا‬‫لمياه‬
‫ميكروبيا‬
•‫أساسيات‬‫هذه‬‫الطريقة‬‫هي‬‫كيفية‬‫حجز‬
‫البكتيريا‬‫بطريقة‬‫آلية‬‫على‬‫سطح‬
،‫المرشح‬‫عن‬‫طريق‬‫ثقوب‬‫التي‬‫ال‬
‫تسمح‬‫بمرور‬‫خاليا‬‫البكتيرية‬‫ذات‬‫األ‬‫قطار‬
‫التي‬‫يزيد‬‫عن‬‫أقطار‬،‫ثقوبها‬‫وتتراوح‬
‫أقطار‬‫المرشحات‬‫ما‬‫بين‬0.22–0.45
‫ميكرون‬،‫وتتأثر‬‫عملية‬‫حجز‬‫الخاليا‬
‫البكتيرية‬‫على‬‫الصفات‬‫التالية‬:
•‫قطر‬‫ثقوب‬‫المرشح‬.
•‫الشحنة‬‫الكهربائية‬‫للمرشح‬،‫وللبكت‬‫يريا‬
‫الموجودة‬‫في‬‫العينة‬.
•)‫درجة‬‫اإلدمصاص‬(Adsorption)
‫الخاليا‬،‫البكتيرية‬‫على‬‫سطح‬‫المرش‬‫حات‬
•‫طبيعة‬‫السائل‬‫المراد‬‫ترشيحه‬.
‫شكل‬(1)‫معقم‬ ‫العليا‬ ‫الصورة‬‫بالترشيح‬‫والصو‬ ،‫رة‬
‫المرشح‬ ‫فتحات‬ ‫حجم‬ ‫توضح‬ ‫السفلى‬Millipore
filter disk‫وال‬ ‫السوائل‬ ‫بمرور‬ ‫تسمح‬ ‫قد‬ ‫التي‬
‫البكتيريا‬ ‫بمرور‬ ‫تسمح‬
Source: Pearson Education <Inc Publishing as Benjamin Coming.
2004 ( jpg class midlands tech.com

3. •‫خطوات‬‫التجربة‬:
•‫لتجهيز‬‫جهاز‬‫الترشيح‬
–‫يضع‬‫قابض‬‫المرشح‬‫ف‬‫ي‬
‫سدادة‬،‫المطاطية‬‫ثم‬
‫إدخاله‬‫في‬‫زجاجة‬
‫التفريغ‬‫المتصلة‬‫بمض‬‫خة‬
‫التفريغ‬.
‫شكل‬(2)‫المختلفة‬ ‫المرشح‬ ‫أدوات‬
•‫للائي‬‫ل‬‫الغش‬ ‫للح‬‫ل‬‫المرش‬ ‫للل‬‫ل‬‫ينق‬
‫الترشي‬ ‫وحدة‬ ‫قاعدة‬ ‫إلى‬‫ح‬
‫أن‬ ‫لللى‬‫ل‬‫عل‬ ،‫لللم‬‫ل‬‫معق‬ ‫لللاط‬‫ل‬‫بملق‬
‫للللح‬‫ل‬‫المرش‬ ‫للللطح‬‫ل‬‫س‬ ‫للللون‬‫ل‬‫يك‬
‫المقسللم‬‫ألعلللى‬.‫هللو‬ ‫كمللا‬
‫في‬ ‫موضح‬‫شكل‬(3)
‫شكل‬(3)‫الغشائي‬ ‫المرشح‬ ‫نقل‬ ‫عملية‬

4. •‫القمع‬ ‫تعقيم‬ ‫طريقة‬
–‫حجمه‬ ‫كأس‬ ‫في‬ ‫يسقط‬ ‫ويترك‬ ،‫باألصبعين‬ ‫القمع‬ ‫يمسك‬800‫مل‬
‫تركيزه‬ ‫إيثانول‬ ‫على‬ ‫يحتوي‬95.%

5. –‫يخرج‬‫القمع‬‫من‬‫الكأس‬‫بماسك‬‫معدني‬‫ويقلب‬‫رأسا‬‫على‬‫عقب‬.
–‫يترك‬‫الكحول‬‫الزائد‬‫يسقط‬‫من‬‫القمع‬‫على‬‫شكل‬‫قطرات‬‫في‬
،‫الكأس‬‫وتجفف‬‫أخر‬‫قطرات‬‫الكحول‬‫بورق‬‫الترشيح‬.

6. •‫يمرر‬‫القمع‬‫بحذر‬‫شديد‬‫عددا‬‫مرات‬‫على‬‫لهب‬‫موقد‬‫بنزن‬‫قبل‬‫إلى‬‫أن‬
‫يجف‬‫الكحول‬.

7. •‫بعد‬‫التخلص‬‫من‬‫الكحول‬‫تمسك‬‫وحدة‬‫القمع‬‫باألصابع‬‫م‬‫ن‬
‫الخارج‬.
•‫تضع‬‫وحدة‬‫القمع‬‫على‬‫قرص‬،‫الترشيح‬‫والتأكد‬‫من‬‫أن‬‫ال‬‫قمع‬
‫ممسوك‬‫بإحكام‬‫في‬،‫موقعه‬‫بواسطة‬‫مقبض‬‫من‬‫نوع‬
‫المقص‬.

8. •‫تسكب‬‫عينة‬‫الماء‬‫في‬‫القمع‬‫وتدار‬‫المضخة‬‫لسحب‬‫الماء‬‫إلى‬
‫أسفل‬‫الكأس‬،‫المخروطي‬‫وتبقى‬‫البكتيريا‬‫على‬‫سطح‬‫و‬‫رقة‬
‫الترشيح‬.

9. •‫بعد‬‫انتهاء‬‫من‬‫سحب‬‫الماء‬،‫يفك‬،‫المقبض‬‫ويضع‬‫القم‬‫ع‬‫في‬
‫الكحول‬‫بحيث‬‫يكون‬‫وضع‬‫الجهة‬‫العليا‬‫في‬‫األسفل‬.

10. •‫الترشيح‬ ‫جهاز‬ ‫قاعدة‬ ‫من‬ ‫المعقم‬ ‫بالملقاط‬ ‫الغشاء‬ ‫يزال‬.

11. •‫ينقل‬‫الغشاء‬‫إلى‬‫طبق‬‫بتري‬‫مناسب‬‫لحجمه‬‫الذي‬‫يحتو‬‫ي‬
‫على‬‫بيئة‬‫مناسبة‬.

12. •‫يدفع‬‫الغشاء‬‫على‬‫البيئة‬‫بادئا‬‫بالجانب‬‫البعيد‬‫من‬‫ا‬،‫لطبق‬‫مع‬
‫لف‬‫الغشاء‬‫على‬‫البيئة‬‫لتفادي‬‫حجز‬‫فقاقيع‬‫هواء‬‫تح‬‫ت‬
،‫الغشاء‬‫ويجب‬‫أن‬‫يكون‬‫وضعه‬‫النهائي‬‫في‬‫منتصف‬‫ال‬‫طبق‬

13. •‫يحضن‬‫الطبق‬‫أو‬‫األطباق‬‫بدون‬،‫قلبها‬‫عند‬‫درجة‬‫حرارة‬
‫والوقت‬‫المناسبان‬.
•‫يالحظ‬‫نمو‬‫البكتيريا‬‫على‬‫سطح‬‫البيئة‬.

14. •‫يحسب‬‫عدد‬‫البكتيريا‬‫الموجودة‬‫في‬100‫مل‬‫عينة‬،‫باستعمال‬
‫المعادلة‬‫التالية‬: