Recommended
More Related Content
Similar to Praktikum Biokimia
Similar to Praktikum Biokimia (20)
Recently uploaded
Recently uploaded (20)
Praktikum Biokimia
- 1. Praktikum Biokimia No Praktikum Tujuan Prinsip Alat & Bahan Prosedur Hasil KARBOHIDRAT 1 Uji Molisch Membedakan antara senyawa karbohidrat dengan senyawa bukan karbohidrat. ->Mendeteksi karbohidrat ● Karbohidrat + H2SO4 menghasilkan senyawa furfural ● Senyawa furfural + α-naphthol menghasilkan senyawa berwarna Ungu 1. Tabung reaksi 2. Pipet tetes 3. Lemari asam 4. Buret & statif 5. Pati 6. Laktosa 7. Sukrosa 8. Glukosa 9. Putih telur 10. Pereaksi Molisch 11. H2SO4 pekat 1. Masukkan masing2 2mL bahan ke tabung reaksi 2. Tambahkan 2 mL pereaksi Molisch pada setiap tabung 3. Teteskan H2SO4 2 mL pada setiap tabung Cincin Ungu tanda karbohidrat: Pati (✓) Laktosa (✓) Sukrosa (✓) Glukosa (✓) Putih telur (x)* Pati, laktosa, sukrosa, dan glukosa adalah senyawa karbohidrat sedangkan Putih telur bukan. 2 Uji Iodium Membedakan polisakarida (lebih spesifiknya pati) dari Disakarida dan Monosakarida ->Mendeteksi ● Struktur 3 dimensi pati berupa spiral dapat mengikat molekul iodium (lugol) secara fisik di sela2 spiral yang membentuk kompleks yang berwarna biru 1. Tabung reaksi 2. Pipet tetes 3. Pati 4. Laktosa 5. Sukrosa 6. Glukosa 7. Larutan lugol 1. Masukkan masing2 2mL bahan ke dalam tabung reaksi 2. Berikan 1 tetes lugol ke dalam setiap tabung Warna biru pekat ciri polisakarida: Pati (✓) Laktosa (x) bening Sukrosa (x) bening Glukosa (x) bening
- 2. polisakarida reaksi Pati adalah gugus polisakarida 3 Uji Barfoed Membedakan antara monosakarida dan disakarida ->Mendeteksi monosakarida ● Reduksi oleh karbohidrat dalam suasana asam. ● Penambahan pereaksi warna fosfomolibdat pada monosakarida akan menghasilkan warna biru tua. 1. Tabung reaksi 2. Pipet tetes 3. Gelas kimia 4. Pemanas 5. Laktosa 6. Glukosa 7. Larutan barfoed 8. Larutan fosfomolibdat 1. Masukkan masing2 1 mL larutan uji ke dalam tabung reaksi 2. Tambahkan 1 mL larutan barfoed ke setiap tabung 3. Panaskan tabung dalam air mendidih selama 3 menit 4. Tambahkan 1 mL larutan fosfomolibdat ke setiap tabung. Warna biru tua indikasi monosakarida: Glukosa (✓) Laktosa (x) Glukosa termasuk dalam senyawa karbohidrat monosakarida 4 Uji Seliwanoff Membedakan karbohidrat yang memiliki gugus keton dan aldehid -> Mendeteksi ketosa ● Karbohidrat atau turunannya (4- hidroksimetil furfural) dengan resorsinol menghasilkan senyawa yang berwarna merah ● Ketika dipanaskan, ketosa lebih cepat terdehidrasi daripada aldosa ● Ketosa yang terdehidrasi kemudian bereaksi kondensasi 1. Tabung reaksi 2. Pipet tetes 3. Gelas kimia 4. Pemanas 5. Laktosa 6. Sukrosa 7. Glukosa 8. Fruktosa 9. Larutan 1. Masukkan masing2 0,5 mL larutan uji ke dalam tabung reaksi 2. Tambahkan 5 mL larutan seliwanoff ke setiap tabung Warna merah (kiri ke kanan): Laktosa (x) Sukrosa (✓) Fruktosa (✓) Glukosa (x)
- 3. dengan resorsinol, menghasilkan zat berwarna merah. seliwanoff 3. Panaskan tabung dalam air mendidih selama 1 menit. Sukrosa dan fruktosa merupakan karbohidrat yang memiliki kandungan ketosa 5 Uji Benedict Memperlihatkan sifat pereduksi dari karbohidrat. ->Mendeteksi monosakarida dan karbohidrat pereduksi ● Tembaga sulfat dalam benedict akan bereaksi dengan monosakarida dan gula pereduksi membentuk endapan berwarna merah bata. ● Monosakarida dan gula pereduksi dapat bereaksi dengan benedict karena keduanya mengandung aldehid ataupun keton bebas sehingga terbentuk endapan kuprooksida (Cu2O) yang berwarna hijau sampai merah bata ● *sukrosa tidak mengandung atom karbon anomer bebas, karena anomer kedua komponen unit monosakarida pada sukrosa (glukosa & fruktosa) berikatan satu sama lain. Alasan inilah yang menjadikan sukrosa bukan merupakan gula pereduksi. 1. Tabung reaksi 2. Pipet tetes 3. Gelas kimia 4. Pemanas 5. Laktosa 6. Sukrosa 7. Glukosa 8. Larutan Benedict 1. Masukkan masing2 1 mL larutan uji ke dalam tabung reaksi 2. Tambahkan 1 mL larutan benedict ke setiap tabung 3. Panaskan tabung dalam air mendidih selama 5 menit. Endapan merah: Laktosa (✓) Sukrosa (x) Glukosa (✓) Laktosa dan glukosa merupakan gula pereduksi sedangkan sukrosa bukan gula pereduksi*
- 4. PROTEIN 1 Reaksi Biuret Memperlihatkan bahwa protein mengandung ikatan peptida ->Mendeteksi keberadaan protein (dengan mendeteksi adanya ikatan peptida) ● Gugus CO dan NH dari ikatan peptida dalam molekul protein memberikan warna lembayung (violet) bila direaksikan dengan ion Cu2+ (biru) dalam suasana alkali. 1. Tabung reaksi 2. Pipet tetes 3. Gelatin 4. Putih telur 5. NaOH 10% 6. Larutan CuSO4 1. Masukkan masing2 2 mL gelatin dan putih telur ke tabung reaksi yang beda 2. Tambahkan 2 mL NaOH 10% ke dalam setiap tabung 3. Tambahkan 1-10 tetes larutan CuSO4 ke masing2 tabung dan lakukan homogenisasi Warna violet: Putih telur (✓) Gelatin (✓) (kiri putih telur, kanan gelatin) Protein dalam gelatin dan putih telur memiliki ikatan peptida 2 Reaksi Xantoprotein Memperlihatkan bahwa protein tertentu mengandung asam amino dengan inti benzena -> mendeteksi asam amino dengan inti benzena ● Nitrasi inti benzena dari asam amino dalam molekul protein (Tirosin, Fenilalanin, Triptofan) menjadi senyawa nitro yang berwarna kuning ● Dalam lingkungan alkali, senyawa terionisasi dan warnanya berubah semakin gelap/jingga ● Perubahan warna menjadi kuning gelap/jingga menandakan presensi asam amino dengan inti benzena ● Paling terlihat pada asam amino 1. Tabung reaksi 2. Pipet tetes 3. Lemari asam 4. Buret & statif 5. Gelas kimia 6. Pemanas 7. Gelatin 8. Putih telur 9. HNO3 pekat 10. Larutan HN4OH 1. Masukkan 2 mL gelatin dan 2 mL putih telur ke tabung yang berbeda. 2. Tambahkan 1 mL HNO3 pekat ke setiap tabung. 3. Perhatikan endapan, kemudian panaskan hingga larutan berwarna kuning dan Warna: Putih telur: kuning pekat Gelatin: Kuning pucat (kiri putih telur, kanan gelatin) Protein dalam gelatin dan putih
- 5. tirosin dan triptofan, dan paling lemah pada fenilalanin. endapan larut. 4. Dinginkan tabung dengan air mengalir 5. Tambahkan 5 tetes NH4OH, lakukan homogenisasi telur memiliki inti benzena 3 Reaksi Millon Memperlihatkan bahwa protein mengandung asam amino dengan inti fenol (tirosin) ->Mendeteksi asam amino tirosin pada protein (dengan mendeteksi inti fenol) ● Tirosin merupakan satu-satunya asam amino yang memiliki gugus hidroksifenil / senyawa fenol ● Inti fenol pada tirosin mengalami nitrasi yang hasil dari nitrasinya membentuk kompleks dengan ion Hg+ dan Hg2+ dalam pereaksi millon yang setelah dipanaskan menghasilkan warna merah kecoklatan. 1. Pipet tetes 2. Tabung reaksi 3. Gelas kimia 4. Pemanas 5. Gelatin 6. Putih telur 7. Pereaksi millon 1. Masukkan 2 mL gelatin dan 2 mL putih telur ke tabung yang berbeda. 2. Masukkan 3-4 tetes pereaksi millon ke setiap tabung 3. Panaskan tabung di air mendidih selama 2-3 menit. Warna merah kecoklatan: Gelatin (✓) Putih Telur (✓) (kiri putih telur, kanan gelatin) Protein dalam gelatin dan putih telur mengandung asam amino tirosin 4 Reaksi Hopkins- Cole Memperlihatkan bahwa protein mengandung asam amino triptofan ->Mendeteksi asam amino triptofan pada protein ● Asam amino triptofan pada protein berkondensasi dengan asam glioksilat yang dengan lingkungan asam pekat membentuk kompleks berwarna. ● Asam amino triptofan memiliki gugus indol, gugus aldehid pada 1. Pipet tetes 2. Tabung reaksi 3. Lemari asam 4. Buret & statif 5. Gelatin 6. Putih telur 7. Pereaksi hopkins-cole 1. Masukkan 2 mL gelatin dan 2 mL putih telur ke tabung yang berbeda. 2. Masukkan 3-4 tetes pereaksi Hopkins-cole ke Hasil: Gelatin: bening Putih telur: kompleks warna, ada warna violet diantara warna putih dan bening
- 6. asam glioksilat (pereaksi hopkins-cole) membantu mengubah gugus indol menjadi senyawa yang berwarna violet seperti yang tampak pada pada bagian tengah. Reaksi tersebut hanya akan berhasil jika ada oks idator kuat, seperti senyawa H2SO4. 8. H2SO4 pekat setiap tabung 3. Tambahkan H2SO4 pekat hingga terbentuk dua lapisan berbeda Putih telur mengandung asam amino triptofan sedangkan gelatin tidak LEMAK 1 Uji Emulsi Lemak Memperlihatkan air dan minyak dapat bercampur dengan bantuan pengemulsi ● Senyawa bersifat pengemulsi apabila dapat larut di air dan minyak ● Keberadaan pengemulsi menyebabkan minyak dapat tersebar merata dan stabil di antara molekul-molekul air ● Minyak bersifat tidak larut dalam pelarut polar (air) & larut dalam pelarut non polar. ● Supaya terbentuk emulsi yang stabil maka diperlukan suatu zat pengemulsi (sabun) yang berfungsi menurunkan tegangan permukaan antara kedua fase cairan. 1. Pipet tetes 2. Tabung reaksi 3. Air suling 4. Minyak kelapa 5. Sabun 1. Masukkan 2 mL air suling ke dua tabung reaksi 2. Tambahkan 1 mL minyak kelapa ke masing-masing tabung 3. Tambahkan sedikit sabun ke salah satu tabung, lakukan homogenisasi Tanpa sabun → terpisah dengan lapisan minyak di atas Dengan sabun → bercampur/larut Sabun merupakan salah satu agen pengemulsi (emulgator) 2 Uji Kejenuhan Lemak Memperlihatkan bahwa pada minyak nabati terdapat ● Minyak tidak jenuh akan mengadisi iodium (I2)sehingga ikatan rangkapnya hilang. 1. Pipet tetes 2. Tabung reaksi 3. Minyak kelapa 1. Masukkan 1 mL bahan uji (minyak) ke (from left to right) Minyak kelapa →. 4 tetes
- 7. lemak jenuh (tidak ada ikatan rangkap) dan lemak tak jenuh (memiliki ikatan rangkap) ->Mengukur tingkat kejenuhan lemak ● Warna coklat pada larutan Iodium (Larutan Hubl) akan hilang sehingga larutan menjadi bening. ● Setelah sampai pada titik jenuh (semua ikatan rangkap pada minyak hilang), larutan iodin tidak lagi diadisi yang menyebabkan warna coklat tampak. 4. Minyak Jagung 5. Minyak Jagung yang dipanaskan 6. Larutan Hubl tabung reaksi 2. Teteskan larutan Hubl ke setiap tabung, hitung setiap tetes hingga warna larutan menjadi keruh/coklat. Minyak jagung (dipanaskan) → 6 tetes Minyak jagung → 8 tetes Tingkat kejenuhan minyak kelapa paling tinggi dan minyak jagung paling rendah 3 Uji Kolesterol (Salkowski test) Memperlihatkan bahwa kolesterol tidak dapat ditemukan di minyak nabati namun ada di sumber hewani ->Mendeteksi adanya kolesterol ● Kolesterol + H2SO4 akan menghasilkan warna merah- ungu ● Penambahan H2SO4 bertujuan untuk memutus ikatan ester lipid. Apabila dalam sampel tersebut terdapat kolesterol, maka lapisan kolesterol di bagian atas menjadi berwarna merah-ungu ● Kuning: H2SO4 yang tidak bereaksi 1. Pipet tetes 2. Tabung reaksi 3. Minyak kelapa 4. Larutan kolesterol 5. Kuning telur dalam kloroform 6. H2SO4 pekat 1. Masukkan 1 mL bahan uji ke tabung reaksi 2. Tambahkan 1 mL larutan H2SO4 ke dalam setiap tabung dan amati perubahan. Minyak kelapa: kuning (-) Kuning telur dalam kloroform: merah- ungu (+) Larutan kolesterol: merah-ungu (+) Terlihat bahwa ada kolesterol pada larutan kuning telur dan larutan kolesterol, minyak kelapa tidak