الاستخلاص والكشف عن المركبات الثانوية في النباتات
- 2. المركبات عن والكشف االستخالص
النباتات في الثانوية
إلقاء
م
.
د
.
شهيد العالي عبد خنساء
م
.
إبراهيم كاظم سارة
ر
.
بايلوجيين
اقبال
خوام
كشيش
- 7. على االستخالص عملية كفاءة وتعتمد
:
•
النسيجًالنباتي
•
ًمحتوىًالنسيجًالمائي
•
نوعًالمادةًالمرادًعزلها
•
هلًالدراسةًوصفيةًامًكمية
•
منعًعملياتًاالكسدةًاالنزيمية
- 8. النباتية المادة وعزل االستخالص طريقة
•
يتمًاستخدامًاالنسجةًالنباتيةًالطازجةًفيًالتحليلًالكيميائيًاذًتوضعًالمادة
ًفيًالكحول
ًالمغليًخاللًدقائقًمنًجمعهاًلكنًفيًاغلبًاألحيان
اليكون
النباتًقيدًالدراسةًف
ًيًمتناول
اليدًلعدةًأسبابًمنها
(
ًبعدًالمسافة
.
ًعدمًتوفرها
.
ًتنموًفيًموسمًآخر
....
الخ
)
ولهذاًت
ًجمع
ًالعيناتًالنباتيةًالمقطوفةًحديثاًفيًأكياسًبالستيكية
,
كماًيمكنًتجفيفًا
ًلعيناتًالنباتية
ًاوًباستخدامًطرائقًبديلةًاختصاراًللوقتًتحتًظروفًخاصةًل،ًبصورةًطبيعية
ًتجنب
ًحدوثًتغيراتًكيميائيةًلألنسجةًالنباتية
.
- 9. النبات في الثانوية المركبات
•
وبماًانًبلدناًيمتلكًثروةًنباتيةًطبيعيةًكبيرةًكانًالبدًمنًالتوجهًلدراسةًالمستخ
ًلصاتًالنباتية
الًفيًالنباتًوبعضًالكائناتًالحيةًالّعومحتواهاًالكيمياويًوأنواعهاًومعرفةًدورهاًالف
ًمعتمدةًأو
غيرًالمعتمدةًفيًتغذيتهاًعلىًالنباتاتًوهذاًكلهًيدخلًضمنًالتصنيفًالكيميائيًل
ًلنبات
plant
chemotaxonomy
ًًعليهًفأنًالمركبات،
الفنيولية
والتربينية
والقلويدات
وغيرهاًت
ًعد
ًمن
ًالمركبات
الكيميائيةًالمعروفةًوالمستخدمةًفيًمجالًتصنيفًالنباتًوكذلكًفهيًمهمةًف
ًيًإقامة
ًالعالقاتًالتطورية
.
•
لهذاًأصبحًمنًالضروريًاخضاعًالنباتاتًالطبيعيةًفيًبلدناًلعملياتًغربلةًمتنوعة
ًلتحديد
محتواهاًمنًالمركباتًالفعالةًبالشكلًالذيًيفضيًالىًالحصولًعلىًمصدرًنباتيًذوًم
ًضادات
ًألنًاستخدامًمضاداتًاألكسدةًالصناعية،أكسدةًطبيعية
Synthetic antioxidants
ًميةًالسرطانيةُسبدأًيقترنًبظهورًبعضًالتأثيراتًال
.
•
ًلذاًفأنًمركباتًااليضًالثانوي
Secondary Metabolites
ًهيًمركباتًكيميائيةًليسًلها
ًعالقةًبصورةًمباشرةًبالتركيبًالخلوي
ل
النسجة
ًًللطاقةواألعضاءًاوًتكونًمصدرا
.
- 10. مجموعتي الى النباتات في الكيميائية المركبات تنقسم
رئيستين ن
:
-
•
Primary Compound (Metabolites)
•
1-Carbohydrates
•
2-Protiens
•
3-Fatty , Compounds and Fatty acids
•
4-Nucleic acid and Nucleic bases
• 5-Miscelanous Compoundsمثلًاالنزيمات
- 11. B-Secondary Metabolites
وتشمل
:
-
• 1-Phenolic Compounds
• -Phenols and Phenolic acids
• -Phenolproponids
• -Flavonoids Pigments
• -Anthocyanins
• -Flavonols and Flavones
• -Xanthones and Stilbenes
• -Quinone Pigments
•
2-Terpenoids
•
-Essential Oils
•
-Diterpenoids and Gibberellins
•
-Triterpenoids and Steriods
•
-Carotenoids
- 21. المستخلصات تحضير
النباتية
المائية النباتية المستخلصات تحضير
:
•
ًيتمًأخذ
10
ًعغمًمنًمسحوقًالمادةًالجافةًألوراقًوسيقانًوجذورًالنباتاتًالنعناعًكال
ًلى
حدة
.
ًوتوضعًفيًدورقًزجاجيًسعة
500
ًملًيحتوي
200
ملًماءًمقطر
.
ًتمًخلطًالمادة
ًالنباتيةًبالخالطًالمغناطيسيًلمدة
15
ًدقيقة
,
ًتركًالمحلولًبعدًذلكًمدة
24
ًساعةًلترسيب
ًاألجزاءًالنباتية
ًوزيادةًفترة
اإلستخالص
إلى
24
ًساعة
(
للحصولًعلىًاستخالصًأفضل
)
ًوتغطيةًالدورقًبأحكام
(
لمنعًدخولًالشوائب
)
,
ومنًثمًرشحًالمحلولًبقطعةًقماشًم
ًن
الململ
ًأوًأوراقًترشيحًنوع
(
Whatman2
)
ًووضعًالراشحًفيًجهازًالطردًالمركزي
Centrifuge
(
ًبسرعة
3000
دورة
/
ًدقيقةًولمدةًعشرًدقائق
)
لترسيبًالموادًالغريبة
.
- 24. الكشوفات
الترسيبية
(
االستداللية
)
المجامي عن للكشف
الفعالة ع
النباتية المستخلصات في
.
المركبات عن الكشف
القلوانية
:
•
كاشف
ماير
Mayer's reagent
•
ضرُح
الكاشف
من
محلول
A
والمحضر
بإذابة
1.58
غم
من
كلوريد
الزئبقيك
HgCl2
في
60
مل
من
الماء
المقطر
,
و
محلول
B
والمحضر
بإذابة
5
غم
من
يوديد
البوتاسيوم
KI
في
10
مل
من
الماء
المقطر
ومزج
محلولي
A
و
B
واكمل
الحجم
الى
100
مل
بالماء
المقطريضاف
الكاشف
الى
المستخلص
المائي
او
الكحولي
يظهر
راسب
ابيض
الى
اسمر
دليل
على
وجود
المركبات
القلوانية
.
- 25. المركبات عن الكشف
الفينولية
:
الرصاص خالت كاشف
:
•
يحضر
المحلول
باذابة
1
غم
من
خالت
الرصاص
في
100
مل
من
الماء
المقطر
،
ثم
اضيفت
قطرات
عديدة
منه
الى
انبوبة
اختبار
تحوي
0.5
مل
من
المستخلص
.
فكان
يظر
لون
اصفر
او
اصفر
مخضر
دليال
على
وجود
التانينات
.
•
كاشف
كلوريد
الحديديك
:
•
محلول
مائي
لـ
1
%
من
كلوريد
الحديديك
يستعمل
للكشف
عن
وجود
التاتينا
ت
والفينوالت
إذ،البسيطة
تضاف
كمية
منه
الى
كمية
مساوية
لها
من
المستخلص
ال
مائي
والكحولي
فيظهر
راسب
ابيض
هالمي
.
- 27. المركبات عن الكشف
التربينية
:
الرغوة كاشف
:
•
يدل
على
وجود
السابونينات
saponins
في
المحلول
.
ترج
قنينة
محكمة
الغلق
تحوي
ً
مستخلصا
ً
مائيا
او
ً
كحوليا
للنبات
,
وعند
ظهور
رغوة
كثيفة
فوق
سطح
المس
تخلص
يكون
ذلك
إشارة
الى
نتيجة
موجبة
•
•
:
الكشف
عن
المركبات
الكاليكوسيدية
:
•
كاشف
موليش
Molish reagent
•
ياخذ
2
مل
من
المستخلص
المائي
والكحولي
ويضاف
اليه
قطرتان
من
محلول
α-
naphthol
ويرج
المحلول
جيدا
ثم
تمسك
االنبوبة
بشكل
مائل
ويضاف
2
مل
من
حامض
الكبريتيك
بشكل
قطرات
على
جدار
االنبوبة
لحين
ظهور
طبقتين
ويفصل
ب
ين
الطبقتين
حلقة
بنفسجية
اللون
عند
وجود
المواد
الكاليكوسيدية
.
- 29. العطرية الزيوت
Essential Oils
:
-
ذو تكون عام بشكل ، عطرية رائحة ذو مركبات هي
عدي الماء كثافة من اقل وكثافتها الغرفة حرارة درجة في سوائل وهي ، معقدة تراكيب
اللون مة
الطيارة بالزيوت سميت ، ملونة تكون ما ًاونادر
Volatile Oils
الماء بخار مع تتقطر ألنها
زكية رائحة ذات تكون ما ًاغالب ألنها العطرية بالزيوت سميت و ، تتحلل ان دون
.
•
تنتشر
الزيوت
العطرية
في
2000
نبات
تمثل
60
عائلة
نباتية
،
تتكون
اثناء
عملية
التح
ول
الغذائي
او
البناء
في
النباتات
،
وتتجمع
في
تركيبات
وعائية
مثل
الشعيرات
الغدية
(
كما
في
النعناع
)
او
غدد
زيتية
(
كما
في
الحمضيات
Citrus
)
،
او
قنوات
زيتية
(
كما
في
العائلة
الخيمية
واليانسون
)
،
قد
توجد
اما
في
كل
أجزاء
النبات
او
أجزاء
معينة
منه
،
كما
ف
ي
الثمار
مثل
اليانسون
Pimpinella anisum
،
او
في
القشرة
كما
في
البرتقال
.
•
توجد
الزيوت
العطرية
ضمن
أعضاء
مختلفة
وضمن
هذه
األعضاء
،
قد
توجد
في
الجي
وب
الصغيرة
او
الخاليا
الغدية
للقشرة
الخارجية
لبعض
األجزاء
النباتية
.
و
قد
توج
د
في
اكثر
من
جزء
نباتي
فهي
توجد
في
البذور
كاليانسون
Pimpinella anisum
وفي
اللحاء
مثل
القرفة
Cinnamomum zeylanicum
،
وفي
الجذور
مثل
عشبة
الهندباء
Vetiveria
zizanioides
و
األوراق
مثل
أشجار
Eucalyptus
و
االزهار
مثل
الخزامى
Lavandula officinalis
وقشور
الثمار
مثل
الحمضيات
Citrus
.
وتكون
نسبتها
مختلفة
حسب
نوع
النبات
ففي
القرنفل
16
-
18
%
و
0.02
%
في
الورد
.
- 31. العطرية للزيوت الطبيعية الصفات
•
1
-
الرائحة
:
معظم
الزيوت
الطيارة
تتميز
بالرائحة
العطرة
،
ً
ونادرا
ما
تكون
رائحت
ها
نفاذة
غير
مرغوب
بها
.
•
2
-
التطاير
:
الغالبية
العظمى
للزيوت
الطيارة
و
المستخلصة
تتبخر
او
تتطاير
ً
تماما
تحت
الظروف
الطبيعية
.
•
3
-
االذابة
:
جميع
الزيوت
ال
تذوب
في
الماء
،
اال
انها
تذوب
في
الكحول
بنسبة
95
%
.
•
4
-
الكثافة
النوعية
:
و
تختلف
قيمتها
للزيوت
الطيارة
بأختالف
مصادرها
النبات
ية
،
ومعظم
الزيوت
العطرية
كثافتها
اقل
من
كثافة
الماء
النوعية
،
مما
يعمل
على
طفو
الزيت
العطري
فوق
سطح
الماء
.
- 32. منها عوامل لعدة ًاتبع االستخالص طرق تختلف
:
•
1
-
التركيب
الكيميائي
للزيت
الطيار
:
يجب
اختيار
الطريقة
التي
يضمن
الحصول
ع
ليه
بحالته
الطبيعية
دون
حدوث
تحلل
او
تغير
في
صفاته
الكيميائية
وبالتالي
ال
يتغير
رائح
ته
او
طعمه
.
•
2
-
الجزء
من
النبات
الذي
يحتوي
على
الزيت
الطيار
ومكان
وجود
خاليا
الزيت
به
و
مدى
حس
اسية
وسمك
جدران
هذه
الخاليا
فطريقة
استخالص
الزيت
من
االزهار
يختلف
عنه
من
األوراق
او
الثمار
او
الجذور
.
•
3
-
العوامل
االقتصادية
في
طريقة
االستخالص
و
ً
خصوصا
عند
المستوى
التجاري
حيث
يجب
ان
تحصل
على
الزيت
بأكمله
بأقل
تكلفة
ممكنة
.
•
4
-
كمية
الزيت
في
النبات
فأذا
كانت
ضئيلة
يتم
استخالصه
بطريقة
المذيبات
حتى
ال
فقدُت
هذه
الكمية
اذا
ما
استخدمت
طريقة
التقطير
بالماء
او
البخار
مثل
استخالص
زيت
الياسمين
اذا
استخ
دم
طريقة
التقطير
فأن
الناتج
النهائي
قد
ال
يحتوي
على
زيت
بالمرة
.
•
5
-
يعتبر
وقت
جمع
المحصول
و
طرق
معاملته
و
اعداده
مثل
االستخالص
من
اهم
العوامل
التي
تؤثر
في
الناتج
النهائي
.
- 33. الزيت نسبة في المؤثرة العوامل
:
•
1
-
خصوبة
التربة
•
2
-
وقت
الجمع
•
3
-
طرائق
االستخالص
•
4
-
عمر
النبات
•
5
-
أجزاء
النبات
•
6
-
كفاءة
الجهاز
•
يتأثر
التركيب
الكيميائي
للزيت
العطري
بعوامل
عديدة
كأختالف
المنطقة
الج
غرافية
و
االرتفاع
عن
سطح
البحر
و
طرائق
التجفيف
و
الممارسات
الزراعية
.
- 34. النباتات من الزيوت استخالص طرائق
•
ً
اوال
–
االستخالص
بطريقة
التقطير
•
التقطير
بالماء
–
التقطير
بالبخار
–
التقطير
بالماء
و
البخار
•
ً
ثانيا
–
االستخالص
بأستخدام
المذيبات
العضوية
(
طيارة
و
ثابتة
)
•
االستخالص
بالزيوت
والشحوم
على
(
البارد
-
الساخن
)
•
ً
ثالثا
-
االستخالص
بالضغط
(
العصر
-
الخدش
)
•
باالسفنج
–
الخدش
او
الوخز
–
البشر
–
عصر
ميكانيكي
•
ً
رابعا
–
االستخالص
بالتحلل
االنزيمي
لبعض
الزيوت
الطيارة
الموجودة
بصورة
كالي
كوسيدات
•
ً
خامسا
–
االستخالص
بواسطة
ثاني
أوكسيد
الكاربون
المسال
•
ً
سادسا
-
االستخالص
باالدمصاص
(
الفحم
النباتي
)
- 35. ًالاو
–
التقطير بطريقة االستخالص
وهي طرائق ثالث للتقطير
:
-
•
1
-
طريقة
التقطير
المائي
Water Distillation
:
توضع
النباتات
المراد
تقطيرها
مع
الماء
في
وعاء
التقطيراو
في
وعاء
شبكي
ثم
يغمر
األخير
بالماء
بحيث
ال
تالمس
الماد
ة
النباتية
جدران
الوعاء
ويتم
التسخين
اما
بأستخدام
النار
مباشرة
او
بصورة
غير
مباشرة
اذ
ي
وضع
وعاء
التقطير
في
حمام
مائي
وتستخدم
هذه
الطريقة
مع
النباتات
التي
تتحمل
الغ
ليان
والمجففة
ً
جزئيا
وتحتوي
على
نسبة
عالية
من
الزيت
.
•
2
-
طريقة
التقطير
بالبخار
•
توضع
النباتات
المراد
استخالص
الزيت
منها
في
او
عبر
وعاء
شبكي
يسمح
لبخ
ار
الماء
ان
يتخللها
فيحمل
بخار
الماء
الزيت
الى
انابيب
التكثيف
وتتحول
الحالة
السائل
ة
وتنفصل
من
الماء
بسهولة
،
ويجب
ان
تكون
المادة
النباتية
مكسرة
الى
أجزاء
صغيرة
.
- 38. 3
-
ًامع والبخار بالماء التقطير طريقة
•
تشبه
طريقة
التقطير
المائي
اال
ان
النباتات
المراد
استخالص
الزيت
منها
توضع
في
وعاء
التقطيربحيث
ال
تطمر
في
الماء
بل
توضع
على
حاجز
شبكي
بحيث
يكون
مستوى
الماء
في
كال
الحالتين
ال
يرتفع
الى
مستوى
العينة
ال
نباتية
،
وعند
تسخين
وعاء
التقطير
يغلي
الماء
ويتبخر
فيتصاعد
البخاروبضغط
منخفض
ويمر
بالنباتات
فيحمل
معه
الزيت
الطيار
الى
انابيب
التكثيف
حيث
يتح
ول
كل
منهما
الى
الحالة
السائلة
،
وتكون
كمية
الزيت
الممكن
الحصول
عليها
اعلى
مما
لو
استخدمت
طريقة
التقطير
المائي
وان
احتمال
تحلل
الزيت
او
تأثره
بال
حرارة
يكون
قليل
.
•
ان
ارتفاع
درجة
الحرارة
لمكونات
الزيت
يؤدي
الى
حصول
Dehydration
الهدرجة
او
البلمرة
Polymerization
.
- 42. العطري الزيوت استخالص في المستعملة المذيبات تقسم
الى ة
قسمين
:
أ
-
الطيارة المذيبات
Volatile Solvent
أهمها
:
•
االيثر
والبتروليم
ايثر
والكلوروفورم
واالسيتون
والبنزين
والهكس
ان
(
وهي
مذيبات
غير
قطبية
)
.
•
ب
-
المذيبات
غير
الطيارة
Non- Volatile Solvent
•
وهي
دهن
البقر
ودهن
الخنزير
وزيت
الزيتون
على
ان
تكون
على
درجة
عا
لية
من
النقاوة
ً
واحيانا
يعمل
مزيج
من
هذه
الدهون
وتجرى
عملية
االستخالص
ب
غمر
العينة
النباتية
بطبقة
الدهن
او
الزيت
بطريقة
تسمح
بذوبان
الزيت
الطيار
في
الدهن
وبعد
تشبع
األخير
بالزيت
الطيار
يجمع
بشكل
عجينة
خام
ثم
ي
ستخلص
الزيت
من
العجينة
بواسطة
الكحول
المطلق
ويتم
الحصول
على
الزيت
م
ن
خالل
تبخير
الكحول
.