Skripsi Uji aktivitas antihiperkolesterol jamur tiram putih (Pleurotus ostreatus) pada hamster hiperkolesterolemia berdasarkan penurunan kadar LDL dan kolesterol total

1. UJI AKTIVITAS ANTIHIPERKOLESTEROL EKSTRAK β-GLUKAN
LARUT ALKALI JAMUR TIRAM PUTIH Pleurotus ostreatus (Jacq.)
Kumm.) PADA HAMSTER HIPERKOLESTEROLEMIA
Pembimbing :
Drs. H. Priyo Wahyudi, M.si.
Elly Wardani, M.farm., Apt
Fajar Santoso
0904015090

2. LATAR BELAKANG
JAMUR TIRAM
PUTIH
(Pleurotus ostreatus)
HIPERKOLESTEROLEMIA
β-GLUKAN
Pleuran
ANTIHIPERKOLESTEROL
Pada penelitian sebelumnya, bahwa pemberian
ekstrak β-glukan Termitomyces eurrhizus 72 mg/200 g
BB pada tikus, menunjukkan hasil penurunan kadar
LDL sebesar 28,55% dan kolesterol total sebesar
11,2%
Pleurotus ostreatus
HIPERKOLESTEROLEMIA
Hiperkolesterolimia adalah suatu gangguan
metabolisme yang ditandai keadaan naiknya kadar
kolesterol dalam darah. Kondisi ini terjadi pada saat
konsentrasi kolesterol total serum melebihi normal
200 mg/dl.
JAMUR TIRAM PUTIH
Jamur tiram putih (Pleurotus ostreatus) merupakan
jamur kayu dengan nilai gizi tinggi. Mudah
dibudidayakan yang secara luas dimanfaatkan sebagai
sumber pangan. Salah satu kandungannya yaitu β-
glukan
BETA-GLUKAN
Beta-glukan jamur tiram disebut pleuran, merupakan
polisakarida salah satu komponen penyusun dinding
sel jamur, mempunyai aktivitas sebagai
antihiperkolesterol
ANTIHIPERKOLESTEROL
Mekanisme penurunan kolesterol oleh β-glukan yaitu
berikatan dengan asam empedu sehingga mencegah
reabsorpsi kolesterol dalam usus dan akhirnya
diekskresikan.

3. IDENTIFIKASI MASALAH
Bagaimana efektivitas ekstrak alkali jamur tiram putih dalam menurunkan kadar
kolesterol dibandingkan dengan kolestiramin?
Apakah pemberian ekstrak β-glukan larut alkali jamur tiram putih (Pleurotus ostreatus)
mempunyai aktivitas antihiperkolesterol dalam menurunkan kadar kolesterol total dan
LDL pada hamster hiperkolesterolemia ?
Pada dosis berapakah ekstrak β-glukan larut alkali jamur tiram putih (Pleurotus
ostreatus) dapat berkhasiat sebagai antihiperkolesterol secara optimum?

4. Apakah pemberian ekstrak β-glukan larut alkali jamur tiram putih mempunyai
aktivitas antihiperkolesterol dalam menurunkan kadar kolesterol total dan LDL pada
hamster hiperkolesterolemia ?
PERUMUSAN MASALAH

5. TUJUAN & MANFAAT
PENELITIAN
 Tujuan penelitan adalah untuk membuktikan aktivitas ekstrak β-glukan
larut alkali jamur tiram putih sebagai antihiperkolesterol
 Manfaat penelitian adalah memberikan informasi tentang ekstrak alkali
beta-glukan jamur tiram putih dapat menurunkan kadar kolesterol total
dan LDL, dan memberikan pengetahuan kepada masyarakat serta menjadi
acuan dalam penelitian selanjutnya.

6. HIPOTESIS
Ekstrak β-glukan larut alkali jamur tiram putih Pleurotus
ostreatus (Jacq.) P. Kumm.) mempunyai aktivitas sebagai
antihiperkolesterol pada hamster hiperkolesterolemia

7. tempat
bahan
waktu
Tempat &
Waktu.
Alat &
Bahan.
April- Juli 2013
Laboratorium PUSPIPTEK Serpong dan Laboratorium
Farmakologi dan Patologi Klinik FFS UHAMKA
kertas saring, neraca analitik, botol timbang, blender,
liofilisator, timbangan, sonde, alat suntik steril, pipet mikro,
mikrotube, spektrophotometer clinical, centrifuge, alat-alat
glass,dll
 Serbuk kering jamur tiram putih
 Pakan kolesterol
 Obat pembanding klestiramin
 Bahan kimia : etanol 80%, reagen kit kolesterol, NaOH
hewan uji
alat
Hamster syrian jantan
TEMPAT & WAKTU, ALAT & BAHAN PENELITIAN

8. Ekstraksi β-glukan
Larut alkali
Ekstrak kering
β-glukan
ORGANOLEPTIS

Kadar
Abu

Perhitungan
Rendemen

Penyiapan
Alat & Bahan
Pemeriksaan
mutu ekstrak 
Kadar
Air

Uji
Kualitatif
POLA PENELITIAN
DETERMINASI

Jamur tiram putih
Analisis DataUji Antihiperkolesterol

9. METODE EKSTRAKSI.
2 kg serbuk
jamur
Akuades
3x volume
+
Dipanaskan ad mendidih
±3 jam, disaring
FILTRAT
RESIDU
Residu + etanol 80%
3x volume,
diaduk & disaring
Residu + NaOH 1N 5x
volume, disaring
FILTRAT
RESIDU
Asam Asetat 2 M
(Netralisasi)
+
Centrifuge
4000 rpm, 20 menit
Endapan
cuci dengan
akuades,
etanol,akuades
Lalu Freezedrying

FILTRAT
RESIDU
Serbukalkali
β-glukan

10. HASIL EKSTRAKSI
No. Bahan Hasil
1 Jamur tiram kering 2000 g
2 Serbuk jamur tiram 1920 g
3 Ekstrak kering 188,8
4 % Rendemen 9,83%

11. No. Berat sampel (g) % DC Kadar air (%)
1 1,804 90,76 9,24
2 1,802 95,12 6,39
3 1,814 90,34 9.66
RATA-RATA 8,43
KADAR AIR
No. Berat krusibel
kosong (g)
Berat krusibel +
ekstrak kering (g)
W1
Berat krusibel + ekstrak
kering konstan (g)
W2
Kadar abu (%)
1 22,4294
2 22,2268 24,2268 22,4290 10,13
3 22,4294
KADAR ABU

12. PEMBUATAN INDUKSI HIPERKOLESTEROL
Kuning telur ayam
55% x 1kg = 550 g
Pakan standar
( pelet hamster), digerus
ad 100% = 400 g
Lemak kambing
dipanaskan ad mencair
5% x 1kg = 50 g
Campur semua bahan,
Bentuk adonan menjadi pelet

13. Dosis Ekstarak β-glukan larut alkali jamur tiram putih :
Dosis 1 : ½ x 25,2 mg/hari/50 g BB = 12,6 mg/hari/50 g BB
Dosis 2 : 1 x 25,2 mg/hari/50 g BB = 25,2 mg/hari/50 g BB
Dosis 3 : 2 x 25,2 mg/hari/50 g BB= 50,4 mg/hari/50 g BB
Dosis Kolestiramin :
Dosis kolestiramin untuk manusia (70 kg) adalah 4 g.
Dosis Hamster (50 g) = 0,026 g/50 g BB
PENETAPAN DOSIS

14. TABEL PERLAKUAN HEWAN UJI
Kelompok Aklimatisasi
7 hari
Induksi pakan
hiperkolesterol
28 hari
Hari
Ke-36
Tahap perlakuan
14 HARI
Hari
Ke-51
Normal
Pakan
standard
Pakan standar
P
E
N
G
A
M
B
I
L
A
N
D
A
R
A
H
Pakan standar + Na CMC 0,5%
P
E
N
G
A
M
B
I
L
A
N
D
A
R
A
H
Negatif
Pakan
hiperkolesterol
+ Na-CMC
Pakan standar + Na CMC 0,5%
Positif Pakan standar + Na CMC 0,5%
+ kolestiramin
Dosis 1
Pakan standar + ekstrak alkali β-
glukan dosis 1
Dosis 2
Pakan standar + ekstrak alkali β-
glukan dosis 2
Dosis 3
Pakan standar + ekstrak alkali β-
glukan dosis 3

15. SKEMA PENGAMBILAN DARAH
Hamster dibius
dengan Eter
Tusuk pada bagian
sudut mata (vena
sinus orbitalis)
Tampung pada
tabung eppendorf
Centrifuge
4000 rpm
15 menit
Serum darah
ETER
Pipa kapiler
1.
2. 3.
4.

16. SKEMA PROSES STANDARDISASI
10 μl larutan standar +
1000 μl reagen enzim (kit) Vortex
Inkubasi
20-25oC, 20 menit
Baca kadar dengan
Spektrofotometer klinikal

17. SERUM 10 μl
+ REAGEN ENZIM (KIT)
1000 μl
VORTEX
BACA KADAR dengan
SPEKTROFOTOMETER KLINIKAL  INKUBASI
37oC, 5 menit

18. SERUM 100 μl
+ 1000 μl
PEREAKSI PENGENDAP
(Heparin & Natrium sitrat)
VORTEX
INKUBASI
37oC, 5 menit
Centrifuge
4000 rpm
15 menit
Ambil SUPERNATAN 100 μl
+ REAGEN ENZIM (KIT )
1000 μl
VORTEX
BACA KADAR dengan
SPEKTROFOTOMETER KLINIKAL


19. ANALISIS DATA
Data persentase penurunan kadar kolesterol dan LDL yang
diperoleh diuji kenormalan dan homogenitasnya. Jika data
normal dan homogenitas, diolah secara parametrik Anova satu
arah untuk melihat pengaruh dari perlakuan. Untuk
mengetahui apakah ada perbedaan antara kelompok
perlakuan dilakukan uji LSD

20. 103.32
470
288.36
208.4
379.11
509.71
142.07
217.18
230.19
139.3
167.34 166.04
0
100
200
300
400
500
600
NORMAL POSITIF NEGATIF DOSIS 1 DOSIS 2 DOSIS 3
kadarkolesteroltotal(mg/dl)
perlakuan
SEBELUM SESUDAH
Grafik batang rerata kadar kolesterol total sebelum dan
sesudah perlakuan

21. KELOMPOK NORMAL POSITIF NEGATIF DOSIS 1 DOSIS 2 DOSIS 3
1 -87,41 44,60 23,53 36,46 67,59 59,32
2 3,59 44,13 2,15 53,39 53,34 74,54
3 -10,47 68,63 34,82 8,17 42,77 50,64
4 -48,73 48,40 -34,30 15,83 54,45 79,86
RERATA -35,75 51,44 6,55 28,46 54,54 66,09
SD 40,92 11,62 30,42 20,47 10,17 13,49
Tabel persentase penurunan kolesterol total

22. Grafik batang rerata kadar LDL sebelum dan sesudah
perlakuan
051
269
175
123
219
286
065
104
143
054
077
087
0
50
100
150
200
250
300
350
NORMAL POSITIF NEGATIF DOSIS 1 DOSIS 2 DOSIS 3
kadarLDL(mg/dl)
perlakuan
SEBELUM SESUDAH

23. KELOMPOK NORMAL POSITIF NEGATIF DOSIS 1 DOSIS 2 DOSIS 3
1 -74,80 47,50 20,08 68,40 68,55 64,61
2 33,80 48,90 14,53 47,53 53,15 61,20
3 -44,50 81,14 24,20 49,84 6,77 70,41
4 -32,75 63,14 -13,78 49,60 70,03 85,17
RERATA -29,56 60,17 11,26 53,84 49,62 70,35
SD 45,80 15,66 17,16 9,76 29,57 10,59
Tabel persentase penurunan LDL

24. UJI STATTISTIK PERSEN PENURUNAN KADAR KOLESTEROL
One-Sample Kolmogorov-Smirnov Test
Delta_Kolesterol
_total
N 20
Normal Parametersa,,b Mean 41.4160
Std. Deviation 27.48460
Most Extreme Differences Absolute .170
Positive .081
Negative -.170
Kolmogorov-Smirnov Z .759
Asymp. Sig. (2-tailed) .613
UJI NORMALITAS
Nilai Asymp. Sig. = 0,613)> α (0,05)
sehingga data terdistristribusi normal.
Test of Homogeneity of Variances
Levene Statistic df1 df2 Sig.
2.115 4 15 .129
UJI HOMOGENITAS
Nilai Sig. 0.129>α (0,05) sehingga data
bervariansi homogen.
ANOVA
Sum of
Squares df Mean Square F Sig.
Between Groups 9059.567 4 2264.892 6.418 .003
Within Groups 5293.095 15 352.873
Total 14352.662 19
ANOVA
Nilai Sig. (0.003) < α (0,05) sehingga
terdapat perbedaaan bermakna antar
kelompok perlakuan

25. UJI STATTISTIK PERSEN PENURUNAN KADAR KOLESTEROL
KESIMPULAN:
Kontrol positif berbeda bermakna dengan kontrol negatif.
Kontrol negatif berbeda bermakna dengan kontrol positif, dosis II dan
dosis III.
Dosis I berbeda bermakna dengan dosis III.
Dosis II berbeda bermakna dengan kontrol negatif.
Dosis III berbeda bermakna dengan kontrol negatif dan dosis I

26. One-Sample Kolmogorov-Smirnov Test
Delta_LDL
N 20
Normal Parametersa,,b Mean 49.0485
Std. Deviation 26.13715
Most Extreme Differences Absolute .226
Positive .107
Negative -.226
Kolmogorov-Smirnov Z 1.012
Asymp. Sig. (2-tailed) .257
a. Test distribution is Normal.
b. Calculated from data.
UJI STATTISTIK PERSEN PENURUNAN LDL
One-Sample Kolmogorov-Smirnov Test
Delta_LDL
N 20
Normal Parametersa,,b Mean 49.0485
Std. Deviation 26.13715
Most Extreme Differences Absolute .226
Positive .107
Negative -.226
Kolmogorov-Smirnov Z 1.012
Asymp. Sig. (2-tailed) .257
a. Test distribution is Normal.
b. Calculated from data.
UJI NORMALITAS
Nilai Asymp. Sig. = 0,257)> α (0,05)
sehingga data terdistristribusi
normal.
Test of Homogeneity of Variances
Levene Statistic df1 df2 Sig.
1.421 4 15 .275
UJI HOMOGENITAS
Nilai Sig. 0.275>α (0,05) sehinggan
data bervariansi homogen.
ANOVA
Sum of
Squares df Mean Square F Sig.
Between Groups 8115.239 4 2028.810 6.256 .004
Within Groups 4864.624 15 324.308
Total 12979.862 19
ANOVA
Nilai Sig. (0.004) < α (0,05) sehingga
terdapat perbedaaan bermakna
antar kelompok perlakuan.

27. UJI STATTISTIK PERSEN PENURUNAN LDL
KESIMPULAN:
Kontrol positif berbeda bermakna dengan kontrol negatif.
Kontrol negatif berbeda bermakna dengan kontrol positif, dosis I, dosis II
dan dosis III.
Dosis I berbeda bermakna dengan kontrol negatif.
Dosis II berbeda bermakna dengan kontrol negatif.
Dosis III berbeda bermakna dengan kontrol negatif.

28. KESIMPULAN
Ekstrak β-glukan larut alkali jamur tiram putih (Pluerotus ostreatus (Jacq.) P. Kumm.)
mempunyai aktivitas sebagai antihiperkolesterol. Semakin besar konsentrasi dosis
ekstrak, makan semakin besar pula penurunan kadar kolesterol total dan LDL.
SARAN
Perlu dilakukan penelitian lebih lanjut hingga didapatkan dosis toksik
dari ekstrak β-glukan larut alkali jamur tiram putih.

29. TE RI MA
KA SIH

30. Data kadar kolesterol total
Data kadar LDL